Сконструированный эквивалент кожи, способ его получения и продукты, получаемые из него - RU2018140838A
Код документа: RU2018140838A
Формула
1. Способ получения синтетической кожи, включающий:
a. формирование искусственного дермального слоя, содержащего фибробласт;
b. дубление по меньшей мере части указанного дермального слоя с формированием, тем самым, указанной синтетической кожи, в которой указанный фибробласт дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий формирование искусственного эпидермального слоя.
3. Способ по п. 2, в котором указанный эпидермальный слой содержит кератиноцит.
4. Способ по п. 3, дополнительно включающий размещение указанного эпидермального слоя на указанном дермальном слое с формированием, тем самым, слоистой структуры.
5. Способ получения синтетической кожи, включающий:
a. размещение искусственного эпидермального слоя на искусственном дермальном слое с формированием, тем самым, слоистой структуры, в котором указанный эпидермальный слой содержит кератиноцит и указанный дермальный слой содержит фибробласт; и
b. дубление по меньшей мере части указанной слоистой структуры с формированием, тем самым, указанной синтетической кожи, где указанный фибробласт или указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
6. Способ получения синтетической кожи, включающий:
a. размещение искусственного эпидермального слоя на искусственном дермальном слое с формированием, тем самым, слоистой структуры, где указанный эпидермальный слой содержит кератиноцит и указанный дермальный слой содержит фибробласт;
b. удаление по меньшей мере части указанного эпидермального слоя для того, чтобы сформировать удаленный продукт; и
c. дубление по меньшей мере части указанного удаленного продукта с формированием, тем самым, указанной синтетической кожи; где указанный фибробласт или указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
7. Способ по любому из пп. 3-6, в котором указанный кератиноцит представляет собой кератиноцит млекопитающего.
8. Способ по п. 7, в котором указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
9. Способ по любому из пп. 3-7, в котором указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
10. Способ по п. 9, в котором указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
11. Способ по любому из пп. 4-10, в котором указанная слоистая структура дополнительно содержит меланоцит.
12. Способ по п. 11, в котором указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
13. Способ по п. 12, в котором указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию.
14. Способ по любому из пп. 11-13, в котором указанная синтетическая кожа дополнительно содержит пигмент.
15. Способ по любому из пп. 11-14, в котором указанный меланоцит представляет собой меланоцит млекопитающего.
16. Способ по п.7, в котором указанным млекопитающим является человек.
17. Способ по любому из пп. 5, 6, в котором указанный фибробласт дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
18. Способ по п. 1 или 17, в котором указанный фибробласт экспрессирует CD10, CD73, CD44, CD90, коллаген I типа, коллаген III типа, пролил-4-гидроксилазу β или их комбинацию.
19. Способ по любому из пп. 1-18, в котором указанный фибробласт представляет собой фибробласт млекопитающего.
20. Способ по п. 19, в котором указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
21. Способ по п. 8 или 20, в котором указанное не являющееся человеком млекопитающее представляет собой одно из примата, коровы, овцы, свиньи, лошади, собаки, кошки, грызуна или зайцеобразного.
22. Способ по любому из пп. 2-6, в котором указанный эпидермальный слой дополнительно содержит коллаген.
23. Способ по п. 22, в котором указанный эпидермальный слой подвергают дополнительной обработке.
24. Способ по любому из пп. 4-6, в котором указанная слоистая структура дополнительно содержит коллаген.
25. Способ по п. 24, в котором указанную слоистую структуру подвергают дополнительной обработке.
26. Способ по п. 6, в котором указанный удаленный продукт дополнительно содержит коллаген.
27. Способ по п. 26, в котором указанный удаленный продукт подвергают дополнительной обработке.
28. Способ по любому из пп. 1-26, в котором указанный дермальный слой дополнительно содержит коллаген.
29. Способ по п. 28, в котором указанный дермальный слой подвергают дополнительной обработке.
30. Способ по пп. 23, 25, 27 или 29, в котором указанную обработку выбирают из группы, состоящей из консервации, вымачивания, мягчения, пикелевания, распикелевания, уменьшения толщины, додубления, смазывания, получения кожи краст, увлажнения, отжимания, стрижки, рехромирования, нейтрализации, окрашивания, жирования, заполнения, нарезания на полосы, увлажнения жирами, отбеливания, фиксации, разводки, сушки, кондиционирования, мятья, тяжки, шлифования, отделки, обработки маслами, обработки щеткой, грунтования, импрегнирования, опрыскивания, валкового покрывания, нанесения покрытия поливом, полирования, расплющивания, тиснения, утюжения, глазирования, мятья в барабане и любой их комбинации.
