Применение олигомеров молочной кислоты в лечении гинекологических расстройств - RU2459620C2

Код документа: RU2459620C2

Чертежи

Показать все 18 чертежа(ей)

Описание

Область техники

В настоящем изобретении описано применение олигомеров молочной кислоты (OMLA) для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, таких как микробные или вирусные инфекции, особенно бактериальный вагиноз. Кроме того, олигомерные продукты по изобретению могут применяться в лечении или профилактике любого заболевания или состояния, где желательно кислое значение pH, составляющее ниже чем примерно 4 или 4,5, или олигомерные продукты по изобретению могут применяться в качестве вспомогательных веществ, высвобождающих кислоту в течение продолжительного периода времени с целью поддержания достаточно низкого значения pH в среде. Изобретение также относится к новым олигомерам молочной кислоты, а также - к новым олигомерным продуктам, содержащим определенные смеси определенных олигомеров молочной кислоты. Конкретно, настоящее изобретение относится к олигомерам молочной кислоты с размером в интервале от димера до додекамера и к их применению. Олигомеры обычно представлены в виде состава, например в форме устройства или набора.

Уровень техники

Инфекции гинекологического или репродуктивного тракта, как правило, относятся к трем различным типам инфекции, которые воздействуют на репродуктивный тракт. Эндогенные инфекции включают бактериальный вагиноз и кандидоз, которые возникают в результате разрастания организмов, которые обычно присутствуют во влагалище. Эндогенные инфекции представляют собой самую распространенную в мире форму инфекций нижнего отдела гинекологического тракта (LGTI), и их можно легко вылечить. Однако они часто появляются снова, что представляет собой главную проблему с медицинской точки зрения.

Ятрогенные инфекции представляют собой вторую группу, которая встречается, когда инфекционный агент (бактерия или другой микроорганизм) вводится в репродуктивный тракт через разнообразные пути, такие как менструальное регулирование, искусственный аборт, вставка ВМС, или в процессе родового акта. Наконец, инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), вызываются микроорганизмами, такими как вирусы, бактерии или паразитарные микроорганизмы, которые передаются в процессе половой активности от инфицированного партнера. Среди инфекций ИППП существует несколько серьезных заболеваний, таких как ВИЧ, хламидия трахоматис (chlamydia trachomatis), кондилома остроконечная (condyloma accuminata), сифилис и гонорея (Neisseria gonorrhea). ИППП могут воздействовать одновременно на мужчин и на женщин, но также может осуществляться их передача от матери к плоду во время беременности.

Бактриальный вагиноз (БВ) представляет собой наиболее частую эндогенную инфекцию, а также наиболее распространенное патологическое состояние женского полового тракта. БВ связан с повышенными осложнениями во время беременности, и может быть вовлечен в патогенез воспаления тазовых органов и опасность для женщин приобретения ВИЧ. Еще остается много вопросов относительно его этиологии, которая осложняет терапию рецидивирующих инфекций. БВ представляет собой разрастание бактерий и отсутствие нормальной флоры в виде молочнокислых бактерий, что приводит в результате к разбалансированию нормальной вагинальной флоры. Во время беременности БВ ассоциирован с неблагоприятным перинатальным исходом и является причиной преждевременных родов. Идентификация и лечение БВ может уменьшить опасность таких последствий. Был протестирован ряд возможных методов лечения с целью терапии или предотвращения рецидивов БВ.

Еще неизвестно, являются ли частые случаи БВ результатом повторного инфицирования или рецидивом. Ассоциация БВ с половым поведением предполагает, что БВ передается половым путем, и что дополнительные случаи могут возникать благодаря повторному инфицированию. Однако очевидные факты не поддерживают теорию половой передачи и повторного инфицирования, и в некоторых исследованиях, оценивающих опасные факторы для повторных случаев БВ, высказываются предположения о том, что повторные случаи БВ происходят благодаря рецидиву. Женщины с развитием раннего рецидива имеют тенденцию жаловаться на аномальные выделения в конце терапии. Кроме того, женщины, не обнаружившие симптомов заболевания, которые считают себя излечившимися после терапии, продолжают обладать аномальной вагинальной флорой. Кроме того, чем более серьезное проявление у ранней аномалии, то она обычно представляет собой рецидив.

Оценка бактериотерапии с использованием безвредных бактерий для замещения патогенных организмов остается неразрешенной.

Некоторые женщины сообщают о психополовых симптомах с отсутствием полового влечения и тревогой по поводу инфекции вследствие рецидивирующих случаев бактериального вагиноза и ассоциированного с ним запаха. Однако сопутствующее лечение партнера-мужчины не уменьшает степень рецидива БВ. Однако использование презерватива с половыми партнерами-мужчинами может помочь уменьшить опасность рецидива бактериального вагиноза. Использование гормональной контрацепции не увеличивает случаи возникновения бактериального вагиноза, тогда как женщины, использующие внутриматочное контрацептивное средство или систему in situ могут иметь повышенную опасность возникновения БВ.

Вагинальное выделение

Вагинальное выделение представляет собой распространенный присутствующий симптом, который может быть физиологическим или патологическим. В то время как БВ остается одним из самых распространенных диагнозов у женщин, посещающих гинекологические медицинские учреждения, вульвовагинальный кандидоз представляет собой другое распространенное инфекционное заболевание, вызывающее вагинальные выделения, которому подвержены примерно 75% женщин в какой-то момент во время их репродуктивного периода жизни. Приблизительно 50% случаев бактериального вагиноза протекает бессимптомно и истинное распространение этого патологического состояния среди населения является неопределенным. Молочнокислые бактерии, населяющие вагинальный эпителий, могут обладать ролью по защите против инфекции. Нормальная вагинальная флора (молочнокислые бактерии) поддерживает вагинальное pH в интервале 3,8-4,4. Качество и количество вагинальных выделений может изменяться у одной и той же женщины с течением времени. Существует широкая вариация вагинальных выделений, и каждая женщина имеет свое собственное ощущение нормального состояния и того, что является приемлемым или избыточным.

Главная проблема патогенных вагинальных выделений заключается в запахе. Этот запах имеет характеристики запаха гнилой рыбы, который характерен для бактериального вагиноза и вызван аминами, главным образом, триметиламином. Другие клинические проявления могут представлять собой избыточные выделения и ощущение несвежести.

Подробное описание изобретения

Как видно из вышеописанного, существует необходимость разработки составов, которые являются подходящими для применения в терапии гинекологических инфекций, главным образом бактериального вагиноза, и которые допускают менее частое введение по сравнению со схемами лечения, известными в настоящее время, которые требуют ежедневного введения или более частого введения, чем ежедневное.

С этой целью заявители настоящего изобретения обнаружили, что олигомеры молочной кислоты являются подходящими для такого применения. С другой стороны, олигомеры высвобождают молочную кислоту, как только они контактируют с водной средой, и, с другой стороны, олигомеры служат в качестве депо молочной кислоты, т.е. не вся молочная кислота высвобождается немедленно; высвобождение молочной кислоты зависит от соответствующего олигомера.

В главном аспекте в настоящем изобретении предлагается применение одного или нескольких олигомеров молочной кислоты для получения состава, предназначенного для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций.

В других аспектах один или несколько олигомеров молочной кислоты могут применяться в лечении или профилактике любых патологических состояний, на которые благоприятно воздействует низкое значение pH, например, в пораженной среде. Таким образом, OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально, могут применяться в профилактическом лечении заболеваний или расстройств, воздействующих на кожу или слизистую оболочку. Препарат, содержащий OMLA, в комбинации с лактатом или индивидуально могут также применяться в качестве вспомогательного вещества для различных местных и мукозальных препаратов, предназначенных для медицинского, стоматологического или ветеринарного использования. В дополнении к этому, OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально могут применяться в качестве ингредиента в продуктах, предназначенных для косметического или лечебнокосметического использования.

Примеры перорального мукозального применения, где подходящие препараты имеют значение с медицинской точки зрения, представляют собой, например, афты (афтозный стоматит), или другие типы пероральных мукозальных повреждений, возникших благодаря бактериальным инфекциям, вирусным инфекциям, грибковым инфекциям или по другим медицинским причинам, подобно, например, лейкоплакии или "Синдрому Горящего Рта". Кроме того, OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально также могут применяться в лечении или препаратах, замещающих слюну.

Ректальные препараты OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально могут применяться при заболеваниях или расстройствах, таких как геморрой, анальная трещина, зуд заднего прохода или проктит.

В области дерматологии существует несколько областей, где кожные препараты или применения OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально, добавленные к известным зарегистрированным или применяемым фармацевтическим агентам или ингредиентам, могут иметь полезное использование. Примеры таких кожных заболеваний или расстройств представляют собой; раны, экзему, атопический дерматит, псориаз, угри, розовые угри, крапивницу, зуд, легкий дерматоз, гипергидроз, алопецию, а также бактериальные инфекции, вирусные инфекции, грибковые инфекции и эктопаразитарные инфекции.

В стоматологической практике OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально могут применяться в качестве ингредиента или вспомогательного вещества в зубной пасте, а также в качестве комбинированного лечения или ингредиента, или вспомогательного вещества, предназначенных для лечения или профилактики кариеса и/или пародонтита и галитоза.

Дополнительное применение OMLA в комбинации с лактатом или индивидуально может иметь место в гастроэнтерологии, где полезные эффекты могут наблюдаться в кислотозависимых расстройствах, таких как ахилия.

В другом главном аспекте, настоящее изобретение относится к новым олигомерам молочной кислоты. Соответственно, в настоящем изобретении предлагается олигомер молочной кислоты следующей формулы I

где n представляет собой целое число от 2 до 25, такое как, например, от 2 до 20, от 3 до 25, от 3 до 20, от 2 до 15, от 3 до 15, от 2 до 10, от 3 до 10, от 4 до 10, или от 4 до 9. В определенных воплощениях n может быть выше в зависимости от применения и периода времени, необходимого для высвобождения молочной кислоты. Соответственно, в тех случаях, где желательно очень продолжительное время высвобождения молочной кислоты, n может представлять собой число до 50, такое как, например, от 20 до 50, от 20 до 30, от 30 до 40 или от 40 до 50 (более низкий интервал, дающий период высвобождения, который ниже, чем более высокий интервал). Новые олигомеры молочной кислоты, по существу, в чистой форме (т.e. определенный олигомер присутствует в концентрации, составляющей 90% или более) не охватывают тетрамер молочной кислоты, произведенный, как описано ниже: к раствору сложного трет-бутилового эфира тетрамера молочной кислоты (0,6982 г) (1,9268 миллимоль) в метиленхлориде (25 мл) по каплям добавляли смешанный раствор трифторуксусной кислоты (2,5 мл) и метиленхлорида (2,5 мл), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа по окончании добавления по каплям; насыщенный раствор гидрокарбоната натрия (30 мл) добавляли для регулирования значения pH водного слоя до pH 8, и затем добавляли туда насыщенный хлорид аммония (50 мл) для регулирования значения pH водного слоя до pH 6; полученную в результате смесь экстрагировали три раза с помощью диэтилового эфира (100 мл); экстрагированный раствор содержал почти все примеси и небольшое количество вещества, представляющего интерес; к оставшемуся водному слою добавляли по каплям 1 н. хлорводородную кислоту (5 мл), охлажденную до 0°C, так чтобы урегулировать значение pH водного слоя до pH 2-3; слой экстрагировали три раза с помощью метиленхлорида (150 мл); в это время изменяли pH и, таким образом, 1 н. хлорводородную кислоту, охлажденную до 0°C, использовали для поддержания значения pH водного слоя, составляющего pH 2-3; полученную в результате смесь сушили на безводном сульфате магния в течение дня и ночи, концентрировали и выделяли с помощью колоночной хроматографии (проявляющий растворитель : гексан : диэтиловый эфир = 1:4) с получением тетрамера молочной кислоты (0,2047 г) (выход:34,7%) в виде бесцветного масла.

Как упомянуто выше, настоящее изобретение относится к новым олигомерам молочной кислоты. Такие соединения обычно трудно получить в виде 100%-чистых соединений, но обычно они содержат смесь основного олигомера вместе с олигомерами молочной кислоты с различной степенью олигомеризации в зависимости от условий синтеза. Таким образом, в контексте настоящего изобретения, термин "новый олигомер молочной кислоты" предназначен для обозначения олигомера с определенной степенью олигомеризации, где концентрация этого определенного олигомера составляет, по меньшей мере, примерено, 90% масс./масс. Однако настоящее изобретение также относится к новым олигомерным продуктам, содержащим смесь олигомеров молочной кислоты. Такие смеси обычно получают с помощью процесса синтеза и, как видно из раздела представленных здесь Примеров, они содержат один или несколько основных олигомеров вместе с рядом олигомеров меньшего и большего размеров. В олигомерных продуктах, полученных в отсутствии какой-либо стадии очистки для удаления олигомеров большей или меньшей молекулярной массы, чем у основного продукта, основные олигомеры обычно присутствуют в концентрации, составляющей, по меньшей мере, примерно 4% масс./масс. Как можно видеть из раздела представленных здесь Примеров, чем большее средневесовая молекулярная масса, тем шире распределение молекулярной массы полученного продукта. Таким образом, в тех случаях, когда средневесовая молекулярная масса составляет примерно от 400 примерно до 700, то основной олигомер(ы) индивидуально присутствует(ют) в концентрации, составляющей по меньшей мере примерно 10% масс./масс. (интервал 10-25%), тогда как когда средневесовая молекулярная масса продукта увеличивается до интервала, составляющего примерно от 700 примерно до 1000, то основной олигомер(ы) индивидуально присутствует(ют) в концентрации, составляющей по меньшей мере примерно 7% масс./масс. (интервал 7-12%), и когда средневесовая молекулярная масса продукта увеличивается до интервала, составляющего примерно от 1000 примерно до 1700, то основной олигомер(ы) индивидуально присутствует(ют) в концентрации, составляющей по меньшей мере примерно 4,4% масс./масс. (интервал 4,4-7).

Кроме того, как видно из раздела представленных здесь Примеров, в тех случаях, когда средневесовая молекулярная масса составляет примерно от 400 примерно до 700, концентрация основных олигомеров (HL₂-HL₅ или HL₃-HL₅, где HL₂ представляет собой димер, HL₃ представляет собой триммер и т.д.) составляет, по меньшей мере, примерно 30% (в определенных примерах интервал составляет примерно от 30 примерно до 65%). Для олигомерных продуктов со средневесовой молекулярной массой в интервале примерно от 700 примерно до 1000, концентрация основных олигомеров (HL₂-HL₈ или HL₃-HL₇) составляет, по меньшей мере, примерно 35% (в определенных примерах интервал составляет примерно от 35 примерно до 65%).

Как упоминается выше, могут быть получены разнообразные олигомерные продукты, содержащие различные смеси индивидуальных олигомеров. Выбор определенного олигомерного продукта зависит от его назначения. Как демонстрируется в разделе представленных здесь Примеров, высвобождение молочной кислоты из олигомерных продуктов зависит от олигомеризации молочной кислоты. Таким образом, олигомерный продукт, имеющий средневесовую молекулярную массу со значением в нижнем пределе, имеет тенденцию к более быстрому высвобождению молочной кислоты, чем олигомерный продукт, имеющий большую молекулярную массу. Соответственно, если требуется быстрое проявление действия, то выбирают олигомерный продукт, имеющий средневесовую молекулярную массу, соответствующую интервалу HL₃-HL₆. Кроме того, из раздела представленных здесь Примеров, видно, что такая композиция может приводить к получению эффекта продолжительностью, по меньшей мере, примерно 8 часов (на основе экспериментов in vitro, смотри Фиг.1, низкое значение pH может поддерживаться в течение 1-2 дней). Если желательно более продолжительное высвобождение молочной кислоты, то выбирают олигомерный продукт большей средневесовой молекулярной массы, такой как, например, олигомерный продукт, имеющий средневесовую молекулярную массу, соответствующую интервалу HL₆-HL₁₂ или HL₆-HL₁₀ (среднее высвобождение - продолжительность in vitro в течение, по меньшей мере, примерно 48 часов), или HL₁₀-HL₂₅ для еще более медленного высвобождения. Как видно из раздела представленных здесь Примеров, преимущество использования олигомерных продуктов, которые имеют определенное распределение молекулярной массы, состоит в том, что возможно получать одновременно быстрое проявление действия (благодаря содержанию коротких олигомеров) и более продолжительное проявление действия (благодаря содержанию олигомеров с большей молекулярной массой).

