Способ очистки, предназначенный для получения очищенного вируса везикулярного стоматита из клеточной культуры - RU2008140137A

Реферат

1. Способ очистки вируса везикулярного стоматита (BBC) из жидкости клеточной культуры, полученной из культуры клеток млекопитающего, зараженных ВВС, который включает: ! (a) осветление жидкости клеточной культуры при помощи низкоскоростного центрифугирования с получением BBC в надосадочной жидкости; !(b) фильтрование надосадочной жидкости, полученной на стадии (а), через фильтр с отверстиями размером от 0,2 до 0,45 мкм, и получение ВВС в отфильтрованном растворе; ! (c) загрузку содержащего BBC отфильтрованного раствора, полученного на стадии (b), на анионообменный мембранный адсорбер, уравновешенный первым буферным солевым раствором, элюирование ВВС из анионообменного мембранного адсорбера вторым буферным солевым раствором и сбор элюированных фракций, содержащих BBC; ! (d) очистку BBC, выделенного на стадии (с), проточной фильтрацией вдоль направления потока (ПФ) с использованием мембраны, предел пропускания по молекулярной массе которой составляет от 300 кДа до 1000 кДа, и получение ВВС в концентрате; и ! (e) фильтрование содержащего ВВС концентрата, полученного на стадии (d), через фильтр с отверстиями размером от 0,2 до 0,22 мкм и получение ВВС в отфильтрованном растворе. ! 2. Способ по п.1, согласно которому ВВС, полученный на стадии (е), по меньшей мере на от 90,0 до примерно 99,0% очищен от загрязняющих его белков клеточной культуры и нуклеиновых кислот. ! 3. Способ по п.1, согласно которому клетки млекопитающего выбирают из группы, включающей эмбриональные клетки почки человека (НЕК), клетки НЕК 293, клетки яичников Китайского хомячка (СНО), клетки почки новорожденных хомячков (BHK), клетки почки Африканской зеленой мартышки (AGMK) и клетки Vero AGMK. ! 4