Производные пептидов или их соли присоединения кислот и фармацевтическая композиция - RU2037499C1

Чертежи

Описание

Изобретение относится к новым биологически активным соединениям производным пептидов или их солям присоединения кислот и фармацевтической композиции на их основе, которые могут найти применение в медицине.

Известен целый ряд соединений, обладающих способностью ингибировать пролиферацию миелоноэтических клеток. Однако все эти соединения труднодоступны, их выделяют из природных источников.

Наиболее близким по структуре к предлагаемым является пентапептид формулы: Glp-Glu-Asp-Cys-Lys OH. Однако оказалось, что это соединение эффективно в отношении ингибирования пролиферации клеток только в меркаптоэтаноле, в то время как без меркаптоэтанола он неэффективен.

Поставлена задача поиск в ряду пептидов новых производных, доступных и эффективных в отношении ингибирования пролиферации миелоноэтических клеток.

Поставленная задача решается предлагаемыми производными пептидов общей формулы I
X-Glu-Asp-Cys (Aсм)-Lys OH где Х Н или Glp;
Асм ацетамидометильная группа, или солями присоединения кислот и фармацевтической композицией, содержащей фармацевтически приемлемый носитель, и в качестве активного начала производное пептида общей формулы I или соль присоединения кислоты в количестве 1-250 мг на дозу.

Соединения согласно изобретению подвергаются следующим испытаниям.

Испытание на кратковременное культивирование.

Клетки костного мозга крысы, используемые для кратковременного выращивания, брали у двухнедельных крыс массой 40 г. После обезглавливания животных выделяли мозговое вещество из бедренной кости и суспендировали в так называемой среде Паркера "ТС-199" (продукт OKI вместе с 10% плодной сыворотки крови теленка (продукт Gibco).

Образцы, взятые из суспензии, состоящие из 3х10⁶ цитобластных клеток мозгового вещества на 1 мл, инкубировали в чистом виде (контрольные образцы) в присутствии испытываемых веществ при 37^оС в атмосфере, содержащей 5 об. двуокиси углерода, насыщенной паром, в течение 4 ч, в пробирках для анализа крови, в инкубаторе В 5060 ЕК фирмы Heгаeus.

В течение третьего часа инкубации добавляли 36 кБк/мл тритийсодержащего тимидина³ Н-Тог (продукт VVWR, Прага) с удельной активностью 721 МБк/мл.

60 мин спустя пипетированием вводили 2х100 мкл аликвотных пробы на фильтрующие бумажные диски 3ММ Whatman, и бумажные диски затем промывали при температуре льда 5%-ным по массе раствором хлорной кислоты, затем этанолом и диэтилэфиром в течение 5 мин соответственно затем сушили.

Радиоактивность бумажных дисков замеряли в смеси на основе толуола, содержащей 5 г/л, 2,5-дифенилоксазола и 0,3 г/л 1,4-бис-(2-(5-фенил)оксазолил)бензола в жидкостном сцинтилляционном спектрометре типа Packard-TriCard. Замеряли число импульсов в минуту.

Число импульсов на каждую пробу сравнивали с числом импульсов необработанного контрольного образца и выражали в процентах к необработанному контрольному образцу.

Согласно результатам в присутствии 10^-7 моль/л Glp-Glu-Asp-Cys-Lys-OH и в присутствии 10^-7 моль/л Glp-Glu-Asp-Cys(Aсм)-Lys-OH введение тритийсодержащего тимидина в культуру клетки уменьшалось на 3 и на 22% соответственно.

Испытание на длительное культивирование клеток.

При длительном культивировании клетки выделенные из костного мозга мыши использовали в полужидкой культуре агара.

1,5х10⁵ клеток мозгового вещества из бедренной кости, полученного от 2-3-месячных самцов мышей С5781, суспендировали в 1 мл среды "МсСоу 5А" (продукт Gibco), затем добавляли 20 об. сыворотки конской крови (продукт Gibco), 16 об. L-клетки КСФ (колониестимулирующий фактор, полученный из надосадочной жидкости лимфоцитов; продукт Фармакологического института Дебреценского медицинского университета, Венгрия) и агар-агар до 0,18 мас.

100 мкл полужидкой среды культивировали в капилляре Micropipet в течение 7 дней указанным образом, затем колонии подсчитывали под стереомикроскопом Zeiss-Cytoplast с 40-кратным увеличением.

