Формула
1. Рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 (GaHV3; MDV-2), содержащий один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих и экспрессирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, встроенный в межгенные локусы UL3/UL4 и/или UL21/UL22 вектора герпесвируса Gallid 3.
2. Рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 по п. 1, в котором рекомбинантным вектором герпесвируса Gallid 3 (GaHV3; MDV-2) является вектор штамма SB-1 герпесвируса Gallid 3 (GaHV3; MDV-2).
3. Рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 по любому из пп. 1 или 2, в котором по меньшей мере один антиген защищает от вируса инфекционной бурсальной болезни (IBDV), вируса инфекционного ларинготрахеита (ILTV), вируса болезни Ньюкасла (NDV), вируса птичьего гриппа (AIV) или вируса птичьего инфекционного бронхита (IBV) и в котором по меньшей мере один антиген предпочтительно выбран из группы, состоящей из
(a) VP2, VP3, VP4 и VPX вируса инфекционной бурсальной болезни (IBDV);
(b) гликопротеина В, гликопротеина I, гликопротеина D, гликопротеина Е и гликопротеина С вируса инфекционного ларинготрахеита (ILTV);
(c) гибридного белка вируса болезни Ньюкасла (NDV-F) и вирусной гемагглютинин-нейраминидазы (NDV-NH) вируса болезни Ньюкасла (NDV);
(d) гемагглютинина (НА) и нейраминидазы (NA) птичьего гриппа, и
(e) белка S1 или белка S2 вируса птичьего инфекционного бронхита (IBV).
4. Вакцина, содержащая рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 по любому из предыдущих пунктов, необязательно содержащая фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или адъювант.
5. Вакцина по п. 4, содержащая дополнительный вектор вируса болезни Марека (MDV), выбранный из группы, состоящей из вектора герпесвируса Gallid 3, вектора (CVI-988) естественным образом аттенуированного штамма Rispens MDV-1 и вектора штамма Fc126 герпесвируса индеек (HVT).
6. Вакцина по п. 5, в которой дополнительным вектором MDV является рекомбинантный вектор MDV и рекомбинантный вектор вируса болезни Марека (MDV) содержит один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих и экспрессирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена.
7. Вакцина по п. 6, в которой рекомбинантный вектор вируса болезни Марека является вторым рекомбинантным вектором герпесвируса Gallid 3, предпочтительно рекомбинантным вектором штамма SB-1 герпесвируса Gallid 3, в дополнение к первому рекомбинантному вектору герпесвируса Gallid 3 по любому из пп. 1-3, и в котором
(a) второй рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 содержит один или более гетерологичных полинуклеотидов, встроенных в межгенные локусы UL3/UL4 и/или UL21/UL22 указанного второго вектора герпесвируса Gallid 3 и
(b) второй рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 содержит по меньшей мере один гетерологичный полинуклеотид, кодирующий и экспрессирующий другой антиген птичьего патогена, в качестве одного или более гетерологичных полинуклеотидов первого рекомбинантного вектора герпесвируса Gallid 3.
8. Искусственная бактериальная хромосома (ИБХ), содержащая полинуклеотид, кодирующий рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 по любому из пп. 1-3.
9. Применение вакцины по любому из пп. 4-7 в вакцинации вида птиц против болезни Марека и одного или более заболеваний, вызываемых одним или более птичьими патогенами.
10. Применение по п. 9, в котором
(а) одно или более заболеваний вызваны одним или более из вируса инфекционной бурсальной болезни (IBDV), вируса инфекционного ларинготрахеита (ILTV), вируса болезни Ньюкасла (NDV), вируса птичьего гриппа (AIV) или вируса птичьего инфекционного бронхита (IBV), и/или
(b) видом птиц является домашняя птица, предпочтительно курица, утка, гусь, индейка, перепел, цесарка или голубь, более предпочтительно индейка или курица.
11. Применение вакцины по любому из пп. 4-7 в защите вида птиц от клинических симптомов, вызываемых вирусом болезни Марека, и клинических симптомов, вызываемых одним или более птичьими патогенами.
12. Применение по п. 11, в котором
(a) один или более клинических симптомов вызваны одним или более из вируса инфекционной бурсальной болезни (IBDV), вируса инфекционного ларинготрахеита (ILTV), вируса болезни Ньюкасла (NDV), вируса птичьего гриппа (AIV) или вируса птичьего инфекционного бронхита (IBV), и/или
(b) видом птиц является домашняя птица, предпочтительно курица, утка, гусь, индейка, перепел, цесарка или голубь, более предпочтительно индейка или курица.
13. Рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3 (GaHV3; MDV-2), содержащий один или более маркеров, встроенных в межгенные локусы UL3/UL4 и/или UL21/UL22 вектора герпесвируса Gallid 3, в котором маркером предпочтительно является ген селективного маркера, репортерный ген или штрих-код ДНК.
14. Способ получения рекомбинантного вектора герпесвируса Gallid 3, включающий в себя:
(a) получение вектора герпесвируса Gallid 3;
(b) встраивание одного или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих и экспрессирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена в межгенные локусы UL3/UL4 и/или UL21/UL22 вектора герпесвируса Gallid 3, и необязательно
(c) амплификацию вектора герпесвируса Gallid 3, содержащего один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, полученного на этапе (b).
15. Способ по п. 14, в котором этап (а) включает в себя получение искусственной бактериальной хромосомы, содержащей полинуклеотид, кодирующий рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3, причем способ необязательно дополнительно включает в себя этапы
(d) выделение искусственной бактериальной хромосомы, содержащей полинуклеотид, кодирующий рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3, содержащий один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, полученного на этапе (b);
(e) трансфекцию эмбриональных фибробластов цыпленка искусственной бактериальной хромосомой, полученной на этапе (d).
16. Способ получения рекомбинантного вектора герпесвируса Gallid 3, включающий в себя
(a) получение вектора герпесвируса Gallid 3, содержащего один или более маркеров в межгенных локусах UL3/UL4 и/или UL21/UL22 вектора герпесвируса Gallid 3;
(b) замену одного или более маркеров на экспрессионную кассету, содержащую один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, и
(c) амплификацию вектора герпесвируса Gallid 3, содержащего один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, полученного на этапе (b).
17. Способ по п. 16, в котором этап (а) включает в себя получение искусственной бактериальной хромосомы, содержащей полинуклеотид, кодирующий рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3, причем способ необязательно дополнительно включает в себя этапы
(d) выделение искусственной бактериальной хромосомы, содержащей полинуклеотид, кодирующий рекомбинантный вектор герпесвируса Gallid 3, содержащий один или более гетерологичных полинуклеотидов, кодирующих по меньшей мере один антиген птичьего патогена, полученного на этапе (b);
(e) трансфекцию эмбриональных фибробластов цыпленка искусственной бактериальной хромосомой, полученной на этапе (d).