Система лиганд-индуцируемого сопряжения полипептидов - RU2017131505A

Код документа: RU2017131505A

Формула

1. Два полипептида, содержащих первый не встречающийся в природе полипептид, содержащий фрагмент или домен ядерного рецепторного белка, и второй не встречающийся в природе полипептид, содержащий другой фрагмент или домен ядерного рецепторного белка, причем указанный первый полипептид способен к связыванию активирующего лиганда, причем указанный второй полипептид способен вступать в связь с указанным первым полипептидом в присутствии указанного активирующего лиганда, при этом каждый из указанных первого и второго полипептидов дополнительно содержит гетерологичные аминокислоты или последовательности полипептидов, такие, что индуцированное активирующим лигандом образование связи между указанными первым и вторым полипептидами приводит к активированному функциональному состоянию, биологическому состоянию или состоянию передачи клеточных сигналов.
2. Первый и второй полипептиды по п. 1, отличающиеся тем, что один или оба фрагмента или домена ядерного рецепторного белка содержат последовательность аминокислот ядерного рецептора членистоногих.
3. Первый и второй полипептиды по п. 1 или 2, отличающиеся тем, что один или оба фрагмента или домена ядерного рецепторного белка содержат последовательность аминокислот ядерного рецептора группы Н.
4. Первый и второй полипептиды по любому из пп. 1-3, отличающиеся тем, что указанная последовательность аминокислот ядерного рецептора в первом полипептиде содержит лиганд-связывающий домен экдизонового рецептора (EcR), его полипептидный фрагмент или полученный путем замен мутант.
5. Первый и второй полипептиды по любому из пп. 1-4, отличающиеся тем, что указанный второй полипептидный фрагмент или домен ядерного рецепторного белка содержит последовательность аминокислот ядерного рецептора млекопитающих.
6. Первый и второй полипептиды по п. 5, отличающиеся тем, что указанный фрагмент или домен ядерного рецепторного белка млекопитающих содержит полипептидный фрагмент ядерного рецептора RXR или его полученный путем замен мутант.
7. Первый и второй полипептиды по любому из пп. 1-6, отличающиеся тем, что указанный второй полипептидный фрагмент или домен ядерного рецепторного белка содержит химеру из последовательностей аминокислот ядерных рецепторов беспозвоночных и млекопитающих, или их полученных путем замен мутантов.
8. Первый и второй полипептиды по п. 7, отличающиеся тем, что указанный второй полипептидный фрагмент или домен ядерного рецепторного белка содержит химеру из последовательностей аминокислот ядерных рецепторов USP (гомолог RXR) беспозвоночных и RXR млекопитающих, или их полученных путем замен мутантов.
9. Система лиганд-индуцируемого сопряжения полипептидов (LIPC), содержащая:
a) Первый не встречающийся в природе полипептид, содержащий фрагмент или домен ядерного рецепторного белка членистоногих, и
b) Второй не встречающийся в природе полипептид, содержащий фрагмент или домен ядерного рецепторного белка членистоногих и/или млекопитающих,
при этом указанные первый и второй полипептиды содержат дополнительные гетерологичные последовательности, способные обеспечивать активированное функциональное состояние, биологическое состояние или состояние передачи клеточных сигналов после контакта с активирующим лигандом.
10. Система LIPC по п. 9, отличающаяся тем, что один или оба фрагмента или домена ядерного рецепторного белка содержат последовательность аминокислот ядерного рецептора группы Н.
11. Система LIPC по п. 9 или 10, отличающаяся тем, что указанный первый полипептид содержит лиганд-связывающий домен экдизонового рецептора (EcR), его полипептидный фрагмент или полученный путем замен мутант.
12. Система LIPC по любому из пп. 9-11, отличающаяся тем, что указанный второй полипептид содержит последовательность аминокислот ядерного рецептора млекопитающих.