Результаты приведены в виде процента сокращения чисел колоний по сравнению с необработанным контрольным образцом. Опыты проводили в присутствии 0,25 ммоль/л меркаптоэтанола (+МЕ) и без меркаптоэтанола (-МЕ).

Результаты приведены в таблице.

В таблице А обозначает Glp-Glu-Asp-Cys-Lys-OH, 1Glp-Glu-Asp-Cys(Асm)-Lys-OH, 2 H-Glu-Asp-Cys(Асm)-Lys-OH
Клеточные культуры, применяемые в опыте с тимидином, имеют короткий срок жизни, и измеряется ДНК-модификация только тех клеток, которые находятся в S-фазе клеточного цикла в ходе четвертого часа опыта (клетки в это время воспринимают радиоактивный тимидин). Эта часть составляет от 25 до 30% клеток. Остальные клетки находятся в фазе С_о, С₁, С₂ или М.

Таким образом, величины ингибирования, замеренные при опыте с тимидином, слабее, чем это может быть достигнуто в ходе опыта на колонии. То есть в последнем опыте клетки-мишени культивируют в течение 1 недели после лечения, таким образом величины ингибирования могут скапливаться или даже уменьшать друг друга.

Тетрапетид H-Glu-Asp-Cys(Асm)-Lys-OH, в котором отсутствует пироглутаминовая кислота на аминоокончания, вел себя очень любопытным образом. В то время как он ингибировал образованные культуры полужидкого агара на 25-65% в диапазоне концентрации от 10^-14 до 10^-6 моль/л, он не ингибировал пролиферацию ни костного мозга крысы, ни клеток тимуса, на основе измерения введения тритийсодержащего тимидина.

Пентапептид формулы (1), ингибирующий как введение тимидина, так и образование колоний, влияет на кроветворные стволовые клетки (GFVs) и влияет на стволовые клетки спинного или костного мозга (GFVc) и на клетки-предшественники спинного или костного мозга, миелобласты, промиелоциты и миелоциты.

Тетрапептид формулы (2) не имеет эффекта на последние клетки, однако он ингибирует пролиферацию колониеобразования, стволовые клетки спинного или костного мозга (GFVc) с особенно высокой селективностью, то есть обладает специфичностью как для клеточной линии, так и для участка.

В ходе опыта с эмиссией⁵¹Cr с цитобластными клетками костного мозга, отражающего токсичность ин витро соединений, оба пептида согласно изобретению оказались нетоксичными.

С целью измерения активности ин виво, соединения вводили интраперитонеально крысам, весящим 40 г. Отмечали 40%-ное снижение митоза мозгового вещества по сравнению с контрольным образцом, таким образом ингибирование ин виво пролиферации также может рассматриваться как значительное.

Наличие ацетамидометильной группы является целесообразным не только с точки зрения биологической активности, но и с химической точки зрения тоже, так как это устраняет частую нестабильность молекулы, несущей свободную меркаптогруппу, и значительное отклонение результатов биологических тестов, частично приписываемое нестабильности.

Насколько известно, это первые биологически активные меркаптосоединения, которые содержат Acm-группу. Их особое преимущество заключается в том, что они с трудом пригодны к оксидированию на воздухе по сравнению с соединениями, несущими свободную меркаптогруппу, таким образом, они намного более стабильны и могут дольше храниться в нормальных условиях.

Другое преимущество олигопептидов формулы (1) и (2) согласно изобретению заключается в том, что они могут быть получены относительно простым синтезом в растворе или в твердой фазе, вопреки высокомолекулярным полипептидам, проявляющим подобную активность.

Пептиды формулы (1) и (2) получают согласно изобретению: ступенчатым удлинением цепочки защищенных промежуточных соединений пептидов формулы (1) и (2), исходя из С-концевого аминокислотного производного, с использованием последовательно связывания активного сложного эфира и высвобождения катализованного основания альфа-аминогруппы, при обеспечении защиты нереагирующих амино- и карбоксильных функций с помощью групп, удаляемых с помощью слабого ацидолиза, и защиты меркаптогруппы остатка цистеина с ацетомидометильной группой, затем снятие защиты с этих защищенных промежуточных веществ с помощью слабого ацидолиза, при необходимости, преобразование свободных олигопептидов формул (1) и (2) в их соли присоединения кислоты.

