Вакцинная композиция против злокачественной опухоли на основе пептида wt1 для мукозального введения - RU2687026C2

Чертежи

Описание

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к вакцине против злокачественной опухоли для мукозального введения, содержащей пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 и активатор индукции клеточного иммунитета.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Существуют вакцины против злокачественной опухоли, которые препятствуют вирусной инфекции, препятствуя злокачественной опухоли, вызываемой вирусом, и вакцины против злокачественной опухоли, которые обеспечивают результат, состоящий в том, что злокачественные клетки специфически атакуются иммунной системой через распознавание специфического антигена злокачественной опухоли иммунной системой через любой иммунный механизм, в частности, клеточный иммунный механизм, в котором цитотоксические T-клетки (CTL) играют важную роль. Первые из них абсолютно неэффективны в случае злокачественной опухоли, в которой вирус не участвует. Последние являются терапевтической стратегией против злокачественной опухоли, состоящей в нацеливании на антиген, которым обладает сама злокачественная клетка. Считается, что последние являются широко эффективными против злокачественных опухолей, имеющих антиген, при установлении этого антигена. В частности, вакцины против злокачественной опухоли, основанные на этой последней точке зрения, могут лечить опухоли, которые трудно устранить хирургической операцией вследствие их размера, и они вызывают меньше побочных эффектов по сравнению с предшествующими способами терапии, такими как химиотерапия и лучевая терапия.

Ген WT1 (опухоль Вильмса 1) сверхэкспрессируется во многих гемопоэтических опухолях и солидных злокачественных опухолях, например, при остром миелоцитарном лейкозе, остром лимфоцитарном лейкозе, хроническом миелоцитарном лейкозе, миелодиспластическом синдроме, множественной миеломе, неходжскинской лимфоме, раке легкого, раке молочной железы, раке желудка, раке толстого кишечника/прямой кишки, раке поджелудочной железы, раке желчных протоков, плоскоклеточном раке головы и шеи, раке щитовидной железы, раке почки, раке предстательной железы, раке яичника, раке тела матки, саркоме костей и мягких тканей, злокачественной меланоме, злокачественной мезотелиоме, опухоли половых клеток яичка и злокачественной глиоме. Эти злокачественные опухоли сверхпродуцируют белок WT1. Белок WT1 фрагментируется в злокачественной клетке с образованием неполных пептидов, состоящих из 8-12 аминокислот. Пептид WT1 является одним из пептидных фрагментов, которые связываются с молекулой MHC класса I в злокачественной клетке, перемещаются к поверхности злокачественной клетки и представляются в качестве антигена, связанного с молекулой MHC класса I на поверхности злокачественной клетки. Пептид WT1 становится меткой злокачественной клетки. Аминокислотная последовательность пептида WT1 соответствует типу молекулы MHC класса I в клетке. Например, в случае клетки, имеющей MHC типа HLA-A*0201, образуется рестриктированный по MHC типа HLA-A*0201 пептид WT1, такой как пептид Db126, состоящий из 9 аминокислот, и в случае клетки, имеющей MHC типа HLA-A*2402, образуется рестриктированный по MHC типа HLA-A*2402 пептид WT1, такой как Db235, состоящий из 9 аминокислот. В случае клетки, имеющей другой MHC, такой как тип HLA-A26 (WO 2005/095598), тип HLA-A*3303 (WO 2007/097358) или тип HLA-A*1101 (WO 2008/081701), образуется рестриктированный по каждому типу MHC пептид WT1. Когда пептид WT1 или модифицированный пептид WT1, в котором часть аминокислот в пептиде WT1 заменена или модифицирована, вводят в живой организм в качестве антигена (в настоящем описании пептид WT1 или модифицированный пептид WT1, который вводят в качестве антигена, называют "антигенным пептидом WT1"), антигенный пептид WT1 связывается с молекулой MHC класса I на поверхности дендритной клетки, которая представляет собой антигенпредставляющую клетку, или после захвата дендритной клеткой антигенного пептида WT1, он связывается с молекулой MHC класса I на дендритной клетке, перемещается на поверхность дендритной клетки, и тем самым представляется в качестве антигена, связанного с молекулой MHC класса I на поверхности дендритной клетки. Активированная дендритная клетка, имеющая комплекс антигенный пептид WT1/молекула MHC класса I, перемещается в регионарный лимфатический узел и активирует CD8-положительные T-лимфоциты, которые распознают комплекс антигенный пептид WT1/молекула MHC класса I, для дифференцировки и пролиферации этих клеток в цитотоксические T-клетки (CTL). CTL распознает опухолевые клетки, имеющие комплекс пептида WT1 (происходящего из эндогенного белка WT1) с той же аминокислотной последовательностью, что и у антигенного пептида WT1, и молекулы MHC класса I, или опухолевые клетки, имеющие комплекс пептида WT1 (происходящего из эндогенного белка WT1) с аминокислотной последовательностью, имеющей перекрестную иммунореактивность с антигенным пептидом WT1 и молекулой MHC класса I, и атакует распознанные опухолевые клетки. Таким образом, упомянутые выше рестриктированные по различным типам MHC пептиды WT1, такие как пептид Db126 и пептид Db235, и модифицированные пептиды WT1, в которых часть аминокислот заменена или модифицирована, пригодны в качестве вакцин против злокачественной опухоли (непатентный документ 1).

Также известно, что для усиления действия пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 в качестве вакцины против злокачественной опухоли используют адъювант. В качестве адъюванта для пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 известны, например, минеральные гели, такие как гидроксид алюминия; поверхностно-активные вещества, такие как лизолецитин и полиолы pluronic; полианионы; пептиды; или масляные эмульсии (патентный документ 1) и GM-CSF, BCG-CWS и Монтанид ISA51 (непатентный документ 1). В дополнение к ним известны различные вакцинные адъюванты, включающие циклические аналоги динуклеотидов (патентный документ 3 и патентный документ 4), такие как 1H-имидазо[4,5-c]хинолин-4-амин, имиквимод (патентный документ 2) и циклический ди-GMP (c-di-GMP), и лиганды TLR2, 3, 7, 8 и 9 (патентный документ 5). Кроме того, также известно, что иммунитет, индуцируемый чрескожным введением содержащего имиквимод пептида далее усиливается добавлением пептида-25 (непатентный документ 2).

Как правило, вакцины вводят путем подкожной или внутрикожной инъекции. В дополнение к этим путям, предпринимались попытки индукции иммунитета различными путями введения, например, чрескожным введением (патентный документ 5 и непатентный документ 2) и мукозальным введением, таким как букальное введение, назальное введение и сублингвальное введение (непатентный документ 3, патентный документ 6 и патентный документ 7).

ПЕРЕЧЕНЬ ДОКУМЕНТОВ

[Патентный документ 1] патент Японии № 4422903

[Патентный документ 2] JP 7-505883 A

[Патентный документ 3] JP 2007-529531 A

[Патентный документ 4] Публикация патентной заявки США № 2008/0286296

[Патентный документ 5] Публикация патентной заявки США № 2008/0193487

[Патентный документ 6] JP 2002-531415 A

[Патентный документ 7] Публикация патентной заявки США № 2008/0112974

[Непатентный документ 1] Yoshihiro Oka et al., Current Opinion in Immunology, 20: 211-220 (2008)

[Непатентный документ 2] Hosoi Akihiro et al., Cancer Research, 68, 3941-3949 (2008)

[Непатентный документ 3] Zhengrong Cui et al., Pharmaceutical Research, Vol. 19, No. 7, 947-953 (2002)

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Хорошо известно, что адъювант используют для повышения эффективности вакцины. Подходящий адъювант обычно варьирует в зависимости, например, от типа антигена, пути введения и иммунного ответа, который желают индуцировать (т.е. клеточный иммунитет или гуморальный иммунитет). Кроме того, в дополнение к адъюванту, существуют различные вещества, которые обеспечивают индукцию иммунитета. Следовательно, задачей настоящего изобретения является предоставление композиции для применения в качестве вакцины против злокачественной опухоли с высокой эффективностью и удобной для применения.

Микроорганизм или вирус сам по себе или его часть содержится в широко используемых вакцинах, и вакцину вводят для индукции иммунного ответа. Обычно инвазия микроорганизма или вируса ингибируется кожей вследствие их размера. Также микроорганизм или вирус деградируется желудочной кислотой и пищеварительными ферментами. Таким образом, необходимо инвазивное введение вакцины в организм. С такой точки зрения, вакцины обычно вводят в организм путем инъекции. Однако инъекция вызывает несколько проблем, включающих боль, страх, рану в области инъекции и последующее рубцевание. Людям, не являющимся работниками здравоохранения, не позволяется проводить инъекцию. Внутрикожная инъекция, которая может вызывать более высокий иммунный ответ, является трудным способом введения. Существует риск случайной инфекции работников здравоохранения вследствие повреждения от укола иглой. Пациенту необходимо посещать лечебное учреждение неоднократно, когда введение проводят повторно. Образуются медицинские отходы, которые делают необходимым специализированную утилизацию, такие как иглы для инъекций. Ввиду вышеуказанных проблем, инъекция не является оптимальным путем введения.

Пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 может активировать CTL (цитотоксическую T-клетку) через молекулу MHC класса I, т.е. пептид может индуцировать клеточный иммунитет. Пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 представляет собой молекулу, имеющую молекулярную массу от приблизительно 700 до приблизительно 1600 и состоящую из 8-12 аминокислот, и он значительно меньше, чем микроорганизмы или сам вирус, хотя он не считается низкомолекулярным веществом. Может быть возможным его введение путем, отличным от инъекции. Однако препарат для введения пептидной вакцины путем, отличным от инъекции, еще не разработан. Для этого существует множество причин, например: подходящее вещество, которое может обеспечивать индукцию клеточного иммунитета, неизвестно; также неизвестно, может ли антиген быть доставлен в ткань, подходящую для индукции клеточного иммунитета. Среди прочего, неизвестно вещество, которое может обеспечивать индукцию клеточного иммунитета, когда его используют с антигеном при введении путем, отличным от инъекции.

Авторы изобретения открыли, что клеточный иммунитет можно эффективно индуцировать путем мукозального введения пептидной вакцины. Авторы изобретения также обнаружили некоторые вещества, подходящие для усиления клеточного иммунитета, индуцируемого мукозальным введением пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1. Вещества могут включать лиганды TLR, такие как Pam₃CSK₄, поли(I:C), липополисахарид, имиквимод и резиквимод; циклические динуклеотиды, такие как циклический ди-GMP и циклический ди-AMP; иммуномодулирующие низкомолекулярные лекарственные средства, такие как левамизол гидрохлорид; ингибиторы циклооксигеназы, такие как этодолак и локсопрофен; антагонисты рецепторов простагландина, такие как антагонист рецептора EP2, антагонист рецептора EP4, антагонист рецептора DP и антагонист рецептора IP; агонисты рецепторов простагландинов, такие как агонист рецептора EP3; ингибиторы продукции TSLP, такие как берберин хлорид и нарингенин; ингибиторы аденилатциклазы, такие как 2',5'-дидезоксиаденозин и ниацин; омега-3 жирные кислоты, такие как эйкозапентаеновая кислота и докозагексаеновая кислота; агонисты PPAR, такие как агонист PPAR-α, агонист PPAR-δ и агонист PPAR-γ; антагонисты дофаминовых рецепторов, такие как антагонист рецептора D1 и антагонист рецептора D5; агонисты дофаминовых рецепторов, такие как агонист рецептора D2, агонист рецептора D3 и агонист рецептора D4; антагонисты гистаминовых рецепторов, такие как антагонист рецептора H1 и антагонист рецептора H2; агонисты гистаминовых рецепторов, такие как агонист рецептора H1, агонист рецептора H3 и агонист рецептора H4; антагонисты серотониновых рецепторов, такие как антагонист рецептора 5-HT2, антагонист рецептора 5-HT4, антагонист рецептора 5-HT6 и антагонист рецептора 5-HT7; агонисты серотониновых рецепторов, такие как агонист рецептора 5-HT1 и агонист рецептора 5-HT2; антагонисты рецептора вазопрессина, такие как антагонист рецептора V2; агонисты рецепторов вазопрессина, такие как агонист рецептора V1; антагонисты мускариновых рецепторов, такие как антагонист рецептора M1, антагонист рецептора M3 и антагонист рецептора M5; агонисты мускариновых рецепторов, такие как агонист рецептора M1, агонист рецептора M2, агонист рецептора M3, агонист рецептора M4 и агонист рецептора M5; антагонисты рецепторов адреналина, такие как антагонист рецептора α1, антагонист рецептора β1, антагонист рецептора β2 и антагонист рецептора β3; агонисты рецепторов адреналина, такие как агонист рецептора α1 и агонист рецептора α2; агонисты ангиотензиновых рецепторов, такие как агонист рецептора AT2; агонисты рецептора GABA, такие как агонист рецептора GABA_B; антагонисты рецепторов тромбина, такие как антагонист рецептора PAR-1; агонисты рецептора тромбина, такие как агонист рецептора PAR-1; агонисты опиоидных рецепторов, такие как бупренорфин; антагонисты рецепторов лейкотриена, такие как антагонист рецептора CysLT1 и антагонист рецептора CysLT2; агонисты рецепторов лейкотриена, такие как агонист рецептора BLT; агонисты рецепторов ADP, такие как аденозиндифосфат; агонисты рецепторов мелатонина, такие как мелатонин; агонисты рецепторов соматостатина, такие как октреотид; агонисты каннабиноидных рецепторов, такие как дронабинол; агонисты рецепторов сфингозин-1-фосфата, такие как финголимод; агонисты метаботропных рецепторов глутамата, такие как агонист рецептора mGluR2, агонист рецептора mGluR3, агонист рецептора mGluR4, агонист рецептора mGluR6, агонист рецептора mGluR7 и агонист рецептора mGluR8; ингибиторы фосфолипазы A2, такие как глицирризиновая кислота; ингибиторы продукции TGF-β, такие как пирфенидон; ингибиторы Th2-цитокинов, такие как суплатаст тозилат; фармакологически приемлемые кислоты, такие как декановая кислота, лауриновая кислота, миристиновая кислота, изостеариновая кислота и олеиновая кислота, или их фармакологически приемлемые соли и хелперные пептиды, такие как пептид-25.

