Выделение клеток из вылупившихся яиц рептилий для применения для получения биоискусственной дермы и кожи для кожевенного производства - RU2019134339A
Код документа: RU2019134339A
Формула
1. Способ in vitro получения клеток для производства кожи рептилий, включающий следующие стадии:
а. получение клеток из вылупившегося яйца рептилии, и
б. выделение и/или культивирование кератиноцитов, фибробластов, меланоцитов, стволовых клеток или клеток-предшественников.
2. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором указанные клетки выделяют с использованием маркеров клеточной поверхности.
3. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки выделяют с помощью проточной цитометрии, например, с помощью сортинга клеток с активированной флуоресценцией (FACS).
4. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки выделяют посредством культивирования смешанной культуры клеток в специфических для клеток средах с получением практически чистых культур конкретных типов клеток.
5. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором практически чистую культуру одного из типов клеток получают путем физического отделения клеток одного типа от других клеток, например, путем обработки трипсином.
6. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки выделяют из хориоаллантоиса.
7. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки выделяют из аллантоиса, аллантоисного мешка, амниона, амниотического мешка, яичного белка, желтка или желточного мешка.
8. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором эпидермальные и кожные стволовые клетки, мезенхимальные стволовые клетки, меланоциты и/или клетки фибробластов выделяют путем культивирования в специфических для клеток средах.
9. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором кератиноциты, фибробласты или меланоциты получают путем дифференцировки стволовых клеток или клеток-предшественников.
10. Способ по п. 5, в котором фибробласты образованы в результате дифференцировки из мезенхимальных стволовых клеток.
11. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки культивируют в присутствии по меньшей мере одного фактора роста.
12. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки культивируют в присутствии фактора роста фибробластов, эпидермального фактора роста и/или фактора роста соединительной ткани.
13. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки культивируют на слое фидерных клеток.
14. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором клетки не являются генетически модифицированными.
15. Способ по одному из предыдущих пунктов, включающий получение практически чистых культур кератиноцитов, фибробластов и меланоцитов.
16. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором культуры одного или нескольких типов клеток подвергают криоконсервации.
17. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором кератиноциты, фибробласты и меланоциты получают из одного вида.
18. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором кератиноциты, фибробласты, меланоциты получают из одного и того же яйца.
19. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором различные типы клеток выделяют из различных яиц одного и того же вида.
20. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором различные типы клеток выделяют из различных яиц различных видов.
21. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором рептилию выбирают из родов Crocodilia (аллигаторы и крокодилы), Chelonia (черепашки и черепахи), двуходок, Squamata (ящерицы и змеи) и Rhynchocephalia (гаттерии или Sphenodon puntatus).
22. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором рептилию выбирают из змеи, аллигатора, крокодила, гаттерии, черепах, черепашек, игуаны, агам, хамелеонов, сцинков, анолисов, ящериц, гекконов, удавов, анаконд, питонов, мамб, гадюк, ужей, гремучих змей, крокодилов, аллигаторов и гавиалов.
23. Способ по одному из предыдущих пунктов, дополнительно включающий выращивание смешанной культуры кератиноцитов, фибробластов и меланоцитов с получением биоискусственной кожи рептилий.
24. Способ по п. 23, в котором клетки культивируют на подложке, такой как волокнистая или сетчатая подложка.
25. Способ по одному из предыдущих пунктов, дополнительно включающий трансплантацию смешанной культуры кератиноцитов, фибробластов и меланоцитов рептилии для восстановления дермы.
26. Способ по одному из предыдущих пунктов, дополнительно включающий культивирование кератиноцитов, фибробластов и/или меланоцитов и сбор коллагена рептилий из указанных клеток.
27. Способ по п. 26, дополнительно включающий получение искусственной кожи рептилий из указанного собранного коллагена.
28. Продукт в виде биоискусственной дермы, который получен или может быть получен с помощью способа по одному из пп. 1-23.
29. Применение вылупившегося яйца рептилии для выделения кератиноцитов, фибробластов, меланоцитов, стволовых клеток или клеток-предшественников.
30. Культура in vitro, содержащая кератиноциты, фибробласты и меланоциты, полученные с помощью способа по одному из пп. 1-23.