31. Способ по пп. 22, 24, 26 или 28, в котором указанный коллаген получают по меньшей мере отчасти посредством продуцирующей коллаген клетки, добавляют отдельно или любой их комбинацией.
32. Способ по п. 31, в котором указанная продуцирующая коллаген клетка включает эпителиальную клетку, кератиноцит, фибробласт, корнеоцит, меланоцит, клетку Лангерганса, базальную клетку или их комбинацию.
33. Способ по п. 32, в котором указанная продуцирующая коллаген клетка включает указанную эпителиальную клетку, где указанная эпителиальная клетка включает сквамозную клетку, кубовидную клетку, цилиндрическую клетку, базальную клетку или их комбинацию.
34. Способ по п. 32, в котором указанная продуцирующая коллаген клетка включает указанный кератиноцит, где указанный кератиноцит включает эпителиальный кератиноцит, базальный кератиноцит, пролиферирующий базальный кератиноцит, дифференцированный надбазальный кератиноцит или их комбинацию.
35. Способ по п. 31, в котором указанная продуцирующая коллаген клетка включает гладкомышечную клетку.
36. Способ по любому из пп. 1-35, в котором указанная синтетическая кожа дополнительно содержит одно или несколько из кератина, эластина, желатина, протеогликана, протеогликана дерматансульфата, гликозаминогликана, фибронектина, ламинина, дерматопонтина, липида, жирной кислоты, углевода или их комбинации.
37. Способ по любому из пп. 1-36, в котором толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,02 мм до приблизительно 5 мм.
38. Способ по п. 37, в котором указанная толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,5 мм.
39. Способ по любому из пп. 1-38, в котором указанная синтетическая кожа дополнительно содержит первый дермальный слой и второй дермальный слой.
40. Способ по п. 39, в котором указанный первый дермальный слой помещают на указанный второй дермальный слой.
41. Способ по любому из пп. 2-6, в котором толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 2 мм.
42. Способ по п. 41, в котором указанная толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,2 мм.
43. Способ по п. 41 или 42, в котором указанная синтетическая кожа дополнительно содержит первый эпидермальный слой и второй эпидермальный слой.
44. Способ по любому из пп. 41-43, в котором указанная синтетическая кожа дополнительно содержит заменитель базальной мембраны.
45. Способ по п. 44, в котором указанный заменитель базальной мембраны находится между указанным эпидермальным слоем и указанным дермальным слоем.
46. Способ по п. 45, в котором указанный заменитель базальной мембраны содержит высушенную бесклеточную амниотическую мембрану.
47. Способ по любому из пп. 1-46, в котором указанный дермальный слой формируют на каркасе.
48. Способ по п. 47, в котором указанный каркас является природным или синтетическим.
49. Способ по п. 47, в котором указанный каркас содержит шелк.
50. Способ по п. 49, в котором указанный каркас содержит природный тканевой адгезив.
51. Способ по п. 50, в котором указанный природный тканевой адгезив содержит фибриновый клей.
52. Способ по любому из пп. 47-51, в котором указанный каркас содержится отчасти в указанной синтетической коже.
53. Способ по любому из пп. 1-51, в котором указанный дермальный слой или указанный эпидермальный слой культивируют in vitro.
54. Способ по п. 53, в котором указанный дермальный слой культивируют in vitro.
55. Способ по п. 54, в котором указанный дермальный слой культивируют с добавкой.
56. Способ по п. 55, в котором указанная добавка содержит одно или несколько веществ из числа коллагена, фибрина, факторов роста, аскорбиновой кислоты, декстрансульфата или каррагенана.
57. Способ по п. 55 или 56, в котором указанная добавка представляет собой природную добавку.
58. Способ по п. 55 или 56, в котором указанная добавка представляет собой синтетическую добавку.
59. Способ по любому из пп. 1-58, в котором указанную индуцированную плюрипотентную стволовую клетку получают посредством индуцированной экспрессии гена Oct3, Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc или их комбинации в зрелой соматической клетке.
60. Способ получения по меньшей мере части изделия из кожи, включающий формирование указанной по меньшей мере части указанного изделия из кожи из указанной синтетической кожи, полученной способом по любому из пп. 1-59.