При пероральном мукозальном введении, среди прочих, обнаружено, что лиганд TLR1/2, такой как Pam₃CSK₄; лиганд TLR2/6, такой как Pam₂CSK₄, MALP-2 и FSL-1; лиганд TLR4, такой как липополисахарид, липид A и монофосфориллипид; лиганд TLR7 и/или TLR8, такой как имиквимод, резиквимод, локсорибин и TLR7-II; циклический динуклеотид, такой как циклический ди-GMP и циклический ди-AMP; иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство, такое как левамизол гидрохлорид; хелперный пептид; ингибитор циклооксигеназы, антагонист рецептора простагландина, агонист рецептора простагландина, ингибитор продукции TSLP, ингибитор аденилатциклазы, омега-3-жирная кислота, агонист PPAR, антагонист дофаминовых рецепторов, агонист дофаминовых рецепторов, агонист рецепторов гистамина, антагонист рецепторов гистамина, агонист рецепторов серотонина, антагонист рецепторов серотонина, антагонист рецепторов вазопрессина, агонист рецепторов вазопрессина, антагонист мускариновых рецепторов, агонист мускариновых рецепторов, антагонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов ангиотензина, агонист рецепторов GABA, антагонист рецепторов тромбина, агонист рецепторов тромбина, агонист опиоидных рецепторов, агонист рецепторов ADP, антагонист рецепторов лейкотриена, агонист рецепторов лейкотриена, агонист рецепторов мелатонина, агонист рецепторов соматостатина, агонист каннабиноидных рецепторов, агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонист метаботропных рецепторов глутамата, ингибитор фосфолипазы A2, ингибитор продукции TGF-β, ингибитор Th2-цитокинов; или комбинация двух или более из них пригодны для обеспечения индукции клеточного иммунитета. Кроме того, было обнаружено, что клеточный иммунитет значительно усиливается с помощью комбинации лиганда TLR и хелперного пептида, комбинации циклического динуклеотида и хелперного пептида, комбинации иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства и хелперного пептида, комбинации ингибитора циклооксигеназы и хелперного пептида, комбинации антагониста рецепторов простагландинов и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов простагландинов и хелперного пептида, комбинации ингибитора продукции TSLP и хелперного пептида, комбинации ингибитора аденилатциклазы и хелперного пептида, комбинации омега-3-жирной кислоты и хелперного пептида, комбинации агониста PPAR и хелперного пептида, комбинации антагониста дофаминовых рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста дофаминовых рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста гистаминовых рецепторов и хелперного пептида, комбинации антагониста гистаминовых рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста серотониновых рецепторов и хелперного пептида, комбинации антагониста серотониновых рецепторов и хелперного пептида, комбинации антагониста рецепторов вазопрессина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов вазопрессина и хелперного пептида, комбинации антагониста мускариновых рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста мускариновых рецепторов и хелперного пептида, комбинации антагониста рецепторов адреналина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов адреналина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов ангиотензина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов GABA и хелперного пептида, комбинации антагониста рецепторов тромбина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов тромбина и хелперного пептида, комбинации агониста опиоидных рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов ADP и хелперного пептида, комбинации антагониста рецепторов лейкотриенов и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов лейкотриенов и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов мелатонина и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов соматостатина и хелперного пептида, комбинации агониста каннабиноидных рецепторов и хелперного пептида, комбинации агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата и хелперного пептида, комбинации агониста метаботропных рецепторов глутамата и хелперного пептида, комбинации ингибитора фосфолипазы A2 и хелперного пептида, комбинации ингибитора продукции TGF-β и хелперного пептида, комбинации ингибитора Th2-цитокинов и хелперного пептида, и комбинации их фармакологически приемлемой кислоты или фармакологически приемлемой соли и хелперного пептида.

Кроме того, обнаружено, что в слизистой оболочке носа, среди прочих, являются эффективными лиганды TLR2 и дектина 1, такие как зимозан; лиганды TLR3, такие как поли(I:C); и иммуномодулирующие низкомолекулярные лекарственные средства, такие как пидотимод и бестатин, а также вышеупомянутые активаторы индукции клеточного иммунитета для перорального мукозального введения.

Таким образом, в первом аспекте настоящее изобретение относится к аспектам, приведенным ниже:

(1) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения для индукции клеточного иммунитета, содержащая:

(i) пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1; и

(ii) первый активатор индукции клеточного иммунитета, выбранный из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагонистов рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-β, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или нескольких из них;

(2) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1), дополнительно содержащая фармакологически приемлемую кислоту или фармакологически приемлемую соль в качестве второго активатора индукции клеточного иммунитета;

(3) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой лиганд TLR;

(4) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой циклический динуклеотид;

(5) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство;

(6) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор циклооксигеназы;

(7) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист рецепторов простагландинов и где антагонист рецепторов простагландинов представляет собой антагонист рецепторов EP2, антагонист рецепторов EP4, антагонист рецепторов DP или антагонист рецепторов IP;

(8) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов простагландинов и где агонист рецепторов простагландинов представляет собой агонист рецепторов EP3;

(9) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор продукции TSLP;

(10) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор аденилатциклазы;

(11) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой омега-3-жирную кислоту;

(12) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист PPAR и где агонист PPAR представляет собой агонист PPAR-α, агонист PPAR-δ или агонист PPAR-γ;

(13) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист дофаминовых рецепторов и где антагонист дофаминовых рецепторов представляет собой антагонист рецептора D1 или антагонист рецептора D5;

(14) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист дофаминовых рецепторов и где агонист дофаминовых рецепторов представляет собой агонист рецептора D2, агонист рецептора D3 или агонист рецептора D4;

(15) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист гистаминовых рецепторов и где антагонист гистаминовых рецепторов представляет собой антагонист рецептора H1 или антагонист рецептора H2;

(16) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист гистаминовых рецепторов и где агонист гистаминовых рецепторов представляет собой агонист рецептора H1, агонист рецептора H3 или агонист рецептора H4;

(17) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист серотониновых рецепторов и где антагонист серотониновых рецепторов представляет собой антагонист рецептора 5-HT2, антагонист рецептора 5-HT4, антагонист рецептора 5-HT6 или антагонист рецептора 5-HT7;

(18) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист серотониновых рецепторов и где агонист серотониновых рецепторов представляет собой агонист рецептора 5-HT1 или агонист рецептора 5-HT2;

(19) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист рецепторов вазопрессина и где антагонист рецепторов вазопрессина представляет собой антагонист рецептора V2;

(20) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов вазопрессина и где агонист рецепторов вазопрессина представляет собой агонист рецептора V1;

(21) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист мускариновых рецепторов и где антагонист мускариновых рецепторов представляет собой антагонист рецептора M1, антагонист рецептора M3 или антагонист рецептора M5;

(22) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист мускариновых рецепторов и где агонист мускариновых рецепторов представляет собой агонист рецептора M1, агонист рецептора M2, агонист рецептора M3, агонист рецептора M4 или агонист рецептора M5;

(23) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист рецепторов адреналина и где антагонист рецепторов адреналина представляет собой антагонист рецептора α1, антагонист рецептора β1, антагонист рецептора β2 или антагонист рецептора β3;

(24) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов адреналина и где агонист рецепторов адреналина представляет собой агонист рецептора α1 или агонист рецептора α2;

(25) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов ангиотензина и где агонист рецепторов ангиотензина представляет собой агонист рецептора AT2;

(26) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов GABA и где агонист рецепторов GABA представляет собой агонист рецептора GABA_B;

(27) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист рецепторов тромбина и где антагонист рецепторов тромбина представляет собой антагонист рецептора PAR-1;

(28) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов тромбина и где агонист рецепторов тромбина представляет собой агонист рецептора PAR-1;

(29) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист опиоидных рецепторов;

(30) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой антагонист рецепторов лейкотриенов и где антагонист рецепторов лейкотриенов представляет собой антагонист рецептора CysLT1 или антагонист рецептора CysLT2;

(31) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов лейкотриенов и где агонист рецепторов лейкотриенов представляет собой агонист рецептора BLT;

(32) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов мелатонина;

(33) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов соматостатина;

(34) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист каннабиноидных рецепторов;

(35) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата;

(36) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист метаботропных рецепторов глутамата и где агонист метаботропных рецепторов глутамата представляет собой агонист рецептора mGluR2, агонист рецептора mGluR3, агонист рецептора mGluR4, агонист рецептора mGluR6, агонист рецептора mGluR7 или агонист рецептора mGluR8;

(37) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой агонист рецепторов ADP;

(38) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор фосфолипазы A2;

(39) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор продукции TGF-β;

(40) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой ингибитор Th2-цитокинов;

(41) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой хелперный пептид;

(42) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (1) или (2), где первый активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой комбинацию хелперного пептида и одного или нескольких веществ, выбранных из группы, состоящей из лиганда TLR, циклического динуклеотида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-β и ингибитора Th2-цитокинов;

(43) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно любому из (1)-(42), которая предоставлена в форме пленки;

(44) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения, согласно любому из (1)-(42), которая предоставлена в форме жидкости;

(45) Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения, согласно любому из (1)-(42), которая предоставлена в форме таблетки, растворяющейся в полости рта.

В другом аспекте вакцинную композицию против злокачественной опухоли для мукозального введения по настоящему изобретению можно использовать для лечения или предупреждения злокачественной опухоли. Таким образом, настоящее изобретение также относится к следующим вариантам осуществления:

(46) Способ лечения или предупреждения злокачественной опухоли у индивидуума, включающий мукозальное введение индивидууму терапевтически эффективного количества (i) пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1, и (ii) активатора индукции клеточного иммунитета, выбранного из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-β, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более из них; и

(47) Способ лечения или предупреждения злокачественной опухоли у индивидуума, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества вакцинной композиции против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно любому из (1)-(42), препарата против злокачественной опухоли в виде пленки для мукозального введения согласно (43), жидкого состава вакцины против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (44) или растворяющейся в полости рта таблетки вакцины против злокачественной опухоли для мукозального введения согласно (45).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к лиганду TLR, циклическому динуклеотиду, хелперному пептиду, иммуномодулирующему низкомолекулярному лекарственному средству, ингибитору циклооксигеназы, антагонисту рецепторов простагландинов, агонисту рецепторов простагландинов, ингибитору продукции TSLP, ингибитору аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоте, агонисту PPAR, антагонисту дофаминовых рецепторов, агонисту дофаминовых рецепторов, агонисту гистаминовых рецепторов, антагонисту гистаминовых рецепторов, агонисту серотониновых рецепторов, антагонисту серотониновых рецепторов, антагонисту рецепторов вазопрессина, агонисту рецепторов вазопрессина, антагонисту мускариновых рецепторов, агонисту мускариновых рецепторов, антагонисту рецепторов адреналина, агонисту рецепторов адреналина, агонисту рецепторов ангиотензина, агонисту рецепторов GABA, антагонисту рецепторов тромбина, агонисту рецепторов тромбина, агонисту опиоидных рецепторов, агонисту рецепторов ADP, антагонисту рецепторов лейкотриенов, агонисту рецепторов лейкотриенов, агонисту рецепторов мелатонина, агонисту рецепторов соматостатина, агонисту каннабиноидных рецепторов, агонисту рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонисту метаботропных рецепторов глутамата, ингибитору фосфолипазы A2, ингибитору продукции TGF-β, ингибитору Th2-цитокинов, или комбинации двух или более из них для применения в качестве активатора индукции клеточного иммунитета, который может усиливать иммунный ответ, индуцируемый мукозальным введением пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1. Таким образом, настоящее изобретение также относится к следующему аспекту:

(48) Лиганд TLR, циклический динуклеотид, хелперный пептид, иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство, ингибитор циклооксигеназы, антагонист рецепторов простагландинов, агонист рецепторов простагландинов, ингибитор продукции TSLP, ингибитор аденилатциклазы, омега-3-жирная кислота, агонист PPAR, антагонист дофаминовых рецепторов, агонист дофаминовых рецепторов, агонист гистаминовых рецепторов, антагонист гистаминовых рецепторов, агонист серотониновых рецепторов, антагонист серотониновых рецепторов, антагонист рецепторов вазопрессина, агонист рецепторов вазопрессина, антагонист мускариновых рецепторов, агонист мускариновых рецепторов, антагонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов ангиотензина, агонист рецепторов GABA, антагонист рецепторов тромбина, агонист рецепторов тромбина, агонист опиоидных рецепторов, агонист рецепторов ADP, антагонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов мелатонина, агонист рецепторов соматостатина, агонист каннабиноидных рецепторов, агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонист метаботропных рецепторов глутамата, ингибитор фосфолипазы A2, ингибитор продукции TGF-β, ингибитор Th2-цитокинов или комбинация двух или более из них для применения в качестве активатора индукции клеточного иммунитета, который может усиливать иммунный ответ, индуцируемый мукозальным введением пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1.

