Биопроизводство лентивирусных векторов - RU2017143141A
Код документа: RU2017143141A
Формула
1. Рекомбинантная плазмида, содержащая векторную кассету, имеющую нуклеотидную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, последовательности SEQ ID NO: 2.
2. Рекомбинантная плазмида по п. 1, в которой нуклеотидная последовательность векторной кассеты идентична, по меньшей мере, на 95% последовательности SEQ ID NO: 2.
3. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, в которой векторная кассета содержит сайт множественного клонирования, включающий сайты рестрикционных эндонуклеаз BstBI, MluI, NotI и ClaI.
4. Рекомбинантная плазмида по п. 3, в которой нуклеотидная последовательность, кодирующая сайт множественного клонирования, включает последовательность SEQ ID NO: 7.
5. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, которая включает нуклеотидную последовательность, кодирующую сигнал упаковки; нуклеотидную последовательность, кодирующую центральный полипуриновый тракт; нуклеотидную последовательность, кодирующую Rev-респонсивный элемент; и нуклеотидную последовательность, кодирующую самоиннактивирующийся длинный концевой повтор.
6. Рекомбинантная плазмида по п. 5, в которой нуклеотидная последовательность, кодирующая сигнал упаковки, включает последовательность SEQ ID NO: 3; нуклеотидная последовательность, кодирующая центральный полипуриновый тракт, включает последовательность SEQ ID NO: 4; нуклеотидная последовательность, кодирующая Rev-респонсивный элемент, включает последовательность SEQ ID NO: 5; и нуклеотидная последовательность, кодирующая самоиннактивирующийся длинный концевой повтор, включает последовательность SEQ ID NO: 6.
7. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, которая включает тетрациклин-репрессируемый промотор, находящийся выше по последовательности относительно векторной кассеты.
8. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, в которой векторная кассета фланкирована, по меньшей мере, двумя сайтами рестрикционных эндонуклеаз, по меньшей мере, двумя сайтами рестрикционных эндонуклеаз, независимо выбранных из группы, состоящей из sfiI и Bsu36I.
9. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, которая содержит нуклеотидную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90% последовательности SEQ ID NO: 1.
10. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, которая содержит нуклеотидную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 95% последовательности SEQ ID NO: 1.
11. Рекомбинантная плазмида по любому из предшествующих пунктов, которая содержит от 6500 нуклеотидов до 6750 нуклеотидов.
12. Конкатамерная матрица, содержащая фрагменты ДНК, полученные из рекомбинантной плазмиды по любому из пп. 1-11.
13. Конкатамерная матрица по п. 8, которая представляет собой направленную конкатамерную матрицу, содержащую фрагменты ДНК, полученные из рекомбинантной плазмиды по п. 8.
14. Упаковочная клеточная линия, трансфицированная конкатамерной матрицей по любому из пп. 12-13, которая выбрана из группы, состоящей из упаковочной клеточной линии GPR, GPRG, GPRT и GPRT-G.
15. Стабильная линия клеток-продуцентов, полученная из трансфицированной упаковочной клеточной линии по п. 14.