61. Способ по п. 60, в котором указанное изделие из кожи включает одно или несколько из ремешка часов, ремня, упаковки, туфли, ботинка, обуви, перчатки, одежды, багажа, сумки, клатча, портмоне, рюкзака, кошелька, седла, упряжи или плети.
62. Способ по п. 61, в котором указанное изделие из кожи представляет собой ремешок часов.
63. Способ по п. 61, в котором указанное изделие из кожи представляет собой ремень.
64. Способ по п. 61, в котором указанное изделие из кожи представляет собой сумку.
65. Дубленая синтетическая кожа, полученная способом по любому из пп. 1-59.
66. Дубленая синтетическая кожа, которая перед дублением содержит искусственный дермальный слой, содержащий фибробласт, в котором указанный фибробласт дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
67. Дубленая синтетическая кожа по п. 66, которая перед дублением дополнительно содержит искусственный эпидермальный слой.
68. Дубленая синтетическая кожа по п. 67, в которой указанный эпидермальный слой дополнительно содержит кератиноцит.
69. Дубленая синтетическая кожа по п. 67 или 68, в котором указанный эпидермальный слой находится на указанном дермальном слое, тем самым формируя слоистую структуру.
70. Дубленая синтетическая кожа, которая перед дублением содержит
слоистую структуру, содержащую
искусственный дермальный слой, содержащий фибробласт, и
искусственный эпидермальный слой, содержащий кератиноцит,
где указанный фибробласт или указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
71. Дубленая синтетическая кожа, которая перед дублением содержит
удаленный продукт, содержащий слоистую структуру,
где указанная слоистая структура содержит
искусственный дермальный слой, содержащий фибробласт, и
искусственный эпидермальный слой, содержащий кератиноцит,
где часть указанного эпидермального слоя удаляют, где указанный фибробласт или указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
72. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 68-71, где указанный кератиноцит представляет собой кератиноцит млекопитающего.
73. Дубленая синтетическая кожа по п. 72, где указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
74. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 68-73, в которой указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
75. Дубленая синтетическая кожа по п. 74, в которой указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
76. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 69-75, в которой указанная слоистая структура дополнительно содержит меланоцит.
77. Дубленая синтетическая кожа по п. 76, в которой указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
78. Дубленая синтетическая кожа по п. 77, в которой указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию.
79. Дубленая синтетическая кожа по п. 77 или 78, где указанная синтетическая кожа дополнительно содержит пигмент.
80. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 76-79, в которой указанный меланоцит представляет собой меланоцит млекопитающего.
81. Дубленая синтетическая кожа по п. 80, где указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
82. Дубленая синтетическая кожа по п. 70 или 71, в которой указанный фибробласт дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
83. Дубленая синтетическая кожа по п. 66 или 82, в которой указанный фибробласт экспрессирует CD10, CD73, CD44, CD90, коллаген I типа, коллаген III типа, пролил-4-гидроксилазу β или их комбинацию.
84. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-82, в которой указанный фибробласт представляет собой фибробласт млекопитающего.
85. Дубленая синтетическая кожа по п. 84, в которой указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
86. Дубленая синтетическая кожа по п. 73, 81 или 85, где указанное не являющееся человеком млекопитающее представляет собой одно из примата, коровы, овцы, свиньи, лошади, собаки, кошки, грызуна или зайцеобразного.
87. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 67-71, в которой указанный эпидермальный слой дополнительно содержит коллаген.
88. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 69-71, в которой указанная слоистая структура дополнительно содержит коллаген.
89. Дубленая синтетическая кожа по п. 71, где указанный удаленный продукт дополнительно содержит коллаген.
90. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-89, в которой указанный дермальный слой дополнительно содержит коллаген.
91. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 87-90, в которой указанный коллаген получают по меньшей мере отчасти посредством продуцирующей коллаген клетки, добавляют отдельно или любой их комбинацией.
92. Дубленая синтетическая кожа по п. 91, в которой указанная продуцирующая коллаген клетка включает эпителиальную клетку, кератиноцит, фибробласт, корнеоцит, меланоцит, клетку Лангерганса, базальную клетку или их комбинацию.
93. Дубленая синтетическая кожа по п.92, в которой указанная продуцирующая коллаген клетка включает указанную эпителиальную клетку, где указанная эпителиальная клетка включает сквамозную клетку, кубовидную клетку, цилиндрическую клетку, базальную клетку или их комбинацию.
94. Дубленая синтетическая кожа по п. 92, в которой указанная продуцирующая коллаген клетка включает указанный кератиноцит, где указанный кератиноцит включает эпителиальный кератиноцит, базальный кератиноцит, пролиферирующий базальный кератиноцит, дифференцированный надбазальный кератиноцит или их комбинацию.