Настоящее изобретение также относится к следующим вариантам осуществления:

(49) Способ индукции клеточного иммунитета, включающий мукозальное введение индивидууму (i) пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 и (ii) первого ускорителя индукции клеточного иммунитета, выбранного из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-бета, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более типов из них;

(50) Лиганд TLR, циклический динуклеотид, хелперный пептид, иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство, ингибитор циклооксигеназы, антагонист рецепторов простагландинов, агонист рецепторов простагландинов, ингибитор продукции TSLP, ингибитор аденилатциклазы, омега-3-жирная кислота, агонист PPAR, антагонист дофаминовых рецепторов, агонист дофаминовых рецепторов, агонист гистаминовых рецепторов, антагонист гистаминовых рецепторов, агонист серотониновых рецепторов, антагонист серотониновых рецепторов, антагонист рецепторов вазопрессина, агонист рецепторов вазопрессина, антагонист мускариновых рецепторов, агонист мускариновых рецепторов, антагонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов ангиотензина, агонист рецепторов GABA, антагонист рецепторов тромбина, агонист рецепторов тромбина, агонист опиоидных рецепторов, агонист рецепторов ADP, антагонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов мелатонина, агонист рецепторов соматостатина, агонист каннабиноидных рецепторов, агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонист метаботропных рецепторов глутамата, ингибитор фосфолипазы A2, ингибитор продукции TGF-β, ингибитор Th2-цитокинов или комбинация двух или более из них для применения в ускорении индукции клеточного иммунитета путем мукозального введения пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1;

(51) Комбинация (i) пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 и (ii) первого ускорителя индукции клеточного иммунитета, выбранного из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-бета, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более типов из них, для применения для индукции клеточного иммунитета путем мукозального введения пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1;

(52) Комбинация (i) пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 и (ii) ускорителя индукции клеточного иммунитета, выбранного из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-бета, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более типов из них для применения для лечения или предупреждения злокачественной опухоли, где комбинацию вводят индивидууму мукозально; и

(53) Применение (i) пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 и (ii) ускорителя индукции клеточного иммунитета, выбранного из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-бета, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более типов из них, для изготовлвения вакцинной композиции против злокачественной опухоли для мукозального введения.

Поскольку вакцинную композицию против злокачественной опухоли по настоящему изобретению можно вводить мукозально (в частности, назальное введение, пероральное мукозальное введение, включая сублингвальное мукозальное введение), она имеет следующие преимущества: превосходную приверженность лечению, например, неинвазивное введение, без боли и устранение страха инъекции; пациенты могут вводить вакцинную композицию против злокачественной опухоли самостоятельно, поскольку введение является простым; может быть устранен риск случайной инфекции вследствие повреждения от укола иглой работников здравоохранения; в случае неоднократного введения частота амбулаторных посещений может быть снижена и это может приводить к улучшению качества жизни пациента; и медицинские отходы, для которых необходима специализированная утилизация, такие как иглы для инъекций, не образуются. Кроме того, также имеется преимущество, состоящее в том, что эффективность вакцинной композиции против злокачественной опухоли по настоящему изобретению значительно увеличивается по сравнению с введением пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 отдельно. Кроме того, также имеется преимущество, состоящее в том, что мукозальное введение вакцинной композиции против злокачественной опухоли по настоящему изобретению может индуцировать более сильный клеточный иммунитет по сравнению с инъекционным введением.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Прежде всего, определены термины, используемые в настоящем описании, чтобы настоящее изобретение легче было понять. Термины, не имеющие определения, имеют значение, которое обычно подразумевают специалисты в области, в частности, медицины, фармацевтики, иммунологии, клеточной биологии, биохимии, химии полимеров и т.п., если контекст не требует иного.

I. Определения

Как используют в рамках изобретения, термин "пептид WT1" означает неполный пептид, состоящий из от приблизительно 8 до приблизительно 15, предпочтительно от приблизительно 8 до приблизительно 12 аминокислот. Пептид WT1 представляет собой пептид, полученный путем фрагментации белка WT1, который является продуктом гена злокачественной опухоли WT1 (опухоль Вильмса), и включает пептид Db126, пептид Db235 и т.п. Кроме того, неполный пептид продукта WT1, описанный в WO 2000/06602, происходящий из WT1 связывающий HLA-A26 антигенный пептид злокачественной опухоли, описанный в WO 2005/095598, рестриктированный по HLA-A*3303 пептид WT1, описанный в WO 2007/097358, и рестриктированный по HLA-A*1101 пептид WT1, описанный в WO 2008/081701, также включены в "пептид WT1" по настоящему изобретению.

Термин "пептид Db126 означает пептид WT1, состоящий из последовательности Arg Met Phe Pro Asn Ala Pro Tyr Leu (SEQ ID No: 1). Термин "пептид Db235" означает пептид WT1, состоящий из последовательности Cys Met Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEQ ID No: 2) (патентный документ 1).

Как используют в рамках изобретения, термин "модифицированный пептид WT1" означает пептид, в котором все или часть аминокислот пептида WT1 модифицированы путем замены, модификации и т.п.

Модифицированный пептид WT1 включает, например,

(a) пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от одной до нескольких, например, 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот заменены, удалены или вставлены в аминокислотную последовательность пептида WT1; и

(b) пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой все или часть аминокислот, например, одна или несколько, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 аминокислот, модифицированы в аминокислотной последовательности пептида WT1.

Примеры "модификации" аминокислоты, которой может обладать модифицированный пептид WT1, включают, но не ограничиваются ими, модификацию присоединением алифатической цепи, такую как алкилирование, такое как ацетилирование и метилирование, гликозилирование, гидроксилирование, карбоксилирование, альдегидизацию, фосфорилирование, сульфонилирование, формилирование, миристоилирование, пальмитоилирование и стеароилирование, октаноилирование, этерификацию, амидацию, дезамидацию, модификацию путем образования дисульфидной связи, такую как модификация цистеином, модификация глутатионом и модификация тиогликолевой кислотой, гликирование, убиквитинилирование, образование сукцинимида, глутамилирование, пренилирование и т.п. Модифицированный пептид WT1 может содержать комбинацию замены, делеции или вставки одной или нескольких аминокислот, и модификации одной или нескольких аминокислот.

В качестве конкретного примера, пептид Db235m, в котором часть пептида Db235 модифицирована, представляет собой модифицированный пептид WT1, состоящий из последовательности Cys Tyr Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEQ ID No: 3) (WO 2002/079253), и он включен в модифицированный пептид WT1 по настоящему изобретению. Также модифицированный пептид WT1 в рамках настоящего изобретения включает тип пептида WT1 с заменой, описанный в WO 2004/026897, производное пептида WT1_235-243, описанное в WO 2007/063903 A1, и рестриктированный по HLA-A24 антигенный пептид злокачественной опухоли, описанный в WO 2003/106682.

Пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 могут быть в свободной форме или в форме любой фармакологически приемлемой соли, например, в форме кислых солей (соль уксусной кислоты, соль TFA, соль хлористоводородной кислоты, соль серной кислоты, соль фосфорной кислоты, соль молочной кислоты, соль виннокаменной кислоты, соль малеиновой кислоты, соль фумаровой кислоты, соль щавелевой кислоты, соль бромистоводородной кислоты, соль янтарной кислоты, соль азотной кислоты, соль яблочной кислоты, соль лимонной кислоты, соль олеиновой кислоты, соль пальмитиновой кислоты, соль пропионовой кислоты, соль муравьиной кислоты, соль бензойной кислоты, соль пикриновой кислоты, соль бензолсульфоновой кислоты, соль додецилсерной кислоты, соль метансульфоновой кислоты, соль п-толуолсульфоновой кислоты, соль глутаровой кислоты, различные соли аминокислот и т.д.), соли металлов (соли щелочных металлов (например, соль натрия, соль калия), соли щелочноземельных металлов (например, соль кальция, соль магния), соль алюминия и т.д.), или соли аминов (соль триэтиламина, соль бензиламина, соль диэтаноламина, соль трет-бутиламина, соль дициклогексиламина, соль аргинина, соль диметиламмония, соль аммония и т.д.). Предпочтительной фармакологически приемлемой солью является соль уксусной кислоты или соль TFA. Можно использовать пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1, который синтезирован или получен, выделен и очищен хорошо известным способом.

Как используют в рамках изобретения, термин "активатор индукции клеточного иммунитета" означает любое вещество, которое может усиливать клеточный иммунный ответ, индуцируемый антигеном, который вводят вместе с веществом, по сравнению с иммунным ответом, индуцированным антигеном без вещества. Активатор индукции клеточного иммунитета может включать вещества, указанные в настоящем описании, хотя он не ограничивается механизмом действия, посредством которого обеспечивается индукция клеточного иммунитета.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) и включает, например, лиганды TLR1-9. Примеры лиганда TLR включают лиганд TLR1/2, лиганд TLR2, лиганд TLR2/6, лиганд TLR2 и детина 1, лиганд TLR3, лиганд TLR4, лиганд TLR5, лиганд TLR7 и/или TLR8, лиганд TLR9 и т.п. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR представляет собой один или несколько лигандов, выбранных из группы, состоящей из лиганда TLR1/2, лиганда TLR2, лиганда TLR2/6, лиганда TLR2 и дектина 1, лиганда TLR3, лиганда TLR4, лиганда TLR7 и/или TLR8 и лиганда TLR9.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR1/2" означает лиганд гетеродимера Toll-подобного рецептора (TLR) 1 и Toll-подобного рецептора (TLR) 2, и включает, например, триацилированный липопротеин, происходящий из клеточной стенки бактерии, и его соль, и они могут представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничиваются ими.

В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR1/2 представляет собой Pam₃CSK₄. Pam₃CSK₄ имеет формулу:

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR2" означает лиганд TLR2 в гетеродимере Toll-подобного рецептора (TLR) 1 и Toll-подобного рецептора (TLR) 2, и TLR2 в гетеродимере Toll-подобного рецептора (TLR) 6 и Toll-подобного рецептора (TLR) 2. Лиганд TLR2 включает, например, липотейхоевую кислоту, пептидогликаны и их соли, происходящие из клеточной стенки бактерий, и они могут представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничиваются ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения, лигандом TLR2 является пептидогликан (PGN).

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR2/6" означает лиганд гетеродимера Toll-подобного рецептора (TLR) 2 и Toll-подобного рецептора (TLR) 6, и он включает, например, диацилированные липопротеины, происходящие из клеточной стенки микоплазмы, и их соли, и они могут представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничиваются ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR2/6 представляет собой Pam₂CSK₄, MALP-2 и/или FSL-1.

Pam₂CSK₄ соответствует следующей формуле.

FSL-1 соответствует следующей формуле.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR2 и дектина 1" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 2 и рецептора β1,3-глюкана (дектина 1), и включает, например, β1,3-глюкан, происходящий из клеточной стенки гриба и его соль, и они могут представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничиваются ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR2 и дектина 1 представляет собой зимозан, происходящий из клеточной стенки дрожжей.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR3" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 3, и включает, например, двухцепочечную РНК (дцРНК), происходящую из вируса, и ее соль, и они могут представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничиваются ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR3 представляет собой полиинозиновую-полицитидиловую кислоту (поли(I:C)), которая является синтетическим продуктом, и/или ее соль.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR4" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 4, и включает, например, липополисахарид (LPS), происходящий из бактерии или растения, в частности, производное липида A, например, монофосфориллипид A, 3 деацилированный монофосфориллипид A (3D-MPL), OM174, OM 294 DP или OM 197 MP-Ac DP и т.п., алкилглюкозаминидфосфат (AGP), например, AGP, описанный в WO 98/50399 или US 6303347, или соль AGP, как описано в US 6764840, и липополисахарид, происходящий из бактерии Pantoea, глюкопиранозиллипид и гиалуронат натрия, но не ограничивается ими.

В предпочтительном аспекте настоящего изобретения в качестве лиганда TLR4 предпочтительны липополисахариды, происходящие из рода Acetobacter (например Acetobacter aceti, Acetobacter xylinum, Acetobacter orientalis и т.д.), рода Zymomonas (например Zymomonas mobilis и т.д.), рода Xanthomonas (например Xanthomonas campestris и т.д.), рода Enterobacter (например Enterobacter cloacae и т.д.), и рода Pantoea (например Pantoea agglomerans и т.д.). Экстракты, происходящие из этих липополисахаридов или очищенные липополисахариды можно использовать как есть. Кроме того, например, липополисахариды (IP-PA1), происходящие из Pantoea agglomerans, можно приобретать от Funakoshi Corporation. Кроме того, в предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR4 представляет собой липополисахарид, происходящий из бактерии Pantoea, глюкопиранозиллипид и/или гиалуронат натрия.

