Способ удаления вирусов из жидкой композиции, содержащей фактор vii - RU2006118024A

Реферат

1. Способ удаления вирусов из жидкой композиции, содержащей фактор VII, где указанная композиция содержит один или более чем один полипептид фактора VII, причем по меньшей мере 5% указанного одного или более чем одного полипептида фактора VII находится в активированной форме, при котором осуществляют нанофильтрацию указанного раствора, используя нанофильтр, имеющий размер пор максимум 80 нм.

2. Способ по п.1, где по меньшей мере 7%, например, по меньшей мере 10%, одного или более чем одного полипептида фактора VII находится в активированной форме.

3. Способ по п.1, где активированная форма полипептида фактора VII составляет 5-70%, например 7-40%, например 10-30% от массы одного или более чем одного полипептида фактора VII.

4. Способ по п.1, где активированная форма полипептида фактора VII составляет 50-100%, например 70-100%, например 80-100% от массы одного или более чем одного полипептида фактора VII.

5. Способ по п.1, где активированная форма полипептида фактора VII составляет 20-80%, например 30-70%, например 30-60% от массы одного или более чем одного полипептида фактора VII.

6. Способ по п.1, где жидкая композиция имеет рН в интервале 7,0-9,5, например, в интервале 7,6-9,4, например в интервале 7,7-9,3, например в интервале 8,0-9,0 или в интервале 8,3-8,7.

7. Способ по п.1, где концентрация полипептида(ов) фактора VII в жидкой композиции находится в интервале 0,01-5 мг/мл, например в интервале 0,05-2,0 мг/мл.

8. Способ по п.1, где размер пор нанофильтра составляет максимум 50 нм, например максимум 30 нм, например в интервале 10-30 нм.

9. Способ по п.1, где мембрана нанофильтра изготовлена из одного или более чем одного материала, выбранного из медноаммиачной целлюлозы, гидрофильного поливинилиденфторида (PVDF), комбинированного PVDF, поверхностно-модифицированного PVDF и полиэфирсульфона.

10. Способ по п.1, где жидкую композицию фактора VII получают, либо она имеет происхождение, из надосадочной жидкости клеточной культуры.

11. Способ по п.1, где жидкая композиция, по существу, не содержит сыворотки.

12. Способ согласно п.1, где полипептид(ы) фактора VII продуцируются(ются) клеточной культурой в присутствии бычьей сыворотки или фетальной сыворотки теленка.

13. Способ по любому из пп.1-12, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО.

14. Способ по п.13, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО, в среде, не содержащей каких-либо компонентов животного происхождения.

15. Способ удаления вирусов из жидкой композиции, содержащей фактор VII, где указанная композиция содержит один или более чем один полипептид фактора VII, и по существу не содержит сыворотки, при котором осуществляют нанофильтрацию указанного раствора, используя нанофильтр, имеющий размер пор максимум 80 нм.

16. Способ по п.15, где жидкую композицию фактора VII получают, либо она имеет происхождение, из надосадочной жидкости клеточной культуры.

17. Способ по п.15, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО.

18. Способ по п.17, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО, в среде, не содержащей каких-либо компонентов животного происхождения.

19. Способ по п.15, где по меньшей мере 5% указанного одного или более чем одного полипептида фактора VII находится в активированной форме.

20. Способ по п.15, где жидкая композиция имеет рН в интервале 7,0-9,5, например в интервале 7,6-9,4, например в интервале 7,7-9,3, например в интервале 8,0-9,0 или в интервале 8,3-8,7.

21. Способ по п.15, где концентрация полипептида(ов) фактора VII в жидкой композиции находится в интервале 0,01-5 мг/мл, например в интервале 0,05-2,0 мг/мл.

22. Способ по п.15, где размер пор нанофильтра составляет максимум 50 нм, например максимум 30 нм, например в интервале 10-30 нм.

23. Способ по любому из пп.15-22, где мембрана нанофильтра изготовлена из одного или более чем одного материала, выбранного из медноаммиачной целлюлозы, гидрофильного поливинилиденфторида (PVDF), комбинированного PVDF, поверхностно-модифицированного PVDF и полиэфирсульфона.

24. Способ удаления вирусов из жидкой композиции, содержащей фактор VII, где указанная композиция содержит один или более чем один полипептид фактора VII, при котором осуществляют нанофильтрацию указанного раствора, используя нанофильтр, имеющий размер пор максимум 80 нм, причем указанный нанофильтр имеет мембрану, изготовленную из одного или более чем одного материала, выбранного из медноаммиачной целлюлозы, гидрофильного поливинилиденфторида (PVDF), комбинированного PVDF, поверхностно-модифицированного PVDF и полиэфирсульфона.

25. Способ по п.24, где материал выбран из материалов на основе поливинилиденфторида и материалов на основе полиэфирсульфона.

26. Способ по п.24, где по меньшей мере 5% указанного одного или более чем одного полипептида фактора VII находится в активированной форме.

27. Способ по п.24, где жидкая композиция имеет рН в интервале 7,0-9,5, например в интервале 7,6-9,4, например в интервале 7,7-9,3, например в интервале 8,0-9,0 или в интервале 8,3-8,7.

28. Способ по п.24, где концентрация полипептида(ов) фактора VII в жидкой композиции находится в интервале 0,01-5 мг/мл, например в интервале 0,05-2,0 мг/мл.

29. Способ по п.24, где размер пор нанофильтра составляет максимум 50 нм, например максимум 30 нм, например в интервале 10-30 нм.

30. Способ по п.24, где жидкую композицию фактора VII получают, либо она имеет происхождение, из надосадочной жидкости клеточной культуры.

31. Способ по п.24, где жидкая композиция по существу не содержит сыворотки.

32. Способ по п.24, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в присутствии бычьей сыворотки или фетальной сыворотки теленка.

33. Способ по любому из пп.24-32, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО.

34. Способ по п.33, где полипептид(ы) фактора VII продуцируется(ются) клеточной культурой в клетках СНО, в среде, не содержащей каких-либо компонентов животного происхождения.

35. Способ инактивации вирусов в жидкой композиции, содержащей фактор VII, где указанная композиция содержит один или более чем один полипептид фактора VII, включающий стадию смешения указанной композиции с детергентом.

36. Способ по п.35, где детергент представляет собой октилфеноксиполиэтоксиэтанол формулы пара-((СН₃)₃СН₂С(СН₂)₂)-С₆Н₄-O-(CH₂CH₂O)_n-H, где n находится в интервале 5-15.

37. Способ по п.36, где детергент представляет собой соединение, где n равно 9-10, например Тритон Х-100.

38. Способ по п.35, где детергент выбран из группы, состоящей из Tween®, полисорбата 20, полисорбата 60 и полисорбата 80.

39. Способ по п.35, где детергент смешивают с жидкой композицией, содержащей фактор VII, до получения концентрации детергента в этой композиции в интервале 0,01-0,3 мас.%, например в интервале 0,05-0,2 мас.%.

40. Способ по п.35, где детергент смешивают с композицией при температуре в интервале 2-12°С, например в интервале 2-9°С.

41. Способ по любому из пп.35-40, где детергент, по существу, не содержит триалкилфосфатных растворителей, таких как три(н-бутил)фосфат.

42. Способ высокой степени очистки жидкой композиции, содержащей фактор VII, от активных вирусов, включающий стадии (i) инактивации вирусов способом, определенным в любом из пп.35-41, и (ii) удаления вирусов любым из способов, определенных в любом из пп.1-35, в любом порядке.

43. Способ по п.42, где стадия инактивации вирусов предшествует стадии удаления вирусов.