95. Дубленая синтетическая кожа по п. 92, в которой указанные продуцирующие коллаген клетки включают гладкомышечную клетку.
96. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-95, где указанная синтетическая кожа дополнительно содержит одно или несколько веществ из числа кератина, эластина, желатина, протеогликана, протеогликана дерматансульфата, гликозаминогликана, фибронектина, ламинина, дерматопонтина, липида, жирной кислоты, углевода или их комбинации.
97. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-96, в которой толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,02 мм до приблизительно 5 мм.
98. Дубленая синтетическая кожа по п. 97, в которой указанная толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,5 мм.
99. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-98, в которой указанная синтетическая кожа дополнительно содержит первый дермальный слой и второй дермальный слой.
100. Дубленая синтетическая кожа по п. 99, в которой указанный первый дермальный слой находится на указанном втором дермальном слое.
101. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 67-71, в которой толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 2 мм.
102. Дубленая синтетическая кожа по п. 101, в которой указанная толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,2 мм.
103. Дубленая синтетическая кожа по п. 101 или 102, где указанная синтетическая кожа дополнительно содержит первый эпидермальный слой и второй эпидермальный слой.
104. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 101-103, где указанная синтетическая кожа содержит заменитель базальной мембраны.
105. Дубленая синтетическая кожа по п. 104, в которой указанный заменитель базальной мембраны находится между указанным эпидермальным слоем и указанным дермальным слоем.
106. Дубленая синтетическая кожа по п. 105, в которой указанный заменитель базальной мембраны содержит высушенную бесклеточную амниотическую мембрану.
107. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-106, в которой указанный дермальный слой формируют на каркасе.
108. Дубленая синтетическая кожа по п. 107, в которой указанный каркас является природным или синтетическим.
109. Дубленая синтетическая кожа по п. 107, в которой указанный каркас содержит шелк.
110. Дубленая синтетическая кожа по п. 109, в которой указанный каркас содержит природный тканевой адгезив.
111. Дубленая синтетическая кожа по п. 110, в которой указанный природный тканевой адгезив содержит фибриновый клей.
112. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 107-111, в которой указанный каркас содержится отчасти в указанной дубленой синтетической коже.
113. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-112, в которой указанный дермальный слой или указанный эпидермальный слой культивируют in vitro.
114. Дубленая синтетическая кожа по п. 113, в которой указанный дермальный слой культивируют in vitro.
115. Дубленая синтетическая кожа по любому из пп. 66-114, которая содержится в одном или нескольких изделиях из числа ремешка часов, ремня, упаковки, туфли, ботинка, обуви, перчатки, одежды, багажа, сумки, клатча, портмоне, рюкзака, кошелька, седла, упряжи или плети.
116. Дубленая синтетическая кожа по п. 115, содержащаяся в ремешке часов.
117. Дубленая синтетическая кожа по п. 115, содержащаяся в ремне.
118. Дубленая синтетическая кожа по п. 115, содержащаяся в сумке.
119. Искусственный эпидермальный слой, содержащий клетку волосяного фолликула и меланоцит, где указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
120. Эпидермальный слой по п. 119, в котором указанная клетка волосяного фолликула содержит клетку дермального сосочка, внешнюю клетку влагалища корня или их комбинацию.
121. Эпидермальный слой по п. 119 или 120, в котором указанный меланоцит представляет собой меланоцит млекопитающего.
122. Эпидермальный слой по пп. 119-121, в котором указанный эпидермальный слой дополнительно содержит кератиноцит.
123. Эпидермальный слой по п. 122, в котором указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
124. Эпидермальный слой по п. 123, в котором указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
125. Эпидермальный слой по пп. 122, 123, или 124, в котором указанный кератиноцит представляет собой кератиноцит млекопитающего.
126. Эпидермальный слой по пп. 121 или 125, в котором указанное млекопитающее представляет собой не являющееся человеком млекопитающее.
127. Эпидермальный слой по п. 126, в котором указанное не являющееся человеком млекопитающее представляет собой одно из примата, коровы, овцы, свиньи, лошади, собаки, кошки, грызуна или зайцеобразного.
128. Эпидермальный слой по любому из пп. 119-127, в котором указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию.
129. Эпидермальный слой по любому из пп. 119-127, который дополнительно содержит волосяной фолликул.