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR5" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 5, и включает, например, флагеллин и т.п. Лиганд TLR5, используемый в рамках настоящего изобретения, может представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничивается ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лиганд TLR5 представляет собой флагеллин.

Как используют в рамках изобретения, термин "TLR7 и/или лиганд TLR8" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 7 и/или TLR8, и включает, например, одноцепочечную РНК, имиквимод, резиквимод (R848), TLR7-II и другие соединения, например, локсорибин и бропиримин, но не ограничивается ими.

В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лигандом TLR7 и/или TLR8 является имиквимод. Имиквимод представляет собой 1-(2-метилпропил)-1H-имидазо[4,5-c]хинолин-4-амин формулы:

и, например, его характеристики и способ получения описаны в JP 7-505883 A (патентный документ 2).

В другом предпочтительном аспекте лигандом TLR7 и/или TLR8 явлется резиквимод. Резиквимод представляет собой 4-амино-2-(этоксиметил)-α,α-диметил-1H-имидазо[4,5-c]хинолин-1-этанол формулы:

В другом предпочтительном аспекте лиганд TLR7 и/или TLR8 представляет собой TLR7-II. TLR7-II соответствует формуле:

В другом предпочтительном аспекте лигандом TLR7 и/или TLR8 является бропиримин. Бропиримин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "лиганд TLR9" означает лиганд Toll-подобного рецептора (TLR) 9 и включает, например, ODN1826 и т.п. Лиганд TLR9, используемый в рамках настоящего изобретения, может представлять собой экстракт, продукт или синтетический продукт, и не ограничивается ими. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения лигандом TLR9 является ODN1826.

ODN1826 представляет собой олигодезоксинуклеотид, состоящий из следующей последовательности (SEQ ID No: 4).

5'-tccatgacgttcctgacgtt-3'

Toll-подобные рецепторы (TLR) представляют собой семейство трансмембранных белков типа I, которые инициируют врожденный иммунный ответ, в котором участвуют определенные цитокины и определенные хемокины и факторы роста, путем их активации in vivo. Все TLR могут активировать определенную молекулу внутриклеточной передачи сигнала, например, ядерный фактор κB (NF-κB) и активируемую митогенами протеинкиназу (MAP-киназа) и т.п., в то время как с каждым TLR, по-видимому, соотносится конкретная популяция цитокинов и хемокинов, которые высвобождаются. TLR1/2, TLR2/6, TLR4 и TLR5 широко экспрессируется в основных клетках, таких как эпителиальные клетки слизистой оболочки, а также в иммунных клетках, таких как дендритная клетка и моноцит. Известно, что эти рецепторы распознают компонент бактерии и стимулируют секрецию воспалительных цитокинов (TNF-α, IL-1 и IL-6). Также известно, что TLR4 активирует продукцию интерферонов типа I (IFNα и IFNβ). TLR3, 7, 8 и 9 составляют подсемейство TLR, которое присутствует в эндосомальной фракции или лизосомальной фракции иммунных клеток (например, дендритная клетка и моноцит). В частности, TLR3 экспрессируется широким диапазоном клеток, таких как дендритная клетка и фибробласт, TLR7 экспрессируется подобными плазмацитам дендритными клетками, и в меньшей степени экспресируется моноцитами, TLR8 экспрессируется моноцитами, а также происходящими из моноцитов дендритными клетками и миелоидными дендритными клетками, и TLR9 экспрессирется подобными плазмацитам дендритными клетками. Это подсемейство опосредует распознавание нуклеиновой кислоты микроорганизма (одноцепочечная РНК, двухцепочечная РНК, одноцепочечная ДНК и т.д.). Агонисты TLR3, TLR7 и/или TLR8, и TLR9 стимулируют продукцию различных провоспалительных цитокинов (включая, например, интерлейкин-6, интерлейкин-12, TNF-α и интерферон-γ). Такие агонисты также обеспечивают увеличение экспрессии костимуляторной молекулы (например, CD40, CD80 или CD86), молекулы главного комплекса гистосовместимости и рецептора хемокинов. Интерфероны типа I (IFNα и IFNβ) также продуцируются клеткой при активации агонистами TLR7 и/или TLR8.

Как используют в рамках изобретения, термин "циклический динуклеотид" означает молекулу, в которой две группы OH части сахара двух нуклеотидов образуют сложный эфир для каждой одинаковой молекулы фосфорной кислоты, и тем самым нуклеотиды циклизуются, и ее аналог, и включает, например, циклический ди-AMP (c-di-AMP), циклический ди-GMP (c-di-GMP), c-dGpGp, c-dGpdGp, c-GpAp, c-GpCp, c-GpUp и т.п., но не ограничивается ими. Циклический динуклеотид активирует дендритные клетки или T-клетки. Следующие примеры циклических динуклеотидов, их применение в качестве адъюванта и способ их получения описаны в JP 2007-529531 A (патентный документ 3). В предпочтительном аспекте настоящего изобретения циклический динуклеотид представляет собой циклический ди-GMP и/или циклический ди-AMP. Циклический ди-GMP имеет формулу:

и способ его синтеза описан в Kawai et al., Nucleic Acids Research Suppl. 3: 103-4.

Как используют в рамках изобретения термин "хелперный пептид" означает любой пептид, который активирует хелперную T-клетку, и включает, например, происходящий из туберкулезной бациллы хелперный пептид, происходящий из вируса кори хелперный пептид, происходящий из вируса гепатита B хелперный пептид, происходящий из вируса гепатита C хелперный пептид, происходящий из Chlamydia trachomatis хелперный пептид, происходящий из спорозоита Plasmodium falciparum хелперный пептид, происходящий из гемоцианина лимфы улитки хелперный пептид, происходящий из столбнячного токсина хелперный пептид, происходящий из коклюшного токсина хелперный пептид, происходящий из дифтерийного токсина хелперный пептид, происходящий из злокачественной клетки хелперный пептид (например, хелперный пептид WT1__332-347 (описанный в патенте Японии № 4621142 "WT1-derived HLA-DR binding Antigen Peptide"), хелперный пептид hWT1₃₅, хелперный пептид hWT1₈₆, хелперный пептид hWT1₂₉₄ (три указанных выше типа описаны в WO 2010/123065 "Cancer Antigen Helper Peptide"), хелперный пептид IMA-MMP-001, хелперный пептид CEA-006, хелперный пептид MMP-001, хелперный пептид TGFBI-004, хелперный пептид HER-2/neu (а.к. 776-790), хелперный пептид AE36, хелперный пептид AE37, хелперный пептид MET-005, хелперный пептид BIR-002), и универсальный хелперный аналог (например PADRE). В предпочтительном аспекте настоящего изобретения хелперный пептид состоит из 10-20 аминокислот, предпочтительно 12-19 аминокислот, более предпочтительно 13-18 аминокислот. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения хелперный пептид представляет собой пептид-25, hWT1₃₅, или PADRE, или WT1__332-347. Пептид-25 представляет собой пептид из 15 аминокислот, состоящий из последовательности Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Ala Gly Gly His Asn Ala Val Phe (SEQ ID No: 5), соответствующей аминокислотным остаткам 240-254 Ag85B, который является одним из основных белков, секретируемых туберкулезной бациллой человека (Mycobacterium tuberculosis). Кроме того, hWT1₃₅ представляет собой пептид из 18 аминокислот, состоящий из последовательности Trp Ala Pro Val Leu Asp Phe Ala Pro Pro Gly Ala Ser Ala Tyr Gly Ser Leu (представленной как SEQ ID No: 6 в настоящей заявке), описанный в WO 2010/123065 "Cancer Antigen Helper Peptide". PADRE представляет собой пептид из 13 аминокислот, состоящий из последовательности D-Ala Lys циклогексил-Ala Val Ala Ala Trp Thr Leu Lys Ala Ala D-Ala (представленной в качестве SEQ ID No: 7 в настоящай заявки). WT1__332-347 представляет собой пептид из 16 аминокислот, состоящий из последовательности Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (представленной в качестве SEQ ID No: 8 в настоящей заявке), описанный в патенте Японии № 4621142 "WT1-derived HLA-DR binding Antigen Peptide".

Кроме того, в рамках настоящего изобретения, вместо упомянутого выше хелперного пептида или в комбинации с ним, также можно использовать пептид, в котором все или часть аминокислот хелперных пептидов модифицированы путем замены, модификации и т.п. (далее обозначаемый как "модифицированный хелперный пептид").

Модифицированный хелперный пептид включает, например,

(a) пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от одной до нескольких, например, 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот заменены, удалены или вставлены в аминокислотной последовательности исходного хелперного пептида; и

(b) пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой все или часть аминокислот, например, одна или несколько, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 аминокислот, модифицированы в аминокислотной последовательности исходного хелперного пептида.

Примеры "модификации" аминокислоты, которой может обладать модифицированный хелперный пептид, включают, но не ограничиваются ими, модификацию присоединением алифатической цепи, такую как ацетилирование, алкилирование, такое как метилирование, гликозилирование, гидроксилирование, карбоксилирование, альдегидизацию, фосфорилирование, сульфонилирование, формилирование, присоединение жирной кислоты, такое как миристоилирование, пальмитоилирование и стеароилирование, октаноилирование, этерификацию, амидацию, дезамидацию, модификацию образованием дисульфидной связи, такую как модификация цистеином, модификация глутатионом и модификация тиогликолевой кислотой, гликирование, убиквитинилирование, образование сукцинимида, глутамилирование, пренилирование и т.п. Кроме того, модифицированный хелперный пептид может содержать комбинацию замены, делеции или вставки одной или нескольких аминокислот и модификации одной или нескольких аминокислот.

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор циклооксигеназы" означает вещество, которое ингибирует функцию циклооксигеназы (COX). Также его далее в настоящем описании обозначают как "ингибитор COX". В качестве ингибиторов COX существуют ингибитор COX, который селективно действует на конкретную циклооксигеназу (например, COX-1 или COX-2), и ингибитор COX, не обладающий селективностью. Примеры ингибиторов COX, которые можно использовать в рамках настоящего изобретения, включают этодолак, локсопрофен, целекоксиб, вальдекоксиб, парекоксиб, люмиракоксиб, мелоксикам, теноксикам, диклофенак, мефенаминовую кислоту, толфенаминовую кислоту, флуфенаминовую кислоту, меклофенаминовую кислоту, нифлумовую кислоту, бензидамин, индобуфен, трифлузал, толметин, фенопрофен, тиапрофеновую кислоту, фелбинак, непафенак, амфенак, правадолин, зальтопрофен, сулиндак, набуметон, дифлунизал, пироксикам, ибупрофен, напроксен, фенопрофен, аспирин, метилсалицилат, салициламид, салсалат, алоксиприн, толметин, индометацин, проглуметацин, ацеметацин, флубипрофен, пранопрофен, ацетаминофен, флоктафенин, лорноксикам, теноксикам, тиапрофеновую кислоту, оксапрозин, кетопрофен, декскетопрофен, дексибупрофен, алминопрофен, каторолак, мофезолак, фенилбутазон, оксифенилбутазон, кетофенилбутазон, фепразон, фенбутазон, этензамид, тиарамид, тиноридин, эпиризол, эморфазон и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения ингибитором COX является этодолак и/или локсопрофен.

