Способы и композиции для лечения нарушений и заболеваний, связанных с rdh12 - RU2019103488A
Код документа: RU2019103488A
Формула
1. Кодон-оптимизированная нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 3, кодирующая RDH12 человека.
2. Экспрессионная кассета, содержащая кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 3, кодирующую RDH12 человека.
3. Экспрессионная кассета по п. 2, в которой указанная кодон-оптимизированная последовательность функционально связана с регулирующими экспрессию последовательностями, которые направляют в клетке-хозяине экспрессию кодон-оптимизированной нуклеотидной последовательности, кодирующей функциональный RDH12.
4. Экспрессионная кассета рекомбинантного AAV, содержащая последовательности инвертированных концевых повторов AAV, фланкирующие экспрессионную кассету, содержащую кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность, которая кодирует функциональный RDH12, а также регулирующие экспрессию последовательности, которые направляют экспрессию кодируемого белка в клетке-хозяине.
5. Экспрессионная кассета rAAV по п. 4, которая представляет собой AAV8-RDH12-Myc или AAV7m8-RDH12-Myc.
6. Вектор или плазмида, содержащие экспрессионную кассету по любому из пп. 2-5.
7. Провирусная плазмида, содержащая капсид AAV и экспрессионную кассету, содержащую последовательности инвертированных концевых повторов AAV и кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность, которая кодирует функциональный RDH12, а также регулирующие экспрессию последовательности, которые направляют экспрессию кодируемого белка в клетке-хозяине.
8. Вектор на основе рекомбинантного адено-ассоциированного вируса (AAV), содержащий капсидный белок AAV и встречающуюся в природе или кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность, которая кодирует функциональный RDH12 или его функциональный фрагмент под контролем регуляторных последовательностей, которые экспрессируют RDH12 в фоторецепторных клетках субъекта.
9. rAAV по п. 8, причем rAAV содержит капсид AAV8 или его вариант, капсид AAV7 или его вариант, капсид AAV5 или его вариант, либо капсид AAV2 или его вариант.
10. rAAV по п. 8, в котором белок RDH12 имеет последовательность SEQ ID NO: 4.
11. rAAV по п. 8, в котором белок RDH12 кодируется нуклеотидной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 3, или ее вариантом.
12. rAAV по п. 8, причем rAAV представляет собой самокомплементарный AAV.
13. Клетка-хозяин, содержащая любую из композиций по любому из пп. 2-12.
14. Композиция, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, пригодную для лечения болезни глаз, содержащую последовательность, кодирующую функциональный RDH12 под контролем регуляторных последовательностей, которые направляют его экспрессию в глазных клетках; и носитель или вспомогательное вещество, подходящие для доставки в глазные клетки субъекта.
15. Композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель, подходящий для доставки в глаз, и вирусный вектор, содержащий капсидный белок AAV и встречающуюся в природе или кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность, которая кодирует функциональный RDH12 или его функциональный фрагмент под контролем регуляторных последовательностей, которые экспрессируют RDH12 в фоторецепторных клетках субъекта.
16. Способ лечения RDH12-опосредованного заболевания у млекопитающего, причем способ включает в себя введение композиции по п. 14 нуждающемуся в этом субъекту.
17. Способ лечения, замедления или остановки прогрессирования болезни глаз или приводящего к слепоте заболевания у млекопитающего, либо восстановления по меньшей мере частичного зрения у указанного субъекта, причем способ включает в себя введение композиции по п. 14 нуждающемуся в этом субъекту.
18. Способ по п. 17, в котором указанную композицию вводят субретинально или интравитреально.
19. Способ по п. 17, в котором указанное заболевание возникает в результате дефицита или мутации гена, кодирующего RDH12.
20. Способ предотвращения, прекращения прогрессирования или ослабления потери зрения, связанной с ВАЛ-13 или ПДС-53, у субъекта, причем указанный способ включает в себя введение указанному субъекту эффективной концентрации композиции, содержащей рекомбинантный адено-ассоциированный вирус (AAV), несущий встречающуюся в природе или кодон-оптимизированную нуклеотидную последовательность, кодирующую функциональный белок RDH12 или его фрагмент под контролем регуляторных последовательностей, которые экспрессируют RDH12 в фоторецепторных клетках указанного субъекта, и фармацевтически приемлемый носитель.
21. Способ по п. 20, в котором композицию вводят перед возникновением заболевания или после начала потери фоторецепторов.
22. Способ по п. 20, в котором введение композиции повторяют по меньше мере один раз в тот же глаз и/или в контралатеральный глаз.
23. Способ лечения или предотвращения ВАЛ-13 или ПДС-53 у нуждающегося в этом субъекта, включающий в себя:
(a) идентификацию субъекта с ВАЛ или ПДС, или субъекта, находящегося в группе риска развития этих заболеваний;
(b) проведение анализа генотипа и идентификацию мутации гена RDH12;
(c) проведение неинвазивной визуализации и функциональных исследований сетчатки и идентификацию зон с остаточными фоторецепторами, на которые может быть нацелена терапия;
(d) введение указанному субъекту эффективной концентрации композиции, содержащей рекомбинантный вирус, несущий нуклеотидную последовательность, кодирующую функциональный RDH12 под контролем промоторной последовательности, которая экспрессирует продукт указанного гена в указанных фоторецепторных клетках, и фармацевтически приемлемый носитель.