В ходе синтеза используется такое сочетание защитных групп, которое позволяет селективное удаление амино-защитной группы, затем, в конце синтеза, удаление всех кислоточувствительных защитных групп возможно в одну стадию.

Пептидная связь образуется с помощью сложного активного эфира, предпочтительно методом пентафторфенилового сложного эфира.

Для промежуточной защиты альфа-аминогрупп, которые впоследствии должны быть встроены в пептидную связь, предпочтительно используют 9-фторфенилметилоксикарбонильную группу (Fmoc), расщепляемой основанием, ε -аминогруппа лизина, аминогруппа глутаминовой кислоты олигопептида формулы (2) и возможна амид-азот из пироглутаминовой кислоты олигопептида формулы (1) предпочтительно защищают трет-бутоксикарбонильной группой (Вос-). Для защиты неактивированных карбоксильных групп в боковых цепях и на карбоксильном окончании предпочтительно применяют этерификацию с трет-бутанолом.

Из защищенных пептидов, полученных как описано выше, защитные группы, кроме S-ацетамидометильной группы, удаляются, затем полученный олигопептид возможно трансформируется в соль присоединения кислоты с помощью анионообменной смолы с анионным циклом, пригодной для образования соли.

Полученные таким образом пептиды обладают фармацевтической чистотой, они не нуждаются в дальнейшей очистке. В случае необходимости они могут быть очищены на силикагелевой колонке или с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Пептид, полученный в форме раствора, может быть извлечен путем выпаривания или лиофилизации раствора. Свободный пептит может быть преобразован в соль описанным образом, предпочтительно его трансформируют в фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты. Такие соли представляют собой, например, соли, образованные соляной, серной, фосфорной, уксусной, лимонной, малеиновой или миндальной кислотой.

Пептиды согласно изобретению и их соли присоединения кислоты могут быть использованы в форме обычных фармацевтических составов в качестве добавок в терапии опухолевых заболеваний.

Преимущество новых соединений заключается в том, что они почти полностью безвредны, они не имеют побочного эффекта в диапазоне терапевтической дозы, в дополнение они значительно ингибируют вредные воздействия лекарственных средств и излучения применяемых для терапии опухолевых заболеваний, или же доза лекарства или облучения может быть увеличена при их введении.

Пептиды формул (1) и (2) могут быть введены в чистом виде или в форме солей, предпочтительно в фармацевтически удобных формах, например твердой, жидкой или полужидкой форме.

При приготовлении составов могут быть использованы обычные носители, разбавители, стабилизирующие, рН-регулирующие, регулирующие осмотическое давление, позволяющие или облегчающие технологию приготовления лекарственного средства добавки и эксципиенты.

Твердые фармацевтические составы могут, например, представлять собой порошок для инъекций. Жидкие составы представляют собой инъекцируемые настойки, включающие микрокапсулы.

Пациенту вводят фармацевтический состав, содержащий желаемую дозу лекарственного средства. Эта доза зависит от степени заболевания, массы тела пациента, пути введения, числа лечений в день и методов других видов лечения. Подходящая доза может быть определена врачом, знающим находящегося на лечении пациента.

С целью упрощения введения предпочитают готовить единичные дозы, включающие одну дозу или кратное число, или половину, треть, четверть одной дозы вводимого лекарственного средства.

Фармацевтические составы согласно изобретению обычно содержат от 1 до 250 мг активного ингредиента в одной единичной дозе. Количество активного ингредиента может выходить за пределы вышеопределенного верхнего или нижнего пределов.

Изобретение подробно иллюстрируется следующими неограничительными рабочими примерами.

Сокращения, использованные в описании, соответствуют общепринятым сокращениям (Biochem. J. 219, 345 (1984)). Все из аминокислот имеют L-конфигурацию, поэтому она не приведена отдельно.

Среди данных аминокислотного анализа "Тin" обозначает 4-тиазолидинкарбоновую кислоту, образованную во время гидролиза ацетомидометилцистеина. Температуры плавления определялись в аппарате д-ра Tottoli (Buchi, Швейцария).

Опыты с использованием тонкослойной хроматографии были проведены на готовом силикалегевом адсорбенте DC-Fertigplatten, Мегек, Германия) со следующими смесями растворителя (соотношения обозначают объемные соотношения):
основной раствор 20:6:11 смесь пиридина-уксусной кислоты воды.