130. Слоистая структура, содержащая:
a. искусственный эпидермальный слой, содержащий клетку волосяного фолликула; и
b. искусственный дермальный слой, содержащий фибробласт, где указанный фибробласт дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
131. Слоистая структура по п. 130, в которой указанный фибробласт экспрессирует CD10, CD73, CD44, CD90, коллаген I типа, коллаген III типа, пролил-4-гидроксилазу β или их комбинацию.
132. Слоистая структура по п. 130, в которой указанный эпидермальный слой дополнительно содержит кератиноцит.
133. Слоистая структура по п. 132, в которой указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
134. Слоистая структура по п. 133, в которой указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
135. Слоистая структура по п. 132, в которой указанная клетка волосяного фолликула представляет собой клетку дермального сосочка, внешнюю клетку влагалища корня или их комбинацию.
136. Слоистая структура по п. 130, в которой указанный эпидермальный слой дополнительно содержит меланоцит.
137. Слоистая структура по п. 136, в которой указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
138. Слоистая структура по п. 137, в которой указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию.
139. Слоистая структура по пп. 136, 137 или 138, в которой указанная слоистая структура пигментирована.
140. Слоистая структура по п. 137, в которой указанный эпидермальный слой является расслаиваемым.
141. Слоистая структура по любому из пп. 130-140, которая дополнительно содержит заменитель базальной мембраны.
142. Слоистая структура по п. 141, в которой указанный заменитель базальной мембраны находится между указанным эпидермальным слоем и указанным дермальным слоем.
143. Слоистая структура по п. 142, в которой указанный заменитель базальной мембраны содержит высушенную бесклеточную амниотическую мембрану.
144. Слоистая структура по п. 130, которая дополнительно содержит каркас.
145. Слоистая структура по п. 144, в которой указанный каркас является природным или синтетическим.
146. Слоистая структура по п. 144, в которой указанный каркас содержит шелк.
147. Слоистая структура по п. 144, в которой указанный дермальный слой находится на указанном каркасе.
148. Слоистая структура по любому из пп. 130-147, которая дополнительно содержит один или несколько компонентов, выбранных из группы, состоящей из кератина, эластина, желатина, протеогликана, протеогликана дерматансульфата, гликозаминогликана, фибронектина, ламинина, дерматопонтина, липида, жирной кислоты, углевода или их комбинации.
149. Слоистая структура по любому из пп. 130-148, которая дополнительно содержит два или более дермальных слоев.
150. Слоистая структура по любому из пп. 130-149, которая дополнительно содержит волосяной фолликул.
151. Слоистая структура по любому из пп. 130-149, которая дополнительно содержит мех.
152. Способ получения слоистой структуры, включающий размещение искусственного эпидермального слоя, содержащего клетку волосяного фолликула, на искусственном дермальном слое, содержащем клетку, дифференцированную из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, с формированием, тем самым, указанной слоистой структуры.
153. Способ по п. 152, в котором указанная клетка, дифференцированная из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, представляет собой фибробласт, меланоцит, кератиноцит или их комбинацию.
154. Способ по п. 153, в котором указанная клетка, дифференцированная из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, представляет собой фибробласт.
155. Способ по п. 154, в котором указанный фибробласт экспрессирует CD10, CD73, CD44, CD90, коллаген I типа, коллаген III типа, пролил-4-гидроксилазу β или их комбинацию.
156. Способ по любому из пп. 152-154, в котором указанный эпидермальный слой дополнительно содержит кератиноцит.
157. Способ по п. 156, в котором указанный кератиноцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
158. Способ по п. 157, в котором указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
159. Способ по любому из пп. 152-158, в котором указанная клетка волосяного фолликула включает клетку дермального сосочка, внешнюю клетку влагалища корня или их комбинацию.
160. Способ по любому из пп. 152-159, в котором указанный эпидермальный слой дополнительно содержит меланоцит.
161. Способ по п. 160, в котором указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
162. Способ по п. 161, в котором указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию.
163. Способ по любому из пп. 152-162, в котором указанный дермальный слой культивируют с добавкой.
164. Способ по п. 163, в котором указанная добавка содержит коллаген, фибрин, факторы роста, аскорбиновую кислоту, декстрансульфат, каррагенан или их комбинацию.
165. Способ по п. 163, в котором указанная добавка представляет собой природную добавку.
166. Способ по п. 163, в котором указанная одна или более добавок представляют собой синтетическую добавку.
167. Способ по любому из пп. 152-166, в котором указанный дермальный слой культивируют на каркасе.