Соответственно, в определенных воплощениях настоящее изобретение относится к олигомерным продуктам, имеющим следующие композиции:

i) олигомерный продукт, где общая концентрация HL₂-HL₅ составляет, по меньшей мере, примерно 50% масс./масс., такая концентрация, как по меньшей мере, примерно 60% масс./масс. В предпочтительном воплощении концентрация находится в интервале, составляющем примерно от 60% масс./масс. примерно до 70% масс./масс., и средневесовая молекулярная масса находится в интервале, составляющем примерно от 350 примерно до 500. Благодаря содержанию относительно коротких олигомеров с относительно высокой концентрацией, такой продукт обладает быстрым проявлением действия и относительно короткой продолжительностью действия (8-12 часов или более, но предположительно не более, чем пара дней)

ii) олигомерный продукт, где общая концентрация HL₂-HL₅ составляет, по меньшей мере, примерно 40% масс./масс. В предпочтительном воплощении концентрация находится в интервале, составляющем примерно от 40% масс./масс. примерно до 50% масс./масс., и средневесовая молекулярная масса находится в интервале, составляющем примерно от 450 примерно до 600. Благодаря содержанию относительно коротких олигомеров, такой продукт обладает быстрым проявлением действия, и благодаря его содержанию олигомеров с большей молекулярной массой, он имеет короткую-среднюю продолжительность действия (1-2 дня или более, но предположительно, не более чем 4-6 дней).

iii) олигомерный продукт, где общая концентрация HL₂-HL₅ составляет, по меньшей мере, примерно 30% масс./масс. В предпочтительном воплощении концентрация находится в интервале, составляющем примерно от 30% масс./масс. примерно до 40% масс./масс., и средневесовая молекулярная масса находится в интервале, составляющем примерно от 500 примерно до 750. Благодаря содержанию относительно коротких олигомеров, такой продукт обладает быстрым проявлением действия, и благодаря его содержанию олигомеров с большей молекулярной массой, он имеет среднюю продолжительность действия (2 дня или более, но предположительно, не более чем 1 неделя).

iv) олигомерный продукт, где общая концентрация HL₃ - HL₈ составляет, по меньшей мере, примерно 35% масс./масс. В предпочтительном воплощении концентрация находится в интервале, составляющем примерно от 35% масс./масс. примерно до 65% масс./масс., и средневесовая молекулярная масса находится в интервале, составляющем от 700 примерно до 1000. Благодаря содержанию относительно коротких олигомеров (хотя и в более низкой концентрации, чем в продуктах i)-iii), описанных выше, ожидается, что такой продукт обладает немедленным проявлением действия, и благодаря его содержанию олигомеров с большей молекулярной массой, он имеет более длительную продолжительность действия (более чем 2 дня).

Все олигомерные продукты i)-iv), упомянутые выше, обладают определенным распределением молекулярной массы в целях допущения одновременно быстрого проявления действия (т.e. в течение первых часов после применения) и более продолжительного действия. Соответственно, коэффициент полидисперсности таких продуктов (обсуждаемых ниже) обычно составляет примерно от 1,2 примерно до 1,5 или примерно от 1,3 примерно до 1,4.

Другие определенные воплощения упоминаются в разделе представленных здесь Примеров.

Более узкое распределение молекулярной массы может быть получено путем воздействия на полученные олигомерные продукты процесса очистки, такого как, например, гель-фильтрация. Соответственно, настоящее изобретение также относится к таким продуктам, где основной олигомер присутствует в концентрации, составляющей 15% масс./масс. или более, такой как, например, 20% масс./масс. или более, 25% масс./масс. или более, или где концентрация основных олигомеров (т.e. общая концентрация индивидуальных основных олигомеров) составляет 45% масс./масс. или более, такая как, например 60% масс./масс. или более, или 75% масс./масс. или более. Такие относительно чистые олигомерные продукты также могут использоваться в комбинации с получением целевого высвобождения молочной кислоты, как обсуждалось выше.

В следующем основном аспекте настоящее изобретение относится к составу, содержащему один или несколько олигомеров молочной кислоты (а именно новый олигомерный продукт) и одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

В следующем основном аспекте настоящее изобретение относится к устройству доставки терапевтически эффективного количества состава, предназначенного для профилактики и/или лечения гинекологической инфекции.

В следующем основном аспекте настоящее изобретение относится к набору, предназначенному для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, который включает, по меньшей мере, первый и второй компонент, где первый компонент включает состав, и второй компонент включает инструкции по использованию состава.

В следующем основном аспекте настоящее изобретение относится к упаковке или контейнеру для хранения набора.

Еще в одном основном аспекте настоящее изобретение относится к способу профилактики и/или лечения гинекологической инфекции, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или нескольких олигомеров молочной кислоты, необязательно в виде состава.

В одном аспекте в изобретении предлагается состав одного или нескольких олигомеров молочной кислоты, которая обладает свойствами повышения кислотности в течение продолжительного периода времени.

Бактериальный вагиноз; его предпосылки и эпидемиология

БВ характеризуется запахом вагинальных выделений, вагинальным pH более чем 4,5, положительным тестом на амины и бледными гомогенными белыми выделениями, и присутствием ключевых клеток, которые обнаруживаются с использованием микроскопии, и изредка вагинальным жжением или зудом.

Вагинальная флора отличается от обычных молочнокислых бактерий (LB), с доминированием флоры с пониженным содержанием LB и разрастанием Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis и анаэробных бактерий, таких как стрептококки, вида Prevotella и вида Mobiluncus.

Бактериальный вагиноз обычно диагностируют с помощью критериев Амселя (Amsel), если присутствуют 3 из 4 следующих критериев: 1) вагинальное pH выше чем 4,5, 2) присутствие ключевых клеток (вагинальных эпителиальных) в вагинальной жидкости, 3) бледно-серыми или белыми гомогенными выделениями, 4) или положительный KOH-тест "whiff'-тест (высвобождение запаха рыбы при добавлении 10%-гидроксида калия к вагинальной жидкости).

Было показано, что некоторые предрасполагающие факторы увеличивают опасность возникновения БВ, такие как более молодой возраст, расовая принадлежность к негроидам, спринцевание, курение и ВМС-контрацепция. Некоторые сообщения связывали БВ с половым поведением, с частой сменой партнера, а также с наличием многочисленных партнеров.

Изобретение будет дополнительно описано настоящим и проиллюстрировано с помощью ссылки на следующие примеры, которые были тщательно подобраны с целью охватить изобретение. Соответственно, они не должны рассматриваться, как какие-либо ограничения изобретения.

Определения

Что касается вещества как такового, термины "олигомер молочной кислоты" и "OMLA" используются как синонимы и предназначаются для обозначения одного или нескольких олигомеров молочной кислоты формулы I, где n представляет собой целое число от 2 до 20, такое как, например, от 3 до 20, от 2 до 15, от 3 до 15, от 2 до 10, от 3 до 10, от 4 до 10 или от 4 до 9. Новые олигомеры молочной кислоты не охватывают тетрамер молочной кислоты, произведенный, как описано ниже: к раствору сложного эфира тетрамера молочной кислоты (0,6982 г) (1,9268 миллимоль) в метиленхлориде (25 мл) по каплям добавляли смешанный раствор трифторуксусной кислоты (2,5 мл) и метиленхлорида (2,5 мл), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа по окончании добавления по каплям; насыщенный раствор раствора гидрокарбоната натрия (30 мл) добавляли для регулирования значения pH водного слоя до pH 8, затем добавляли насыщенный хлорид аммония (50 мл) для регулирования значения pH водного слоя до pH 6; полученную в результате смесь экстрагировали три раза с помощью диэтилового эфира (100 мл); экстрагированный раствор содержал почти все примеси и небольшое количество вещества, представляющего интерес; к оставшемуся водному слою добавляли по каплям 1 н. хлорводородную кислоту (5 мл), охлажденную до 0°C, так чтобы урегулировать значение pH водного слоя до pH 2-3; слой экстрагировали три раза с помощью метиленхлорида (150 мл); в это время изменяли pH и, таким образом, 1 н. хлорводородную кислоту, охлажденную до 0°C, использовали для поддержания значения pH водного слоя, составляющего pH 2-3; полученную в результате смесь сушили на безводном сульфате магния в течение дня и ночи, концентрировали и выделяли с помощью колоночной хроматографии (проявляющий растворитель : гексан : диэтиловый эфир = 1:4) с получением тетрамера молочной кислоты (0,2047 г) (выход: 34,7%) в виде бесцветного масла.

Однако, что касается использования олигомеров молочной кислоты, то предполагается, что небольшие структурные вариации олигомеров не влияют на их способность к высвобождению молочной кислоты. Соответственно, предполагается, что производные олигомеров, где концевая карбоновая кислота и/или гидроксильная группа была модифицирована, например, до получения сложного эфира, амида, сложного тиоэфира (для карбоновой кислоты) или простого эфира (для гидроксильной группы) являются подходящими для применения согласно изобретению. Соответственно, производные олигомеров молочной кислоты следующей формулы II

где n представляет собой целое число, определенное здесь ранее для формулы (I), и R представляет собой H, R¹R²N-, R¹O-, или R¹S-, и R¹, R² и R³ представляют собой одинаковые или различные группы и выбраны из H, алкила C₁-C₆, включающего метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, или арила, включающего бензил, и их фармацевтически приемлемые соли, и X представляет собой H или алкил, включающий метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, или ацил, -OCR⁴, где R⁴ выбран из H, алкила C₁-C₆, включающего метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, или арила, включающего бензил, и их фармацевтически приемлемые соли, при условии, что R не является OH, когда X является H, также могут использоваться для олигомеров молочной кислоты формулы (I) или в олигомерных продуктах молочной кислоты, как описано здесь.

Термин "противомикробный" предназначен для обозначения эффекта, который нарушает или ингибирует рост микробов, таких как бактерии (например, стрептококк группы B), грибки, вирусы или паразиты. Термин "противобактериальный" предназначен для обозначения эффекта, который нарушает или ингибирует рост бактерий. Термин "противогрибковый" предназначен для обозначения эффекта, который нарушает или ингибирует рост грибков. Термин "противовирусный" предназначен для обозначения эффекта, который нарушает или ингибирует способность вируса реплицироваться и, следовательно, его способность к размножению, репродукции или росту.

Термин "средневесовая молекулярная масса" или "Mw" предназначен для описания молекулярной массы полимера. Средневесовая молекулярная масса рассчитывается следующим образом: M_w=Σ_i(N_iM_i²)/Σ_i(N_iM_i), где N_i представляет собой количество молекул с молекулярной массой M_i. Наглядно, если средневесовая молекулярная масса представляет собой w, и вы берете случайный мономер, то полимер, к которому он принадлежит, будет иметь массу, составляющую в среднем w. Средневесовая молекулярная масса может определяться, например, с помощью масс-спектрометрии, ЯМР-спектроскопии, светового рассеяния, малоуглового рассеяния нейтронов (SANS), рентгеновского рассеяния и с помощью скорости седиментации.

Термин "среднечисленная молекулярная масса" или "M_n" предназначен для определения молекулярной массы полимера. Среднечисленная молекулярная масса представляет собой общее усредненное среднее значение молекулярных масс индивидуальных полимеров. Оно определяется с помощью измерения молекулярной массы полимерных молекул в количестве n, путем суммирования значений масс, и деления на n: M_n=Σ_i(N_iM_i)/Σ_i(N_i), где N_i представляет собой количество молекул с молекулярной массой M_i. Среднечисленная молекулярная масса полимера может определяться с помощью, например, масс-спектрометрии, ЯМР-спектроскопии, осмометрии давления паров, титрования концевой группы и коллигативных свойств.

Термин "коэффициент полидисперсности" предназначен для обозначения меры распределения молекулярных масс в образце полимера, которая определяется как соотношение средневесовой молекулярной массы к среднечисленной молекулярной массе полимера.

Термин "олигомерный продукт" предназначен для обозначения продукта, содержащего два или несколько олигомеров молочной кислоты, т.е. смесь олигомеров с различной степенью олигомеризации. Как видно из описания и примеров, представленных здесь, олигомерные продукты обычно получают с помощью использования метода синтеза, и коэффициент полидисперсности используется в качестве меры того, насколько широким или узким является распределение молекулярной массы. Как объяснено здесь, обычным является преимущество присутствия в продукте олигомеров с различной молекулярной массой, поскольку это вызывает быстрое высвобождение молочной кислоты из олигомеров с низкой молекулярной массой и более длительное или продолжительное высвобождение из полимеров с более высокой молекулярной массой. Таким образом, возможно создание олигомерного продукта с целевым профилем высвобождения.

Термин "состав" предназначен для обозначения композиции, содержащей один или несколько OMLA вместе со вспомогательными веществами в количестве одного или нескольких, или такой композиции, которая может применяться для местного применения на коже или слизистой оболочке. Состав согласно изобретению может быть представлен в любой подходящей форме, особенно для введения во влагалище, включая вагинальное введение. Термин "состав" также используется для препарата, который не содержит каких-либо добавленных вспомогательных веществ, за исключением OMLA, но приготовлен в соответствии с требованиями по применению для слизистой оболочки.

Термин "антиадгезионный агент" предназначен для обозначения любого агента, который уменьшает адгезионную способность гинекологических патогенных микробных организмов или вирусов, и в особенности агентов, которые вызывают отлипание таких организмов, как вирус.

Термин "адгезионная способность" предназначен для обозначения эффекта, который обеспечивает или стимулирует адгезию или "способность прилипания" к поверхности, такой как слизистая оболочка. Для обозначения адгезии на слизистой оболочке также может использоваться термин "мукоадгезионная способность".

Термин "пессарий" предназначен для обозначения лекарственного средства, которое вводится во влагалище, где активные ингредиенты высвобождаются, абсорбируются и действуют на слизистую оболочку; и термин "вагинальный суппозиторий" используется в качестве его синонима.

Олигомеры молочной кислоты

В одном воплощении, имеющем отношение к олигомерам молочной кислоты как к таковым, изобретение содержит один или несколько олигомеров молочной кислоты как таковых, изобретение содержит один или несколько олигомеров молочной кислоты формулы I, где n представляет собой целое число, определенное здесь по отношению к формуле (I). Новые олигомеры молочной кислоты в чистой форме не охватывают тетрамер молочной кислоты, произведенный как описано ниже: к раствору сложного эфира тетрамера молочной кислоты (0,6982 г) (1,9268 миллимоль) в метиленхлориде (25 мл) по каплям добавляли смешанный раствор трифторуксусной кислоты (2,5 мл) и метиленхлорида (2,5 мл), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа по окончании добавления по каплям; насыщенный раствор раствора гидрокарбоната натрия (30 мл) добавляли для регулирования значения pH водного слоя до pH 8, затем добавляли туда насыщенный хлорид аммония (50 мл) для регулирования значения pH водного слоя до pH 6; полученную в результате смесь экстрагировали три раза с помощью диэтилового эфира (100 мл); экстрагированный раствор содержал почти все примеси и небольшое количество вещества, представляющего интерес; к оставшемуся водному слою добавляли по каплям 1 н. хлорводородную кислоту (5 мл), охлажденную до 0°C, так чтобы урегулировать значение pH водного слоя до pH 2-3; слой экстрагировали три раза с помощью метиленхлорида (150 мл); в это время изменяли pH и, таким образом, 1 н. хлорводородную кислоту, охлажденную до 0°C, использовали для поддержания значения pH водного слоя, составляющего pH 2-3; полученную в результате смесь сушили на безводном сульфате магния в течение дня и ночи, концентрировали и выделяли с помощью колоночной хроматографии (проявляющий растворитель:гексан:диэтиловый эфир=1:4) с получением тетрамера молочной кислоты (0,2047 г) (выход:34,7%) в виде бесцветного масла.

В одном воплощении, имеющем отношение к применению олигомеров молочной кислоты, изобретение содержит одно или несколько производных олигомеров молочной кислоты, имеющих вышеупомянутую формулу II, где n, R и X определены выше.

Олигомеры молочной кислоты представляют собой цепи молочной кислоты, конденсированные друг с другом с помощью сложноэфирных связей между компонентом карбоновой кислоты в одной цепи с компонентом вторичного спирта в другой цепи. Количество соединенных мономеров находится в интервале от 2 и обычно до 20. Состав, предназначенный для профилактики и/или лечения бактериального вагиноза, также может включать использование карбоновой кислоты, такой как бензойная кислота или уксусная кислота, дакарбоновые кислоты, такие малоновая кислота, соединения, имеющие одновременно группу карбоновой кислоты и гидроксильную группу (например, салициловая кислота), карбонаты, сульфаты или вариант, в котором концевая группа формулы II представляет собой R, где R представляет собой R¹R²N, R¹O-, или R¹S-, R¹, R² и R³ представляют собой одинаковые или различные группы и выбраны из H, алкила C1-C6, включающего метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, или арила, включающего бензил, а также состав включает их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения, полученные с помощью способа по настоящему изобретению, включают все комбинации оптических изомеров олигомеров молочной кислоты согласно настоящему изобретению (например, R- и S-энантиомеры, D- и L-формы), а также рацемические, диастереомерные, мезо- и другие смеси таких изомеров.

Кроме того, олигомеры молочной кислоты могут быть трансформированы в их соответствующие сложные эфиры, амиды, тиоэфиры или соли. Соль олигомеров молочной кислоты может представлять собой любую фармацевтически приемлемую соль, такую как соль натрия, калия, кальция, магния или аммония, или соль трометамола. Кроме того, олигомеры молочной кислоты можно обнаружить в виде комплексов с металлами или с макромолекулами.