1) 99 1 смесь этилацетата основного раствора.

2) 19 5 смесь этилацетата основного раствора.

3) 9:1 смесь этилацетата основного раствора.

4) 4 1 смесь этилацетата основного раствора.

5) 2 3 смесь этилацетата основного раствора.

6) 1 4 смесь этилацетата основного раствора.

7) 3 7 смесь н-бутанола основного раствора.

8) 1 1 1 1 смесь н-бутанола уксусной кислоты этилацетата воды.

Хроматограммы проявляли с помощью нингидрина и иодида калия толидина после хлорирования.

Измерения с помощью жидкостной хроматографии высокого давления проводили в оборудовании, снабженном УФ-детектором типа Labor-MIM 300 с переменной длиной волы, обводным инжектором Labor-MIM, подающим насосом и манометром, состоящими из блоков 8020 и 302 фирмы Gilson, и самописца типа Rabelkis ОН-827.

Разделение проводили на колонке длиной 150 см, заполненной фазой С₁₈ Labor-MIM с размером частиц 10 мкм, имеющей наружный диаметр 4,6 мм. Элюент содержал 97 ч. по объему воды, 3 об. ч. ацетонитрила и 0,4 ч. по объему трифторуксусной кислоты. Измерения проводили с протоком 1 мл/мин, светопоглощение раствора детектировали при 220 нм.

Чистота пептидов превосходила 95% на основе методов как тонкослойной хроматографии, так и жидкостной хроматографии.

Удельное вращение замеряли в поляриметре типа Perkin-Elmer 241. Растворители удаляли и выпаривание проводили в ротационном вакуумном выпаривателе над водяной баней до 40^оС во всех случаях.

Аминокислотный анализ целевых соединений проводили в аппарате Biotronik LC 5001. Пробы гидролизовали в растворе 6 моль/л соляной кислоты при 110^оС в течение 24 ч. Результаты анализа находились в пределах ошибки ±5% В ходе гидролиза основная часть ацетамидометилцистеина была преобразована в 4-тиазолидинкарбоновую кислоту (Tin).

П р и м е р 1. H-Glu-Asp-Cys(Асm)-Lys-OH (2).

5,81 г (10 ммоль) Fmoc-Cys-(Aсm)-OPfo и 3,54 г (10,5 ммоль) H-Lys-(Boc)-OtBu˙HCl вводят в реакцию в 20 мл диметилформамида в присутствии 1,47 мл (10,5 моль) триэтиламина. 4 ч спустя реакционную смесь разбавляют 100 мл этилацетата и полученную в результате смесь промывают с помощью 50 мл воды, 3х30 мл 1 моль/л водного раствора соляной кислоты, 3х30 мл 5%-ного водного раствора гидрокарбоната натрия, сушат на безводном сульфате натрия и выпаривают в вакууме.

Масло, полученное в виде остатка после выпаривания, растворяют в 15 мл этилацетата при нагреве, и раствор разбавляют 60 мл н-гексана. Суспензию хранят на холоде в течение ночи, затем фильтруют, и осадок промывают н-гексаном.

В результате получают 4,4 г (63% в расчете на активный сложный эфир) Fmoc-Cys(Aсм)-Lys(Boc)-OtBu. Температура плавления 110-113^оС. ( α)^D₂₀ -22,8^о (с 1,0, в этаноле) Rf2 0,60
1,6 г (2,29 ммоль) указанного дипептида обрабатывают в 15 мл диметилформамида, содержащего 10% диметиламина, затем реакционную смесь выпаривают в вакууме, н-гексан несколькими порциями выливают на маслянистый остаток, затем супернатант отстаивают, осадок растворяют в 10 мл диметилформамида.

К раствору добавляют 1,5 г (2,6 ммоль) Fmoc-Asp (OtBu )-OPfp, 1 ч спустя реакционную смесь выпаривают в вакууме, н-гексан выливают несколько раз на масло, полученное в виде остатка после выпаривания, затем супернатант отстаивают и, наконец, кристаллизуют добавлением диизопропилового эфира.