168. Способ по п. 167, в котором указанный каркас является природным или синтетическим.
169. Способ по п. 167, в котором указанный каркас содержит шелк.
170. Способ по любому из пп. 152-166, в котором указанный дермальный слой помещают на каркасе.
171. Способ по п. 170, в котором указанный каркас является природным или синтетическим.
172. Способ по п. 170, в котором указанный каркас содержит шелк.
173. Способ по любому из пп. 152-172, в котором указанный эпидермальный слой является расслаиваемым.
174. Способ по п.152, дополнительно включающий культивирование указанного дермального слоя на втором дермальном слое.
175. Способ по любому из пп. 152-174, в котором указанный дермальный слой культивируют in vivo.
176. Способ по п. 175, в котором указанный дермальный слой не культивируют на коллагеновом матриксе.
177. Способ по любому из пп. 152-176, в котором толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,02 мм до приблизительно 5 мм.
178. Способ по п. 177, в котором указанная толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,5 мм.
179. Способ по любому из пп. 152-178, в котором толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 2 мм.
180. Способ по п. 179, в котором указанная толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,2 мм.
181. Слоистая структура, содержащая
искусственный эпидермальный слой, содержащий клетку волосяного фолликула и кератиноцит или меланоцит;
искусственный дермальный слой, содержащий фибробласт, где указанный фибробласт, указанный кератиноцит или указанный меланоцит дифференцирован из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, где указанный меланоцит экспрессирует Sox-10, MITF-M, gp-100, DCT, TYR, MLANA или их комбинацию, где указанный фибробласт экспрессирует CD10, CD73, CD44, CD90, коллаген I типа, коллаген III типа, пролил-4-гидроксилазу β или их комбинацию, где указанный кератиноцит экспрессирует KRT14, p63, DSG3, ITGB4, LAMA5, KRT5, TAp63, Lamb3, KRT18 или их комбинацию.
182. Слоистая структура по пп. 181, в которой толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,02 мм до приблизительно 5 мм.
183. Слоистая структура по п. 182, в которой указанная толщина указанного дермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,5 мм.
184. Слоистая структура по любому из пп. 181-183, в которой толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 2 мм.
185. Слоистая структура по п. 184, в которой указанная толщина указанного эпидермального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,1 мм до приблизительно 0,2 мм.
186. Искусственный эпидермальный слой, содержащий:
a. роговой слой;
b. зернистый слой;
c. шиповатый слой; и
d. базальный слой, где указанный роговой слой, указанный зернистый слой, указанный шиповатый слой и указанный базальный слой организованы, как изображено на фиг. 6A, фиг. 8A.
187. Искусственный эпидермальный слой по п. 186, в котором указанная толщина указанного рогового слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 0,05 мм.
188. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-187, в котором указанная толщина указанного зернистого слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 0,15 мм.
189. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-188, в котором указанная толщина указанного шиповатого слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 0,15 мм.
190. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-189, в котором указанная толщина указанного базального слоя находится в диапазоне от приблизительно 0,01 мм до приблизительно 0,15 мм.
191. Искусственный эпидермальный слой, содержащий:
a. роговой слой;
b. зернистый слой;
c. шиповатый слой; и
d. базальный слой.
192. Искусственный эпидермальный слой по п. 191, в котором указанная толщина указанного рогового слоя находится в диапазоне от приблизительно 4% до приблизительно 20% от указанного искусственного эпидермального слоя.
193. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 191, 192, в котором указанная толщина указанного зернистого слоя находится в диапазоне от приблизительно 4% до приблизительно 60% от указанного искусственного эпидермального слоя.
194. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 191-193, в котором указанная толщина указанного шиповатого слоя находится в диапазоне от приблизительно 4% до приблизительно 40% от указанного искусственного эпидермального слоя.
195. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 191-194, в котором указанная толщина указанного базального слоя находится в диапазоне от приблизительно 4% до приблизительно 40% от указанного искусственного эпидермального слоя.
196. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-195, в котором по меньшей мере приблизительно 2% клеток, содержащихся в указанном искусственном эпидермальном слое, дифференцированы из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
197. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-196, в котором по меньшей мере приблизительно 10% клеток, содержащихся в указанном искусственном эпидермальном слое, дифференцированы из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки
198. Искусственный эпидермальный слой по любому из пп. 186-196, в котором по меньшей мере приблизительно 50% клеток, содержащихся в указанном искусственном эпидермальном слое, дифференцированы из индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
