Модифицированные вирусоподобные частицы вируса мозаики огурца - RU2017111266A
Код документа: RU2017111266A
Формула
1. Модифицированная вирусоподобная частица (ВПЧ) вируса мозаики огурца (ВМО), отличающаяся тем, что указанная модифицированная ВПЧ ВМО содержит модифицированный полипептид ВМО, по существу состоит из модифицированного полипептида ВМО или, в качестве альтернативы, состоит из по меньшей мере одного модифицированного полипептида ВМО, при этом указанный модифицированный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
a. полипептида ВМО, и
b. эпитопа клетки Т-хелпера; и
при этом указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
(i) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО; или
(ii) мутированной аминокислотной последовательности, причем аминокислотная последовательность, которую мутируют, представляет собой аминокислотную последовательность белка оболочки ВМО, и при этом идентичность последовательностей указанной мутированной аминокислотной последовательности и указанного белка оболочки ВМО составляет по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95%, еще более предпочтительно по меньшей мере 98% и еще более предпочтительно по меньшей мере 99%.
2. Модифицированная ВПЧ ВМО по п. 1, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит аминокислотную последовательность белка оболочки ВМО, предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО.
3. Модифицированная ВПЧ ВМО по п. 1, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит аминокислотную последовательность, содержащую мутацию, предпочтительно состоит из мутированной аминокислотной последовательности, при этом аминокислотная последовательность, которую мутируют, представляет собой аминокислотную последовательность белка оболочки ВМО, и при этом идентичность последовательностей указанной мутированной аминокислотной последовательности и указанного белка оболочки ВМО составляет по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95%, еще более предпочтительно по меньшей мере 98% и еще более предпочтительно по меньшей мере 99%.
4. Модифицированная ВПЧ ВМО по п. 3, отличающаяся тем, что указанная мутированная аминокислотная последовательность и аминокислотная последовательность, которую мутируют, различаются по меньшей мере одним остатком и не более чем 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, или 2 аминокислотными остатками, и предпочтительно указанные различия выбраны из (i) вставки, (ii) удаления, (iii) замены аминокислоты, и (iv) любой комбинации (i)-(iii).
5. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
(i) (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 1, или (b) аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 95%, также еще более предпочтительно по меньшей мере 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере 99% идентична последовательности SEQ ID NO: 1; или
(ii) мутированной аминокислотной последовательности, причем указанная аминокислотная последовательность, подлежащая мутированию, представляет собой аминокислотную последовательность, определенную в (i) данного пункта, и при этом идентичность последовательностей указанной мутированной аминокислотной последовательности и указанной аминокислотной последовательности, которую мутируют, составляет по меньшей мере 95%, предпочтительно по меньшей мере 98% и более предпочтительно по меньшей мере 99%.
6. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из: (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 1 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 1, или (b) аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 95%, еще более предпочтительно по меньшей мере на 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере на 99% идентична последовательности SEQ ID NO: 1.
7. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
(i) (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 21, или (b) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, содержащей область аминокислотной последовательности, причем указанная область аминокислотной последовательности идентична по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 95%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере на 99% последовательности SEQ ID NO: 21; или
(ii) мутированной аминокислотной последовательности, причем аминокислотная последовательность, которую мутируют, представляет собой аминокислотную последовательность, определенную в (i) данного пункта, и при этом идентичность последовательностей указанной мутированной аминокислотной последовательности и указанной аминокислотной последовательности, которую мутируют, составляет по меньшей мере 95%, предпочтительно по меньшей мере 98% и более предпочтительно по меньшей мере 99%.
8. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из: (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 21, или (b) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, содержащей участок аминокислотной последовательности, причем указанный участок аминокислотной последовательности идентичен по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 95%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере на 99% последовательности SEQ ID NO: 21.
9. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
(i) (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 1 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 1, или (b) аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 95%, еще более предпочтительно по меньшей мере на 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере на 99% идентична последовательности SEQ ID NO: 1; и
при этом указанная аминокислотная последовательность, определенная в (а) или (b) данного пункта, содержит последовательность SEQ ID NO: 21; или при этом указанная аминокислотная последовательность, определенная в (а) или (b) данного пункта, содержит участок аминокислотной последовательности, причем указанный участок аминокислотной последовательности по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, более предпочтительно по меньшей мере на 85%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 90%, также более предпочтительно по меньшей мере на 95%, также еще более предпочтительно по меньшей мере на 98% и также еще более предпочтительно по меньшей мере на 99% идентичен последовательности SEQ ID NO: 21; или
(ii) мутированной аминокислотной последовательности, причем аминокислотная последовательность, которую мутируют, представляет собой аминокислотную последовательность, определенную в (i) данного пункта, и при этом идентичность последовательностей указанной мутированной аминокислотной последовательности и указанной аминокислотной последовательности, которую мутируют, составляет по меньшей мере 98%, предпочтительно по меньшей мере 99%.
10. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из:
(i) (а) аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 1 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 1; или
(b) аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 1; и
при этом указанная аминокислотная последовательность, определенная в (а) или (b) данного пункта, содержит последовательность SEQ ID NO: 21; или при этом указанная аминокислотная последовательность, определенная в (а) или (b) данного пункта, содержит участок аминокислотной последовательности, причем указанный участок аминокислотной последовательности идентичен по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 21.
11. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов замещает N-концевую область указанного полипептида ВМО.
12. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанное количество замещенных аминокислот в указанной N-концевой области равно или меньше, чем количество аминокислот, из которых состоит указанный эпитоп клеток Т-хелперов.
13. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная замещенная N-концевая область указанного полипептида ВМО состоит из 5-15 последовательных аминокислот, предпочтительно из 9-14 последовательных аминокислот, более предпочтительно из 11-13 последовательных аминокислот.
14. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная N-концевая область указанного полипептида ВМО соответствует аминокислотам 2-12 последовательности SEQ ID NO: 1.
15. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов представляет собой универсальный эпитоп клеток Т-хелперов.
16. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов состоит из не более чем 20 аминокислот.
17. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов представляет собой последовательность PADRE.
18. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов содержит, предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5.
19. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов получен из вакцины для применения у человека.
20. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов получен из токсина столбняка.
21. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный эпитоп клеток Т-хелперов имеет последовательность SEQ ID NO: 4, предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4.
22. Модифицированная ВПЧ ВМО по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанный полипептид ВМО содержит или предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности белка оболочки ВМО, причем указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 1 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 1, или аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 1; и при этом указанная аминокислотная последовательность содержит последовательность SEQ ID NO: 21, и при этом указанный эпитоп клеток Т-хелперов замещает N-концевую область указанного полипептида ВМО, и при этом указанная замещенная N-концевая область указанного полипептида ВМО состоит из 11-13 последовательных аминокислот, предпочтительно из 11 последовательных аминокислот, и также предпочтительно указанная N-концевая область указанного полипептида ВМО соответствует аминокислотам 2-12 последовательности SEQ ID NO: 1.
23. Модифицированная ВПЧ ВМО по п. 1, отличающаяся тем, что указанный модифицированный полипептид ВМО содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6.
24. Модифицированная ВПЧ ВМО по п. 1, отличающаяся тем, что указанный модифицированный полипептид ВМО содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, предпочтительно состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7.
25. Композиция, содержащая модифицированную вирусоподобную частицу по любому из пп. 1-24.
26. Композиция по п. 25, содержащая:
(a) модифицированную вирусоподобную частицу по любому из пп. 1-24, и при этом указанная модифицированная вирусоподобная частица содержит по меньшей мере один первый сайт присоединения; и
(b) по меньшей мере один антиген, при этом указанный антиген содержит по меньшей мере один второй сайт присоединения;
причем (а) и (b) связаны посредством указанных по меньшей мере одного первого и по меньшей мере одного второго сайта присоединения.
27. Композиция по п. 26, отличающаяся тем, что указанный первый сайт присоединения и указанный второй сайт присоединения соединены посредством по меньшей мере одной ковалентной пептидной связи.