13. Система LIPC по п. 12, отличающаяся тем, что указанный второй полипептид содержит полипептидный фрагмент ядерного рецептора RXR или его полученный путем замен мутант.
14. Система LIPC по любому из пп. 9-13, отличающаяся тем, что указанный второй полипептид содержит химеру из последовательностей аминокислот ядерных рецепторов беспозвоночных и млекопитающих, или их полученных путем замен мутантов.
15. Система LIPC по п. 14, отличающаяся тем, что указанный второй полипептид содержит химеру из последовательностей аминокислот ядерных рецепторов USP (гомолог RXR) беспозвоночных и RXR млекопитающих, или их полученных путем замен мутантов.
16. Первый и второй полипептиды по любому из пп. 1-8 или система LIPC по любому из пп. 9-15, отличающиеся тем, что по меньшей мере один из фрагментов ядерных рецепторных белков происходит из полипептида экдизонового рецептора, выбранного из группы, состоящей из LBD EcR еловой листовертки-почкоеда Choristoneura fumiferana («CfEcR»), LBD EcR жука Tenebrio molitor («TmEcR»), LBD EcR Manduca sexta («MsEcR»), EcR LBD Heliothies virescens («HvEcR»), LBD EcR звонца Chironomus tentans («CfEcR»), LBD EcR тутового шелкопряда Bombyx mori («BmEcR»), LBD EcR плодовой мушки Drosophila melanogaster («DmEcR»), LBD EcR комара Aedes aegypti («AaEcR»), LBD EcR мясной мухи Lucilia capitata («LcEcR»), LBD EcR мясной мухи Lucilia cuprina («LucEcR»), LBD EcR средиземноморской плодовой мушки Ceratitis capitata («CcEcR»), LBD EcR саранчи Locusta migratoria («LmEcR»), LBD EcR тли Myzus persicae («MpEcR»), LBD EcR краба-скрипача Celuca pugilator («CpEcR»), LBD EcR белокрылки Bamecia argentifoli (BaEcR), LBD EcR цикадки Nephotetix cincticeps (NcEcR) и LBD EcR иксодового клеща Amblyomma americanum («AmaEcR»).
17. Первый и второй полипептиды по любому из пп. 1-8 или система LIPC по любому из пп. 9-15, отличающиеся тем, что по меньшей мере один из фрагментов ядерных рецепторных белков происходит из полипептида экдизонового рецептора, кодируемого полинуклеотидом, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CfEcR-DEF), SEQ ID NO: 2 (CfEcR-CDEF), SEQ ID NO: 3 (DmEcR-DEF), SEQ ID NO: 4 (TmEcR-DEF) SEQ ID NO: 5 (AmaEcR-DEF), или полинуклеотидом, кодирующим функциональный вариант, по существу идентичный указанному полипептиду.
18. Первый и второй полипептиды или система LIPC по пп. 16-17, отличающиеся тем, что по меньшей мере один из полипептидов экдизонового рецептора содержит последовательность полипептида SEQ ID NO: 6 (CfEcR-DEF), SEQ ID NO: 7 (DmEcR-DEF), SEQ ID NO: 8 (CfEcR-CDEF), SEQ ID NO: 9 (TmEcR-DEF), SEQ ID NO: 10 (AmaEcR-DEF), или последовательность полипептида, по существу идентичную указанной.
19. Первый и второй полипептиды или система LIPC по любому из пп. 16-18, отличающиеся тем, что указанная последовательность полипептида экдизонового рецептора содержит приблизительно или по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или более мутаций по типу замены относительно соответствующего полипептида экдизонового рецептора дикого типа.
