Бессывороточная стабильная трансфекция и продукция рекомбинантных белков человека в клеточных линиях человека - RU2008103319A

Реферат

1. Способ получения иммортализованной клеточной линии человека, стабильно трансфицированной последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей ген, кодирующий целевой белок человека, или его производное, или его мутант, промотор и сигнал полиаденилирования (полиА) гормона роста быка, где указанный промотор и сигнал полиA связаны с 5'- и 3'-концом гена, кодирующего указанный целевой белок человека соответственно, где способ включает трансфекцию иммортализованной линии клеток-хозяев человека в бессывороточных условиях вектором трансфекции, содержащим указанную последовательность нуклеиновой кислоты и начало репликации. ! 2. Способ по п.1, в котором целевой белок человека представляет собой белок плазмы человека, выбранный из факторов свертывания крови, таких, как фактор IX, фактор VIII (дикого типа и с делецией B-домена), фактор VII/VIIa и фактор фон Виллебранда (vWF), факторов роста, таких, как эритропоэтин, колониестимулирующих факторов (CSF), таких, как гранулоцитстимулирующий фактор (G-CSF), макрофаг CSF (M-CSF) и гранулоцит-макрофаг CSF (GM-CSF), цитокины, такие, как интерлейкины, ингибиторы протеаз, такие, как альфа-1-антитрипсин (A1AT) и химотрипсин, транспортные белки, такие, как гормоны, белки с ингибиторным или регуляторным действием и их производные и мутанты, предпочтительно белок человека выбран из фактора IX, фактора VIII, включая фактор VIII дикого типа и фактор VIII с делецией B-домена, фактора VII/VIIa, G-CSF, vWF и A1AT, наиболее предпочтительно белок человека представляет собой фактор IX свертывания крови, кодируемый п.о. 939-2324 SEQ ID NO:1, A1AT человека, кодируемый п.о. 973-2259 SEQ ID NO:2, фактор VIII дикого типа, показанный в SEQ ID NO:9, фактор VIII человека с делецией B