Физические свойства олигомерного продукта зависят от средней молекулярной массы, состояние которого находится в интервале от жидкого, полутвердого и до твердого продукта. Чем меньше молекулярная масса, тем более жидкий продукт. Растворимость в воде также зависит от средней молекулярной массы. Чем меньше олигомеризация молочной кислоты, тем выше растворимость в воде. Эти свойства также могут использоваться в создании подходящей композиции. Таким образом, если, например, целевым является быстрорастворимый продукт, имеющий свойства быстрого высвобождения, то следует выбирать олигомерный продукт, имеющий относительно низкую молекулярную массу (например, HL₃ - HL₆), тогда как если целевым является малорастворимый продукт с более продолжительным временем высвобождения, то следует выбирать олигомерный продукт, имеющий большую средневесовую молекулярную массу (например, HL₅ - HL₁₀ или даже больше). Кроме того, может быть выбран индивидуальный олигомерный продукт в зависимости от конечного дозированного состава. Таким образом, например, для состава в виде геля или других жидких или полутвердых композиций, выбор олигомерного продукта может производиться соответственно среди жидких, полужидких олигомерных продуктов, таких как, например, таблетки или капсулы, причем твердые олигомерные продукты могут быть более подходящими.

В одном воплощении олигомер молочной кислоты обладает растворимостью в воде, составляющей по меньшей мере, 1 процент по весу, такой растворимостью, как 0,1-50, 1-50 процентов по весу, 1-30 процентов по весу, или 5-30 процентов по весу при комнатной температуре. Растворимость в воде олигомеров молочной кислоты зависит от длины олигомера. Кроме того, растворимость может увеличиваться в разведенных щелочных растворах.

В одном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mw, составляющую от 400 до 2000 г/моль. В определенном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mw, составляющую от 380 до 760 г/моль, такую как от 400 до 700 г/моль, от 450 до 650 г/моль, от 500 до 650 г/моль, от 550 до 625 г/моль или от 550 до 600 г/моль. Олигомер может быть, по существу чистым, как определено здесь, или более типично, один или несколько олигомеров молочной кислоты содержатся в олигомерном продукте, имеющем определенный коэффициент полидисперсности. Типичная полидисперсность составляет примерно от 1,2 до 1,5, такая полидисперсность, как примерно от 1,3 примерно до 1,4, но если это желательно, продукт также может быть очищен до состояния меньшей полидисперсности.

В воплощении изобретения один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mn, составляющую от 250 до 1,500 г/моль. В определенном воплощении Mn составляет от 250 до 760 г/моль, как, например, от 380 до 760 г/моль, от 400 до 700 г/моль, от 450 до 650 г/моль. В следующем воплощении Mn составляет от 500 до 600 г/моль, от 525 до 600 г/моль или от 525 до 575 г/моль. В примерах, представленных здесь, приведены примеры соответствующих значений Mw и Mn и коэффициента полидисперсности.

В другом определенном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mw, составляющую от 700 до 2000 г/моль. В определенном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mw, составляющую от 700 до 1700 г/моль, такую как от 700 до 1000 г/моль, от 1000 до 1500 г/моль, от 1500 до 2000 г/моль. Олигомер может быть, по существу, чистым или более типично, один или несколько олигомеров молочной кислоты содержаться в олигомерном продукте, имеющем определенную полидисперсность. Типичная полидисперсность составляет примерно от 1,2 до 1,5, такая как, например, примерно от 1,3 примерно до 1,5, но если это желательно, продукт также может быть очищен до состояния меньшей полидисперсности.

В другом определенном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mn, составляющую от 500 до 1500 г/моль. В другом определенном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют Mn, составляющую от 500 до 1300 г/моль, такую как от 600 до 1100 г/моль. В другом воплощении Mn составляет от 1000 до 1500 г/моль или от 1000 до 1200 г/моль. Олигомер может быть, по существу, чистым или более типично, один или несколько олигомеров молочной кислоты могут содержаться в олигомерном продукте, имеющем определенную полидисперсность. Типичная полидисперсность составляет примерно от 1,2 до 1,5, такая как, например, примерно от 1,3 примерно до 1,5, но если это желательно, продукт также может быть очищен до состояния меньшей полидисперсности.

В одном воплощении коэффициент полидисперсности олигомеров молочной кислоты согласно настоящему изобретению составляет менее чем 1,8, такой как менее чем 1,7. Более типично, коэффициент полидисперсности составляет 1,5 или менее, такой как менее чем 1,4, или от 1,2, до 1,4. Чем более очищенный продукт, тем ниже коэффициент полидисперсности. Соответственно, для некоторых воплощений изобретения коэффициент полидисперсности составляет менее чем 1,2 или менее чем 1,1. Для чистых олигомеров коэффициент полидисперсности может составлять менее чем 1,08, менее чем 1,06, менее чем 1,04, менее чем 1,02, или менее чем 1,01.

В одном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты или олигомерный продукт имеют характеристическую вязкость при 25°С, в пределах 10^-3-10¹² Па·с, такую как 10^-1-10⁹Па·с, 1-10⁵ Па·с, которую определяли с помощью реометра.

В одном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты высвобождает молочную кислоту в течение периода времени, составляющего, по меньшей мере, 4 часа, по меньшей мере, 8 часов, по меньшей мере, 12 часов, такого периода времени, как, по меньшей мере, 16 часов, по меньшей мере, 20 часов, по меньшей мере, 24 часа, по меньшей мере, 36 часов, по меньшей мере, 2 дня, по меньшей мере, 3 дня, по меньшей мере, 4 дня, по меньшей мере, 5 дней, по меньшей мере, 6 дней или, по меньшей мере, 7 дней под воздействием воды при комнатной температуре.

Как обсуждалось здесь ранее, получают смесь олигомеров и могут ее использовать как таковую. В таких смесях обычно присутствуют индивидуальные олигомеры в максимальном количестве 10-20% масс./масс.

Определенные олигомерные продукты по изобретению представляют собой:

i) олигомерный продукт, содержащий

10-20% масс./масс. HL₂

15-25% масс./масс. HL₃

10-20% масс./масс. HL₄ и

8-15% масс./масс. HL₅

ii) олигомерный продукт, содержащий

10-15% масс./масс. HL₂

15-25% масс./масс. HL₃

10-15% масс./масс. HL₄ и

10-15% масс./масс. HL₅

iii) олигомерный продукт, содержащий

7-15% масс./масс. HL₂

7-15% масс./масс. HL₃

7-15% масс./масс. HL₄ и

8-15% масс./масс. HL₅

iv) олигомерный продукт, содержащий

2,5-10% масс./масс. HL₂

4-15% масс./масс. HL₃

5-15% масс./масс. HL₄ и

5-15% масс./масс. HL₅

v) олигомерный продукт, содержащий

2,5-7,5% масс./масс. HL₂

5-10% масс./масс. HL₃

5-12% масс./масс. HL₄ и

5-12% масс./масс. HL₅

vi) олигомерный продукт, содержащий

5-15% масс./масс. HL₃

5-15% масс./масс. HL₄

5-15% масс./масс. HL₅

5-10% масс./масс. HL₆ и

5-15% масс./масс. HL₇

vii) олигомерный продукт, содержащий

5-10% масс./масс. HL₃

5-10% масс./масс. HL₄

5-10% масс./масс. HL₅

5-10% масс./масс. HL₆ и

5-10% масс./масс. HL₇

viii) олигомерный продукт, содержащий

2,5-7,5% масс./масс. HL₃

5-10% масс./масс. HL₄

5-10% масс./масс. HL₅

5-10% масс./масс. HL₆ и

5-15% масс./масс. HL₇

Другие воплощения изобретения представляют собой более очищенные продукты, такие как представленные ниже.

В другом воплощении, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой тример молочной кислоты (n=2).

Окисляющие свойства

Низкое значение pH влагалища достигается благодаря продуцированию молочной кислоты при метаболизме молочнокислых бактерий, а также благодаря превращению гликогена в молочную кислоту эстрогенными вагинальными эпителиальными клетками. В культуре молочнокислые бактерии окисляют их ростовую среду до pH 3,2-4,8. В этом интервале pH устойчивое состояние равновесия устанавливается там, где кислотность становится самоингибирующей. Анаэробы плохо растут при pH 4,5 или менее. Исследования in vitro показали, что концентрации БВ-ассоциированных бактерий увеличиваются с увеличением вагинального pH. Однако, было обнаружено, что молочная кислота и низкое значение pH вызывают более сглаженный ингибирующий эффект на эти бактерии, чем пероксид водорода. Однако, когда происходит повышение вагинального pH, такое как после полового акта и во время менструации, то наблюдается разрастание бактерий. Интересно, оказывается, что низкое значение pH является важным фактором для адгезии молочнокислых бактерий на эпителиальных клетках. БВ также можно получить при инокуляции БВ-ассоциированных бактерий во влагалище здоровой женщины, как показано в исходной работе Gardner и Dukes (Gardner HL, Dukes CD. Haemophilus vaginalis vaginitis. Am J Obstet Gynecol 1955; 69:962-76).

Таким образом, точный механизм возникновения БВ остается неразрешенным. БВ ассоциирован с уменьшением количества молочнокислых бактерий (LB) и меньшим продуцированием пероксида водорода. Происходит повышение вагинального pH, и происходит разрастание БВ-ассоциированных микроорганизмов. В настоящее время неизвестно, что вызывает уменьшение продуцирующих пероксид водорода штаммов молочнокислых бактерий при БВ.

Другими словами, главной целью при предотвращении или лечении БВ является поддерживание вагинального pH на значении 4,5 или менее. Это предотвратит разрастание патогенных бактерий вплоть до восстановления нормальных LB, способных к поддержанию pH.

Периодическая снижающая pH терапия на эпизодической или профилактической основе может рассматриваться для предотвращения или лечения рецидивирующего БВ.

Изобретение включает способ, а также состав, предназначенный для профилактики и/или лечения бактериального вагиноза путем предложения терапевтически эффективного количества одного или несколько олигомеров молочной кислоты или их производных или комбинации таких олигомеров молочной кислоты или их производных.

Состав также может состоять из терапевтически эффективной комбинации одного или несколько олигомеров молочной кислоты и лактата.

Адгезионная способность

Мукоадгезия (или биоадгезия) определяется как процесс, посредством которого синтетические или природные макромолекулы прилипают к различным поверхностям слизистой оболочки тела. Если молекула обладает мукоадгезионными свойствами или если такие мукоадгезионные вещества вводят в качестве составляющих в фармацевтические составы, то местное действие лекарственного средства или абсорбция лекарственного средства клетками слизистой оболочки могут быть усиленными или обладать продолжительным действием. Кроме того, если в молекуле присутствуют мукоадгезионные свойства или если вводятся мукоадгезионные составляющие, то высвобождение лекарственного средства и его действие могут быть улучшены в месте применения в течение продолжительного периода времени.

OMLA сами по себе обладают некоторыми мукоадгезионными свойствами, однако в комбинации с другими полимерами, присутствующими в составе, используемыми в качестве матрикса или покрытия, OMLA демонстрируют ярко выраженную мукоадгезионную способность или, по меньшей мере, некоторую мукоадгезионную способность, зависящую от молекулярной массы (смотри Таблицу I ниже). Как можно увидеть ниже, мукоадгезионная способность OMLA-гелей, пластырей и пессарий оценивается от (3) ярко выраженной до (4) очень ярко выраженной.

Это свойство присуще OMLA-молекуле и четко демонстрируется, как показано в осуществленных химических экспериментах и в экспериментах, предшествующих получению состава. Степень мукоадгезионной способности OMLA является настолько ярко выраженной, что отсутствует необходимость добавления к составам дополнительных мукоадгезионных составляющих во время галеновой разработки пессарий или вагинальных суппозиториев на основе OMLA.

Для синтетических полимеров, таких как производные целлюлозы, хитозаны, карбополы и карбомеры, механизм био/мукоадгезии является результатом ряда различных физико-химических взаимодействий. Это также является вероятным механизмом продолжительной мукоадгезионной способности, которую можно наблюдать для OMLA.

Таблица I.
Мукоадгезионные свойства составов, содержащих OMLA ЖидкостьГельПластырьПессарийМолочная кислота, чистота 85%0---OMLA (в основном от тетрамера до октамера)-343OMLA (в основном от пентамера до декамера)-444

Следует заметить, что молочная кислота представляет собой жидкость и присутствует только в жидкой форме, в то время как OMLA становится последовательно от более полутвердых до твердых по мере увеличения размера молекулы. В композициях, включающих OMLA, OMLA не присутствуют в жидкой форме, а только в полутвердой или в твердой форме.

Мукоагезионная способность (или биоадгезионная способность) представлена согласно визуальной аналоговой шкале VAS, градуированной на 5 групп, где 0 обозначает отсутствие мукоадгезионных свойств и 4 обозначает очень ярко выраженные мукоадгезионные свойства.

В определенном воплощении настоящего изобретения один или несколько олигомеров молочной кислоты обладают мукоадгезионной способностью, составляющей, по меньшей мере, 3, такой способностью, как, например, по меньшей мере, 4 или 5 по градуированной визуальной аналоговой шкале VAS.

Терапия бактериального вагиноза

При использовании пероральных или вагинальных препаратов метронидазола и клиндамицина, у женщин наблюдается исходная реакция в объеме 80-90% на лечение, но при этом в течение 3 месяцев наблюдается 15-30% случаев рецидива. Предполагая наличие ассоциации между молочнокислыми бактериями, продуцированием пероксида водорода, вагинальным pH и разрастанием БВ-ассоциированных бактерий, регулирование только одного из этих факторов может помочь некоторым женщинам с рецидивирующим БВ, но этого может быть недостаточно для устранения всех случаев заболевания.

Хотя хорошо известна взаимосвязь между молочнокислыми бактериями, продуцированием пероксида водорода, вагинальным pH и разрастанием БВ-ассоциированных бактерий, фактор инициации БВ остается неизвестным.

Лечение, фокусирующееся только на одном аспекте этой взаимосвязи, может помочь некоторым женщинам с рецидивирующим БВ, но комбинированный способ лечения является лучшим. Так как бактериальный вагиноз также может быть бессимптомным, рецидив часто не может быть дифференцирован от неудачного лечения. Таким образом, рецидивирующий бактериальный вагиноз может быть предотвращен с использованием эффективной терапии исходного случая заболевания.

В одном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты применяют для получения состава, предназначенного для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций. В следующем воплощении гинекологическая инфекция представляет собой бактериальную инфекцию, такую как бактериальный вагиноз, неспецифичный кольпит, старческий кольпит, цервицит и уретрит. В следующем воплощении гинекологическая инфекция представляет собой грибковую инфекцию, такую как кандидоз (Candida albicans), криптококкоз, актиномикоз. В следующем воплощении, гинекологическая инфекция представляет собой вирусную инфекцию, такую как Вирус Иммунодефицита Человека (ВИЧ), Вирус Простого Герпеса (ВПГ), Вирус Папилломы Человека (ВПЧ).

Составы

OMLA согласно настоящему изобретению или при применении согласно настоящему изобретению обычно представлены в виде фармацевтического состава, т.e. OMLA представлены в составе вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами.

Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества могут быть выбраны из группы, состоящей из носителей, разбавителей, связующих агентов, дезинтегрирующих агентов, агентов, улучшающих текучесть, pH-регулирующих агентов, стабилизирующих агентов, консервантов, гелеобразующих агентов или агентов, способствующих набуханию, поверхностно-активных веществ, эмульгирующих агентов, суспендирующих агентов, основ для суппозиториев, пессарий или вагинальных суппозиториев, основ для кремов, мазей, гелей, лосьонов, шампуней, пенок, аэрозолей и им подобных. Определенный выбор фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ зависит от состава, например, дозированного состава. Специалист в данной области может обнаружить рекомендации по применению, например, в публикации Remington's Pharmaceutical Sciences (Gennaro, Alfonso R., ed., 18. ed., 1990, xvi, Mack, ISBN: 0-912734-04-3).

Конечный состав также может включать одну или несколько фармацевтически приемлемых солей, таких как фосфат, сукцинат, лизинат, ацетат, ципионат, валерат, гемисукцинат, бутират или трометамоловую соль, индивидуально или в комбинации. Количество полимера на основе лактатов или его производных, включенное в каждый дозированный препарат, может находиться в интервале от 0,01 мг до 50 г на дозированную единицу, но предпочтительно в интервале 0,5 мг - 5 г. Состав одного или несколько олигомеров молочной кислоты восстанавливает нормальный физиологический уровень pH во влагалище. Это уменьшает количество анаэробных бактерий, которые вызывают характерный для вагиноза неприятный запах посредством продуцирования триметиламина.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению состав включает i) один или несколько олигомеров молочной кислоты или их производные, как определено в любом из пунктов 1-40, ii) комбинацию одного или нескольких олигомеров молочной кислоты или их производных, как определено в любом из пунктов 1-40, или iii) комбинацию i) и/или ii) и/или молочную кислоту, предназначенную для профилактики и/или лечения микробной инфекции согласно любому из пунктов 1-4.

В одном воплощении состав включает, по меньшей мере, 0,01% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты. В другом воплощении состав включает примерно от 0,02% до 100% масс./масс., такое количество, как, например, примерно от 0,1% примерно до 95% масс./масс., примерно от 1% примерно до 95% масс./масс., примерно от 5% примерно до 95% масс./масс., примерно от 10% примерно до 90% масс./масс., примерно от 15% примерно до 90% масс./масс., примерно от 15% примерно до 50% масс./масс. или примерно от 15% примерно до 40% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты.

