Аттенуированный вирус инфекционного бронхита - RU2018130683A
Код документа: RU2018130683A
Формула
1. Живой аттенуированной коронавирус, содержащий мутацию в неструктурном белке nsp-3 и/или делецию акцессорных белков 3a и/или 3b.
2. Коронавирус по п.1, где мутация в nsp-3 находится в области аденозиндифосфатрибоза-1'-фосфатазы (ADRP).
3. Коронавирус по п.1 или 2, в котором ген nsp-3 кодирует белок, содержащий одну или несколько аминокислотных мутаций, выбранных из списка:
Asn (N) на Ala (A) в положении 373 в SEQ ID NO: 6; и
Gly (G) на Ser (S) в положении 379 в SEQ ID NO: 6.
4. Коронавирус по любому из пп. 1-3, в котором ген nsp-3 кодирует белок, содержащий аминокислотную мутацию Asn (N) на Ala (A) в положении 373 в SEQ ID NO:6.
5. Коронавирус по любому из пп. 1-3, в котором ген nsp-3 кодирует белок, содержащий аминокислотную мутацию Gly (G) на Ser (S) в положении 379 в SEQ ID NO:6.
6. Коронавирус по любому из пп. 1-5, в котором ген nsp-3 содержит одну или несколько нуклеотидных замен, выбранных из списка:
A на G в нуклеотидном положении 1116 и A на C в нуклеотидном положении 1117 по сравнению с последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 5; и
G на A в нуклеотидном положении 1138 по сравнению с последовательностью, показанной как SEQ ID NO:5.
7. Коронавирус по п.1, содержащий делецию в нуклеотидном положении от 37 до 384 последовательности, показанной как SEQ ID NO: 2.
8. Коронавирус по любому из пп. 1-7, который является вирусом инфекционного бронхита (IBV).
9. Коронавирус по любому из пп. 1-8, который представляет собой M41 IBV.
10. Коронавирус по п.9, который содержит белок S, в котором по меньшей мере часть относится к серотипу IBV, отличному от M41.
11. Коронавирус по п.10, где субъединица S1 из серотипа IBV, отличного от M41.
12. Коронавирус по любому из пп. 1-11, который обладает уменьшенной патогенностью по сравнению с коронавирусом дикого типа, так что при введении вируса в яйцо с развивающимся эмбрионом он способен реплицироваться, не являясь патогенным для эмбриона.
13. Модифицированный ген nsp-3, определенный в любом из пп. 1-6.
14. Белок, кодируемый модифицированным геном nsp-3 по п.13.
15. Плазмида, содержащая модифицированный ген nsp-3 по п.13 или модифицированный ген 3 с делецией акцессорного белка 3a и/или 3b.
16. Способ получения коронавируса по любому из пп.1-12, который включает следующие стадии:
трансфекцию плазмиды по п.15 в клетку-хозяин;
инфицирование клетки-хозяина рекомбинирующим вирусом, содержащим геном штамма коронавируса с геном nsp-3 и/или геном 3;
обеспечение гомологичной рекомбинации между последовательностями генов в плазмиде и соответствующими последовательностями в рекомбинирующем вирусном геноме с получением модифицированного гена; и
отбор рекомбинирующего вируса, содержащего модифицированный ген.
17. Способ по п.16, в котором рекомбинирующий вирус является вирусом осповакцины.
18. Способ по п.16 или 17, который также включает стадию:
(v) выделения рекомбинантного коронавируса, содержащего модифицированный ген из ДНК рекомбинирующего вируса стадии (iv).
19. Клетка, способная продуцировать коронавирус по любому из пп. 1-12.
20. Вакцина, содержащая коронавирус по любому из пп. 1-12 и фармацевтически приемлемый носитель.
21. Способ лечения и/или профилактики заболевания у особи, который включает стадию введения особи вакцины по п.20.
22. Вакцина по п.20 для применения в лечении и/или профилактики заболевания у особи.
23. Применение коронавируса по любому из пп.1-12 для получения вакцины для лечения и/или профилактики заболевания у особи.
24. Способ, вакцина или применение по пп.21, 22 или 23, где заболевание представляет собой инфекционный бронхит (IB).
25. Способ по п.21, в котором способ введения выбран из группы, состоящей из: применение глазных капель, интраназальное введение, введение с питьевой водой, инъекция после вылупления и инъекция in ovo.
26. Способ по п.24, в котором вакцинация представляет собой вакцинацию in ovo.
27. Способ получения вакцины по п.20, который включает стадию инфицирования клетки по п.19 коронавирусом по любому из пп. 1-12.
