Способ продуцирования и очистки ортопоксвируса - RU2011148790A
Код документа: RU2011148790A
Реферат
1. Способ получения и очистки ортопоксвируса дикого типа, аттеньюированного и/или рекомбинантного ортопоксвируса, включающий следующие этапы:a) приготовление культуры пакующих клеток;b) инфицирование культуры пакующих клеток ортопоксвирусом;c) культивирование инфицированных пакующих клеток до получения потомства ортопоксвируса;d) инкубация в присутствии одной или более нуклеаз;e) выделение ортопоксвирусов из супернатанта культуры и/или пакующих клеток;f) добавление моновалентных солей к ортопоксвирусам, выделенным на этапе е), в условиях, подходящих для ингибирования активности нуклеазы (нуклеаз) и для предотвращения адсорбции указанных ортопоксвирусов к анионообменному адсорбенту на этапе g);g) осуществление контакта смеси, полученной на этапе f) с анионообменным адсорбентом в условиях, подходящих для захвата нуклеиновых кислот;h) осветление смеси, полученной на этапе g), в условиях, подходящих для удаления клеточного дебриса;i) промывка анионообменного адсорбента раствором, содержащим моновалентные соли, в условиях, подходящих для выделения оставшихся ортопоксвирусов в фильтрате;j) концентрирование фильтрата, полученного на этапе h), и фильтрата, полученного на этапе i);k) диафильтрация содержащей ортопоксвирус фракции, полученной на этапе j).2. Способ по п.1, в котором пакующие клетки представляют собой иммортализованные клеточные линии, предпочтительно иммортализованные линии клеток птиц.3. Способ по п.2, где иммортализованные линии клеток птиц способны расти в суспензии без (микро)носителей, причем указанные клетки предпочтительно культивируют в среде, свободной от продуктов животного происхождения.4. Спо