В одном воплощении один или несколько олигомеров молочной кислоты высвобождают молочную кислоту в течение периода времени, составляющего, по меньшей мере, 8 часов, по меньшей мере, 12 часов, такой период времени, как, по меньшей мере, 16 часов, по меньшей мере, 20 часов, по меньшей мере, 24 часа, по меньшей мере, 36 часов, по меньшей мере, 2 дня, по меньшей мере, 3 дня, по меньшей мере, 4 дня, по меньшей мере, 5 дней, по меньшей мере, 6 дней или по меньшей мере, 7 дней под воздействием воды при комнатной температуре.

В одном воплощении состав создан для вагинального введения. В другом воплощении состав создан для интравагинального или трансвагинального введения. В одном воплощении состав представляет собой твердый, полутвердый или жидкий состав. В другом воплощении, согласно настоящему изобретению галеновое состав представленный в форме тампона, пессария, вагинального аэрозоля, вагинальной прокладки, вагинального геля, вагинальной вставки, вагинального пластыря, вагинального кольца, вагинальной губки, вагинального суппозитория, вагинального крема, вагинальной эмульсии, вагинальной пены, вагинального лосьона, вагинальной мази, вагинального порошка, вагинального шампуня, вагинального раствора, вагинального спрея, вагинальной суспензии, вагинальной таблетки, вагинальной палочки, вагинальной пенки, вагинального диска, полупроницаемого упаковочного материала и любой их комбинации.

В одном воплощении фармацевтический агент состава согласно изобретению введен в устройство в виде системы доставки лекарственного средства с контролируемым высвобождением.

В одном воплощении состав включает гликоген или его предшественники или производные, для того, например, чтобы служить в качестве источника питания для молочнокислых бактерий.

В другом воплощении состав включает пробиотики, представленные в форме микроорганизмов, таких как ацидофильные молочнокислые бактерии или им подобные виды, которые при введении в адекватных количествах придают свойства, полезные для здоровья организма-хозяина, приводя в результате к восстановлению доминирования молочнокислых бактерий в вагинальной флоре.

В следующем воплощении pH-регулирующие агенты обеспечивают уровень pH ниже чем 5, такой уровень, как ниже чем 4, с целью получения более быстрого восстановления кислой среды для оптимизации терапевтической реакции и восстановления роста молочнокислых бактерий.

Состав согласно изобретению может быть представлен в любой подходящей форме. Определенную форму следует выбирать в зависимости от определенного пути введения. Таким образом, для перорального введения (в желудочно-кишечный тракт) являются предпочтительными полутвердые или твердые композиции, такие как, например, твердые дозированные формы (например, таблетки, капсулы, саше), порошки, гранулы, шарики, пеллеты и т.д. Для местного введения или для введения в полость рта могут быть подходящими гель, кремы, мази, лосьоны, порошки, пластыри, зубная паста, жидкость для полоскания рта и т.д. Специалист в данной области обнаружит рекомендации по получению таких форм и по выбору подходящих фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, например, в публикации Remington's Pharmaceutical Sciences.

В определенном аспекте состав создан для введения во влагалище. В таких случаях являются подходящими следующие дозированные формы: агенты, регулирующие вязкость, или агенты, стимулирующие адгезию.

В одном воплощении изобретения состав дополнительно содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, выбранных из группы, состоящей из производных целлюлозы, таких как гидроксипропилметилцеллюлоза (HPMC), метилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза (HEC), гидроксипропилцеллюлоза (HPC), этилгидроксиэтилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (Na CMC), производных крахмала, таких как умеренно сшитый крахмал, акриловых полимеров, таких как карбомер и его производные (Поликарбофил, Карбопол®, и т.д.); из полиэтиленоксида (PEO), хитозана (поли-(D-глюкозамина); природных полимеров, таких как желатин, альгинат натрия, пектин, склероглюкан, трагакант, геллановая кислота, ксантановая смола или гуаровая камедь, сополимеров (метилвинилового эфира/малеинового ангидрида), микрокристаллической целлюлозы/ Авицела®) и кросскармеллозы. В другом воплощении изобретения концентрация фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества находится в интервале, составляющем 0,05-10 процентов по весу, в таком интервале, как 0,1-5 процентов по весу состава. Еще в одном воплощении одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ представляют собой вагинальные стимулирующие мукоадгезию агенты и/или агенты, регулирующие вязкость.

Противомикробные свойства

Микробиологическое исследование на всем протяжении менструального цикла показало, что концентрация видов бактерий, отличных от молочнокислых, была выше при менструации. Таким образом, существует потенциал для бактериального разрастания в этот момент времени, поскольку существует нестабильность вагинальной флоры.

Идея добавления противобактериальных компонентов к препарату заключается в том, что патогенные бактерии продуцируют гидролитические ферменты, которые разрушают вагинальную слизистую оболочку. Этот эффект патогенов нарушает нормальную защитную вагинальную слизистую оболочку.

Состав также может включать один или несколько противомикробных агентов, таких как антибиотики, такие как клиндамицин или метронидазол, эфирных масел, таких как масло чайного дерева, катионов или химических элементов, таких как Hg, Cu, Pb, или Ag, из полиеновых антимикотиков, имидазола, триазола, аллиаминов, эхинокандина, ацикловира, амантадина, спиртов, четвертичных соединений аммония, борной кислоты, хлоргексидин глюконата, пероксида водорода, гидроперита, иода, меркурохрома, октенина дигидрохлорида, фенольных соединений (карболовой кислоты), хлорида натрия, гипохлорита натрия, ноноксинола, а также комбинации и/или смеси таких агентов. Окисляющее соединение, такое как H₂O₂, обеспечивает неблагоприятную среду для патогенных анаэробных бактерий, характерных для бактериального вагиноза. Кроме того, некоторые окисляющие соединения, такие как H₂O₂, также могут добавлять противобактериальные свойства против патогенов. Молочнокислые бактерии, которые сами продуцируют H₂O_2,менее подвержены неблагоприятному воздействию, например, H₂O₂.

Противомикробный агент также может использоваться в подходящих концентрациях, которые известны специалисту в данной области. Концентрация противомикробного агента может составлять более чем 0,01 процент по весу, может находиться в таком интервале, как 0,01-50 процентов по весу, таком как 0,01-25 процентов по весу, 0,05-25 процентов по весу, 0,1-10 процентов по весу, 0,5-5 процентов по весу состава.

В одном воплощении согласно изобретению состав дополнительно включает противобактериальный агент, выбранный из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина и хлорхинальдола.

В другом воплощении согласно изобретению состав дополнительно содержит один или несколько противобактериальных агентов, предназначенных для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, определенных здесь.

В другом воплощении согласно изобретению противобактериальный агент выбран из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина.

В другом воплощении согласно изобретению количество противобактериального агента находится в интервале от 5 мг до 1000 мг на дозу.

В другом воплощении согласно изобретению противобактериальный агент, выбранный из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина, азитромицина или эритромицина, вводится внутрь тампона.

В другом воплощении согласно изобретению состав дополнительно содержит один или несколько антибиотических агентов широкого спектра действия.

В следующем воплощении согласно изобретению антибиотический агент широкого спектра действия выбран из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина, которые предназначены для профилактики и/или лечения гонореи или хламидийных инфекций. Еще в одном воплощении согласно изобретению количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале от 100 мг до 3000 мг на дозу.

В следующем воплощении согласно изобретению антибиотический агент широкого спектра действия выбран из группы, состоящей из тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина или цефлотоксина, которые предназначены для профилактики и/или лечения гонореи. В следующем воплощении согласно изобретению количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале от 400 мг до 3000 мг на дозу.

В следующем воплощении согласно изобретению состав дополнительно содержит один или несколько антибиотических агентов широкого спектра действия, выбранных из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина и эритромицина, предназначенных для лечения хламидийных инфекций. Еще в одном воплощении согласно изобретению, количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале 100 мг - 2000 мг на дозу. Еще в одном воплощении лекарственное средство представлено в форме тампона.

В одном воплощении согласно изобретению состав дополнительно включает антихламидийный агент, выбранный из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина и эритромицина.

В одном воплощении согласно изобретению состав дополнительно включает противогрибковый агент, выбранный из группы, состоящей из миконазола, терконазола, изоконазола, фентиконазола, флуконазола, нистатина, кетоконазола, клотримазола, бутоконазола, эконазола, тиоконазола, итраконазола, 5-фторурацила и метронидазола. В другом воплощении противогрибковый агент, предназначенный для лечения кандидоза, представлен в количестве на дозу, которое находится в интервале от 0,1 мг - 2000 мг. В следующем воплощении один или несколько противогрибковых агентов выбраны из группы, состоящей из кетоконазола, миконазола и метронидазола, и необязательно, агент вводится внутрь тампона.

В одном воплощении согласно изобретению состав дополнительно включает спермицидный агент.

В одном воплощении согласно изобретению состав согласно любому из пунктов 60-64 дополнительно включает противовирусный агент, выбранный из группы, состоящей из ацикловира, фемцикловира, валацикловира и AZT.

В одном воплощении согласно изобретению состав согласно любому из пунктов 60-63 дополнительно включает противовирусный агент. В другом воплощении противовирусный агент выбран из группы, состоящей из ацикловира, фемцикловира, валацикловира и AZT. В следующем воплощении количество противовирусного агента находится в интервале 100 мг - 1200 мг на дозу. Еще в одном воплощении противовирусный агент представляет собой ацикловир и вводится внутрь тампона.

В одном воплощении согласно изобретению состав согласно любому из пунктов 65-66 дополнительно содержит противотрихомонадный или противопаразитарный агент, выбранный из группы, состоящей из метронидазола и клотримазола.

В одном воплощении согласно изобретению состав согласно любому из пунктов 65-67 дополнительно включает метронидазол, предназначенный для лечения трихомоноза. В другом воплощении количество метронидазола находится в интервале от 10 мг до 750 мг на дозу.

Антиадгезионные агенты

Состав может дополнительно включать один или несколько антиадгезионных агентов. Молочнокислые бактерии, которые придают благоприятные окисляющие свойства вагинальной среде, не прилипают к вагинальной слизистой оболочке. Однако патогенные грибки прилипают к слизистой оболочке, и патогенные бактерии могут контактировать со слизистой оболочкой и разрушают защитную оболочку нормальной здоровой вагинальной слизистой оболочки. Это может повышать опасность рецидива вагиноза у пациентов, имеющих предрасположенность к этому заболеванию. Таким образом, составы, которые включают одно или несколько соединений, которые предотвращают такую мукоадгезию, могут быть полезны для профилактики, предотвращения и лечения бактериального вагиноза. Настоящее изобретение может включать один или несколько несущих заполнителей, которые предотвращают мукоадгезию патогенных микроорганизмов, предпочтительно, анаэробных бактерий и грибков. Антиадгезионные агенты могут представлять собой агенты, которые служат как в качестве барьера, предотвращающего адгезию, так и в качестве агента, который вызывает отлипание уже прилипших организмов. Примеры антиадгезионных агентов, вызывающих отлипание, могут представлять собой маннозу, лактозу, ксилит и другие сахарные спирты. Конечный состав может состоять из комбинаций и/или смесей нескольких соединений, каждое из которых представлено в эффективных количествах при их использовании индивидуально или вместе.

В одном воплощении изобретения антиадгезионный агент выбран из группы, состоящей из маннозы, лактозы, ксилита и других сахарных спиртов.

В одном воплощении изобретения количество антиадгезионного агента находится в интервале 0,01-10 процентов по весу, в таком интервале, как 0,1-5 процентов по весу состава.

Поверхностно-активные вещества

В одном воплощении согласно настоящему изобретению состав содержит один или несколько поверхностно-активных веществ, выбранных из группы, состоящей из лаурилсульфата натрия, полисорбатов, желчной кислоты, солей желчной кислоты, лецитина, фосфолипидов, метиллаурата, олеиновой кислоты, олеилового спирта, моноолеата глицерина, диолеата глицерина, триолеата глицерина, моностеарата глицерина, монолаурата глицерина, фосфолипидов, пропиленгликоль монолаурата, додецилсульфата натрия, сложного эфира сорбитана, соли холевой кислоты, холановой кислоты, полоксамера, кремофора и других полиоксиэтилированных липидов, и любой их комбинации.

В следующем воплощении согласно настоящему изобретению концентрация поверхностно-активного вещества находится в интервале 0,01-10 процентов по весу, в таком интервале, как 0,1-5 процентов по весу состава.

В одном воплощении фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество состава согласно изобретению представляет собой липофильный или гидрофильный носитель. Примеры липофильных носителей представляют собой воски, масла, изопропил миристат, твердые триглицериды и какао масло.

Примеры гидрофильных носителей представляют собой глицерин, пропиленгликоль, полиоксиэтиленгликоль.

В другом воплощении состав согласно изобретению предназначен для интравагинальной доставки и содержит один или несколько липофильных или гидрофильных носителей, и один или несколько мукоадгезионных агентов с общими концентрациями, которые находятся в интервале от 60 до 90% масс./масс. и от 5 до 25% масс./масс. соответственно.

В другом воплощении состав согласно изобретению предназначен для трансвагинальной доставки и содержит один или несколько липофильных или гидрофильных носителей, и один или несколько мукоадгезионных агентов, и один или несколько интенсификаторов проникновения или стимуляторов поглощения с общими концентрациями, которые находятся в интервале от 60 до 90% масс./масс., от 5 до 25% масс./масс., и от 5 до 20% масс./масс. соответственно.

В другом воплощении состав дополнительно содержит один или несколько липофильных носителей полусинтетических глицеридов насыщенных жирных кислот, содержащих 8-18 атомов углерода.

В другом воплощении состав дополнительно содержит гидрофильный носитель-полиэтиленгликоль с молекулярной массой от 400 до 6000. В следующем воплощении концентрация полиэтиленгликоля находится в интервале от 60 до 90% масс./масс.

В другом воплощении, состав дополнительно содержит мукоадгезионные агенты, представляющие собой альгинат, пектин или гидроксипропилметилцеллюлозу. В следующем воплощении концентрация гидроксипропилметилцеллюлозы находится в интервале от 5 до 20% масс./масс. Еще в одном воплощении интенсификатор проникновения представляет собой поверхностно-активное вещество, соль желчной кислоты или этоксигликоль. Еще в одном воплощении концентрация этоксигликоля находится в интервале от 5 до 30% масс./масс.

В другом воплощении согласно настоящему изобретению состав содержит один или несколько олигомеров молочной кислоты, одно или несколько их производных или комбинацию одного или нескольких олигомеров молочной кислоты и одного или нескольких их производных совместно с фармацевтически приемлемым нетоксическим вспомогательным веществом, включающим примерно от 60 до 90% масс./масс. липофильного или гидрофильного носителя и примерно от 5 примерно до 25% масс./масс. мукоадгезионного агента, предназначенных для интравагинальной доставки, или примерно от 60 примерно до 90% масс./масс. липофильного или гидрофильного носителя, примерно от 5 примерно до 25% масс./масс. мукоадгезионного агента и примерно от 5 до 20% масс./масс. интенсификатора проникновения, предназначенных для трансвагинальной доставки.

В другом воплощении согласно настоящему изобретению состав дополнительно содержит липофильный носитель полусинтетического глицерида насыщенных жирных кислот, содержащих 8-18 атомов углерода, где гидрофильный носитель представляет собой полиэтиленгликоль с молекулярной массой от 400 до 6000, в интервале от 60 до 90% масс./масс., и где мукоадгезионный агент представляет собой альгинат, пектин или гидроксипропилметилцеллюлозу, где концентрация гидроксипропилметилцеллюлозы находится в интервале от 5 до 20% масс./масс. и где интенсификатор проникновения представляет собой поверхностно-активное вещество, соль желчной кислоты или этоксигликоль, где количество этоксигликоля находится в интервале от 5 до 30% масс./масс.

Устройство

В одном воплощении состав олигомеров молочной кслоты согласно настоящему изобретению, предназначенный для профилактики и/или лечения гинекологических микробных бактериальных инфекций, может быть представлен в форме устройства, которое доставляет терапевтически эффективное количество одного или несколько олигомеров молочной кислоты или их производных или комбинацию одного или несколько олигомеров молочной кислоты или их производных нуждающемуся в этом субъекту интравагинально или трансвагинально в матку или в общий кровоток через вагинальную слизистую оболочку.

В одном воплощении настоящее изобретение включает устройство для доставки состава, определенного здесь, предназначенного для профилактики и/или лечения гинекологической инфекции, определенной здесь.

В другом воплощении согласно настоящему изобретению устройство является интравагинальным.

В другом воплощении согласно настоящему изобретению состав вводится интравагинально или трансвагинально.

В одном воплощении состав представляет собой твердый, полутвердый или жидкий состав. В другом воплощении согласно настоящему изобретению галеновый состав представлен в форме тампона, пессария, вагинальной прокладки, вагинальной вставки, вагинального пластыря, вагинального кольца, вагинальной губки, вагинального спрея, вагинального порошка, вагинальной палочки, вагинальной пенки (vaginal shaum), вагинального диска, полупроницаемого упаковочного материала и любой их комбинации.

В другом воплощении согласно настоящему изобретению фармацевтический агент вводится в устройство в качестве системы доставки лекарственного средства с контролируемым высвобождением.

Набор

В одном воплощении состав олигомеров молочной кислоты согласно настоящему изобретению может быть представлен в наборе, предназначенном для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, определенных здесь, который включает, по меньшей мере, первый и второй компонент, где первый компонент включает состав, определенный здесь, и второй компонент включает инструкции по применению состава.

