Мутанты по n-белку вируса респираторно-репродуктивного синдрома свиней - RU2007131536A

Реферат

1. Композиция, содержащая инфекционный агент РРСС (респираторно-репродуктивный синдром свиней), выбранный из группы, состоящей из

а) генетически модифицированного РРСС-вируса, содержащего N-белок, который был модифицирован по меньшей мере в одной консервативной области, выбранной из группы, состоящей из NLS-2-области, NoLS-области и NES-области, так, что консервативная область была элиминирована, и где генетически модифицированный РРСС-вирус является аттенуированным;

б) инфекционной молекулы РНК, кодирующей генетически модифицированный РРСС-вирус, указанный в (а); и

в) выделенной полинуклеотидной молекулы, содержащей последовательность ДНК, кодирующую инфекционную молекулу РНК, указанную в (б).

2. Композиция по п.1, которая была дополнительно модифицирована, так, что или а) консервативная NLS-1-область была элиминирована, или консервативная область была элиминирована введением неконсервативной аминокислотной замены, или консервативная область была по меньшей мере частично удалена.

3. Композиция по п.1, где консервативная область выбрана из любой из следующих ниже или комбинации следующих ниже: а) NoLS-области, NLS-2-области и или NES-области.

4. Композиция по п.1, где РРСС-вирус выбран из любого из следующих ниже или комбинации следующих ниже: а) североамериканского РРСС-вируса или европейского РРСС-вируса.

5. Композиция по п.3, где РРСС-вирус представляет собой североамериканский РРСС-вирус, и где консервативная область представляет собой NLS-2-область.

6. Композиция по п.5, выбранная из группы, состоящей из этих композиций

где 43 и 44 остатки N-белка представляют собой глицин,

где 43 и 44 остатки N-белка представляют собой глицин, и 45 остаток представляет собой аспарагин,

где NLS-2-область была по меньшей мере частично удалена,

где по меньшей мере один из остатков N-белка с 43 по 48 был удален,

где были удалены и 43, и 44 остатки N-белка,

где были удалены 43, 44 и 46 остатки N-белка,

где были удалены 44, 46 и 47 остатки N-белка, и или

где были удалены 46, 47 и 48 остатки N-белка.

7. Композиция по любому из пп.1-6, содержащая дополнительные нуклеотидную мутацию, замены и/или делеции, сконструированные с целью минимизации вероятности реверсии.

8. Вакцина для защиты свиньи от инфекции РРСС-вируса, содержащая композицию по любому из пп.1-7 в количестве, эффективном для выработки иммунитета против инфекции РРСС-вируса, и носитель, приемлемый для ветеринарного применения.

9. Способ защиты свиньи от инфекции РРСС-вируса, включающий вакцинацию животного вакциной по п.8 в количестве, эффективном для выработки иммунитета против инфекции РРСС-вируса.

10. Трансфицированная клетка-хозяин, содержащая композицию по любому из пп.1-9.

11. Способ получения генетически модифицированного и аттенуированного РРСС-вируса, включающий

а) мутирование последовательности ДНК, кодирующей инфекционную молекулу РНК, кодирующую РРСС-вирус, с целью получения генетически модифицированного РРСС-вируса, содержащего N-белок, который был модифицирован по меньшей мере в одной консервативной области, выбранной из группы, состоящей из NLS-2-области, NoLS-области и NES-области, так, что консервативная область была элиминирована;

б) введение генетически модифицированного РРСС-вируса в клетку-хозяина, способную поддерживать репликацию РРСС.

12. Способ по п.11, где генетически модифицированный РРСС-вирус также был модифицирован одной или более чем одной дополнительной нуклеотидной мутацией, заменой и/или делецией, которые минимизируют вероятность реверсии.

13. Способ по п.11, где генетически модифицированный РРСС-вирус представляет собой североамериканский РРСС-вирус или европейский РРСС-вирус.

14. Способ по любому из пп.11-13, где клетка-хозяин, способная поддерживать репликацию РРСС, представляет собой клетку MARC-145.

15. Способ по любому из пп.11-13, где клетка-хозяин, способная поддерживать репликацию РРСС, содержится в живой свинье.