Выделение нового пестивируса, вызывающего врожденный тремор а - RU2019111600A
Код документа: RU2019111600A
Формула
1. Выделенный полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 или последовательность по меньшей мере с 60%, в частности, с 70% идентичности с ними.
2. Полинуклеотид по п. 1, который является инфекционным полинуклеотидом.
3. Полинуклеотид по п. 1 или 2, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид присутствует в клетке.
4. Полинуклеотид по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что с указанным полинуклеотидом связан промотор РНК-полимеразы функционально.
5. Полинуклеотид по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид дополнительно содержит экзогенный полинуклеотид.
6. Полинуклеотид по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид присутствует в векторе.
7. Полинуклеотид, который представляет собой кДНК с последовательностью SEQ ID NO: 1.
8. Полинуклеотид, который представляет собой кДНК, и имеет по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологии с SEQ ID NO: 1.
9. Инфекционный полинуклеотид, содержащий последовательность, выбранную из группы SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29 или любые их комбинации или последовательность, которая по меньшей мере на 95% им идентична.
10. Композиция, содержащая свиной пестивирус, который имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 или последовательность, которая по меньшей мере на 60%, в частности, по меньшей мере на 70% им идентична.
11. Композиция, содержащая свиной пестивирус, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или последовательность, идентичную ей по меньшей мере на 60%.
12. Композиция, содержащая свиной пестивирус, содержащий одну или несколько аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4 (Npro), SEQ ID NO: 5 (Core), SEQ ID NO: 6 (Ems), SEQ ID NO: 7 (E1), SEQ ID NO: 8 (E2), SEQ ID NO: 9 (P7), SEQ ID NO: 10 (NS2), SEQ ID NO: 11 (NS3), SEQ ID NO: 12 (NS4A), SEQ ID NO: 13 (NS4B), SEQ ID NO: 14 (NS5A) и SEQ ID NO: 15 (NS5B).
13. Композиция по любому из пп. 10-12, отличающаяся тем, что свиной пестивирус инактивирован или ослаблен.
14. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что указанный пестивирус представляет собой химически инактивированный вирус, который специфически инактивирован путем обработки инактивирующим агентом, выбранным из группы, состоящей из бинарного этиленимина, этиленимина, ацетилэтиленимина, бета-этиленимина, бета-пропиолактона, глутаральдегида, озона и формальдегида.
15. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что указанный пестивирус представляет собой физически инактивированный пестивирус, который инактивирован обработкой ультрафиолетовым излучением, рентгеновским излучением, гамма-излучением, оттаиванием и/или нагреванием.
16. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что указанный пестивирус ослаблен путем модификации генов Npro, Erns или N2-3.
17. Композиция по любому из пп. 10-16, содержащая пестивирус в лиофилизированной форме.
18. Композиция по любому из пп. 10-17, содержащая TCID50 по меньшей мере приблизительно 1×104.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая композицию по любому из пп. 10-18.
20. Вектор на основе свиного пестивируса, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2 или последовательность, которая по меньшей мере на 60%, в частности по меньшей мере на 70% ей идентична, и последовательность, кодирующую гетерологичную последовательность.
21. Вектор по п. 20, отличающийся тем, что указанная гетерологичная последовательность выбрана из вируса, выбранного из группы, состоящей из APPV, NRPV, свиного цирковируса 2 (PCV2), вируса Bungowannah, вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV), в частности BVDV-1, BVDV-2, вируса классической чумы свиней (CSFV), RaPV и вируса пограничной болезни, причем в частности, указанная гетерологичная последовательность кодирует поверхностный антиген из указанных вирусов.
22. Вектор по любому из пп. 20 или 21, отличающийся тем, что гетерологичная последовательность вставлена в область 5'- или 3'-конца Npro.
23. Вектор по любому из пп. 20-22, отличающийся тем, что указанная гетерологичная последовательность кодирует слитый пептид с белком Npro, Е2 или Е1 пестивируса.
24. Химерный пестивирус, содержащий нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 60%, в частности, по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2, и чужеродный полипептид.
25. Вакцина для животных, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 1 по 9, или композицию по любому из пп. 10-18, или вектор по любому из пп. 20-23, или химерный пестивирус по пункту 24.
26. Набор для индукции иммунного ответа против инфекции свиного пестивируа у животного, причем указанный набор включает композицию по любому из пп. 10-18 и инструкции по введению указанной композиции указанному животному.
27. Способ защиты поросенка от заболевания, ассоциированного с пестивирусом, при этом указанный способ включает введение любой супоросой свиноматке, отъемышу, ремсвинке, или свиноматке или ремсвинке до размножения композиции согласно любому из пп. 10-18, в количестве, достаточном для защиты поросенка.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что заболевание представляет собой врожденный тремор, в частности, врожденный тремор А-II.
29. Способ по п. 27 или 28, согласно которому композицию вводят парентерально, в частности, внутримышечно, подкожно, внутрикожно или внутривенно, с использованием иглы и шприца или безыгольного инъекционного устройства; или путем введения через слизистую оболочку, в частности через нос или через рот.
30. Способ обнаружения пестивируса, отличающийся тем, что образец тестируют с помощью ОТ-ПЦР с использованием по меньшей мере одного праймера, выбранного из SEQ ID NO: 32 и SEQ ID NO: 33.
31. Диагностическая тест-система для обнаружения пестивируса, содержащая по меньшей мере один праймер, выбранный из SEQ ID NO: 32 и SEQ ID NO: 33.
32. Способ обнаружения антигена пестивируса, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 60% ей идентична, в биологическом образце, причем указанный способ включает:
Осуществление контакта биологического образца с моноклональным антителом 6А5, причем указанное моноклональное антитело специфически связывается с антигеном указанного пестивируса, если он присутствует в указанном образце; и обнаружение связывания антитела с указанным антигеном в указанном образце.
33. Способ приготовления вакцины по п. 32, включающий следующие последовательные этапы:
a) Заражение культуры клеток-хозяев полинуклеотидом по любому из пп. 1-9, вектором по любому из пп. 20-23 или химерным пестивирусом по пункту 24,
b) Инкубацию указанной культуры клеток-хозяев для размножения вируса,
c) Сбор культуры клеток-хозяев и, необязательно
d) Выделение вируса из культуры и
e) Смешивание культуры с фармацевтически приемлемым носителем.
34. Применение полинуклеотида по любому из пп. 1-9, или композиции по любому из пп. 10-18, или вектора по любому из пп. 20-23, или химерного пестивируса по п. 24 или любой их комбинации для приготовления вакцины для животных.
35. Полинуклеотид по любому из пп. 1-8, или композиция по любому из пп. 10-18, или вектор по любому из пп. 20-23, или химерный пестивирус по п. 24 или любая их комбинация для применения в вакцине для животных.
36. Способ борьбы с пестивирусной инфекцией у животных, согласно которому вакцину по п. 25 комбинируют с диагностическим набором по п. 26.