Локсопрофен соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецепторов простагландинов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию простагландина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора EP2, антагонист рецептора EP4, антагонист рецептора DP и антагонист рецептора IP.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора EP2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию простагландина E2 на рецептор EP2. Примеры антагониста рецептора EP2 включают AH6809 и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

AH6809 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора EP4" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию простагландина E₂ на рецептор EP4. Примеры антагониста рецептора EP4 включают GW627368X и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

GW627368X соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора DP" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию простагландина D₂ на рецептор DP. Примеры антагониста рецептора DP включают S-5751, BWA868C и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

BWA868C соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора IP" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию простагландина I₂ на рецептор IP. Примеры антагониста рецептора IP включают RO1138452 и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

RO1138452 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов простагландинов" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор простагландинов, и включает, например, агонист рецептора EP3.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора EP3" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор EP3. Примеры агониста рецептора EP3 включают сульпростон, GR63799, клопростенол, ONO-AE-248, карбациклин, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Сульпростон соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор продукции TSLP" означает вещество, имеющее функцию ингибирования продукции TSLP. Поскольку полагают, что лекарственное средство, которое ингибирует NF-κB, непрямо ингибирует продукцию TSLP, оно включено в эту категорию. Примеры ингибитора продукции TSLP включают нарингенин, берберин, ресвератрол, лутеолин, апигенин, хризоериол, велутин, рутин, гесперидин, кверцетин, даидзеин, генистеин, носкапин, дииндолилметан, ксантон, партенолид и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Берберин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор аденилатциклазы" означает вещество, имеющее функцию ингибирования активности аденилатциклазы. Примеры ингибитора аденилатциклазы включают 2',5'-дидезоксиаденозин, ниацин, инсулин и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

2',5'-дидезоксиаденозин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "омега-3-жирная кислота" относится к ненасыщенной жирной кислоте, имеющей двойную углерод-углеродную связь в положении ω-3. Примеры омега-3-жирной кислоты включают эйкозапентаеновую кислоту, α-линоленовую кислоту, докозагексаеновую кислоту и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Эйкозапентаеновая кислота соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист PPAR" означает вещество, обладающее функцией действия на рецептор, активируемый пролифераторами пероксисом, и включает, например, агонист PPAR-α, агонист PPAR-δ и агонист PPAR-γ.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист PPAR-α" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор, активируемый пролифераторами пероксисом, типа α. Термин "агонист PPAR-δ" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор, активируемый пролифераторами пероксисом, типа δ. Термин "агонист PPAR-γ" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор, активируемый пролифераторами пероксисом, типа γ. Примеры агониста PPAR-α, и/или агониста PPAR-δ, и/или агониста PPAR-γ включают клофибрат, фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, этофибрат, телмисартан, олеилэтаноламид, тетрадецилтиоуксусную кислоту, троглитазон, пиоглитазон, розиглитазон, балаглитазон, ривоглитазон, циглитазон, дарглитазон, эдаглитазон, нетоглитазон, индеглитазар, тезаглитазар, мураглитазар, алеглитазар и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Клофибрат соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист дофаминовых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию дофамена на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора D1 и антагонист рецептора D5.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора D1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию дофамина на рецептор D1. Примеры антагониста рецептора D1 включают бензазепин, фенолдопам, лоркасерин, SCH23390, SCH39166, LE300 и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Бензазепин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора D5" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию дофамина на рецептор D5. Примеры антагониста рецептора D5 включают SCH39166 и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

SCH39166 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист дофаминовых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор дофамина, и включает, например, агонист рецептора D2, агонист рецептора D3 и агонист рецептора D4.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора D2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор D2. Примеры агониста рецептора D2 включают каберголин, бромкриптин, перголид, ропинирол, талипексол, арипипразол, луразидон и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Ропинирол соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора D3" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор D3. Примеры агониста рецептора D3 включают пирибедил, ротиготин, PD1289077, OH-DPAT и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Ротиготин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора D4" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор D4. Примеры агониста рецептора D4 включают флибансерин, ABT724, PD168077, CP226269 и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Флибансерин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист гистаминовых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию гистамина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора H1 и антагонист рецептора H2.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора H1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию гистамина на рецептор H1. Примеры антагониста рецептора H1 включают кетансерин, тонзиламин, мепирамин, трипеленамин, диметинден, клемастин, бамипин, изотипендил, хлорфеноксамин, диметотиазин, хлорпромазин, гидроксизин, опипрамол, бетагистин, циннаризин, левокарбастин, антазолин, дифенилпиралин, карбиноксамин, доксиламин, алимемазин, циклазин, меклозин, левоцетиразин, ципрогептадин, фениндамин, трипролидин, азатадин, астемизол, терфенадин, акривастин, эбастин, дезлоратидин, рупатидин, биластин, мизоластин, ноберастин, рокастин, темеластин, бепотастин, дифенгидрамин, хлорфенирамин, кетотифен, прометазин, ципрогептадин, эпинастин, олопатадин, бепотастин, астемизол, эмедастин, меквитазин, оксатомид, лоратидин, фексофенадин, цетиразин, азеластин, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Дифенгидрамин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора H2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию гистамина на рецептор H2. Примеры антагониста рецептора H2 включают циметидин, ранитидин, фамотидин, низатидин, роксатидин, лафутидин, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Фамотидин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист гистаминовых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на гистаминовый рецептор, и включает, например, агонист рецептора H1, агонист рецептора H3 и агонист рецептора H4.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора H1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор H1. Примеры агониста рецептора H1 включают 2-пиридилэтиламин, 2-тиазолилэтиламин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

2-Пиридилэтиламин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора H3" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор H3. Примеры агониста рецептора H3 включают имметридин, иметит, иммепип, α-метилгистамин, проксифан и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Проксифан соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора H4" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор H4. Примеры агониста рецептора H4 включают 4-метилгистамин, VUF8430, иммепип и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

4-Метилгистамин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист серотониновых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию серотонина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора 5-HT2, антагонист рецептора 5-HT4, антагонист рецептора 5-HT6 и антагонист рецептора 5-HT7.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора 5-HT2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию серотонина на рецептор 5-HT2. Примеры антагониста рецептора 5-HT2 включают пизотифен, рисперидон, оланзапин, кветиапин, арипипразол, блонансерин, клозапин, палиперидон, ритансерин, иохимбин, мезулергин, агомелатин, циклобензаприн, сарпогрелат, метисергид, кетансерин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Оланзапин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора 5-HT4" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию серотонина на рецептор 5-HT4. Примеры антагониста рецептора 5-HT4 включают пибосерод, GR113808, GR125487, RS39604, SB204070 и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Пибосерод соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонисит рецептора 5-HT6" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию серотонина на рецептор 5-HT6. Примеры антагониста рецептора 5-HT6 включают церлапирдин, клозапин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Церлапирдин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора 5-HT7" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию серотонина на рецептор 5-HT7. Примеры антагониста рецептора 5-HT7 включают луразидон, метерголин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Метерголин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист серотониновых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор серотонина, и включает, например, агонист рецептора 5-HT1 и агонист рецептора 5-HT2.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора 5-HT1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор 5-HT1. Примеры агониста рецептора 5-HT1 включают пиклозотан, тандоспирон, суматриптан, золмитриптан, элетриптан, ризатриптан, наратриптан, алмотриптан, фроватриптан, авитриптан, эрготамин, алкалоид спорыньи и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Золмитриптан соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора 5-HT2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор 5-HT2. Примеры агониста рецептора 5-HT2 включают α-метил-5-HT, агомелатин, норфенфлурамин, мета-хлорфенилпиперазин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Агомелатин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецепторов вазопрессина" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию вазопрессина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора V2.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора V2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию вазопрессина на рецептор V2. Примеры антагониста рецептора V2 включают толваптан, мозаваптан, кониваптан, ликсиваптан и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Мозаваптан соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов вазопрессина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор вазопрессина, и включает, например, агонист рецептора V1.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора V1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор V1. Примеры агониста рецептора V1 включают вазопрессин, фелипрессин, десмопрессин, липрессин, терлипрессин, орнипрессин, аргипрессин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Десмопрессин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист мускариновых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию ацетилхолина на мускариновые рецепторы, и включает, например, антагонист рецептора M1, антагонист рецептора M3 и антагонист рецептора M5.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора M1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию ацетилхолина на рецептор M1. Термин "антагонист рецептора M3" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию ацетилхолина на рецептор M3. Термин "антагонист рецептора M5" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию ацетилхолина на рецептор M5. Примеры антагониста рецептора M1, и/или антагониста рецептора M3, и/или антагониста рецептора M5 включают пирензепин, атропин, тримебутин, пиперидолат, оксибутинин, тропикамид, пропиверин, толтеродин, солифенацин, дарифенацин, имидафенацин, оксифенциклимин, тиотропия бромид, эзоксибутинин, тиквизий и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Оксибутинин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист мускариновых рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на мускариновый рецептор, и включает, например, агонист рецептора M1, агонист рецептора M2, агонист рецептора M3, агонист рецептора M4 и агонист рецептора M5.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора M1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор M1. Термин "агонист рецептора M2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор M2. Термин "агонист рецептора M3" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор M3. Термин "агонист рецептора M4" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор M4. Термин "агонист рецептора M5" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор M5. Примеры агониста рецептора M1, и/или агониста рецептора M2, и/или агониста рецептора M3, и/или агониста рецептора M4, и/или агониста рецептора M5 включают ацетилхолин, ацеклидин, алвамелин, талсаклидин, ксаномелин, пилокарпин, цевимелин, бетанехол, мазатикол, мускарин, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Бетанехол соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецепторов адреналина" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию адреналина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора α1, антагонист рецептора β1, антагонист рецептора β2 и антагонист рецептора β3.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора α1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию адреналина на рецептор α1. Примеры антагонист рецептора α1 включают празозин, доксазозин, буназозин, тримазозин, алфузозин, силодозин, теразозин, тамусулозин, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Тамусулозин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора β1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию адреналина на рецептор β1. Термин "антагонист рецептора β2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию адреналина на рецептор β2. Термин "антагонист рецептора β3" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию адреналина на рецептор β3. Примеры антагониста рецептора β1, и/или антагониста рецептора β2, и/или антагониста рецептора β3 включают бопиндолол, пиндолол, тимолол, дихлоризопреналин, алпренолол, картеолол, инденолол, бунитролол, пентбутолол, пропранолол, надолол, нипрадилол, тилизолол, ацебутолол, целипролол, метопролол, атенолол, бизопролол, бетоксалол, практолол, бевантолол, бутоксамин, карведилол, амозулалол, аротинолол, лабеталол и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Пропранолол соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов ангиотензина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор ангиотензина, и включает, например, агонист рецептора AT2.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов адреналина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор адреналина, и включает, например, агонист рецептора α1 и агонист рецептора α2.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора α1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор α1. Термин "агонист рецептора α2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор α2. Примеры агониста рецептора α1 и/или агониста рецептора α2 включают норадреналин, норфенефрин, этилэфрин, нафазолин, фенилэфрин, мидодрин, метоксамин, окседрин, метараминол, арбутамин, эфедрин, оксиметазолин, тетризолин, ксилометазолин, трамазолин, псевдоэфедрин, дипивефрин, амидфрин, метилэфедрин, рилменидин, бримонидин, медетомидин, ксилазин, тизанидин, гуанфацин, метилдопа, гуанабенц и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Ксилазин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов ангиотензина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор ангиотензина, и включает, например, агонист рецептора AT2.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора AT2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор AT2. Примеры агониста рецептора AT2 включают новокинин, ангиотензин и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Ангиотензин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов GABA" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор GABA, и включает, например, агонист рецептора GABA_B.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора GABA_B" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор GABA_B. Примеры агониста рецептора GABA_B включают баклофен, γ-аминомасляную кислоту, арбаклофен и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Баклофен соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецепторов тромбина" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию тромбина на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора PAR-1.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора PAR-1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию тромбина на рецептор PAR-1. Примеры антагониста рецептора PAR-1 включают ворапаксар, атопаксар, FR171113, RWJ56110, дабигатран, дабигатран этексилат, мелагатран, ксимелагатран, гирудин, гирулог, аргатробан и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Ворапаксар соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов тромбина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор тромбина, и включает, например, агонист рецептора PAR-1.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора PAR-1" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор PAR-1. Примеры агониста рецептора PAR-1 включают TRAP-6, TRAP-14, NAT6-NH₂ и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

TRAP-6 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист опиоидных рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на опиоидный рецептор. Примеры агониста опиоидных рецепторов включают тримебутин, алвимопан, морфин, оксикодон, дигидрокодеин, диаморфин, петидин, пентазоцин, бупренорфин, буторфанол, нальбуфин, тилидин, дезоцин, мептазинол, тапентадол, налтрексон, метадон, этилморфин, гидрокодон, ацетилдигидрокодеин, налорфин, лоперамид, ремоксиприд, опипрамол, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Бупренорфин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецепторов лейкотриенов" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию лейкотриена на рецептор, и включает, например, антагонист рецептора CysLT1 и антагонист рецептора CysLT2.

Как используют в рамках изобретения, термин "антагонист рецептора CysLT1" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию лейкотриена на рецептор CysLT1. Термин "антагонист рецептора CysLT2" означает вещество, имеющее функцию препятствования действию лейкотриена на рецептор CysLT2. Примеры антагониста рецептора CysLT1 и/или антагониста рецептора CysLT2 включают монтелукаст, зафирлукаст, пранлукаст, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль. Примеры фармакологически приемлемой соли монтелукаста включают монтелукаст натрий и т.п.

Монтелукаст натрий соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов лейкотриенов" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор лейкотриена, и включает, например, агонист рецептора BLT.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора BLT" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор BLT. Примеры агониста рецептора BLT включают лейкотриен B4, CAY10583 и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Лейкотриен B4 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов ADP" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор ADP. Примеры агониста рецепторов ADP включают аденозиндифосфат и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль.

