Органоиды, содержащие изолированные почечные клетки, и их применение - RU2015152257A
Код документа: RU2015152257A
Формула
1. Способ формирования органоида, содержащего гетерогенную популяцию клеток почек и популяцию биоактивных клеток, причем указанный способ включает культивирование гетерогенной популяции клеток почек и популяции биоактивных клеток в культуральной системе, выбранной из группы, состоящей из: i) культуры 2D; ii) культуры 3D: гель COL(I); iii) культуры 3D : Матригель; iv) культуры 3D: с постоянным перемешиванием, за которым следует COL(I)/Матригель; и v) культуры 3D: гель COL(IV).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит популяцию биоактивых клеток почек.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию В2, содержащую обогащенную популяцию канальцевых клеток, и при этом гетерогенная популяция клеток почек обеднена клеточной популяцией В1.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек дополнительно обеднена клеточной популяцией B5.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию, выбранную из группы B2, B2/B3, B2/B4 и B2/B3/B4.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит эритропоэтин (ЭПО)-продуцирующие клетки.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что популяция биоактивных клеток представляет собой популяцию эндотелиальных клеток.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток представляет собой клеточную линию.
9. Способ по п. 7, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток содержит ЭКПВЧ-клетки.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клеточные популяции выбираются из группы ксеногенных, сингенных, аллогенных, аутологичных популяций и их комбинаций.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в течение первого периода времени гетерогенная популяция клеток почек и популяция биоактивных клеток культивируются отдельно, а в течение второго периода времени культивируются вместе .
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что второй период времени составляет по меньшей мере 24 часа.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что второй период времени составляет от 24 часов до 72 часов.
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что популяция клеток почек и популяция биоактивных клеток объединены в соотношении 1:1.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что популяция клеток почек и популяция биоактивных клеток суспендированы в питательной среде.
16. Органоид, произведенный согласно способу по любому из пп.1-15.
17. Органоид, содержащий гетерогенную популяцию клеток почек и популяцию биоактивных клеток.
18. Органоид по п. 17, отличающийся тем, что популяция биоактивных клеток представляет собой популяцию эндотелиальных клеток.
19. Органоид по п. 18, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию В2, содержащую обогащенную популяцию канальцевых клеток, и при этом гетерогенная популяция клеток почек обеднена клеточной популяцией В1.
20. Органоид по п. 19, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек дополнительно обеднена клеточной популяцией B5.
21. Органоид по п. 17, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию, выбранную из группы B2/B3, B2/B4 и B2/B3/B4.
22. Органоид по п. 17, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит эритропоэтин (ЭПО)-продуцирующие клетки.
23. Органоид по п. 18, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток представляет собой клеточную линию.
24. Органоид по п. 18, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток содержит ЭКПВЧ-клетки.
25. Состав для инъекций, содержащий по меньшей мере один органоид и жидкую среду.
26. Состав по п. 25, отличающийся тем, что жидкая среда выбирается из питательной среды клеток, DPBS и их комбинаций.
27. Состав по п. 26, отличающийся тем, что жидкая среда представляет собой DPBS.
28. Состав по п. 25, отличающийся тем, что органоиды суспендируют в жидкой среде.
29. Состав для инъекций, содержащий органоиды и биоматериал, стабилизирующий клетки, чувствительный к температуре и поддерживающий
(i) по существу твердое состояние при температуре около 8°С или ниже и
(ii) по существу жидкое состояние при температуре окружающей среды или выше.
30. Состав по п. 29, отличающийся тем, что органоиды содержат биологически активные клетки почек.
31. Состав по п. 30, отличающийся тем, что органоиды дополнительно содержат клетки ЭКПВЧ.
32. Состав по п.29, отличающийся тем, что биоактивные клетки по существу равномерно диспергированы по всему объему биоматериала, стабилизирующего клетки.
33. Состав по п. 29, отличающийся тем, что биоматериал характеризуется переходным состоянием "из твердого вещества в жидкость" в диапазоне от около 8°С и приблизительно до значения температуры окружающей среды или выше.
34. Состав по п. 29, отличающийся тем, что по существу твердое состояние является гелеобразным состоянием.
35. Состав по п. 29, отличающийся тем, что биоматериал, стабилизирующий клетки, содержит гидрогель.
36. Состав по п. 35, отличающийся тем, что гидрогель содержит желатин.
37. Состав по п. 36, отличающийся тем, что желатин присутствует в составе в количествах от около 0,5% до около 1% (масса/объем).
38. Состав по п. 36, отличающийся тем, что желатин присутствует в составе в количестве около 0,75% (масса/объем).
39. Способ лечения заболевания почек у пациента, имеющего для этого показания, который предусматривает введение по меньшей мере одного органоида, содержащего гетерогенную популяцию клеток почек и популяцию биоактивных клеток.
40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что популяция биоактивных клеток представляет собой популяцию эндотелиальных клеток.
41. Способ по п. 39, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию В2, содержащую обогащенную популяцию канальцевых клеток, и при этом гетерогенная популяция клеток почек обеднена клеточной популяцией В1.
42. Способ по п. 41, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек дополнительно обеднена клеточной популяцией B5.
43. Способ по п. 39, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит клеточную популяцию, выбранную из группы B2, B2/B3, B2/B4 и B2/B3/B4.
44. Способ по п. 39, отличающийся тем, что гетерогенная популяция клеток почек содержит эритропоэтин (ЭПО)-продуцирующие клетки.
45. Способ по п. 40, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток представляет собой клеточную линию.
46. Способ по п. 40, отличающийся тем, что популяция эндотелиальных клеток содержит ЭКПВЧ-клетки.
47. Способ лечения заболевания почек у пациента, имеющего для этого показания, включает введение состава для инъекций согласно любому из пп. 25-38.
48. Способ согласно любому из пп. 39-46, отличающийся тем, что субъект представляет собой млекопитающее.
49. Способ согласно п. 48, отличающийся тем, что млекопитающее представляет собой человека.
50. Способ согласно любому из пп. 39-46, отличающийся тем, что субъект имеет заболевание почек.
51. Способ согласно любому из пп. 39-46, отличающийся тем, что наблюдается улучшение любого из следующих показателей: анемии (гематокрит, гемоглобин, эритроциты), воспаления (лейкоциты), концентрации мочи (spGrav) и азотемии (АМК - азот мочевины крови)
52. Применение органоида в изготовлении лекарственного средства для лечения болезни почек.
