Конструирование рекомбинантных вирусных вакцин путем прямой транспозон-опосредованной инсерции чужеродных иммунологических детерминант в белки векторного вируса - RU2009105099A

Реферат

1. Способ получения вирусного генома, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гетерологичный пептид, предусматривающий !(i) стадию получения вирусного гена-мишени; ! (ii) стадию, на которой вирусный ген-мишень подвергают мутагенезу; и ! (iii) стадию лигирования молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей гетерологичный пептид, в сайт мутагенеза вирусного гена-мишени. ! 2. Способ по п.1, дополнительно предусматривающий стадии ! (iv) трансфекции клеток геномными библиотеками нуклеиновых кислот для инициации репликации вируса; и ! (v) отбора жизнеспособных вирусов-рекомбинантов. ! 3. Способ по п.1, где вирусный ген-мишень представлен в челночном векторе, и после лигирования молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей гетерологичный пептид, в сайт мутагенеза вирусного гена-мишени способ дополнительно предусматривает стадию введения мутировавшего вирусного гена-мишени в вирусный геном, из которого был получен вирусный ген-мишень, вместо соответствующего вирусного гена, лишенного инсерции, с получением вирусного генома, содержащего инсерцию. ! 4. Способ по п.3, где челночный вектор содержит два или более вирусных генов-мишеней. ! 5. Способ по п.1, где вирусный ген-мишень получен в контексте интактного вирусного генома, и указанный способ предусматривает получение вирусного генома, содержащего инсерцию. ! 6. Способ по любому из пп.1-5, дополнительно предусматривающий получение вирусного вектора из вирусного генома, содержащего инсерцию, путем введения вирусного генома, содержащего инсерцию, в клетки. ! 7. Способ по п.6, дополнительно предусматривающий выделение вирусного вектора из клеток или их супернатанта. ! 8. Способ �