Аденозиндифосфат соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов мелатонина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор мелатонина. Примеры агониста рецепторов мелатонина включают мелатонин, перлапин, тасимелтеон, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Мелатонин соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов соматостатина" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор соматостатина. Примеры агониста рецепторов соматостатина включают соматостатин, соматостатин-14, октреотид, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Октреотид соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист каннабиноидных рецепторов" означает вещество, имеющее функцию действия на каннабиноидный рецептор. Примеры агониста каннабиноидных рецепторов включают дронабинол, набилон, левонантрадол, отенабант, GW833972A, GW405833, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Дронабинол соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор сфингозин-1 фосфата. Примеры агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата включают финголимод, понесимод, RPC-1063, ONO-4641, SEW2871, сфингозин-1 фосфат и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Финголимод соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист метаботропных рецепторов глутамата" означает вещество, имеющее функцию действия на метаботропный рецептор глутамата, и включает, например, агонист рецептора mGluR2, агонист рецептора mGluR3, агонист рецептора mGluR4, агонист рецептора mGluR6, агонист рецептора mGluR7 и агонист рецептора mGluR8.

Как используют в рамках изобретения, термин "агонист рецептора mGluR2" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR2. Термин "агонист рецептора mGluR3" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR3. Термин "агонист рецептора mGluR4" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR4. Термин "агонист рецептора mGluR6" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR6. Термин "агонист рецептора mGluR7" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR7. Термин "агонист рецептора mGluR8" означает вещество, имеющее функцию действия на рецептор mGluR8. Примеры агониста рецептора mGluR2, и/или агониста рецептора mGluR3, и/или агониста рецептора mGluR4, и/или агониста рецептора mGluR6, и/или агониста рецептора mGluR7, и/или агониста рецептора mGluR8 включают VU0361737, VU0155041, бифенилинданон A, PBDA, L-AP4, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

VU0361737 соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор фосфолипазы A2" означает вещество, имеющее функцию ингибирования активности фосфолипазы A2. Примеры ингибитора фосфолипазы A2 включают глицирризиновую кислоту, глицирретовую кислоту, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Глицирретовая кислота соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор продукции TGF-β" означает вещество, имеющее функцию ингибирования продукции TGF-β. Примеры ингибитора продукции TGF-β включают пирифенидон, траниласт и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль.

Пирфенидон соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, термин "ингибитор Th2-цитокинов" означает вещество, имеющее функцию ингибирования продукции Th2-цитокинов, таких как IL-4 и IL-5. Примеры ингибитора Th2-цитокинов включают суплатаст и его производное, а также его фармакологически приемлемую соль. Примеры фармакологически приемлемой соли суплатаста включают суплатаст тозилат. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения, ингибитором Th2-цитокинов является суплатаст тозилат.

Суплатаст тозилат соответствует формуле:

Как используют в рамках изобретения, "фармакологически приемлемая кислота" в качестве второго активатора индукции клеточного иммунитета, который может содержаться в композиции по настоящему изобретению, означает кислоту, которая не имеет вредоносного эффекта на индивидуума, которому ее вводят, и не ухудшает фармакологической активности ингредиентов в композиции. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения фармакологически приемлемая кислота представляет собой органическую кислоту, более предпочтительно органическое соединение, содержащее карбоксильную группу, или органическое соединение, содержащее сульфонатную группу, более предпочтительно насыщенную или ненасыщенную прямую или разветвленную жирную кислоту, в которой насыщенная неразветвленная часть имеет 8-20 атомов углерода, молочную кислоту, яблочную кислоту, салициловую кислоту, малеиновую кислоту, лимонную кислоту или органическое соединение, содержащее сульфонатную группу, более предпочтительно насыщенную или ненасыщенную прямую или разветвленную жирную кислоту, в которой насыщенная неразветвленная часть имеет 8-16 атомов углерода, молочную кислоту, яблочную кислоту, салициловую кислоту, малеиновую кислоту, лимонную кислоту, или органическое соединение, содержащее сульфонатную группу, еще более предпочтительно жирную кислоту, выбранную из группы, состоящей из декановой кислоты, лауриновой кислоты, миристиновой кислоты, изостеариновой кислоты и олеиновой кислоты, или молочную кислоту, салициловую кислоту, лимонную кислоту или метансульфоновую кислоту.

Как используют в рамках изобретения, "фармакологически приемлемая соль", которая может содержаться в композиции по настоящему изобретению, означает соль, которая не имеет вредоносного эффекта на индивидуума, которому ее вводят, и не ухудшает фармакологическую активность ингредиентов в композиции, и включает соли неорганических кислот (например, гидрохлорид и фосфат), соли органических кислот (например, ацетат, фталат и соль TFA), соли металлов (например, соли щелочных металлов, такие как натриевая соль и калиевая соль, соли щелочноземельных металлов, такие как кальциевая соль и магниевая соль, алюминиевая соль и т.д.), соли аминов (например, соль триэтиламина, соль бензиламина, соль диэтаноламина, соль трет-бутиламин, соль дициклогексиламина, соль аргинина, соль диметиламмония, соль аммония и т.д.), но не ограничивается ими.

Как используют в рамках изобретения, термин "иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство" означает вещество, которое активирует или подавляет иммунные клетки, такие как T-клетки, NK-клетки, макрофаги и т.п., и которое не соответствует никакому из упомянутых выше лигандов TLR, циклическому динуклеотиду, хелперному пептиду, ингибитору циклооксигеназы, антагонисту рецепторов простагландинов, агонисту рецепторов простагландинов, ингибитору продукции TSLP, ингибитору аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоте, агонисту PPAR, антагонисту дофаминовых рецепторов, агонисту дофаминовых рецепторов, агонисту гистаминовых рецепторов, антагонисту гистаминовых рецепторов, агонисту серотониновых рецепторов, антагонисту серотониновых рецепторов, антагонисту рецепторов вазопрессина, агонисту рецепторов вазопрессина, антагонисту мускариновых рецепторов, агонисту мускариновых рецепторов, антагонисту рецепторов адреналина, агонисту рецепторов адреналина, агонисту рецепторов ангиотензина, агонисту рецепторов GABA, антагонисту рецепторов тромбина, агонисту рецепторов тромбина, агонисту опиоидных рецепторов, агонисту рецепторов ADP, антагонисту рецепторов лейкотриенов, агонисту рецепторов лейкотриенов, агонисту рецепторов мелатонина, агонисту рецепторов соматостатина, агонисту каннабиноидных рецепторов, агонисту рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонисту метаботропных рецепторов глутамата, ингибитору фосфолипазы A2, ингибитору продукции TGF-β и ингибитору Th2-цитокинов. Примеры иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства включают бестатин, пидотимод, левамизол, голотимод, форфеницинол, и их производное, а также их фармакологически приемлемую соль. Примеры фармакологически приемлемой соли левамизола включают левамизол гидрохлорид.

Бестатин соответствует формуле:

Пидотимод соответствует формуле:

Левамизол гидрохлорид соответствует формуле:

В рамках настоящего изобретения иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство обычно представляет собой соединение, имеющее молекулярную массу менее 1000, предпочтительно менее 500. В предпочтительном аспекте настоящего изобретения иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство представляет собой одно или несколько соединений, выбранных из группы, состоящей из бестатина, пидотимода и левамизола гидрохлорида.

Как описано выше, авторы изобретения открыли, что среди различных активаторов индукции клеточного иммунитета, лиганд TLR, циклический динуклеотид, хелперный пептид, иммуномодулирующее низкомолекулярное лекарственное средство, ингибитор циклооксигеназы, антагонист рецепторов простагландинов, агонист рецепторов простагландинов, ингибитор продукции TSLP, ингибитор аденилатциклазы, омега-3-жирная кислота, агонист PPAR, антагонист дофаминовых рецепторов, агонист дофаминовых рецепторов, агонист гистаминовых рецепторов, антагонист гистаминовых рецепторов, агонист серотониновых рецепторов, антагонист серотониновых рецепторов, антагонист рецепторов вазопрессина, агонист рецепторов вазопрессина, антагонист мускариновых рецепторов, агонист мускариновых рецепторов, антагонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов адреналина, агонист рецепторов ангиотензина, агонист рецепторов GABA, антагонист рецепторов тромбина, агонист рецепторов тромбина, агонист опиоидных рецепторов, агонист рецепторов ADP, антагонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов лейкотриенов, агонист рецепторов мелатонина, агонист рецепторов соматостатина, агонист каннабиноидных рецепторов, агонист рецепторов сфингозин-1-фосфата, агонист метаботропных рецепторов глутамата, ингибитор фосфолипазы A2, ингибитор продукции TGF-β, и ингибитор Th2-цитокинов особенно пригодны для усиления иммунного ответа, индуцируемого мукозальным введением пептидного антигена WT1 и/или модифицированного пептидного антигена WT1. Таким образом, в одном аспекте активатор индукции клеточного иммунитета по настоящему изобретению представляет собой одно или несколько веществ, выбранных из них. В другом аспекте он представляет собой "первый активатор индукции клеточного иммунитета" по изобретению. В особенно предпочтительном аспекте настоящего изобретения активатор индукции клеточного иммунитета представляет собой комбинацию хелперного пептида и одного или нескольких веществ, выбранных из группы, состоящей из лиганда TLR, циклического динуклеотида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, антагониста рецепторов тромбина, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-β и ингибитора Th2-цитокинов. Индукцию клеточного иммунитета можно количественно определять различными известными способами. В рамках настоящей заявки можно использовать любой из известных способов, например, способ ELISPOT, описанный в разделе "Примеры".

Как используют в рамках изобретения, неинвазивное введение означает введение абсолютно без причинения физического раздражения и/или химического раздражения, предпочтительно без причинения физического раздражения (например, без причинения раздражения путем отслаивающей слизистую оболочку обработки, повреждающей слизистую оболочку обработки и перфорирующей слизистую оболочку обработки) слизистой оболочке.

Как используют в рамках изобретения, термин "злокачественная опухоль" означает злокачественную опухоль, ассоциированную с аномальной экспрессией, например, сверхэкспрессией, гена WT1. Примеры злокачественной опухоли могут включать гемопоэтические опухоли и солидные злокачественные опухоли. Примеры гемопоэтических опухолей, ассоциированных с аномальной экспрессией гена WT1, включают, но не ограничиваются ими, лейкоз, такой как острый миелоцитарный лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз и хронический миелоцитарный лейкоз, миелодиспластический синдром, множественную миелому, а также злокачественную лимфому, такую как неходжскинская лимфома. Примеры солидной злокачественной опухоли, ассоциированной с аномальной экспрессией гена WT1, включают, но не ограничиваются ими, рак легкого, рак молочной железы, рак желудка, злокачественную опухоль толстого кишечника/прямой кишки, герминогенную злокачественную опухоль, рак печени, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак желчных протоков, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак щитовидной железы, рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак яичника, рак тела матки, рак шейки матки, саркому костей и мягких тканей, злокачественную меланому, злокачественную мезотелиому, опухоль мужских половых клеток и злокачественную опухоль.

Как используют в рамках изобретения, термин "аномальная экспрессия гена" означает, что уровень экспрессии гена в клетке значительно увеличен или снижен, например, в 2 раза или более, как например, в 4 раза или более, по сравнению с другими клетками той же ткани. Термин "сверхэкспрессия" означает, что аномальная экспрессия представляет собой увеличение уровня экспрессии. Уровень экспрессии гена можно легко измерять с использованием любого способа, хорошо известного в данной области.

Как используют в рамках изобретения, термин "индивидуум" означает любое животное, имеющее ген WT1, иммунный ответ у которого может быть индуцирован мукозальным введением вакцинной композиции против злокачественной опухоли на практической стадии. Как правило, индивидуумом может быть млекопитающее, включая человека, мышь, крысу, собаку, кошку, кролика, лошадь, корову, овцу, свинью, козу, обезьяну и шимпанзе. Особенно предпочтительным индивидуумом является человек.

Как используют в рамках изобретения, термин "модельное животное для иммунологической оценки" означает модельное животное для оценки свойства вакцинной композиции против злокачественной опухоли для мукозального введения усиливать иммунитет. В частности, он означает модельное животное для оценки свойства индукции клеточного иммунитета. Модельное животное для иммунологической оценки следует выбирать с учетом совместимости между антигеном в вакцинной композиции, подлежащей оценке, и молекулой MHC класса 1 животного. Следует использовать модель на животных, подходящую для оценки свойства вакцинной композиции индуцировать клеточный иммунитет. В случае вакцинной композиции, содержащей пептид, рестриктированный по MHC класса 1 типа HLA-A*24, свойство можно оценивать у мышей BALB/c. В случае вакцинной композиции, содержащей пептид, рестриктированный по MHC типа HLA-A*02, свойство можно оценивать у генетически модифицированной мыши, с помощью которой можно оценить индукцию клеточного иммунитета пептидом, рестриктированным по MHC типа HLA-A*02. В случае вакцинной композиции, содержащей другой пептид, рестриктированный по MHC типа HLA, свойство оценивают у животного, с помощью которого можно оценить индукцию клеточного иммунитета пептидом, рестриктированным по MHC типа HLA. В случае вакцинной композиции, содержащей белковый антиген, свойство оценивают у животного, имеющего MHC, имеющий совместимость с эпитопом класса 1, подлежащим использованию для индукции клеточного иммунитета, среди различных эпитопов класса 1, включенных в аминокислотную последовательность белкового антигена. Кроме того, в случае вакцинной композиции против злокачественной опухоли для мукозального введения с использованием пептида Db126, который совместим не только с типом HLA-A*02, но также с типом MHC-H-2Db, в качестве модели для иммунологической оценки можно использовать не только генетически модифицированную мышь, с помощью которой можно оценивать индукцию клеточного иммунитета пептидом, рестриктированным по MHC типа HLA-A*0201, но также мышь C57BL/6, которая является животным, имеющим тип MHC-H-2Db.