В другом воплощении первый компонент набора включает состав, определенный здесь, и второй компонент включает средства введения состава. В следующем воплощении, дополнительный третий компонент набора включает инструкции по применению состава.

В другом воплощении набор может включать состав в виде вагинального устройства и средств введения в виде аппликатора.

Упаковка

В одном воплощении настоящее изобретение включает упаковку или контейнер для хранения набора, определенного здесь.

Способ лечения

В одном аспекте настоящее изобретение включает способ профилактики и/или лечения гинекологической инфекции, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или нескольких олигомеров молочной кислоты, определенных здесь, необязательно в виде состава, определенного здесь.

В другом аспекте настоящее изобретение включает способ терапии, профилактики и/или лечения запаха вагинальных выделений, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или несколько олигомеров молочной кислоты, определенных здесь, необязательно в виде состава, определенного здесь.

Еще в одном аспекте настоящее изобретение включает способ терапии, профилактики и/или лечения запаха вагинальных выделений, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или несколько олигомеров молочной кислоты, определенных здесь, необязательно в виде состава, определенного здесь, и где состав включает санитарно-гигиеническое устройство.

Подписи к фигурам

Фиг.1. OMLA 12 (диализный мешок) - изменение pH. Когда OMLA (вещество) помещают в диализный мешок, то благодаря диффузии (OMLA и LA после деградации) pH внешней водной камеры уменьшается. Изменение pH наблюдается в течение продолжительного периода времени; несмотря на замену воды вне диализного мешка через 3, 7 и 47 ч A) pH через 1 ч после замены жидкости. B), C), и D) изменение pH во время периодов между моментами замены воды вне диализного мешка.

Фиг.2. OMLA 31 (диализный мешок) - изменения pH. Это тот же тип эксперимента, какой представлен на Фиг.1, но вместе с OMLA 31. Воду меняли через 6, 46 и 88 часов. Присутствует меньше низкомолекулярных компонентов, и эффект, как ожидалось, слабее и медленнее. Фиг.2A представляет значение pH через 1 ч после замены жидкости, и Фиг.2B-2D демонстрируют изменение pH во время периодов между моментами замены воды вне диализного мешка.

Фиг.3. Профиль высвобождения свободной молочной кислоты из OMLA 31 (0,209 г), определенный с помощью титрования с помощью KOH с использованием магнитной мешалки в воде при 20°C. Фигура представляет количество кислот (OMLA низкой молекулярной массы и LA), растворенных в воде. Половина OMLA, вероятно, имеют низкую молекулярную массу, тогда как остальные растворяются медленно.

Фиг.4. A) Изменения значений pH (средних) вне диализного мешка: OMLA дает возможность поддерживать низкое значение pH в течение более продолжительного времени, чем LA. B) Профили высвобождения LA и OMLA из диализного мешка: Молочная кислота высвобождается из диализного мешка немедленно, в то время как 50% OMLA (более высокой молекулярной массы) высвобождается быстро, и 50% высвобождается медленно (средняя линия). OMLA более высокой молекулярной массы не гидролизуется в воде в течение продолжительного периода времени, поскольку средняя линия выше, чем самая нижняя линия (высвобождение кислот из OMLA).

Фиг.5. A) Проточная ячейка для суппозиториев при 37°C. B) Изменения pH акцепторной воды (при 37°C) как функция от времени в Примере 4.

Фиг.6. A) Проточная ячейка для суппозиториев при 37°C. Высвобождение кислот (% общий) из вагинальных суппозиториев не зависит от соотношения OMLA-желатина. B) Проточная ячейка для суппозиториев при 37°C. Благодаря самому низкому содержанию OMLA в вагинальном суппозитории, составляющем 0,1/3 г, снижение pH является самым маленьким. Таким образом, содержание OMLA в составе представляет собой фактор, который дает возможность регулирования pH.

Фиг.7. A) Высвобождение LA из геля в диализной магнитной ячейке при 37°C. Высвобождение OMLA-кислот из геля становится более продолжительным и не показывает исходного "всплеска", наблюдаемого для OMLA (Фиг.3). B) Изменения pH акцепторной воды (при 37°C) как функция от времени в Примере 7, в диализной магнитной ячейке при 37°C. pH акцепторной жидкости является неизменным в течение продолжительного периода времени благодаря медленному высвобождению OMLA-кислот из геля HEC.

Фиг.8. A) Колба с магнитной мешалкой при 37°C. Более низкая линия представляет собой высвобождение OMLA-кислот из диска EC, в то время как верхняя показывает, что часть OMLA, высвобожденных из диска, все еще не деградировали, и высвобождают кислоты только после полного гидролиза. B) Колба с магнитной мешалкой при 37°C. Медленное высвобождение OMLA и OMLA-кислот из диска происходит в результате уменьшения pH в течение очень продолжительного периода времени, несмотря на частое изменение акцепторной среды для очистки воды.

Фиг.9. Масс-спектрометрический ESI-анализ олигомеров LA, полученных нагреванием до 120°C для A) 10, B) 20, и C) 31 часа соответственно.

Фиг.10 Высвобождение молочной кислоты посредством гидролиза OMLA 30. Кислотное высвобождение, изображенное в процентном содержании общего кислотного содержания OMLA 30. Титрование проводили с помощью KOH. Эффект высвобождения кислот можно было наблюдать до 48 ч.

Фиг.11. Четыре различные составы лиофилизованных таблеток, содержащих соответственно различные мукоадгезионные полимеры; A (HMPC (a), тестировали in vivo), B (HMPC+MC (b)), C (HMPC+MC (c)) и D (HEC (d)), количество полимера приведено в Примере 15 для каждого состава. Высвобождение кислоты приведено в процентном содержании общего содержания кислот OMLA 30, титрованного против KOH.

Фиг.12A. Мониторинг введения OMLA 30 в составе вагинального суппозитория, демонстрирующий одновременно немедленный эффект, а также продолжительный эффект влияния на pH в вагинальном тракте.

Фиг.12B. Мониторинг введения OMLA 30 в составе лиофилизованной вагинальной таблетки, демонстрирующий несколько более медленный эффект влияния на снижение pH с общей продолжительностью 72 ч.

Фиг.12C. Мониторинг введения геля Лактал®, демонстрирующий немедленный эффект влияния на pH, но не демонстрирующий никакого стойкого эффекта влияния на поддержание низкого значения pH.

Фиг.12D. Мониторинг введения средства Виваг®, которое исходно увеличивает pH, а впоследствии снижает его. Понижающий эффект, по-видимому, присутствует в течение периода времени, составляющего чуть больше чем 12 ч.

Примеры

Пример 1

Получение олигомера молочной кислоты

Олигомеры молочной кислоты (OMLA) получают с помощью нагревания молочной кислоты (LA) торгового качества, содержащей 85% LA и 15% воды, при 120°C в открытых пробирках в течение различных периодов времени, таким образом олигомеризуя LA до различной степени и получая продукты различной вязкости. Номер OMLA-продукта (например, OMLA 12) указывает на то, сколько часов его нагревают.

Различные олигомеры охарактеризованы, как описано в Примере 9.

Пример 2

Высвобождение in vitro молочной кислоты из OMLA 12

Этот эксперимент демонстрирует эффективность OMLA как источника кислотных компонентов и эффективность при сохранении низкого значения pH в течение продолжительного периода времени.

Высвобождение кислотного компонента из OMLA (OMLA 12, образованный через 12 часов при 120°C). OMLA 12, 1 г, помещают в диализный мешок, который помещен в дистиллированную воду, 50 мл, при комнатной температуре. Воду постоянно перемешивают с помощью магнитной мешалки. pH воды измеряют с регулярными интервалами, после замены жидкости, а также в периоды между моментами замены. Через 3, 7 и 47 часов воду меняют на свежую. Результаты показаны на Фиг.1, где графики демонстрируют изменения pH, измеренные в воде вне диализного мешка. На Фиг.1A представлено значение pH через 1 ч после замены жидкости, и на Фиг.1B-1D показано изменение pH в периоды между моментами замены воды вне диализного мешка. Очевидно, что в экспериментальных условиях OMLA продуцирует кислоту в течение многих часов (дней).

Результаты указывают, что высвобождение кислотных компонентов из OMLA является постоянным и продолжительным.

Пример 3

Высвобождение in vitro молочной кислоты из OMLA 31

Эксперимент проводят с OMLA 31 идентично тому, как его проводили в Примере 2 (OMLA 31 образован через 31 час при 120°C), хотя воду вне диализного мешка меняли более часто (каждый час до 7 ч и позже через 21, 45 и 88 ч). Результаты показаны на Фигуре 2. На Фиг.2A представлено значение pH через 1 ч после замены жидкости, на Фиг.2B-2D показано изменение pH в периоды между моментами замены воды вне диализного мешка.

Выводы сделаны такие же, как приведенные в Примере 2. Кроме того, демонстрируется, что в зависимости от молекулярной массы OMLA уменьшение pH может быть больше или меньше: pH в интервале 3-4,5 легче поддерживать при использовании OMLA 31, в то время как с помощью OMLA 12 значение pH составляет ниже 3 в течение продолжительных интервалов времени.

Пример 4

Титрование свободных карбоксильных групп в OMLA

Этот эксперимент демонстрирует кислотность OMLA в виде содержания карбоксильных групп и оценивает скорость гидролиза OMLA до свободной LA.

209 мг OMLA 31 суспендируют в чистой воде при 20°C, раствор титруют с помощью KOH (0,01 M) до получения нейтрального раствора (что подтверждают с помощью индикатора pH). Количество KOH, необходимое для нейтрализации раствора в нулевой момент времени эквивалентно приблизительно 100 мг LA. Когда при спонтанном продуцировании LA понижается pH, то с регулярными интервалами добавляют больше KOH для поддержания раствора в нейтральном состоянии. Результаты показаны на Фигуре 3 и демонстрируют, что с течением времени осуществляется скорее постоянное продуцирование LA-эквивалентов из OMLA 31, несколько мг в час в условиях нейтрального раствора. (Ожидается, что все OMLA 31 будет гидролизовано, когда будет насчитываться приблизительно 230-240 мг LA.)

Результаты демонстрируют, что деградация OMLA до свободной LA происходит медленно, но исходная кислотная среда продуцируется благодаря свободным карбоксильным группам OMLA.

Пример 5

Сравнение высвобождения in vitro молочной кислоты из молочной кислоты и OMLA 30 соответственно через диализную мембрану

Эксперимент демонстрирует различие между LA и OMLA по отношению к способности поддержания постоянного кислотного pH и доказывает, что гидролиз OMLA в LA происходит медленно. 200 мг LA или OMLA помещают в диализные мешки. Мешки погружают в 50 мл воды (37°C) и перемешивают при той же температуре в течение 48 часов. Через 3, 6, 24 и 48 часов акцепторную жидкость удаляют и заменяют на свежую воду. pH измеряют через регулярные интервалы времени. Жидкость титруют с помощью 0,1 M или 0,01 M KOH для измерения того, насколько много высвобождается эквивалентов LA. Затем добавляют избыток KOH и через 24 часа раствор титруют с помощью 0,1 или 0,01 HCl. Это делают для оценки того, насколько много полимера растворяется, но не подвергается гидролизу. Результаты представлены на Фиг.4A. pH измеряют вне диализных мешков каждый час в течение интервала времени 1-10 часов и периодически в период до 48 часов (Фиг.4B).

LA высвобождается из диализного мешка немедленно, в то время как 50% OMLA (часть с меньшей молекулярной массой и свободная LA) высвобождается быстро, и остальная часть OMLA высвобождается медленно. Часть OMLA, которая диффундирует через диализную мембрану, но не высвобождает LA, можно измерить после полного гидролиза с помощью KOH (средняя линия, Фиг.4A). Если OMLA помещают в диализный мешок, то медленное высвобождение кислотных компонентов позволяет поддерживать постоянное кислотное pH в течение продолжительного времени, несмотря на частую замену воды вне диализной мембраны. LA сама по себе не способна поддерживать кислотное pH постоянным, поскольку она вся через короткий промежуток времени оказывается в акцепторной среде и удаляется, в то время как акцепторную жидкость заменяют. Это доказывает, что OMLA подходит для поддержания постоянной кислотной среды, и этот эффект невозможен при использовании LA.

Пример 6

Высвобождение in vitro молочной кислоты из состава, содержащей OMLA 16

Препарат вагинальных суппозитореиев[г]OMLA 161Желатин0,35Вода0,3Глицерин1,35

OMLA смешивают вместе с частью глицерина. Остальные вещества смешивают и нагревают до растворения желатина и добавляют к смеси глицерин и OMLA. После гомогенизации смесь заливают в формы для вагинальных суппозиториев и охлаждают.

Вагинальные суппозитории (2,5 г) помещают в Ph. Eur. проточный аппарат для тестирования растворимости суппозиториев и проводят тест на высвобождение. Акцептором является вода (37°C, скорость потока составляет 12,5 мл/ч). Через 2, 4, 6, 8 и 10 ч жидкость собирают и измеряют содержание LA и pH. Профиль высвобождения LA, а также pH воды показаны на Фиг.5A и 5B. Несмотря на быструю дезинтеграцию и растворение желатина из вагинальных суппозиториев, высвобождение кислоты продолжается в течение продолжительного периода времени. Высвобождение кислот приводит в результате к получению низкого pH в течение продолжительного периода времени, несмотря на тот факт, что все время свежая вода течет через камеру - в это время сама LA будет полностью удаляться.

Другой эксперимент проводят, как описано выше, с различными количествами OMLA в вагинальных суппозиториях, от 33% (как в Примере 4) до 16,5%-3,3%. Результаты показаны на Фиг.6. Высвобождение кислот (% общий) из вагинальных суппозиториев не зависит от соотношения OMLA-желатин, хотя благодаря, по меньшей мере, самому низкому содержанию OMLA в вагинальном суппозитории 0,1/3 г уменьшение pH является наименьшим. Таким образом, содержание OMLA в составе представляет собой фактор, который дает возможность регулирования pH.

Вагинальный суппозиторий с желатиновой основой является подходящим составом, который дает возможность продолжительного высвобождения LA и уменьшения pH среды зависимым от соотношения OMLA-основа вагинального суппозитория образом.

Пример 7

Высвобождение in vitro молочной кислоты из OMLA 20 в гелевом составе

Гелевый препарат [г]OMLA 201Гидроксиэтилцеллюлоза (Натрозол 250)0,25Глицерин1,5Этанол 95% об./об.2,0Вода10

OMLA растворяют в смеси этанола и глицерина. Гидроксиэтилцеллюлозу суспендируют в воде и добавляют к раствору OMLA при интенсивном перемешивании. Затем смесь нагревают до 50°C и непрерывно перемешивают до образования геля. 1 г геля (10% OMLA) помещают в диализную магнитную камеру и перемешивают в 50 мл воды при 37°C. Через 1, 4, 8, 24 и 28 часов, 20 мл акцепторной жидкости заменяют на свежую воду (37°C). pH образцов измеряют и 10 мл образца титруют с помощью 0,01 M KOH и исходя из этого рассчитывают количество LA. Результаты показаны на Фиг.7.

Высвобождение OMLA-кислот из геля является продолжительным и не показывает исходного "всплеска" подобно наблюдаемому для вещества OMLA (Фиг.3), что происходит в результате медленного высвобождения OMLA из матрикса геля. Как следствие, pH акцепторной жидкости остается постоянным в течение продолжительного периода времени.

Пример 8

Высвобождение in vitro молочной кислоты из OMLA 10 в дисковой состав

Этот эксперимент демонстрирует, может ли OMLA вводиться в твердый недеградируемый состав, который может высвобождать кислотные компоненты и поддерживать пониженное pH среды.

Препарат в форме диска:

0,5 г OMLA 10 и 2,5 г этилцеллюлозы растворяют вместе в метиленхлориде. Смесь помещают в чашку Петри, где растворителю дают возможность испариться, и образуется диск.

Тест на высвобождение:

Диск разрезают на две части и обе помещают в отдельные колбы, наполненные 50 мл воды (37°C). Содержимое в колбах перемешивают при 37°C и удаляют жидкость через 1, 3, 6, 24, 48, 72 и 96 ч, и заменяют ее на свежую воду.

25 мл собранной жидкости титруют с помощью 0,01M KOH. С целью оценки количества кислотных компонентов, которые высвобождаются, но не гидролизуются, добавляют избыток основания и через несколько часов смесь титруют с помощью 0,01M HCl. На Фиг.8A представлены результаты теста высвобождения в отсутствии (образец A) и в присутствии стадии дополнительного гидролиза (образец B).

pH измеряют в оставшейся жидкости. На Фиг.8B представлены изменения значения pH в процессе развития эксперимента. Фиг.8A демонстрирует, что высвобождение кислотных компонентов из этилцеллюлозного диска происходит медленно и может поддерживаться в течение продолжительного периода времени (дни). Через 5 дней высвобождается только 15-20% LA. Это поддерживает постоянное кислотное pH акцепторной жидкости, несмотря на частичное изменение в свежей жидкости. Также высвобождаются OMLA, которые присутствует после полного гидролиза до LA (образец B). Через 4 дня почти 70% OMLA все еще остается в диске. Путем изменения композиции матрикса, можно достичь различной скорости высвобождения из диска.