В результате получают 1,52 г (76,1%) Fmoc-Asp (OtBu)-Lys (Boc)-OtBu. Небольшую пробу перекристаллизовывают из этилацетата. Физические характеристики этой пробы следующие:
Температура плавления 124-125^оС
(α)₂₀^D -31,8^о (с 1,0, в этаноле). Rf3 0,70
1,4 г (1,61 ммоль) трипептида, полученного как описано выше, и обработанного диметилформамидом, содержащим 10% диметиламина, как описано в предыдущем абзаце. К маслу, полученному в виде остатка после выпаривания реакционной смеси, несколько раз приливают н-гексан, затем супернатант отстаивают и потом растворяют в 6 мл диметилформамида и вводят в реакцию с 0,83 г (1,75 ммоль) Boc-Glu (OtBu)-OPfp.

1,5 ч спустя реакционную смесь выпаривают, остаток подвергают хроматографии в колонке в готовой форме с 30 мл силикагеля с использованием смеси 1 для элюирования. Чистые фракции собирают, выпаривают в вакууме, масло, полученное в виде остатка после выпаривания, переводят в твердое состояние в смеси диизопропилового эфира и н-гексана.

Таким образом, получают 1,22 г (81,3% ) аморфного Boc-Glu(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys-(Aсm)-Lys(Boc)-OtBu. (α)₂₀^D -42,2^о (с 1,0, в этаноле) Rf2 0,45
1,15 г (1,24 ммоль) защищенного тетрапептида, полученного как описано выше, обрабатывают в 25 мл 4 ммоль/л хлористого водорода в растворе уксусной кислоты. 30 мин спустя надосадочную жидкость сливают, простой эфир выливают на остаточное масло, надосадочную жидкость отстаивают, растворяют в 15 мл воды и обрабатывают анионообменной смолой ацетатного цикла Dowex 2x8.

Раствор выпаривают в вакууме и остаток изолируют этанолом. Сырой продукт пропускают через хроматограф на колонке, приготовленной из 30 г силикагеля, используя смесь 5 в качестве элюента. Собирают чистые фракции, выпаривают и остаток перекристаллизовывают из смеси воды и этанола.

Таким образом получают 0,28 г (40,0%) аморфного H-Glu-Asp-Cys (Aсm )-Lys-OH (2) который содержит 2-3% Glp-Asp-Cys- (Aсm)-Lys-OH, в качестве загрязнителя. (α)₂₀^D -33,7^о (с 0,6, в воде) Rf6 0,35; Rf8 0,25.

Аминокислотный анализ:
Lys 0,92 (1), Asp 1,04 (1), GIu 1,04 (1),
Cys 0,36 (1), Tin 0,32, NH₃ 0,63.

П р и м е р 2. Glp-Glu-Asp-Cys(Aсm)-Lys-OH (1).

4,5 г (5,17 ммоль) Fmoc-Asp(OtBu)-Cys(Aсm)-Lys-(Boc)-OtBu обрабатывают с помощью 40 мл диметилформамида, содержащего 10% диметиламина. 10 мин спустя реакционную смесь выпаривают в вакууме, н-гексан наливают на остаток несколько раз, затем супернатант отстаивают. Tвердое вещество растворяют в 20 мл диметилформамида и вводят в реакцию с 3,55 г (6,0 ммоль) Fmoc-Glu(OtBu)-OPfp.

1 ч спустя реакционную смесь выпаривают, остаток растворяют в 10 мл этилацетата, затем раствор разбавляют 50 мл диизопропилового эфира. На следующий день суспензию отфильтровывают.

Таким образом получают 4,46 г (81,8% ) Fmoc-Glu(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Aсm)-Lys(Boc)-OtBu.

Температура плавления 111-115^оС. (α)₂₀^D -38,4^оС (с 1,0, в этаноле) Rf2 0,70; Rf4 0,90.

1,60 г (1,52 ммоль) указанного защищенного тетрапептида обрабатывают 15 мл диметилформамида, содержащего 10% диметиламина, затем реакционную смесь выпаривают в вакууме и несколько раз выливают н-гексан на масло, полученное в виде остатка после выпаривания, затем супернатант отстаивают. Полученный таким образом свободный тетрапептид (Rf4 0,35) растворяют в 8 мл диметилформамида и вводят в реакцию с 0,59 г (2,0 ммоль) GIp-OPfp. 1 ч спустя реакционную смесь выпаривают и остаток отделяют простым эфиром.

В результате получают 1,0 г (69,7%) Glp-Glu(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Aсm)-Lys-(Boc)- OtBu.