II. Вакцинная композиция против злокачественной опухоли для мукозального введения

Уже было выявлено, что пептиды WT1 и/или модифицированные пептиды WT1 пригодны в качестве вакцины против злокачественной опухоли (например, патентный документ 1).

Как используют в рамках изобретения, композиция "для мукозального введения" может быть предоставлена в любом составе или препарате, который обычно используют при мукозальном введении, таком как сублингвальное введение, назальное введение, букальное введение, ректальное введение и вагинальное введение, и такой состав может представлять собой полутвердый состав, такой как состав геля (желеобразный состав), состав крема, состав мази и состав пластыря, жидкий состав, твердый состав, такой как порошковый состав, состав мелких гранул, состав гранул, состав пленки, таблетки и таблетки, растворяющиеся в полости рта, состав спрея для слизистой оболочки, такой как состав аэрозоля, ингалируемый состав и т.п. Классификация, определение, природа, процесс получения и т.п. этих составов хорошо известны в данной области. Например, см. Японскую фармакопею, 16 издание.

Например, в качестве растворителя для жидкого состава можно использовать подходящее количество растворителя, такого как вода или этанол, глицерин, пропиленгликоль и т.п., и жидкий состав можно получать путем диспергирования или растворения ингредиентов в растворитель.

В качестве основы для состава геля (желеобразного состава) в качестве основы в форме гидрогеля можно использовать, например, карбоксивиниловый полимер, гелевую основу, безжировую мазь, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, натрий-полиакрилат, карбоксиметилцеллюлозу, крахмал, ксантановую смолу, камедь карайи, альгинат натрия, метилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы (HPMCP), ацетат фталат целлюлозы (CAP), карбоксиметилэтилцеллюлозу (CMEC), этилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксивиниловый полимер, трагакант, гуммиарабик, камедь тары, камедь семян тамаринда, камедь семян псилиума, агар, геллановую камедь, глюкоманнан, камедь бобов рожкового дерева, гуаровую камедь, каррагенан, декстрин, декстран, амилозу, калий-карбоксиметилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, кальций-карбоксиметилцеллюлозу, пуллулан, хитозан, натрий-карбоксиметилкрахмал, семенную оболочку подорожника, галактоманнан, Eudragit, казеин, алкиловый эфир альгиновой кислоты, желатин, полиэтиленгликоль и т.п. Эти основы можно растворять в растворителе для получения состава геля, обладающего текучестью, или состава геля, обладающего пластичностью. Растворителем предпочтительно является вода, в то время как также можно использовать глицерин или пропиленгликоль.

Примеры основы для состава крема включают основы типа вода/масло, такие как гидрофильная мазь, быстровпитывающийся крем и т.п.; и основы типа масло/вода, такие как гидрофильный вазелин, очищенный ланолин, Aquahole, Eucerin, Neocerin, водный ланолин, кольдкрем, гидрофильный Plastibase и т.п. Эти основы можно помещать в жировой или масляный растворитель или воду, и перемешивать с помощью гомогенизатора и т.п. с высокой скоростью для получения состава крема.

Примеры основы для состава пленки включают поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, натрий-полиакрилат, карбоксиметилцеллюлозу, крахмал, ксантановую смолу, камедь карайи, альгинат натрия, метилцеллюлозу, карбоксивиниловый полимер, агар, гидроксипропилцеллюлозу, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы (HPMCP), ацетат фталат целлюлозы (CAP), карбоксиметилэтилцеллюлозу (CMEC), этилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксивиниловый полимер, трагакант, гуммиарабик, камедь бобов рожкового дерева, гуаровую камедь, каррагенан, декстрин, декстран, амилозу, калий-карбоксиметилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, кальций-карбоксиметилцеллюлозу, пуллулан, хитозан, натрий карбоксиметилкрахмал, семенную оболочку подорожника, галактоманнан, сополимер аминоалкилметакрилата E, сополимер аминоалкилметакрилата RS, сополимер метакриловой кислоты L, сополимер метакриловой кислоты LD, сополимер метакриловой кислоты S, сополимер метилакрилат/метакриловая кислота/метилметакрилат, сополимер этилакрилат/метилметакрилат, поливинилацеталь диэтиламиноацетат, казеин, алкиловый эфир альгиновой кислоты и т.п. Эти основы можно растворять в воде или полярном органическом растворителе, таком как этанол, и после покрытия пленкой, сушить с получением состава пленки. В одном предпочтительном аспекте вакцинная композиция для мукозального введения по настоящему изобретению находится в форме состава пленки.

Например, порошковый состав, состав мелких гранул, состав гранул или состав таблетки может быть изготовлен с использованием добавок, таких как эксципиенты (например, лактоза, кукурузный крахмал, кристаллическая целлюлоза, и т.д.), связующие вещества (например, гидроксипропилцеллюлоза, гуммиарабик и т.д.), и подходящее количество растворителя (например, вода, этанол, и т.д.), путем смешения ингредиентов взбалтыванием, и с последующими стадиями гранулирования, сушки, прессования и т.п. Если необходимо, можно использовать смазывающее вещество, такое как стеарат магния, и покровное вещество, такое как гидроксипропилцеллюлоза, сахароза и т.п.

Примеры основы для таблетки, растворяющейся в полости рта (лиофилизированный тип) включают полисахариды, такие как желатин и пуллулан. Кроме того, в качестве формующего агента можно использовать маннит, трегалозу, сорбит, глицин и т.п. Эти добавки можно растворять в воде, распределять и лиофилизировать с получением таблетки, растворяющейся в полости рта (лиофилизированный тип). В одном предпочтительном аспекте вакцинная композиция для мукозального введения по настоящему изобретению находится в форме таблетки, растворяющейся в полости рта.

Например, состав аэрозоля включает, в качестве его компонентов, жидкий состав, состав геля, обладающий высокой текучестью, состав крема, мелкие частицы, такие как порошки и т.п. С использованием устройства для распыления для диспергирования компонентов в качестве мелких частиц твердого вещества или жидкости в газе, состав аэрозоля можно эффективно вводить в область введения, такую как слизистая оболочка полости рта, слизистая оболочка носа и т.п.

Количество пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 и активатора индукции клеточного иммунитета в композиции по настоящему изобретению конкретно не ограничено. В одном аспекте композиция по настоящему изобретению содержит пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1, предпочтительно в количестве от 0,01 до 40% по массе, более предпочтительно от 0,1 до 30% по массе, исходя из общей массы композиции. В одном аспекте композиция по настоящему изобретению содержит активатор индукции клеточного иммунитета, предпочтительно в количестве от 0,001 до 30% по массе, более предпочтительно от 0,01 до 20% по массе, исходя из общей массы композиции.

Кроме того, композиция по настоящему изобретению может содержать добавку, если необходимо. Добавку выбирают, например, из обеспечивающих изотоничность веществ, антисептиков/гермицидов, антиоксидантов, растворителей, солюбилизаторов, суспендирующих веществ, наполнителей, корректирующих pH веществ, стабилизаторов, ускорителей всасывания, средств, контролирующих скорость высвобождения, красителей, пластификаторов, адгезивов и т.п., или комбинации двух или более из них, в зависимости от совместимости с основным ингредиентом основы, пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1, и активатора индукции клеточного иммунитета, предполагаемого режима введения и т.п.

Терапевтически эффективное количество пептида WT1 и/или модифицированного пептида WT1 может широко варьировать, в зависимости от тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья индивидуума и других известных факторов. Как правило, удовлетворительного результата можно достигнуть при суточной дозе приблизительно от 0,1 мкг до 1 г/кг массы тела. Активатор индукции клеточного иммунитета вводят одновременно с пептидом WT1 и/или модифицированным пептидом WT1 или последовательно, и предпочтительно его вводят одновременно с пептидом. Эффективное количество активатора индукции клеточного иммунитета может широко варьировать, в зависимости от типа активатора индукции клеточного иммунитета, подлежащего применению, наличия или отсутствия другого активатора индукции клеточного иммунитета и т.п., и удовлетворительного результата достигают при суточной дозе приблизительно от 0,01 мкг до 1 г/кг массы тела. Суточную дозу можно вводить в единичной дозе или несколькими разделенными частями в несколько моментов времени, как например, два раза или более, например, два, три, четыре или пять раз. Интервал между введениями выбирают соответствующим образом, например, из одного раза в сутки, одного раза в 3 суток, одного раза в неделю, одного раза в 2 недели, одного раза в месяц, одного раза в 3 месяца, одного раза в 6 месяцев, одного раза в год, и более длительного интервала, в зависимости от состояния пациента, тяжести злокачественной опухоли, терапевтической или профилактической цели и т.п. Как правило, для лечения пациента, фактически имеющего злокачественную опухоль, пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 вводят с более высокой частотой и в более высокой дозе, в то время как для профилактической цели для пациента, не имеющего злокачественной опухоли, пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 вводят с более низкой частотой и в более низкой дозе.

Настоящее изобретение поясняется более подробно и конкретно ниже с помощью примеров, однако настоящее изобретение не ограничивается примерами.

ПРИМЕРЫ

Сублингвальный жидкий состав

Получали жидкий состав, имеющий ингредиенты, представленные ниже в таблице 1. В частности, пептид Db126 (соль уксусной кислоты), активатор индукции клеточного иммунитета, и необязательно фармакологически приемлемую кислоту, которые отвешивали в количествах, прямо представленных в таблице 1, смешивали с 4 частями по массе добавки (DMSO) и основы (солевой раствор) всего до 100 частей по массе, и материалы смешивали с получением сублингвального жидкого состава.

Используемые пептид Db126 (соль уксусной кислоты) и пептид-25 химически синтезировали и очищали с помощью ВЭЖХ. Имиквимод приобретали от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. Циклический ди-GMP (c-di-GMP) и циклический ди-AMP (c-di-AMP) приобретали от Biolog Life Science Institute. Использовали Pam₃CSK₄, изготавливаемый InvivoGen, Zymosan, изготавливаемый Nacalai Tesque, Inc., поли(I:C), изготавливаемый InvivoGen, происходящий из бактерий Pantoea липополисахарид, изготавливаемый MACROPHI Inc., глюкопиранозиллипид, изготавливаемый InvivoGen (MPLA), резиквимод (R848) и ODN1826, изготавливаемый InvivoGen, пидотимод, изготавливаемый Santa Cruz Biotechnology, Inc., бестатин, изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., левамизол гидрохлорид, изготавливаемый MP Biomedicals, пептидогликан, Pam₂CSK₄и флагеллин, изготавливаемые InvivoGen, TLR7-II, изготавливаемый CALBIOCHEM, соответственно.

Использовали следующие материалы.

Имиквимод: изготавливаемый Tokyo Chemical Industry Co., Ltd., клофибрат: изготавливаемый LKT Laboratories, Inc., кверцетин: изготавливаемый Cayman Chemical Company, ресвератрол (ресвератрол (синтетический)): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., носкапин: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 3,3'-дииндолилметан: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., ксантон: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., партенолид: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., этодолак: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., локсопрофен (локсопрофен Na): изготавливаемый Yoshindo Inc., диклофенак (диклофенак натрий): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., кетопрофен: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., целекоксиб: изготавливаемый TOCRIS bioscience, докозагексаеновая кислота: изготавливаемая Cayman Chemical Company, 2',5'-дидезоксиаденозин: изготавливаемый BIOMOL International, SCH23390: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., ротиготин: изготавливаемый STARNASCENS, GW627368X: изготавливаемый Cayman Chemical Company, сулпростон: изготавливаемый Cayman Chemical Company, клопростенол: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., BWA868C: изготавливаемый Cayman Chemical Company, RO1138452: изготавливаемый Cayman Chemical Company, лейкотриен B4: изготавливаемый Cayman Chemical Company, монтелукаст (монтелукаст натрий): изготавливаемый LG Life Sciences, зилеутон: изготавливаемый Toronto Research Chemicals, Inc., глицирризиновая кислота (дикалий глицирризинат): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., пирфенидон: изготавливаемый TOCRIS bioscience, дифенгидрамин (дифенгидрамин гидрохлорид): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., фамотидин: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., проксифан: изготавливаемый TOCRIS bioscience, азеластин (азеластин гидрохлорид): изготавливаемый LKT Laboratories, Inc., 4-метилгистамин: изготавливаемый TOCRIS bioscience, оланзапин: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., золмитриптан: изготавливаемый Cipla, толваптан: изготавливаемый Sigma-Aldrich, десмопрессин: изготавливаемый Sigma-Aldrich, пилокарпин (пилокарпин гидрохлорид): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., тамсулозин (тамсулозин гидрохлорид): изготавливаемый Cipla, пропранолол (пропранолол гидрохлорид): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., ксилазин: изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., новокинин: изготавливаемый Sigma-Aldrich, баклофен: изготавливаемый Tokyo Chemical Industry Co., Ltd., TRAP-6: изготавливаемый Bachem, аденозин дифосфат: изготавливаемый MP Biomedicals, соматостатин-14: изготавливаемый Bachem, GW405833: изготавливаемый Sigma-Aldrich, SEW2871: изготавливаемый Cayman Chemical Company, тримебутин (тримебутин малеат): изготавливаемый Tokyo Chemical Industry Co., Ltd., лоперамид (лоперамид гидрохлорид): изготавливаемый Wako Pure Chemical Industries, Ltd., мелатонин: изготавливаемый LKT Laboratories, Inc., L-AP4 (L-2-амино-4-фосфономасляная кислота): изготавливаемая Wako Pure Chemical Industries, Ltd., и суплатаст тозилат: изготавливаемый TOCRIS bioscience.

