Популяция стволовых клеток шейки матки человека и ее применение - RU2015139970A
Код документа: RU2015139970A
Формула
1. Способ выделения стволовых клеток, включающий:
(a) получение клеточной суспензии из ткани шейки матки,
(b) выделение клеток из указанной клеточной суспензии,
(c) инкубацию указанных клеток в подходящей среде для культивирования клеток и в условиях, которые обеспечивают пролиферацию клеток и
(d) отбор стволовых клеток.
2. Способ по п. 1, где этап (a) включает ферментативную дезагрегацию цервикальной слизи.
3. Способ по п. 1 или 2, где выделенные стволовые клетки:
(a) экспрессируют клеточные маркеры CD29, CD44, CD73, CD90, CD105, виментин, цитокератин (СKАЕ1АЕ3), Klf4, Oct4 и Sox-2 и
(b) не экспрессируют по меньшей мере один клеточный маркер, выбранный из группы, состоящей из десмина, актина HHF35, β-катенина, p63, E-кадгерина, CD117, CD133, HLA-DR, TRA1-81, CD45, CD34 и CD31.
4. Способ по п. 3, где стволовые клетки дополнительно характеризуются:
(a) скоростью пролиферации от 0,4 до 2,1 удвоений в течение 24 часов в среде для выращивания,
(b) фибробластоподобной морфологией,
(c) стабильным кариотипом по меньшей мере в течение 10 пересеваний клеток,
(d) способностью расти в монослое и прикрепляться к субстрату,
(e) способностью дифференцироваться в эндотелиальном, эктодермальном или мезодермальном направлении дифференцировки,
(f) отсутствием опухолеобразующей способности и/или
(g) способностью образовывать сферы.
5. Способ по п. 1, 2 или 4, где ткань шейки матки представляет собой ткань шейки матки млекопитающего, предпочтительно, ткань шейки матки человека.
6. Способ по п. 3, где ткань шейки матки представляет собой ткань шейки матки млекопитающего, предпочтительно, ткань шейки матки человека.
7. Способ по п. 1, 2 или 4, где ткань шейки матки не является злокачественной тканью.
8. Способ по п. 3, где ткань шейки матки не является злокачественной тканью.
9. Применение ткани шейки матки, выделенной способом по любому из пп. 1-6, для получения стволовых клеток шейки матки.
10. Применение по п. 9, где ткань шейки матки не является злокачественной.
11. Выделенная стволовая клетка шейки матки, где указанная клетка:
(a) экспрессирует клеточные маркеры CD29, CD44, CD73, CD90, CD105, виментин, цитокератин (СKАЕ1АЕ3), Klf4, Oct4 и Sox-2 и
(b) не экспрессирует по меньшей мере один клеточный маркер, выбранный из группы, состоящей из десмина, актина HHF35, β-катенина, p63, E-кадгерина, CD117, CD133, HLA-DR, TRA1-81, CD45, CD34 и CD31.
12. Выделенная стволовая клетка по п. 11, где клетка дополнительно характеризуется:
(a) скоростью пролиферации от 0,4 до 2,1 удвоений в течение 24 часов в среде для выращивания,
(b) фибробластоподобной морфологией,
(c) стабильным кариотипом по меньшей мере в течение 10, предпочтительно, 20 пересеваний клеток,
(d) способностью расти в монослое и прикрепляться к субстрату,
(e) способностью дифференцироваться в адипогенном, остеогенном, нейрональном или миоцитарном направлении дифференцировки,
(f) отсутствием опухолеобразующей способности и/или
(g) способностью образовывать сферы.
13. Выделенная стволовая клетка по п. 11 или 12, где клетка является клеткой от млекопитающего, предпочтительно, от человека, более предпочтительно, от человека не в менструальной фазе.
14. Популяция клеток, содержащая выделенную стволовую клетку по любому из пп. 11-13.
15. Кондиционированная среда, получаемая способом, включающим:
(a) инкубацию выделенной стволовой клетки по любому из пп. 11-13 или популяции клеток по п. 14 и
(b) удаление клеток из среды для культивирования.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенную стволовую клетку по любому из пп. 11-13, популяцию клеток по п. 14 или кондиционированную среду по п. 15 и фармацевтически приемлемый носитель и/или адъювант.
17. Применение выделенной стволовой клетки по любому из пп. 11-13, популяции клеток по п. 14, кондиционированной среды по п. 15 или фармацевтической композицией по п. 16 в качестве лекарственного средства.
18. Применение стволовой клетки по любому из пп. 11-13, популяции клеток по п. 13, кондиционированной среды по п. 15 в производстве фармацевтической композиции для лечения или профилактики злокачественной опухоли, предопухолевых состояний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, хронических патологий или инфекционных заболеваний, заболеваний, ассоциированных с потерей тканм, или для диагностики, прогнозирования или лечения нарушений фертильности или в косметическом лечении.
19. Применение выделенной стволовой клетки по любому из пп. 11-13, популяции клеток по п. 14, кондиционированной среда по п. 15 в производстве фармацевтической композиции для ингибирования или снижения пролиферации и/или метастазирования опухолевых клеток, дифференцировки моноцитов, пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови или роста и/или репликации патогенных микроорганизмов, или для усиления или индукции апоптоза опухолевых клеток, или для усиления регенерации ткани и отбора половых клеток.
20. Набор, содержащий выделенную стволовую клетку по любому из пп. 11-13, популяцию клеток по п. 14 или кондиционированную среду по п. 15, или фармацевтическую композицию по п. 16.
21. Применение набора по п. 20 в производстве композиции для лечения или профилактики злокачественной опухоли, предопухолевых состояний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, хронических патологий или инфекционных заболеваний, заболеваний, ассоциированных с потерей ткани, или для диагностики, прогнозирования или лечения нарушений фертильности или в косметическом лечении.
22. Применение набора по п. 20 в производстве композиции для ингибирования или снижения пролиферации и/или метастазирования опухолевых клеток, дифференцировки моноцитов или пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови, или для усиления или индукции апоптоза опухолевых клеток, или для усиления регенерации ткани, или для отбора половых клеток.