Температура плавления 158-160^оС (α)₂₀^D -42,7^о (с 1,0, в этаноле) Rf4 0,55.

0,90 г (0,95 ммоль) указанного защищенного тетрапептида обрабатывают 10 мл 4 ммоль/л хлористого водорода в растворе уксусной кислоты в течение 30 мин, затем супернатант удаляют и остаток выделяют простым эфиром.

Сырой продукт хроматографируют на колонке, приготовленной из 20 г силикагеля, используя смесь 8 в качестве элюента. Чистые фракции собирают, выпаривают, затем остаток осаждают из смеси этанола и этилацетата, затем из смеси метанола и этилацетата.

В результате получают 0,33 г (51,4%) Glp-Glu-Asp(Aсm)-Lys-OH (1) пентапептид. (α)₂₀^D -22,8^о (с 1,0, в этаноле) Rf7 0,35.

Аминокислотный анализ:
Lys 1,0 (1), Asp 0,98 (1), GIu 2,03 (1)
Cys 0,31 (1), Tin 0,45, NH₃ 0,72.

П р и м е р 3. Glp-Glu-Asp-Cys (Aсm)-Lys-OH (1)
2,90 г (2,75 ммоль) Fmoc-Glu(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Aсm)-Lys(Boc)-OtBu обрабатывают 25 мл диметилформамида, содержащего 10% диметиламина. 10 мин спустя реакционную смесь выпаривают, н-гексан выливают несколько раз на масло, полученное в качестве остатка после выпаривания, затем суспензию отстаивают. Твердое вещество растворяют в 15 мл диметилформамида и вводят в реакцию с 1,30 г (6 ммоль) Boc-Glp-OPfp. 1 ч спустя реакционную смесь выпаривают, остаток отделяют диизопропиловым эфиром.

В результате получают 2,62 г (91,2% ) Boc-Glp-Glu(OtBu)-Asp(OtBu)-Cys(Aсm)-Lys-(Boc)-OtBu. Температура плавления: 96-101^оС (α)₂₀^D -47,0^о (с 1,0, в метаноле) Rf5 0,40.

2,50 г (2,39 ммоль) указанного защищенного пентапептида обрабатывают смесью 40 мл трифторуксусной кислоты и 5 мл анизола в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь выпаривают до объема 10 мл, затем остаток разбавляют простым эфиром. Суспензию отфильтровывают, осадок тщательно промывают простым эфиром, затем растворяют в 30 мл воды после сушки.

Раствор обрабатывают 10 мл анионообменной смолы ацетатного цикла Dowex 2х8, затем резину отфильтровывают и фильтрат выпаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси простого эфира и метанола.

В результате получают 0,95 г (58,8%) пентапептида формулы (1). (α)₂₀^D -53,7^о (с 1,0, в метаноле).

П р и м е р 4. Ампула с порошком для инъекций.

500 мг Glp-Glu-Asp-Cys(Aсm)-Lys-OH пентапептида и 9,5 г лактозы растворяют в 80 мл дистиллированной воды, пригодной для приготовления инъекций, добавляют 0,1 г метилпарагидроксибензоата, затем объем раствора дополняют до 100 мл дистиллированной водой, пригодной для приготовления инъекций. Гомогенный раствор фильтруют до стерильного, каждый 1 мл заполняют в ампулы, лиофилизуют, затем ампулы закрывают полимерной пробкой.

В результате получают ампулы, содержащие 5 мг активного ингредиента.

Когда содержание активного ингредиента в ампуле с порошком отличается от указанного, количество лактозы предпочтительно выбирают таким образом, чтобы общее количество лактозы и активного ингредиента было примерно 10 г в расчете на 100 мл раствора. Вместо лактозы также можно использовать такое же количество маннита.

При введении лекарства порошок растворяется в таком количестве водного раствора хлорида натрия, которое позволяет приготовление изотонического раствора.

Реферат

Использование: в медицине. Сущность изобретения: производные пептидов общей формулы I: x-Glu-Asp-Cys(Acm)-LysOH, где X - Н или Glp, Acm - ацетамидометильная группа или соли просоединения кислот и фармацевтическая композиция, ингибирующая пролиферацию кроветворных клеток, содержащая соединение 1 в количестве 1 - 250 мг на дозу и фармацевтически приемлемый носитель. 2 с. и 2 з. п. ф-лы, 1 табл.

Формула