28. Композиция по п. 26, отличающаяся тем, что указанный первый сайт присоединения и указанный второй сайт присоединения соединены посредством по меньшей мере одной ковалентной непептидной связи.
29. Композиция по любому из пп. 26-28, отличающаяся тем, что указанный первый сайт присоединения представляет собой аминогруппу, предпочтительно представляет собой аминогруппу остатка лизина.
30. Композиция по любому из пп. 26-29, отличающаяся тем, что указанный второй сайт присоединения представляет собой сульфгидрильную группу, предпочтительно сульфгидрильную группу остатка цистеина.
31. Композиция по любому из пп. 26-30, отличающаяся тем, что указанный первый сайт присоединения не является сульфгидрильной группой.
32. Композиция по любому из пп. 26-31, отличающаяся тем, что только один из указанных вторых сайтов присоединения связывается с указанным первым сайтом присоединения посредством по меньшей мере одной непептидной ковалентной связи, что обеспечивает существование единственного и единообразного типа связывания указанного антигена с указанной модифицированной вирусоподобной частицей, причем указанный один второй сайт присоединения, который связывается с указанным первым сайтом присоединения, представляет собой сульфгидрильную группу, и при этом указанный антиген и указанная модифицированная вирусоподобная частица взаимодействуют посредством указанной связи, образуя упорядоченный и повторяющийся антигенный массив.
33. Композиция по любому из пп. 26-32, отличающаяся тем, что указанный второй сайт присоединения представляет собой сульфгидрильную группу, присоединенную с помощью химической связи.
34. Композиция по любому из пп. 26-33, дополнительно содержащая линкер, причем указанный линкер связывает указанный антиген с указанным вторым сайтом присоединения, и при этом предпочтительно указанный линкер содержит или, в качестве альтернативы, состоит из указанного второго сайта присоединения.
35. Композиция по любому из пп. 25-34, дополнительно содержащая по меньшей мере одно иммуностимулирующее вещество, причем предпочтительно указанное иммуностимулирующее вещество связано с указанной вирусоподобной частицей, смешано с указанной вирусоподобной частицей или упаковано в указанную вирусоподобную частицу, и при этом предпочтительно указанное иммуностимулирующее вещество упаковано в указанную модифицированную вирусоподобную частицу.
36. Композиция по п. 35, отличающаяся тем, что указанное иммуностимулирующее вещество состоит из ДНК или РНК неэукариотического происхождения.
37. Композиция по п. 35 или 36, отличающаяся тем, что указанное иммуностимулирующее вещество представляет собой олигонуклеотид, содержащий неметилированный CpG, и при этом предпочтительно указанный олигонуклеотид, содержащий неметилированный CpG, содержит последовательность-палиндром, и при этом дополнительно предпочтительно указанный CpG-мотив указанного олигонуклеотида, содержащего неметилированный CpG, представляет собой часть последовательности-палиндрома, и также еще более предпочтительно указанная последовательность-палиндром представляет собой GACGATCGTC (SEQ ID NO: 31).
38. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что указанная последовательность-палиндром фланкирована на своем 5'-конце по меньшей мере 3 и не более чем 15 молекулами гуанозина, и при этом указанная последовательность-палиндром фланкирована на своем 3'-конце по меньшей мере 3 и не более чем 15 молекулами гуанозина.
39. Композиция по любому из пп. 26-38, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой антиген опухоли, аутоантиген, полипептид патогена, аллерген или гаптен.
40. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-17, и при этом предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 42 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 42.
41. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-5, и при этом предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 41 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 41.
42. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ФНО-α.
43. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-1α.
44. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-13, и при этом предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 46 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 46.
45. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой пептид, полученный из Aβ-1-42.
46. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой IgE или пептид, или домен, содержащийся в IgE.
47. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой α-синуклеин или пептид, полученный из α-синуклеина, и при этом предпочтительно указанный пептид состоит из 6-14 аминокислот, и при этом более предпочтительно указанный антиген представляет собой пептид, полученный из α-синуклеина, выбранный из любой из последовательностей SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34.
48. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-4, и при этом предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 45 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 45.
49. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ГнРГ.
50. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой эотаксин.
51. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа A или его антигенный фрагмент.
52. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой ИЛ-31, причем предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 43 или SEQ ID NO: 44 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 43 или SEQ ID NO: 44.
53. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген получен из Plasmodium falciparum или Plasmodium Vivax, или указанный антиген получен из PCB.
54. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой аллерген кошки Fel d1 или рекомбинантный Fel d1 (rFel d1), при этом предпочтительно указанный антиген представляет собой рекомбинантный Fel d1 (rFel d1).
55. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18, и при этом предпочтительно указанный антиген содержит последовательность SEQ ID NO: 18 или предпочтительно состоит из последовательности SEQ ID NO: 18.
56. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой аллерген собаки Can f1 или Can f2.
57. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой пептид, связанный с геном кальцитонина (CGRP).
58. Композиция по любому из пп. 26-39, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой амилин.
59. Вакцина, содержащая или, в качестве альтернативы, состоящая из модифицированной вирусоподобной частицы по любому из пп. 1-24 или композиции по любому из пп. 25-58.
60. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) модифицированную вирусоподобную частицу по любому из пп. 1-24, композицию по любому из пп. 25-58 или вакцину по п. 59; и
(b) фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или вспомогательное вещество.
61. Способ иммунизации, включающий введение модифицированной вирусоподобной частицы по любому из пп. 1-24, композиции по любому из пп. 25-58, вакцины по п. 59, или фармацевтической композиции по п. 60 животному или человеку.
62. Способ по п. 61, отличающийся тем, что указанную модифицированную вирусоподобную частицу, указанную вирусоподобную частицу, указанную композицию, указанную вакцину или указанную фармацевтическую композицию вводят указанному животному или указанному человеку подкожно, внутривенно, внутрикожно, интраназально, перорально, интранодально или трансдермально.
63. Модифицированная вирусоподобная частица по любому из пп. 1-24, композиция по любому из пп. 25-58, вакцина по п. 59 или фармацевтическая композиция по п. 60 для применения в качестве лекарственного средства.
64. Применение модифицированной вирусоподобной частицы по любому из пп. 1-24, композиции по любому из пп. 25-58, вакцины по п. 59 или фармацевтической композиции по п. 60 при получении лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства или состояния у животного или человека.
65. Модифицированная вирусоподобная частица по любому из пп. 1-24, композиция по любому из пп. 25-58, вакцина по п. 59 или фармацевтическая композиция по п. 60 для применения в способе лечения заболевания, расстройства или состояния у животного или человека.
66. Композиция по любому из пп. 40-44 и 48 для применения в способе лечения воспалительного заболевания у животного или человека.
67. Композиция по п. 66, отличающаяся тем, что указанное воспалительное заболевание выбрано из PA, PC, псориаза, астмы, болезни Крона, колита, ХОБЛ, сахарного диабета, нейродермита (аллергического дерматита).
68. Композиция по п. 45 для применения в способе лечения болезни Альцгеймера у животного или человека.
69. Композиция по п. 46 для применения в способе лечения аллергий у животного или человека.
70. Композиция по п. 47 для применения в способе лечения болезни Паркинсона у животного или человека.
71. Композиция по п. 49 для применения в снижении уровня тестостерона в организме животного или человека.
72. Композиция по п. 51 или 52 для применения в способе лечения или предотвращения инфекции вирусом гриппа A у животного или человека.
73. Композиция по п. 53 для применения в способе предотвращения или лечения малярии.
74. Композиция по п. 54 для применения в способе предотвращения или лечения инфекции PCB.
75. Композиция по п. 55 для применения в способе предотвращения или лечения аллергии на кошек у человека.
76. Композиция по п. 56 для применения в способе предотвращения или лечения аллергии на собак у человека.
77. Композиция по п. 57 для применения в способе лечения мигрени у животного или человека.
78. Композиция по п. 58 для применения в способе лечения сахарного диабета типа II у животного или человека.