20. Первый и второй полипептиды или система LIPC по любому из пп. 16-19, отличающиеся тем, что указанный полипептид экдизонового рецептора кодируется полинуклеотидом, содержащим мутацию кодона, которая приводит к замене остатка аминокислоты, причем указанный остаток аминокислоты находится в положении, эквивалентном или аналогичном а) остатку аминокислоты 20, 21, 48, 51, 52, 55, 58, 59, 61, 62, 92, 93, 95, 96, 107, 109, 110, 120, 123, 125, 175, 218, 219, 223, 230, 234 или 238 последовательности SEQ ID NO: 17, b) остаткам аминокислот 95 и 110 последовательности SEQ ID NO: 17, с) остаткам аминокислот 218 и 219 последовательности SEQ ID NO: 17, d) остаткам аминокислот 107 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, е) остаткам аминокислот 127 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, f) остаткам аминокислот 107 и 127 последовательности SEQ ID NO: 17, g) остаткам аминокислот 107, 127 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, h) остаткам аминокислот 52, 107 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, i) остаткам аминокислот 96, 107 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, j) остаткам аминокислот 107, 110 и 175 последовательности SEQ ID NO: 17, k) остатку аминокислоты 107, 121, 213 или 217 последовательности SEQ ID NO: 18, или l) остатку аминокислоты 91 или 105 последовательности SEQ ID NO: 19.
21. Первый и второй полипептиды или система LIPC по любому из пп. 16-20, отличающиеся тем, что указанная мутация по типу замены выбрана из группы, состоящей из а) мутации по типу замены Е20А, Q21A, F48A, 151А, Т52А, T52V, T52I, T52L, Т55А, Т58А, V59A, L61A, I62A, М92А, М93А, R95A, V96A, V96T, V96D, V96M, VI071, F109A, А110Р, A110S, А110М, A110L, Y120A, A123F, М125А, R175E, М218А, С219А, L223A, L230A, L234A, W238A, R95A/A110P, М218А/С219А, V107I/R175E, Y127E/R175E, V107I/Y127E, V107I/Y127E/R175E, T52V/V107I/R175E, V96A/V107I/R175E, T52A/V107I/R175E, V96T/V107I/R175E или V107I/A110P/R175E последовательности SEQ ID NO: 17, b) мутации по типу замены А107Р, G121R, G121L, N213A, С217А или C217S последовательности SEQ ID NO: 18, и с) мутации по типу замены G91A или А105Р последовательности SEQ ID NO: 19.
22. Первый и второй полипептиды или система LIPC по любому из пп. 16-21, отличающиеся тем, что указанный полипептид ретиноидного Х-рецептора содержит полипептид, выбранный из группы, состоящей из полипептида ретиноидного Х-рецептора позвоночных, полипептида ретиноидного Х-рецептора беспозвоночных (USP) и химерного ретиноидного Х-полипептида, содержащего полипептидные фрагменты из RXR позвоночных и беспозвоночных.
23. Первый и второй полипептиды или система LIPC по п. 22, отличающиеся тем, что указанный химерный полипептид ретиноидного Х-рецептора содержит по меньшей мере два разных полипептидных фрагмента ретиноидного Х-рецептора, выбранных из группы, состоящей из полипептидного фрагмента ретиноидного Х-рецептора вида позвоночных, полипептидного фрагмента ретиноидного Х-рецептора вида беспозвоночных и полипептидного фрагмента ретиноидного Х-рецептора не относящегося к двукрылым/чешуекрылым вида беспозвоночных.
24. Первый и второй полипептиды или система LIPC по п. 23, отличающиеся тем, что указанный химерный полипептид ретиноидного Х-рецептора содержит полипептид ретиноидного Х-рецептора, содержащий по меньшей мере один полипептидный фрагмент ретиноидного Х-рецептора, выбранный из группы, состоящей из спирали EF-домена 1, спирали EF-домена 2, спирали EF-домена 3, спирали EF-домена 4, спирали EF-домена 5, спирали EF-домена 6, спирали EF-домена 7, спирали EF-домена 8, спирали EF-домена 9, спирали EF-домена 10, спирали EF-домена 11, спирали EF-домена 12, F-домена и β-складчатого листа EF-домена, причем указанный полипептидный фрагмент ретиноидного Х-рецептора происходит из полипептида ретиноидного Х-рецептора другого вида или полипептида ретиноидного Х-рецептора другой изоформы относительно второго полипептидного фрагмента ретиноидного Х-рецептора.
