Конверсия на основе малых молекул соматических клеток в клетки нейрального гребня - RU2016105998A
Код документа: RU2016105998A
Формула
1. Способ получения клеток нейрального гребня из соматических клеток, включающий:
а) культивирование соматических клеток в среде, дополненной вальпроевой кислотой,
б) культивирование клеток, полученных на стадии а), в бессывороточной среде, дополненной N-{(3R,4R)-4-[4-(2-фтор-6-гидрокси-3-метоксибензоил)бензоиламино]азепан-3-ил}-4-гидрокси-3,5-диметилбензамидом.
2. Способ по п. 1, где способ не включает генетическую модификацию соматических клеток или клеток, полученных на стадии (а), путем интродукции генов.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором стадия б) включает культивирование клеток в суспензионной культуре.
4. Способ по п. 1 или 2, в котором бессывороточную среду, применяемую на стадии б), дополняют ингибитором белка, участвующего в остеогенезе (BMP).
5. Способ по п. 4, в котором ингибитор BMP представляет собой ноггин.
6. Способ по одному из пп. 1, 2 или 5, в котором бессывороточную среду, применяемую на стадии б), дополняют малой молекулой, представляющей собой ингибитор трансформирующего фактора роста бета (TGF-β).
7. Способ по п. 6, в котором малая молекула, являющаяся ингибитором TGF β, представляет собой SB431542.
8. Способ по одному из пп. 1, 2, 5 или 7, в котором бессывороточную среду, применяемую на стадии б), дополняют малой молекулой, представляющей собой ингибитор киназы 3 гликогенсинтазы (GSK3β).
9. Способ по п. 8, в котором ингибитор GSK3β представляет собой 3-(3-аминофенил)-4-(1-метил-1Н-индол-3-ил)пиррол-2,5-дион.
10. Способ по одному из пп. 1, 2, 5, 7 или 9, в котором стадия а) включает культивирование клеток в течение 2 дней.
11. Способ по одному из пп. 1, 2, 5, 7 или 9, в котором стадия б) включает культивирование клеток в течение 7 дней.
12. Способ по одному из пп. 1, 2, 5, 7 или 9, в котором соматические клетки представляют собой фибробласты.
13. Способ по одному из пп. 2, 5, 7 или 9, в котором соматические клетки представляют собой человеческие клетки.
14. Способ по одному из пп. 1, 2, 5, 7 или 9, в котором соматические клетки получают из организма индивидуума, страдающего неврологическим заболеванием.
15. Клетки нейрального гребня, полученные способом по одному из предыдущих пунктов.
16. Способ по одному из пп. 1, 2, 5, 7 или 9, дополнительно включающий
в) инкубацию продукта, полученного на стадии б), в условиях, пригодных для дифференцировки клеток нейрального гребня в дифференцированную клетку, выбранную из группы, включающей шванновскую клетку, хондроцит, гладкомышечную клетку или адипоцит.
17. Шванновские клетки, хондроциты, гладкомышечные клетки или адипоциты, полученные способом по п. 16.
18. Биобанк клеток нейрального гребня по п. 15 или дифференцированных шванновских клеток, хондроцитов, гладкомышечных клеток или адипоцитов по п. 17.
19. Применение клеток по п. 15 или 17, или биобанка по п. 18 в качестве модели in vitro неврологических заболеваний.
20. Терапевтическая композиция, содержащая клетки по п. 15 или 17, или биобанк по п. 18.
21. Применение N-{(3R,4R)-4-[4-(2-фтор-6-гидрокси-3-метоксибензоил)бензоиламино]азепан-3-ил}-4-гидрокси-3,5-диметилбензамида в способе получения клеток нейрального гребня из соматических клеток.
22. Применение 3-(3-аминофенил)-4-(1-метил-1Н-индол-3-ил)пиррол-2,5-диона в способе получения клеток нейрального гребня из соматических клеток.