Состав пленки

Получали состав пленки, имеющий ингредиенты, представленные ниже в таблице 1. В частности, 46 частей по массе D-маннита (изготавливаемого Roquette), 2,6 части по массе полиэтиленгликоля 400 (изготавливаемого Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), и 150 частей по массе очищенной воды смешивали при ультразвуковом перемешивании. К смеси добавляли 41 часть по массе гидроксипропилцеллюлозы (Nippon Soda Co., Ltd., HPC-SSL), 10 частей по массе пептида Db126 (химически синтезированного и очищенного с помощью ВЭЖХ), 0,3 части по массе пептида-25 (химически синтезированного и очищенного с помощью ВЭЖХ), и 0,1 часть по массе активаторов индукции клеточного иммунитета, отличных от хелперного пептида, и материалы в достаточной степени смешивали путем взбалтывания. 1/100 количества (2,5 части по массе) раствора капельно добавляли на обеспечивающую высвобождение пленку, изготовленную из полиэтилена терефталата, и сушили воздухом и сушили при пониженном давлении с получением 1 части по массе состава пленки. В тесте с иммунизацией мышей, описанном ниже, один лист (10 мг) состава пленки вводили для каждой дозы на мышь. Используемые активаторы индукции клеточного иммунитета были доступны от того же поставщика, который описан выше для сублингвального жидкого состава.

Таблетка, растворяющаяся в полости рта

Получали таблетку, растворяющуюся в полости рта, имеющую ингредиенты, представленные ниже в таблице 1. В частности, 48,6 частей по массе D-маннита (изготавливаемого Roquette) и 41 часть по массе растворимого в воде рыбьего желатина добавляли к 400 частям по массе очищенной воды, и материалы растворяли при 35°C. К этой смеси добавляли 10 частей по массе пептида Db126 (химически синтезированный и очищенный с помощью ВЭЖХ), 0,3 части по массе пептида-25 (химически синтезированный и очищенный с помощью ВЭЖХ) и 0,1 часть по массе активаторов индукции клеточного иммунитета, отличных от хелперного пептида, и материалы в достаточной степени перемешивали путем взбалтывания. 1/100 количества (5 частей по массе) раствора капельно добавляли на алюминиевую фольгу и лиофилизировали с получением 1 части по массе таблетки, растворяющейся в полости рта. В тесте иммунизации мышей, описанном ниже, одну таблетку (10 мг) таблетки, растворяющейся в полости рта, вводили для каждой дозы на мышь. Используемые активаторы индукции клеточного иммунитета приобретали от тех же поставщиков, которые описаны выше для сублингвального жидкого состава.

Тест иммунизации мышей 1 (сублингвальное введение)

Тест иммунизации мышей проводили с использованием сублингвальных жидких составов, составов пленок и таблеток, растворяющихся в полости рта, как описано выше. Оценку уровня индукции иммунитета проводили способом ELISPOT. В частности, в случае однократного введения, после анестезии мыши вводили жидкий состав, состав пленки или таблетку, растворяющуюся в полости рта, в сублингвальный отдел и состав держали как есть в течение 2 минут, а затем мышь содержали в течение 6 суток. В случае введения два раза упомянутые выше действия повторяли через 6 суток после первого введения. Через 6 суток после последнего введения селезенку извлекали и уровень индукции антигенспецифического клеточного иммунитета оценивали способом ELISPOT, как описано ниже.

(Способ ELISPOT)

Из извлеченной селезенки получали суспензию клеток селезенки. Клетки селезенки (3×10⁶ клеток/лунка) и антигенный пептид (100 мкМ) вместе с культуральной средой помещали в лунку планшета ELISPOT, на которой было иммобилизовано антитело против IFN-γ мыши. Планшет культивировали в течение 20 часов в условиях 37°C и 5% CO₂. Способом ELISPOT оценивали количество точек, соответствующих клеткам, продуцирующим IFN-γ (количество точек/3×10⁶ клеток).

Результаты теста иммунизации представлены ниже в таблице 1 вместе с дозой и количеством введений. Каждая используемая мышь представляла собой генетически модифицированную мышь, которую можно использовать для оценки способности индуцировать клеточный иммунитет у пептида, рестриктированного по MHC типа HLA-A*0201. Для сравнения, результаты, полученные для инъецируемых составов, представлены в таблице 1 (сравнительные примеры 2-6).

Назальный жидкий состав

Получали жидкий состав, имеющий ингредиенты, представленные ниже в таблице 2. В частности, пептид Db126 (соль уксусной кислоты) и активатор индукции клеточного иммунитета, который отвешивали в количествах, прямо указанных в таблице 2, смешивали с 4 частями по массе добавки (DMSO) и основы (солевой раствор) всего до 100 частей по массе. Материалы смешивали с получением назального жидкого состава. Пептид Db126 и активатор индукции клеточного иммунитета были доступны от того же поставщика, который описан выше для сублингвального жидкого состава.

Тест иммунизации мышей 2 (назальное введение)

Тест иммунизации мышей проводили с использованием назального жидкого состава, полученного, как описано выше. Оценку уровня индукции иммунитета проводили способом ELISPOT. В частности, в случае однократного введения, под анестезией мыши вводили жидкий состав путем ингаляции через полость носа, а затем мышь содержали в течение 6 суток. В случае введения два раза упомянутые выше действия повторяли через 6 суток после первого введения. Через 6 суток после последнего введения селезенку извлекали и уровень индукции антигенспецифического клеточного иммунитета оценивали способом ELISPOT. Способ ELISPOT выполняли аналогично тому, как в тесте иммунизации мыши 1.

Результаты теста иммунизации представлены ниже в таблице 2 вместе с дозой и количеством введений. Каждая использованная мышь представляла собой генетически модифицированную мышь, которую можно использовать для оценки способности индуцировать клеточный иммунитет у пептида, рестриктированного по MHC типа HLA-A*0201. Для сравнения, результаты, полученные для инъецируемых составов, также представлены в таблице 2 (сравнительные примеры 2-6).

Внутрикожный инъецируемый состав

Получали внутрикожный инъецируемый состав, имеющий ингредиенты, представленные ниже в таблице 3. В частности, пептид Db126 (соль уксусной кислоты) и Монтанид ISA51VG (Freund Corporation) в качестве адъюванта, которые отвешивали в количествах, прямо указанных в таблице 3, смешивали с 0,5 части по массе добавки (DMSO) и основы (солевой раствор) всего до 100 частей по массе, и материалы смешивали с получением инъецируемого состава. Пептид Db126 был доступен от того же поставщика, который описан выше для сублингвального жидкого состава.

Тест иммунизации мыши 3 (внутрикожная инъекция)

Тест иммунизации мышей проводили с использованием внутрикожного инъецируемого состава, как описано выше. Оценку уровня индукции иммунитета проводили способом ELISPOT. В частности, 200 мкл инъецируемого состава внутрикожно вводили в спину мыши, а затем мышь содержали в течение 6 суток. Через 6 суток после введения селезенку извлекали и уровень индукции антигенспецифического клеточного иммунитета оценивали способом ELISPOT. Введение проводили один раз, и каждая используемая мышь представляла собой генетически модифицированную мышь, которую можно использовать для оценки способности индуцировать клеточный иммунитет у пептида, рестриктированного по MHC типа HLA-A*0201. Способ ELISPOT выполняли аналогично тесту иммунизации 1. Результаты теста иммунизации представлены ниже в таблице 3.

Вакцинную композицию против злокачественной опухоли для мукозального введения, содержащую пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1 и первый активатор индукции клеточного иммунитета, вводили сублингвальным (таблица 1) или назальным (таблица 2) путем, и оценивали эффективность первого активатора индукции клеточного иммунитета.

В результате, предпочтительным был активатор индукции клеточного иммунитета, выбранный из лиганда TLR, циклического динуклеотида, хелперного пептида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, ингибитора продукции TSLP, ингибитора аденилатциклазы, омега-3-жирной кислоты, агониста PPAR, антагониста дофаминовых рецепторов, агониста дофаминовых рецепторов, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста рецепторов вазопрессина, агониста рецепторов вазопрессина, антагониста мускариновых рецепторов, агониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов адреналина, агониста рецепторов ангиотензина, агониста рецепторов GABA, агониста рецепторов тромбина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов ADP, антагониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов лейкотриенов, агониста рецепторов мелатонина, агониста рецепторов соматостатина, агониста каннабиноидных рецепторов, агониста рецепторов сфингозин-1-фосфата, агониста метаботропных рецепторов глутамата, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора продукции TGF-бета, ингибитора Th2-цитокинов и комбинации двух или более их типов.

Предпочтительно, были эффективными первый активатор индукции клеточного иммунитета, выбранный из лиганда TLR, циклического динуклеотида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, ингибитора продукции TSLP, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, агониста PPAR, ингибитора продукции TGF-бета, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов мелатонина, агониста метаботропных рецепторов глутамата и комбинации двух или более их типов, а также комбинация хелперного пептида с первым активатором индукции клеточного иммунитета, отличным от хелперного пептида.

Что касается сублингвального введения, более предпочтительно, были эффективными первый активатор индукции клеточного иммунитета, выбранный из лиганда TLR4, лиганда TLR1/2, лиганда TLR2/6, лиганда TLR7 и/или TLR8, циклического динуклеотида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, ингибитора продукции TSLP, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, агониста PPAR, ингибитора продукции TGF-бета, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов мелатонина, агониста метаботропных рецепторов глутамата и комбинации двух или нескольких их типов, а также комбинация хелперного пептида с первым активатором индукции клеточного иммунитета, отличным от хелперного пептида.

Что касается назального введения, еще более предпочтительно, были эффективными первый активатор индукции клеточного иммунитета, выбранный из лиганда TLR4, лиганда TLR1/2, лиганда TLR2 и дектина 1, лиганда TLR3, лиганда TLR7 и/или TLR8, циклического динуклеотида, иммуномодулирующего низкомолекулярного лекарственного средства, ингибитора циклооксигеназы, ингибитора продукции TSLP, антагониста рецепторов простагландинов, агониста рецепторов простагландинов, агониста PPAR, ингибитора продукции TGF-бета, агониста гистаминовых рецепторов, антагониста гистаминовых рецепторов, агониста серотониновых рецепторов, антагониста серотониновых рецепторов, антагониста мускариновых рецепторов, антагониста рецепторов адреналина, агониста опиоидных рецепторов, агониста рецепторов мелатонина, агониста метаботропных рецепторов глутамата и комбинации двух или нескольких их типов, а также комбинация хелперного пептида с первым активатором индукции клеточного иммунитета, отличным от хелперного пептида.

Также было подтверждено, что индукция клеточного иммунитета ускоряется при добавлении фармакологически приемлемой кислоты или ее фармакологически приемлемой соли в качестве второго активатора индукции клеточного иммунитета.

С точки зрения безопасности, сублингвальное введение является более предпочтительным, чем назальное введение. Однако сильная индукция иммунитета также была подтверждена, когда использовали состав пленки или таблетки, растворяющейся в полости рта, которая является предпочтительной формой с точки зрения удобства и стабильности при хранении.

Как показано в таблицах 1 и 2, мукозальное введение вакцинной композиции против злокачественной опухоли, содержащей пептид WT1 и/или модифицированный пептид WT1, может индуцировать клеточный иммунный ответ, эквивалентный или более сильный, чем иммунный ответ, индуцируемый путем инъекции. В Current Opinion in Immunology 2008, 20: 211-220 описаны результаты клинических испытаний и подтверждено, что вакцина WT1 является пригодной в качестве вакцины против злокачественной опухоли при введении путем инъекции. Мукозальное введение вакцинной композиции по настоящему изобретению может индуцировать клеточный иммунный ответ, который является эквивалентным или более сильным, чем иммунный ответ, индуцируемый путем инъекции у мышей, и, таким образом, ожидается, что композиция по настоящему изобретению также может эффективно индуцировать клеточный иммунный ответ, сравнимый или более сильный, чем иммунный ответ, индуцируемый инъекцией. Композиция по изобретению пригодна в качестве вакцины против злокачественной опухоли.

Реферат

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к вакцинной композиции против злокачественной опухоли, сверхэкспрессирующей WT1, для мукозального введения для применения в индукции клеточного иммунитета. Вышеуказанная композиция содержит: терапевтически эффективное количество пептида Db126 и терапевтически эффективное количество первого активатора индукции клеточного иммунитета, представляющего собой лиганд TLR7, выбранный из TLR7-II и резиквимода. Изобретение позволяет эффективно индуцировать клеточный иммунитет против раковой опухоли. 5 з.п. ф-лы, 3 табл.

Формула