Способы выделения вирусоподобных частиц - RU2015139154A
Код документа: RU2015139154A
Формула
1. Способ выделения экспрессированных бакуловирусом вирусоподобных частиц (VLP) безоболочечных вирусов из клеток насекомых, отличающийся тем, что способ не включает стадий лизиса или разрушения клеток и включает стадию смешивания клеток насекомых с солью, где раствор соли в воде, полученный в результате смешивания, содержит по меньшей мере 300 мосмоль/л соли, катион которой выбран из группы, состоящей из щелочных металлов и щелочно-земельных металлов, и анион которой выбран из группы, состоящей из CI-, Br- и I-.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что стадии смешивания клеток насекомых с солью предшествует стадия концентрации, во время которой клетки насекомых концентрируют.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что катион выбран из группы, состоящей из Na+, Mg2+, Ca2+ и K+.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что соль выбрана из группы, состоящей из NaCl, KC1, CaCl2 и MgCl2.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор соли в воде, полученный в результате смешивания, состоит, по существу, из соли согласно любому из п.п. 1-4 и воды.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что безоболочечный вирус является членом семейства Parvoviridae или Circoviridae.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор соли в воде хранят при температуре 35-50ºC.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что раствор соли в воде хранят при температуре 40-45ºC.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки насекомых представляют собой клетки SF9 или SF21.
10. Способ очистки экспрессированных бакуловирусами вирусоподобных частиц (VLP) безоболочечных вирусов, способ включает стадии
a) инфицирования клеток насекомых рекомбинантным бакуловирусом, кодирующим VLP-белки,
b) культивирования клеток насекомых,
c) выделения VLP из клеток насекомых,
d) отделения VLP,
отличающийся тем, что способ не включает стадий лизиса или разрушения клеток и стадия c) включает способ по любому из п.п. 1-9 для выделения VLP.
