Ферменты синтетазы - RU2007106971A

Реферат

1. Трансгенная клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, которая содержит последовательность нуклеиновой кислоты, причем эта молекула нуклеиновой кислоты состоит из последовательности, представленной на фиг. 3А, или молекулы нуклеиновых кислот, которые гибридизуются с этой последовательностью в строгих условиях гибридизации, где указанная молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид, обладающий ацил-КоА-синтетазной активностью.

2. Клетка по п.1, где указанная молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты, представленную на фиг. 3А.

3. Клетка по п.1, где указанная молекула нуклеиновой кислоты состоит из последовательности нуклеиновой кислоты, представленной на фиг. 3А.

4. Трансгенная клетка, адаптированная для экспрессии молекулы нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипетид, представленный аминокислотной последовательностью, показанной на фиг. 3Б, или вариантом аминокислотной последовательности, которая модифицирована добавлением, делецией или заменой по меньшей мере одного аминокислотного остатка, и где указанный полипетид или вариант полипептида обладает активностью ацил-КоА-синтетазы.

5. Клетка по любому из пп.1-4, где указанная модификация сохраняет или усиливает ферментативную активность указанного полипептида.

6. Клетка по п.1 или 4, где указанная молекула нуклеиновой кислоты выделена из водорослей.

7. Клетка по п.1 или 4, где указанная активность ацил-КоА-синтетазы модифицирует 20- и/или 22-углеродные полиненасыщенные жирные кислоты.

8. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп.1-7.

9. Вектор по п.8, который адаптирован таким образом, что включает тканеспецифичный промотор.

10. Вектор по п.9, где указанный промотор представляет собой семяспецифичный промотор.

11. Вектор по п.9 или 10, где указанный промотор представляет собой индуцибельный промотор или промотор, регулируемый стадией развития.

12. Клетка по п.1 или 4, где указанная клетка представляет собой эукариотическую клетку.

13. Клетка по п.1 или 4, где указанная клетка представляет собой прокариотическую клетку.

14. Клетка по п.12, где указанная эукариотическая клетка представляет собой клетку растения.

15. Семя, содержащее клетку растения по п.14.

16. Применение полипептида, или клетки, или растения, или семени по любому из пп.1-7 или 12-15 в этерификации длинноцепочечной жирной кислоты коферментом А с образованием ацил-КоА.

17. Реакционный сосуд, содержащий полипептид по любому из пп.1-7, длинноцепочечную жирную кислоту, АТФ и кофермент А.

18. Сосуд по п.17, где указанный сосуд представляет собой ферментатор.

19. Сосуд по п.17, где указанный полипептид экспрессируется клеткой по любому из пп.12-14.

20. Сосуд по п.19, где указанная клетка представляет собой эукариотическую клетку.

21. Сосуд по п.20, где указанная клетка представляет собой клетку дрожжей.

22. Сосуд по п.19, где указанная клетка представляет собой прокариотическую клетку.

23. Способ этерификации субстрата, представляющего собой длинноцепочечную жирную кислоту, коферментом А с образованием ацил-КоА, включающий стадии:

1) обеспечения наличия реакционного сосуда по любому из пп.17-22, и

2) выращивания клеток, содержащихся в указанном реакционном сосуде, в условиях, которые делают возможной этерификацию длинноцепочечной жирной кислоты до ацил-КоА.

24. Способ по п.23, где указанная длинноцепочечная жирная кислота выбрана из группы, состоящей из 18:3n6, 20:4n6, 18:4n3, 20:5n3 и 22:6n3.

25. Композиция масла, липида или жирной кислоты, содержащая полиненасыщенные жирные кислоты, полученные способом по п.23 или 24.

26. Композиция по п.25, где источником указанной композиции служит трансгенное растение.

27. Применение масла, липидов или жирных кислот, полученных способом по п.23 или 24, или масла, липида или жирной кислоты по п.25 или 26, в корме, пищевых продуктах, косметических средствах или фармацевтических средствах.