Пример 9

Масс-спектрометрический анализ олигомеров LA, получаемых при нагревании до 120°C в течение 10, 20, и 31 часа соответственно.

Масс-спектрометрический ESI-анализ олигомеров LA, получаемых простым нагреванием LA до 120°C в течение различных периодов времени. Продукты получают путем нагревания LA до 120°C в течение 10 (Фиг.9A), 20 (Фиг.9B), и 31 (Фиг.9C) часа.

Пики соответствуют: 145: циклический димер и H⁺, 257: тример и Na⁺, 329: тетрамер и Na⁺, 401: пентамер и Na⁺, 473: гексамер и Na⁺, 545: гептамер и Na⁺, 617: октамер и Na⁺, 689: нонамер и Na⁺, 761: декамер и Na⁺, 833: ундекамер и Na⁺, 905: додекамер и Na⁺, 977: тридекамер и Na⁺, 1049: тетрадекамер и Na⁺, 1121: пентадекамер и Na⁺, 1193: гексадекамер и Na⁺, 1265: гептедекамер и Na⁺, и т.д.

"Распределение Гаусса" медленно смещается в сторону более высоких молекулярных масс с течением времени нагревания. Другие параметры помимо времени, например, температура, содержание воды, давление, катализатор и т.д. влияют на результат. При смешивании олигомерных продуктов, полученных различными путями, возможно получить олигомерные смеси любого состава.

Пример 10

Мукоадгезионные свойства составов, содержащих OMLA

Химические эксперименты и эксперименты, предшествующие получению состава, проводят с целью определения мукоадгезионной способности OMLA в форме геля или в других полутвердых формах (смотри таблицу ниже). Мукоадгезионную способность для OMLA оценивали для жидкости, геля, пластыря и пессария. Муко(Био)адгезивная способность приведена согласно визуальной аналоговой шкале VAS, градуированной на 5 групп, где 0 обозначает отсутствие мукоадгезионных свойств и 4 обозначает очень ярко выраженные мукоадгезионные свойства.

Мукоадгезионные свойства составов, содержащих OMLA

ЖидкостьГельПластырьПессарийМолочная кислота, чистоты 85%0---OMLA (в основном от тетрамера до октамера)-343OMLA (в основном от пентамера до декамера)-444

Лактат, содержащий 15% воды, представляет собой жидкость и присутствует только в жидкой форме, в то время как продукт OMLA становится более и более вязким при увеличении размера молекулы.

Пример 11

Синтез олигомеров молочной кислоты (OMLA)

Состав Composition исходного материала

L-молочную кислоту используют в качестве исходного материала. Состав исходного материала в водном растворе при 25 °C при равновесии представлен ниже:

TAHL1HL2HL3HL4HL5FAWР9065,5117,333,680,710,1376,7912,641,172

Свойство: Композиция, содержащая Молочные Кислоты и их Олигомеры в Равновесной Системе при 25°C

TA: Общая Концентрация Молочной Кислоты, % масс./масс.

HL1: Концентрация Мономерной Молочной Кислоты, % масс./масс.

HL2: Концентрация Лактоил-Молочной Кислоты, % масс./масс., MW=162

HL3: Концентрация ЛактоилЛактоил-Молочной Кислоты, % масс./масс., MW=234

HL4: MW=306

HL5: MW=378

FA: Прямая титруемая кислотность, рассчитанная как относящаяся к молочной кислоте

W: Процентное Содержание Воды, % масс./масс.

P: Степень Полимеризации (=TA/FA)

Замечание: Концентрации олигомеров не выражаются как относящиеся к молочной кислоте, но выражаются как относящиеся к компоненту.

Проводят две группы синтеза. В первой группе (001/1-5) синтез проводят с помощью нагревания вышеупомянутого исходного материала, содержащего 10% масс./масс. воды при 120°C в течение 18 ч (001/1), 24 ч (001/2), 31 ч (001/3), 41 ч (001/4) и 51 ч (001/5). Во второй группе (002/1-5), синтез проводят с помощью нагревания вышеупомянутого исходного материала, содержащего 10% масс./масс. воды при 140°C в течение 18 ч (002/1), 24 ч (002/2), 31 ч (002/3), 41 ч (002/4) и 51 ч (002/5). Нагревание проводят в открытых сосудах, давая воде возможность испариться.

Композиции полученных продуктов оценивают с помощью HPLC-анализа.

Определение олигомеров:

Молочная кислота, лактид, мезо-лактид и олигомеры молочной кислоты разделяют с использованием жидкостной хроматографии и количественно оценивают с помощью УФ-детекции. Реальное разделение олигомеров проводят с использованием градиентной системы, в которой концентрация органического растворителя увеличивается во время прогона. УФ-реакцию олигомеров измеряют при длине волны, при которой, как известно, поглощают карбонильные и сложноэфирные связи. Количественную оценку проводят с использованием метода внешних стандартов.

Определение свободной кислоты:

Свободную кислоту определяют с использованием электрода solvotrode и неводного титрования. Смесь метанола и хлорметана используют для растворения образцов. Титрование проводят с использованием метанолята калия в качестве титранта.

Кроме того, замечено, что присутствуют обе формы лактида L- и D-, т.e., как оказалось, синтез не является стереоселективным и, соответственно, предполагается, что присутствуют олигомеры обеих форм молочной кислоты, олигомер L-молочной кислоты, олигомер D-молочной кислоты, а также их смеси, включающие рацемические смеси.

Состав продуктов

Код образца/название Описание

1Lac2008.001/12Lac2008.001/23Lac2008.001/34Lac2008.001/45Lac2008.001/56Lac2008.002/17Lac2008.002/28Lac2008.002/39Lac2008.002/4 10Lac2008.002/5

Таблица 1
HPLC лактид и олигомеры молочной кислоты для образцов Lac2008.001/1-5:компонент12345мезо-лактид [% (масс./масс.)]<0,1<0,1<0,1<0,1<0,1D+L лактид [% (масс./масс.)]1,11,21,21,51,4HL [% (масс./масс.)]10,57,26,14,23,2HL₂ [% (масс./масс.)]17,212,59,86,45,2HL₃ [% (масс./масс.)]19,615,312,39,07,5HL₄ [% (масс./масс.)]16,013,912,29,98,3HL₅ [% (масс./масс.)]12,011,811,09,58,5HL₆ [% (масс./масс.)]8,69,89,58,98,2HL₇ [% (масс./масс.)]6,38,58,48,78,4HL₈ [% (масс./масс.)]4,26,06,67,27,1HL₉ [% (масс./масс.)]2,85,05,86,46,7HL₁₀ [% (масс./масс.)]1,93,44,55,76,2HL₁₁ [%(масс./масс.)]1,12,63,64,65,3HL₁₂ [% (масс./масс.)]0,81,92,94,04,7HL₁₃ [% (масс./масс.)]0,51,32,13,24,0HL₁₄ [% (масс./масс.)]0,21,01,72,73,4HL₁₅ [% (масс./масс.)]<0,10,51,01,92,8HL₁₆ [% (масс./масс.)]<0,10,50,81,82,5HL₁₇ [% (масс./масс.)]<0,1<0,10,81,62,2HL₁₈ [% (масс./масс.)]<0,1<0,10,61,51,9Сумма HL_{1 t/m 18} [% (масс./масс.)]102,9102,6101,098,797,5

HL соответствует мономеру молочной кислоты, HL₂ соответствует димеру, HL₃ соответствует тримеру и т.д.

Таблица 2
HPLC лактид и олигомеры молочной кислоты для образцов Lac2008.002/1-5:компонент12345мезо-лактид [% (масс./масс.)]<0,1<0,1<0,1<0,1<0,1D+L лактид [% (масс./масс.)]1,71,71,81,92,0HL [% (масс./масс.)]5,13,02,51,60,9HL₂ [% (масс./масс.)]7,75,64,12,72,0HL₃ [% (масс./масс.)]10,17,05,74,03,0HL₄ [% (масс./масс.)]10,88,16,54,63,5HL₅ [% (масс./масс.)]10,38,26,85,04,2HL₆ [% (масс./масс.)]9,17,96,75,34,4HL₇ [% (масс./масс.)]8,98,27,35,95,1HL₈ [% (масс./масс.)]7,26,76,35,34,9HL₉ [% (масс./масс.)]6,26,15,95,34,7HL₁₀ [% (масс./масс.)]5,56,15,65,14,5HL₁₁ [% (масс./масс.)]4,44,95,24,94,4HL₁₂ [% (масс./масс.)]3,64,24,44,44,3HL₁₃ [% (масс./масс.)]3,03,64,04,13,9HL₁₄ [% (масс./масс.)]2,53,13,23,83,6HL₁₅ [% (масс./масс.)]1,72,42,73,33,3HL₁₆ [% (масс./масс.)]1,42,22,53,43,1HL₁₇ [% (масс./масс.)]1,21,92,42,32,8HL₁₈ [% (масс./масс.)]0,91,52,02,52,5Сумма HL_{1 t/m 18} [% (масс./масс.)]101,292,285,675,467,3

Полный масс-баланс последних образцов не завершен, поскольку в образцах присутствуют олигомеры молочной кислоты большей массы. Они не включены в HL_{1 t/m 18}.

Вышеупомянутые результаты используют для расчета Mn и Mw и коэффициента полидисперсности. Получают следующие результаты.

Таблица 3.
Среднечисловая и средневесовая молекулярные массы и коэффициент полидисперсности для образцов 1-10 Образец 12345678910Mn32339647257362957172183910311138Mw426530661791848726992119815471682Коэффициент полидисперсности 1,321,341,401,381,351,271,381,431,501,48n4-65-86-97-118-127-109-1411-1714-2215-24

Число n указывает среднюю степень олигомеризации (т.e. n=4 относится к тетрамеру, 5 к пентамеру, 6 к гексамеру и т.д.).

Как видно из таблицы, представленной выше, увеличение времени реакции, а также увеличение температуры реакции приводит к увеличению средней молекулярной массы. Кроме того, коэффициент полидисперсности имеет тенденцию к увеличению со временем протекания реакции для групп, синтезированных при температуре реакции 140°C. Кроме того, кажется, что коэффициент полидисперсности является относительно независимым от времени реакции, когда применяется температура реакции 120°C.

Пример 12

Стабильность OMLA 30 в воде

OMLA 30 получают путем нагревания L-молочной кислоты при 120°C в течение 30 часов.

Применение олигомеров молочной кислоты в качестве депо-форм молочной кислоты зависит от их способности к гидролизу до молочной кислоты (или до меньших олигомеров) с целью поддержания кислого pH (или понижения pH) в среде.

Три образца OMLA 30 (1 г каждого) помещают в отдельные пробирки. Один из них смешивают с 0,1 г воды (образец B), другой с 0,5 г воды (образец C) и в один не добавляют воды (образец A). Все пробирки хранят в течение 1 недели при 60°C. В течение этого времени образцы, содержащие воду (B и C), подвергают растворению и получают менее вязкий раствор. В качестве контроля, образец A также хранят при 4°C (контроль).

Через 7 дней образцы из каждой пробирки титруют с помощью 0,1M KOH. Используемый объем KOH приведен в Таблице (объем P).

Затем добавляют избыток KOH в каждую пробирку и через два дня перемешивания предполагается, что образцы полностью гидролизованы. Избыток KOH титруют с помощью 0,1 M HCl. На основе титрования рассчитывают количество KOH, вступившего в реакцию с LA, полученной из полностью гидролизованного образца. Объем KOH, вступившего в реакцию с LA, полученной из полностью гидролизованного OMLA рассматривается как равный 100% (объем T).

F=(объем P×100%)/объем T

Только когда F представляет собой 100%, все титрующиеся карбоксильные группы будут принадлежать LA, в противном случае свободные карбоксильные группы OMLA вносят вклад в значение F.

ОбразецХранение (7 дней)Масса титрующегося образца[мг]Объем КОН [мл]F% свободных карбоксильных группF среднее (%)ПризнакА
без воды60°С2364,8514,8313Полутвердый1913,111,23ПолутвердыйВ
10% воды60°С28318,350,850Растворенный19812,449,2РастворенныйС
33% воды60°С39530,885,385,7Растворенный37429,3586,07РастворенныйА
без воды4°С2532,858,528,2Полутвердый2242,47,97Полутвердый

Из приведенных выше результатов, как оказалось, олигомерный продукт является относительно стабильным при отсутствии воды, и скорость гидролиза увеличивается с увеличением концентрации воды. Соответственно, ожидается, что могут быть получены достаточно стабильные фармацевтические композиции, содержащие олигомерные продукты, и что такие композиции после применения, например, во влагалище высвобождают молочную кислоту продолжительным образом, что, в свою очередь, может приводить к продолжительному эффекту, т.е. к продолжительному поддержанию во влагалище кислого pH.

Пример 13

Фармацевтические композиции, содержащие OMLA - лиофилизованные таблетки

Состав, подобный таблетке, получают подвергая воздействию гель с получением лиофилизованной формы в блистерной упаковке, как описано ниже.

Лиофилизованные таблетки используют в предварительном in vivo исследовании (смотри Пример 17)

Гель, подверженный лиофилизации [г]:

OMLA 3020Лактоза10Pharmacoat* 6cP20Вода 50* гипромеллоза USP (Shin-Etsu Chemical)

Получение:

Лактозу растворяют в воде и добавляют по частям гипромеллозу при интенсивном перемешивании. Когда полимер растворяется, к полученному в результате гелю добавляют OMLA и гель тщательно перемешивают.

Гель, содержащий OMLA, распределяют в блистерные ячейки (2 г на ячейку) и лиофилизуют. Получают следующие "таблетки":

Лиофилизованная таблетка (A) [мг]:

OMLA 30 400

Лактоза 200

Гипромеллоза 400

Лиофилизация:

В процессе применяют следующий режим работы:

Давление:0-2 ч - атмосферное 2-48 ч - 1 мбар

Температура:

Время (ч)°С0-2-402-17-2517-27-1027-42042-441044-462046-4820

Вариации

1. Гелевая композицияКачествоКоличествоOMLA 30 -20 (%)OMLA 10-30, OMLA Lac2008.003; 007;007; (+LA)2-30%Лактоза - 10%Другие сахара и сахарные спирты0-50%Pharmacoat 6cP-20%Другие типы гипромеллозы, гидроксиэтилцеллюлоза, натриевая соль кармелозы, метилцеллюлоза, другие желатинирующие и мукоадгезионные агенты #0-40%Вода - 50%С растворенными кислотами или противомикробными агентами15-90%II. Лиофилизованная таблеткаКачествоКоличествоРазмер цилиндра: диаметр - 1см,
высота - 1смЛюбая форма, подходящая для вагинального применения OMLA 30-400 мг/табТак же как для геля50-1000мгЛактоза - 200 мг-"- Гипромеллоза -"- III. Получение геля Лактозу растворяют в воде и по частям добавляют гипромеллозу с интенсивным перемешиванием.Лактоза может быть добавлена к готовому гелю гипромеллозы. Когда полимер растворяется, к полученному в результате гелю добавляют OMLA и гель тщательно перемешивают. Дисперсия OMLA в геле может проводиться при более высокой температуре (до 80°С). Гель, содержащий OMLA, помещают в блистерные ячейки (2г на ячейку) и лиофидизуют. Лиофилизацию можно проводить в других единых дозированных формах или на пластинах. В последнем случае диски (цилиндры) вырезают из лиофилизованного листа. IV. Лиофилизация Время - 48 ч24-60 ч Температура (от -40°С до 30°С)Заморозку можно проводить при более низкой температуре (например, -20°С). Наибольшая температура: 10-50°С. ДавлениеДо 20 мбар Время-температураМогут подходить различные схемы # как уже здесь приведено

Пример 14

In vitro-высвобождение молочной кислоты из лиофилизованных таблеток

Лиофилизованные таблетки, A, описанные в Примере 13, и содержащие OMLA 30, тестируют на предмет высвобождения молочной кислоты. Эксперимент проводят путем помещения 1/2 таблетки в диализный мешок (37°C), как описано здесь в Примере 2. Получают следующие результаты.

Высвобождение кислот из лиофилизованных таблеток, содержащих OMLA 30 (метод с использованием диализного мешка - 50 мл жидкости) 14.03.2008

Измерения рН

Лиофилизован
ная таблеткарН1,53,04,56,07,59,022,524,046,548,020% Pharmacoat 6cP3,032,923,233,153,523,303,163,113,353,27

Результаты для таблеток согласно вышеприведенной таблице показаны на фигуре 13 слева направо в каждом блоке.

Титрование с помощью КОН (кислоты рассчитывали, как молочную кислоту - общий %)

20% Pharmacoat 6cPВысвобожденные кислоты (%)Время (ч)369244820% Pharmacoat 6cP29,9944,3152,8785,4998,90

Результаты показаны на Фиг.10. Результаты показывают, что возможно поддержание низкого значения рН в течение периода времени, составляющего, по меньшей мере, 48 часов. Измерения рН и определение высвобожденных кислот (т.е. с использованием титрования с помощью КОН) согласуются между собой.

Пример 15

In vitro-высвобождение молочной кислоты из лиофилизованных таблеток, содержащих различные типы мукоадгезионных полимеров

В следующей таблице описана композиция лиофилизованных таблеток (и гелей, подвергнутоых лиофилизации). Таблетки содержат мукоадгезионные полимеры, которые улучшают адгезию таблеток на слизистой оболочке (например, на вагинальной слизистой оболочке) при введении.

А* (in vivo)BCDГель для лиофилизации (г)OMLA 3020202020Лактоза10101010Мукоадгезионный полимер:
типHPMC(a)HPMC+MC(b)HPMC+MC(c)HEC(d)количество2010515ВодаДо 100До 100До 100До 100Лиофилизованная таблетка (мг)OMLA 30400400400400Лактоза200200200200Мукоадгезионный полимер400200100300Общая масса (мг)1000800700900* - препарат, использованный in vivo; результаты представлены подробно выше (смотри пример 14)

HPMC (a)

гипромеллоза - Pharmacoat 606 - 6 cP (Shin-Etsu Chemical)

HPMC+MC (b)

гипромеллоза и метилцеллюлоза - Metolose 60SH - 50 cP (Shin-Etsu Chemical)

HPMC+MC (c)

гипромеллоза и метилцеллюлоза - Metolose 65SH - 4000 cP (Shin-Etsu Chemical)

HEC (d)

гидроксиэтилцеллюлоза - Natrosol L - 76 cP (Aqualon)

Высвобождение кислот из лиофилизатов исследуют, как описано выше в Примере 14 для лиофилизованных таблеток, содержащих Pharmacoat 606.

Измерения рН

СоставрНВремя (ч)1,53,04,56,07,59,022,524,046,548,0A (in vivo)3,032,923,233,153,523,303,163,113,353,27В3,122,963,233,063,273,192,993,053,123,14С2,912,783,153,093,493,283,093,113,323,30D3,012,953,052,963,343,293,293,333,483,41

Результаты для композиций A-D показаны на фигуре 14 слева направо в каждом блоке.

Титрование с помощью КОН (кислоты рассчитывали, как молочную кислоту - общий %)

СоставВысвобожденные кислоты (%)Время
(ч)3692448A (in vivo)29,9944,3152,8785,4998,90В22,8542,1252,1989,01104,38С35,1648,6857,8674,0686,16D29,1357,0778,6493,40104,44

Результаты показаны на Фиг.11. Результаты показывают, что все тестированные композиции способны поддерживать понижение рН в течение, по меньшей мере, 48 часов. Высвобождение молочной кислоты из композиций варьируется. Композиция D, как оказалось, высвобождает молочную кислоту быстрее, чем другие композиции, но все же продолжительно, что дает возможность поддержания пониженного значения pH в течение, по меньшей мере, 48 часов. Соответственно, выбор мукоадгезионного полимера может иметь некоторое влияние на скорость высвобождения молочной кислоты из олигомеров.

Пример 16

Фармацевтические композиции, содержащие вагинальные суппозитории, содержащие OMLA

Вагинальные суппозитории получают и используют в предварительном in vivo-исследовании (смотри пример 17)

Сформованный вагинальный суппозиторий [мг]:

OMLA 30 - 500

Макрогол (Macrogol) 6000 - 2000 (продукт фирмы Hoechst)

Макрогол 6000 (полиоксиэтиленгликоль мол.масс. 6000 Да) плавят при 50°C и добавляют OMLA. Теплую массу переносят в единые дозированные формы и оставляют для охлаждения.

Вариации

I. КомпозицияКачествоКоличествоOMLA 30 - 20(%)OMLA 10-30, OMLA Lac2008.003; 007;007; (+LA)2-50%Макрогол 6000 - 80%Другие твердые макроголы или их смесь с полутвердыми или жидкими макроголами50%-98%II. РазмерКачествоКоличествоТорпедоподобная форма
Масса - 2,5 гЛюбая форма, подходящая для вагинального примененияДо 5 гIII. Получение Макрогол 6000 плавят при 50°С и добавляют OMLAМожет применяться температура 40-100°С Теплую массу переносят в единую дозированную форму и оставляют охлаждатьсяОхлаждение может быть быстрым

Пример 17

Предварительные in vivo-исследования

Исследование проводят с целью исследования различных составов OMLA по сравнению с двумя продаваемыми лекарственными средствами (Vivag и Lactal-гелем).

Прототип вагинального суппозитория (пессарий, 500 мг) и лиофилизованную вагинальную таблетку (400 мг) используют в разовом in-vivo-эксперименте с самоконтролем с помощью здоровых женщин-волонтеров (возраст 56). Вагинальное pH исследуют в течение периода времени 36-96 ч. Как можно видеть из результатов, представленных на фигурах 12A-12D, визуализирующих результаты использования композиции с применением вагинального суппозитория (A), вагинальной таблетки (B), геля Lactal® (C, 225 мг LA) и Vivag® (D)), составы, содержащие OMLA, показывают настолько более продолжительный эффект поддержания низкого pH в вагинальном тракте, насколько это возможно, по сравнению с гелем Lactal или Vivag, которые временно снижают pH, но при этом не демонстрируют продолжительности поддержания pH на уровне низких значений. Уровень низких значений pH благодаря вагинальным таблеткам, содержащим OMLA, можно детектировать в течение периода времени до 72 ч при отсутствии информации о субъективном дискомфорте. Можно увидеть, наблюдается более продолжительный эффект благодаря вагинальным суппозиториям, содержащим OMLA, с информацией о незначительном дискомфорте. Таким образом, pH-понижающий эффект с продолжительностью до 60-80 ч подтверждает ожидаемые мукоадгезионные свойства, а также хорошую субъективную переносимость. Исследуют индивидуальные составы, как можно увидеть ниже;

A OMLA30-вагинальный суппозиторийB OMLA30-вагинальная таблеткаГель Lactal® (225 мг LA)Vivag®t (ч)PHt (ч)PHt (ч)PHt (ч)pH04,404,404,404,443,644,143,644,783,683,684,184,4124,1123,6124,4124,4244,1243,6244,4244,1284,1283,6 284,4324,1323,6 364,1363,6 484,1484,1 524,1524,1 564,1564,1 604,1604,1 724,1724,4 764,1764,4 804,25804,4 844,4844,4 964,4964,4

В A: Дискомфорт: День 1; Небольшое жжение и выделения. День 2; Небольшие выделения. День 3-5; Отсутствие субъективного дискомфорта.

Переносимость: Небольшой дискомфорт

Приемлемость: Хорошая, но не оптимальная

In B: Дискомфорт: День 1-5; Отсутствие субъективного дискомфорта.

Переносимость: Очень хорошая.

Приемлемость: Очень хорошая.

In C: Дискомфорт: День 1; Небольшое жжение и выделения. День 2; Отсутствие дискомфорта.

Переносимость: Хорошая.

Приемлемость: Хорошая.

In D: Дискомфорт: День 1; Отсутствие дискомфорта.

Переносимость: Хорошая.

Приемлемость: Хорошая.

Пример 18

Протокол клинического исследования

Программа клинического исследования инициирована для демонстрации использования OMLA при БВ и родственных заболеваниях. В исходном исследовании исследуют группу согласившихся участвовать здоровых женщин в постклимактерическом периоде. Главной целью является оценка переносимости и субъективной приемлемости различных галеновых составов, содержащих олигомеры молочной кислоты, по сравнению с продаваемыми продуктами, такими как Vivag и гель Lactal. Дополнительной целью является исследование аспекта безвредности галеновых составов, содержащих олигомер молочной кислоты.

Полный план исследования. Исследование проводят как одноцентровое испытание среди здоровых женщин в пред- и постклимактерическом периоде. Перед началом эксперимента субъекты подвергаются гинекологическому и клиническому обследованию, включающему анамнез, основные показатели состояния организма и анализ мочи за 10 дней до первого дня исследования. В период исследования субъекты дают бальную оценку переносимости и приемлемости, а также проводят оценку вагинального pH. Исследуемые препараты лактата распределяют при 1-м визите. Исследуемые параметры представляют собой собственные измерения переносимости, приемлемости и pH. Введение другого OMLA и контрольного препарата отделены сроком, составляющим, по меньшей мере, 1 неделю. Последующее наблюдение за безвредностью препарата, включающее клиническое обследование и анализ мочи, проводят через 2-10 дней после последнего вагинального применения лактата.

Описание исследуемого лекарственного средства. Исследуемые препараты предоставлены в форме вагинального суппозитория или таблетки (с молочной кислотой) с содержанием 400 - 600 мг эквивалентов молочной кислоты. Составы содержат вспомогательные вещества, которые широко используются (PhEur) в вагинальных препаратах: гидроксипропилцеллюлоза, макрогол. Все субъекты получают 1-5 препаратов во время исследования (максимум 5 недель), получение которых отделено друг от друга, по меньшей мере, на 7 дней. Исследуемое лекарственное средство поставляют в место исследования с номерами лота/упаковки, сертификатом анализа и датами последнего/повторного испытания.

Активное соединение: Олигомер молочной кислоты

Дозированный состав: Вагинальный суппозиторий или таблетка

Концентрация: 400 мг и 600 мг (эквивалентов молочной кислоты)

Производитель: Фармацевтический факультет, Университет Гданьска, Польша

Анализ: Микробный тест и тесты контроля качества согласно Ph. Eur.

(категория 2)

Схемы дозировки исследуемых лекарственных средств

Каждый субъект в течение всего времени получает максимум 5 различных разовых галеновых составов исследуемого препарата (400-600 мг эквивалентов молочной кислоты), получение которых отделено одно от другого, по меньшей мере, на 7 дней. В качестве контроля служат продаваемые продукты, такие как Vivag и гель Lactal.

Продолжительность лечения. Продолжительность исследования составляет 4-8 недель, включая период перед исследованием, период исследования и последующий период.

Процедура рандомизации. Субъекты оценивают лечение в свободной форме. Неясность отсутствует.

Оценка данных. Субъекты дают бальную оценку переносимости и приемлемости, а также проводят собственную оценку pH. Полную программу клинического исследования проводят согласно нормативным требованиям.

Конкретные варианты осуществления

1. Применение одного или несколько олигомеров молочной кислоты для получения состава, предназначенного для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций.

2. Применение по п.1, где инфекция представляет собой бактериальную инфекцию, такую как бактериальный вагиноз, неспецифичный кольпит, старческий кольпит, цервицит и уретрит.

3. Применение по п.1, где инфекция представляет собой грибковую инфекцию, такую как кандидоз (Candida albicans), криптококкоз, актиномикоз.

4. Применение по п.1, где инфекция представляет собой вирусную инфекцию, такую как Вирус Иммунодефицита Человека (ВИЧ), Вирус Простого Герпеса (ВПГ), Вирус Папилломы Человека (ВПЧ).

5. Применение по п.1, где один или несколько олигомеров молочной кислоты имеет следующую формулу II

где n представляет собой целое число от 1 до 20, такое как, например, от 2 до 20, от 3 до 20, от 1 до 15, от 2 до 15, от 3 до 15, от 1 до 10, от 2 до 10, от 3 до 10, или от 4 до 9, где R представляет R¹R²N-, R¹O-, или R¹S-,

R¹, R² и R³ представляют собой одинаковые или различные группы и выбраны из H, алкила C₁-C₆, включающего метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, или арила, включающего бензил, и

их фармацевтически приемлемые соли.

6. Применение по любому из предыдущих пп., где один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют при 25°С собственную вязкость, в пределах 10^-3-10¹² Па·с, такую как 10^-1-10⁹ Па·с, 1-10⁵ Па·с, которую определяли с помощью реометра.

7. Применение по любому из предыдущих пп., где один или несколько олигомеров молочной кислоты высвобождают молочную кислоту в течение периода времени, составляющего, по меньшей мере, 8 часов, по меньшей мере, 12 часов, такого периода времени, как 16 часов, по меньшей мере, 20 часов, по меньшей мере, 24 часов, по меньшей мере, 36 часов, по меньшей мере, 2 дня, по меньшей мере, 3 дня, по меньшей мере, 4 дня, по меньшей мере, 5 дней, по меньшей мере, 6 дней, или, по меньшей мере, 7 дней, под воздействием воды при комнатной температуре.

8. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой тример молочной кислоты (n=2).

9. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой тетрамер молочной кислоты (n=3).

10. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой пентамер молочной кислоты (n=4).

11. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой гексамер молочной кислоты (n=5).

12. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой гептамер молочной кислоты (n=6).

13. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой октамер молочной кислоты (n=7).

14. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой нонамер молочной кислоты (n=8).

15. Применение по любому из предыдущих пп., где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой декамер молочной кислоты (n=9).

16. Применение по любому из предыдущих пп., где состав включает, по меньшей мере, 0,01% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты.

17. Применение по любому из предыдущих пп., где состав содержит один или несколько олигомеров молочной кислоты в количестве, составляющем примерно от 0,02% до 100% масс./масс., в таком количестве, как, например, примерно от 0,1% примерно до 95% масс./масс., примерно от 1% примерно до 95% масс./масс., примерно от 5% примерно до 95% масс./масс., примерно от 10% примерно до 90% масс./масс., примерно от 15% примерно до 90% масс./масс.

18. Применение по любому из предыдущих пп., где состав создан для вагинального введения.

19. Применение по любому из предыдущих пп., где состав представляет собой твердый, полутвердый или жидкий состав.

20. Применение по любому из предыдущих пп., где галеновый состав представлен в форме тампона, пессария, вагинального аэрозоля, вагинальной прокладки, вагинального геля, вагинальной вставки, вагинального пластыря, вагинального кольца, вагинальной губки, вагинального суппозитория, вагинального крема, вагинальной эмульсии, вагинальной пены, вагинального лосьона, вагинальной мази, вагинального порошка, вагинального шампуня, вагинального раствора, вагинального спрея, вагинальной суспензии, вагинальной таблетки, вагинальной палочки, вагинальной пенки, вагинального диска, полупроницаемого упаковочного материала и любой их комбинации.

21. Применение по любому из предыдущих пп., где состав дополнительно содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

22. Применение по п. 21, где одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ выбирают из группы, состоящей из производных целлюлозы, таких как гидроксипропилметилцеллюлоза (HPMC), метилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза (HEC), гидроксипропилцеллюлоза (HPC), этилгидроксиэтилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (Na CMC), производных крахмала, таких как умеренно сшитый крахмал, акриловых полимеров, таких как карбомер и его производные (Поликарбофил, Карбопол®, и т.д.); из полиэтиленоксида (PEO), хитозана (поли-(D-глюкозамина); природных полимеров, таких как желатин, альгинат натрия, пектин, склероглюкан, трагакант, геллановая камедь, ксантановая смола или гуаровая камедь, сополимеров (метилвинилового эфира/малеинового ангидрида), микрокристаллической целлюлозы/ Авицела®) и кросскармеллозы.

23. Применение по п.22, где концентрация одного или нескольких фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ находится в интервале 0,05-10 процентов по массе, таком как 0,1-5 процентов от массы состава.

24. Применение по п.22 или 23, где одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ представляют собой вагинальные мукоадгезивно-стимулирующие агенты и/или агенты, регулирующие вязкость.

25. Применение по любому из предыдущих пп., где состав дополнительно содержит один или несколько антиадгезионных агентов.

26. Применение по п.25, где количество антиадгезионного агента находится в интервале 0,01-10 процентов по массе, таком интервале, как 0,1-5 процентов от массы состава.

27. Применение по любому из предыдущих пп., где состав содержит один или несколько дополнительных противомикробных агентов.

28. Применение по п.27, где противомикробный агент выбирают из группы, состоящей из антибиотиков, таких как клиндамицин или метронидазол, из эфирных масел, таких как масло чайного дерева, катионов или химических элементов, таких как Hg, Cu, Pb, или Ag, из полиеновых антимикотиков, имидазола, триазола, аллиаминов, эхинокандина, ацикловира, амантадина, спиртов, четвертичных соединений аммония, борной кислоты, хлоргексидин глюконата, пероксида водорода, гидроперита, иода, меркурохрома, октенина дигидрохлорида, фенольных соединений (карболовой кислоты), хлорида натрия, гипохлорита натрия, ноноксинола и любой их комбинации.

29. Олигомер молочной кислоты формулы I

где n представляет собой целое число от 2 до 20, такое как, например, от 3 до 20, от 2 до 15, от 3 до 15, от 2 до 10, от 3 до 10, от 4 до 10 или от 4 до 9.

30. Олигомер по п.29, при условии, что олигомер не является тетрамером молочной кислоты, полученным, как описано ниже: к раствору сложного эфира тетрамера молочной кислоты (0,6982 г) (1,9268 миллимоль) в метиленхлориде (25 мл) по каплям добавляли смешанный раствор трифторуксусной кислоты (2,5 мл) и метиленхлорида (2,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа по окончании добавления по каплям; насыщенный раствор раствора гидрокарбоната натрия (30 мл) добавляли для регулирования значения pH водного слоя до pH 8, затем добавляли туда насыщенный хлорид аммония (50 мл) для регулирования значения pH водного слоя до pH 6; полученную в результате смесь экстрагировали три раза с помощью диэтилового эфира (100 мл); экстрагированный раствор содержал почти все примеси и небольшое количество вещества, представляющего интерес; к оставшемуся водному слою добавляли по каплям 1 н. хлорводородную кислоту (5 мл), охлажденную до 0°C, так чтобы урегулировать значение pH водного слоя до pH 2-3; слой экстрагировали три раза с помощью метиленхлорида (150 мл); в это время изменяли pH и, таким образом, 1 н. хлорводородную кислоту, охлажденную до 0°C, использовали для поддержания значения pH водного слоя, составляющего pH 2-3; полученную в результате смесь сушили на безводном сульфате магния в течение дня и ночи, концентрировали и выделяли с помощью колоночной хроматографии (проявляющий растворитель:гексан:диэтиловый эфир=1:4) с получением тетрамера молочной кислоты (0,2047 г) (выход:34,7%) в виде бесцветного масла.

31. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой тример молочной кислоты (n=2).

32. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой тетрамер молочной кислоты (n=3).

33. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой пентамер молочной кислоты (n=4).

34. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой гексамер молочной кислоты (n=5).

35. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой гептамер молочной кислоты (n=6).

37. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой октамер молочной кислоты (n=7).

38. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой нонамер молочной кислоты (n=8).

39. Олигомер молочной кислоты по п.29 или 30, где, по меньшей мере, 25% масс./масс., по меньшей мере, 30% масс./масс., по меньшей мере, 40% масс./масс., по меньшей мере, 50% масс./масс., по меньшей мере, 60% масс./масс., по меньшей мере, 70% масс./масс., по меньшей мере, 80% масс./масс. или, по меньшей мере, 90% масс./масс. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты представляет собой декамер молочной кислоты (n=9).

40. Состав, содержащий один или несколько олигомеров молочной кислоты, определенных по любому из пп.1-39, и одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

41. Состав по п. 40, содержащий i) один или несколько олигомеров молочной кислоты или их производные, определенных по любому из пп.1-40, ii) комбинацию одного или нескольких олигомеров молочной кислоты или их производные, определенных по любому из пп.1-40, или iii) комбинацию i) и/или ii) и/или молочную кислоту, для профилактики и/или лечения микробной инфекции по любому из пп.1-4.

41. Состав по п.39 или 40, предназначенный для интравагинального или трансвагинального введения.

42. Состав по любому из пп.39-41, который дополнительно содержит противобактериальный агент, выбранный из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина.

43. Состав по любому из пп.39-42, дополнительно содержащий один или несколько противобактериальных агентов, предназначенных для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, определенных по пп.1-4.

44. Состав по п.45, где противобактериальный агент выбран из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина.

45. Состав по п.43 или 44, где количество противобактериального агента находится в интервале от 5 мг до 1000 мг на дозу.

46. Состав по любому из пп.43-45, где противобактериальный агент, выбранный из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина, азитромицина или эритромицина, вводится внутрь тампона.

47. Состав по любому из пп.39-46, дополнительно содержащий один или несколько антибиотических агентов широкого спектра действия.

48. Состав по п.47, где антибиотический агент широкого спектра действия выбран из группы, состоящей из клиндамицина, тетрациклина, амоксициллина, ампициллина, эритромицина, доксициклина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина, цефлотоксина, которые предназначены для профилактики и/или лечения гонореи или хламидийных инфекций.

49. Состав по п.48, где количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале от 100 мг до 3000 мг на дозу.

50. Состав по любому из пп.47-49, где антибиотический агент широкого спектра действия выбран из группы, состоящей из тетрациклина, амоксициклина, ампициллина, лумефлоксацина, норфлоксацина, афлоксама, ципрофлаксина, азитромицина или цефлотоксина, которые предназначены для профилактики и/или лечения гонореи.

51. Состав по п.50, где количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале от 400 мг до 3000 мг на дозу.

52. Состав по п.50 или 51, представленный в форме тампона.

53. Состав по любому из пп.47-52, дополнительно содержащий один или несколько антибиотических агентов широкого спектра действия, выбранных из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина и эритромицина, которые предназначены для лечения хламидийных инфекций.

54. Состав по п.53, где количество антибиотического агента широкого спектра действия находится в интервале от 100 мг до 2000 мг на дозу.

55. Состав по п.53 или 54, представленный в форме тампона.

56. Состав по любому из пп.39-55, который дополнительно содержит антихламидийный агент, выбранный из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина и эритромицина.

57. Состав по любому из пп.39-56, который дополнительно содержит противогрибковый агент, выбранный из группы, состоящей из миконазола, терконазола, изоконазола, фентиконазола, флуконазола, нистатина, кетоконазола, клотримазола, бутоконазола, эконазола, тиоконазола, итраконазола, 5-фторурацила и метронидазола.

58. Состав по п.57, где противогрибковый агент, предназначенный для лечения кандидоза, представлен в количестве на дозу, которое находится в интервале от 0,1 мг - 2000 мг.

59. Состав по п.57 или 58, где один или несколько противогрибковых агентов выбраны из группы, состоящей из кетоконазола, миконазола и метронидазола, и, необязательно, агент вводится в тампон.

60. Состав по любому из пп.39-59, который дополнительно содержит противовирусный агент, выбранный из группы, состоящей из ацикловира, фемцикловира, валацикловира и AZT.

61. Состав по любому из пп.39-60, дополнительно содержащий противовирусный агент.

62. Состав по п.61, где противовирусный агент выбран из группы, состоящей из ацикловира, фемцикловира, валацикловира и AZT.

63. Состав по п.61 или 62, где количество противовирусного агента находится в интервале от 100 мг до 1200 мг на дозу.

64. Состав по любому из пп.61-63, где противовирусный агент представляет собой ацикловир и вводится внутрь тампона.

65. Состав по любому из пп.39-64, который дополнительно содержит противотрихомонадный или противопаразитарный агент, выбранный из группы, состоящей из метронидазола и клотримазола.

66. Состав по любому из пп.39-65, дополнительно содержащий метронидазол, предназначенный для лечения трихомоноза.

67. Состав по п.66, где количество метронидазола находится в интервале от 10 мг до 750 мг на дозу.

68. Состав по любому из пп.39-67, где фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество представляет собой липофильный или гидрофильный носитель.

69. Состав по пп.39-68 для интравагинальной доставки, где состав содержит один или несколько липофильных или гидрофильных носителей, и один или несколько мукоадгезионных агентов, общая концентрация которых находится в интервале от 60 до 90% масс./масс. и от 5 до 25% масс./масс. соответственно.

70. Состав по пп.39-69 для трансвагинальной доставки, где состав содержит один или несколько липофильных или гидрофильных носителей, и один или несколько мукоадгезионных агентов, и один или несколько интенсификаторов проникновения или стимуляторов поглощения с общими концентрациями, которые находятся в интервале от 60 до 90% масс./масс., от 5 до 25% масс./масс., и от 5 до 20% масс./масс. соответственно.

71. Состав по любому из пп.39-70, дополнительно содержащий один или несколько липофильных носителей в виде полусинтетических глицеридов насыщенных жирных кислот, содержащих 8-18 атомов углерода.

72. Состав по любому из пп.39-71, дополнительно содержащий гидрофильный носитель полиэтиленгликоль с молекулярной массой от 400 до 6000.

73. Состав по любому из пп.39-72, где концентрация полиэтиленгликоля находится в интервале от 60 до 90% масс./масс.

74. Состав по любому из пп.39-73, дополнительно содержащий мукоадгезионные агенты альгинат, пектин или гидроксипропилметилцеллюлозу.

75. Состав по любому из пп.39-74, где концентрация гидроксипропилметилцеллюлозы находится в интервале от 5 до 20% масс./масс.

76. Состав по любому из пп.39-75, где интенсификатор проникновения представляет собой поверхностно-активное вещество, соль желчной кислоты или этоксигликоль.

77. Состав по п.76, где концентрация этоксигликоля находится в интервале от 5 до 30% масс./масс.

78. Состав по любому из пп.39-77, где фармацевтический агент вводится в устройство в виде системы доставки лекарственного средства с контролируемым высвобождением.

79. Устройство для доставки состава, определенного по любому из п.п.39-78, предназначенной для профилактики и/или лечения гинекологической инфекции, определенной по любому из пп.1-4.

80. Устройство по п.79, которое является интравагинальным.

81. Устройство по п.79 или 80, где состав вводится интравагинально или трансвагинально.

82. Устройство по любому из пп.79-81, где фармацевтический агент вводится в устройство в виде системы доставки лекарственного средства с контролируемым высвобождением.

83. Набор, предназначенный для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, определенных по любому из пп.1-4, который включает первый и второй компонент, где первый компонент включает состав, определенный по любому из пп.39-78, и второй компонент включает инструкции по применению состава.

84. Набор по п.83, где первый компонент включает состав, определенный по любому из пп.39-78, и второй компонент включает средство для введения состава.

85. Набор по п.84, где дополнительный третий компонент включает инструкции по применению состава.

86. Набор по п.84 или 85, где состав представлен в форме вагинального устройства, и средством для введения является аппликатор.

87. Упаковка или контейнер для хранения набора, определенного по любому из пп.83-86.

88. Способ профилактики и/или лечения гинекологической инфекции, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или нескольких олигомеров молочной кислоты, определенных по любому из пп.29-38, необязательно в виде состава, определенного по любому из пп.39-78.

89. Способ терапии, профилактики и/или лечения запаха вагинальных выделений, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы одного или нескольких олигомеров молочной кислоты, определенных по любому из пп.29-38, необязательно в виде состава, определенного по любому из пп.39-78.

90. Способ по п.89, где состав представляет собой санитарно-гигиеническое устройство.

Реферат

Предложено применение одного или нескольких олигомеров молочной кислоты в качестве активного ингредиента для приготовления лекарственного средства для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, в котором один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют формулу (I), где n представляет собой целое число от 2 до 50, и соответствующая фармацевтическая композиция. Показан немедленный и продолжительный (чуть более 12 час) эффект средства на рН в вагинальном тракте. Обеспечение кислотной среды в терапии гинекологических инфекций (такой как бактериальный вагиноз, неспецифичный кольпит, старческий кольпит, цервицит и уретрит, грибковой инфекции, такой как кандидоз - Candida albicans, криптококкоз, актиномикоз, или вирусной инфекции, такой как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирус простого герпеса (ВПГ), вирус папилломы человека (ВПЧ)) допускает менее частое введение составов по сравнению с известными в настоящее время. 2 н. и 20 з.п. ф-лы, 14 ил., 18 пр-ров.

Формула

1. Применение одного или нескольких олигомеров молочной кислоты в качестве активного ингредиента для приготовления лекарственного средства для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, в котором один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют следующую формулу I

где n представляет собой целое число от 2 до 50.

2. Применение по п.1, в котором инфекция представляет собой бактериальную, грибковую или вирусную инфекцию.

3. Применение по п.2, в котором бактериальная инфекция представляет собой инфекцию, выбранную из бактериального вагиноза, неспецифического кольпита, сенильного кольпита, цервитита и уретрита.

4. Применение по п,2, в котором грибковая инфекция представляет собой инфекцию, выбранную из кандидоза (Candida albicans), криптококкоза, актиномикоза.

5. Применение по п.2, в котором вирусная инфекция представляет собой инфекцию, выбранную из вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вируса простого герпеса (HSV), вируса папилломы человека (HPV).

6. Применение по п.1, где n представляет собой целое число от 2 до 25, от 2 до 20, от 3 до 25, от 3 до 20, от 2 до 15, от 3 до 15, от 2 до 10, от 3 до 10, от 4 до 10 или от 4 до 9.

7. Применение по п.1, в котором один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют средневесовую молекулярную массу от 300 до 2000.

8. Применение по п.1, в котором общая концентрация олигомеров HL₂, HL₃, HL₄ и HL₅ составляет, по меньшей мере, 30% мас./мас.

9. Применение по п.1, в котором один или несколько олигомеров молочной кислоты имеют характеристическую вязкость, определенную с помощью реометра при 25°С в пределах 10^-3-10¹²Па·с, 10^-1-10⁹ Па·с или 1-10⁵Па·с.

10. Применение по п.1, в котором один или несколько олигомеров молочной кислоты высвобождает молочную кислоту под воздействием воды при комнатной температуре в течение периода времени, по меньшей мере, 8 ч, по меньшей мере, 12 ч, по меньшей мере, 16 ч, по меньшей мере, 20 ч, по меньшей мере, 24 ч, по меньшей мере, 36 ч, по меньшей мере, 2 дней, по меньшей мере, 3 дней, по меньшей мере, 4 дней, по меньшей мере, 5 дней, по меньшей мере, 6 дней, или, по меньшей мере, 7 дней.

11. Применение по п.1, в котором лекарственное средство содержит, по меньшей мере, 0,01% мас./мас. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты.

12. Применение по п.1, в котором лекарственное средство содержит, от 0,02% до 100% мас./мас., от 0,1% до 95% мас./мас., от 1% до 95% мас./мас., от 5% до 95% мас./мас., от 10% до 90% мас./мас., от 15% до 90% мас./мас. одного или нескольких олигомеров молочной кислоты.

13. Применение по п.1, в котором лекарственное средство предназначено для вагинального введения.

14. Применение по п.1, в котором состав представляет собой твердый, полутвердый или жидкий состав.

15. Применение по п.1, в котором лекарственное средство находится в форме геля, крема, лосьона, мази, порошка или пластыря.

16. Применение по п.1, в котором лекарственное средство находится в составе вагинального тампона, пессария, вагинального аэрозоля, вагинальной прокладки, вагинального геля, вагинальной вставки, вагинального пластыря, вагинального кольца, вагинальной губки, вагинального суппозитория, вагинального крема, вагинальной эмульсии, вагинальной пены, вагинального лосьона, вагинальной мази, вагинального порошка, вагинального шампуня, вагинального раствора, вагинального спрея, вагинальной суспензии, вагинальной таблетки, вагинальной палочки, вагинального диска, и любой их комбинации.

17. Применение по п.1, где лекарственное средство дополнительно содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, выбранных из гйдроксипропилметилцеллюлозы (НРМС), метилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы. (НЕС), гидроксипропилцеллюлозы (НРС), этилгидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (Na CMC), умеренно сшитого крахмала, акриловых полимеров, полиэтиленоксида (РЕО), хитозана (поли-(D-глюкозамина), природных полимеров.

18. Применение по п.17, где концентрация одного или нескольких фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ находится в интервале от 0,01 до 99,9% мас./мас., от 1% до 95% мас./мас., от 5% до 95% мас./мас., от 10% до 90% мас./мас., от 15% до 90% мас./мас., от 20% мас./мас. до 80% мас./мас. или от 30% мас./мас. до 70% мас./мас.

19. Фармацевтическая композиция для вагинального введения для профилактики и/или лечения гинекологических инфекций, содержащая один или несколько олигомеров молочной кислоты, как определено в любом из пп.1-18, вместе с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.

20. Фармацевтическая композиция по п.19, в составе вагинального тампона, пессария, вагинального аэрозоля, вагинальной прокладки, вагинального геля, вагинальной вставки, вагинального пластыря, вагинального кольца, вагинальной губки, вагинального суппозитория, вагинального крема, вагинальной эмульсии, вагинальной пены, вагинального лосьона, вагинальной мази, вагинального порошка, вагинального шампуня, вагинального раствора, вагинального спрея, вагинальной суспензии, вагинальной таблетки, вагинальной палочки, вагинального диска, и любой их комбинации.

21. Фармацевтическая композиция по п.19 или 20, в которой фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество выбрано из гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС), метилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы (НЕС), гидроксипропилцеллюлозы (НРС), этилгидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (Na CMC), умеренно сшитого крахмала, акриловых полимеров, таких как карбомер и его производные (Поликарбофил, Карбопол®, и т.д.); полиэтиленоксида (РЕО), хитозана (поли-(D-глюкозамина); природных полимеров.

22. Фармацевтическая композиция по пп.19-21 в форме геля, лосьона, мази, порошка или пластыря.

Патенты аналоги

Авторы

БАЧЕЛЛЕР Грег (BE)

ХЕДНЕР Томас (SE)

ЙОНССОН Йерген (SE)

СКУБЕРТ Вернер (SE)

СЬЕГРЕН Кристер (SE)

СТЕРНЕР Олов (SE)

ШНИТОВСКА Мальгорзат (PL)

BACHELLER GREG

KHEDNER TOMAS

JONSSON JERGEN

SKUBERT VERNER

S EGREN KRISTER

STERNER OLOV

SHNITOVSKA MAL GORZAT

BACHELLER GREG

KHEDNER TOMAS

JONSSON JERGEN

SKUBERT VERNER

S'EGREN KRISTER

STERNER OLOV

SHNITOVSKA MAL'GORZAT

Патентообладатели

LAKKURE AB

Заявители

LAKKURE AB

СПК: A61K9/0034 A61K9/0036 A61K9/02 A61K9/06 A61K9/19 A61K31/19 A61K31/74 A61K31/765 A61K45/06 A61K47/10 A61K47/38 A61P1/00 A61P1/02 A61P15/00 A61P15/02 A61P17/00 A61P17/02 A61P17/04 A61P17/06 A61P17/14 A61P31/00 A61P31/04 A61P31/10 A61P31/12 A61P31/18 A61P31/20 A61P31/22 C07C69/34

МПК: A61K31/19 A61P17/00 A61P31/00

Публикация: 2012-08-27

Дата подачи заявки: 2008-03-28

РОССТИП

Поиск по товарам

Добавить свой товар

Сообщества

Товары

Участники

Патенты

Запросов

Поставщикам

О сервисе

Блогерам

Помощь