25. Первый и второй полипептиды или система LIPC по п. 22, отличающиеся тем, что указанный химерный полипептид ретиноидного Х-рецептора кодируется полинуклеотидом, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты соответствующую а) последовательности SEQ ID NO: 11, b) нуклеотидам 1-348 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 268-630 последовательности SEQ ID NO: 13, с) нуклеотидам 1-408 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 337-630 последовательности SEQ ID NO: 13, d) нуклеотидам 1465 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 403-630 последовательности SEQ ID NO: 13, e) нуклеотидам 1-555 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 490-630 последовательности SEQ ID NO: 13, f) нуклеотидам 1-624 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 547-630 последовательности SEQ ID NO: 13, g) нуклеотидам 1-645 последовательности SEQ ID NO: 12 и нуклеотидам 601-630 последовательности SEQ ID NO: 13, и h) нуклеотидам 1-717 последовательности SEQ ID NO: 12, нуклеотидам 613-630 последовательности SEQ ID NO: 13; или полинуклеотидом, кодирующим функциональный вариант, по существу идентичный указанному полипептиду.
26. Первый и второй полипептиды или система LIPC по п. 22, отличающиеся тем, что указанный химерный ретиноидный Х-полипептид содержит последовательность полипептида, соответствующую а) последовательности SEQ ID NO: 14, b) аминокислотам 1-116 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 90-210 последовательности SEQ ID NO: 16, с) аминокислотам 1-136 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 113-210 последовательности SEQ ID NO: 16, d) аминокислотам 1-155 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 135-210 последовательности SEQ ID NO: 16, e) аминокислотам 1-185 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 164- 210 последовательности SEQ ID NO: 16, f) аминокислотам 1-208 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 183-210 последовательности SEQ ID NO: 16, g) аминокислотам 1-215 последовательности SEQ ID NO: 15 и аминокислотам 201-210 последовательности SEQ ID NO: 16, и h) аминокислотам 1-239 последовательности SEQ ID NO: 15, аминокислотам 205-210 последовательности SEQ ID NO: 16; или последовательность полипептида, по существу идентичную указанной.
27. Первый и второй полипептиды или система LIPC по любому из пп. 1-26, отличающиеся тем, что одна или обе дополнительных гетерологичных последовательности содержат трансмембранный домен.
28. Первый и второй полипептиды или система LIPC по п. 27, отличающиеся тем, что по меньшей мере один из трансмембранных доменов представляет собой однократно проходящий через мембрану трансмембранный домен I типа.
29. Выделенный полинуклеотид, содержащий последовательность полинуклеотида, которая кодирует первый или второй полипептиды по любому из пп. 1-28.
30. Первый полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую первый полипептид, и второй полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую второй полипептид по любому из пп. 1-28.
31. Вектор, содержащий один из полинуклеотидов по п. 29 или 30.
32. Вектор, содержащий оба полинуклеотида по п. 29 или 30.
33. Вектор по п. 31 или 32, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой экспрессионный вектор.
34. Клетка-хозяин, содержащая вектор по любому из пп. 31-33.
35. Клетка-хозяин по п. 34, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин представляет собой Т-клетку млекопитающего.
36. Клетка-хозяин по п. 34, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин представляет собой Т-клетку человека.
37. Способ индуцирования передачи клеточных сигналов, включающий введение первого и второго полипептидов, или системы LIPC по любому из пп. 1-28, полинуклеотидов по п. 29 или 30, или вектора по любому из пп. 31-33, в клетку-хозяина, и приведение в контакт указанной клетки-хозяина с активирующим лигандом.
38. Первый и второй полипептиды, или система LIPC по любому из пп. 1-28, полинуклеотиды по п. 29 или 30, вектор по любому из пп. 31-33, или способ по любому из пп. 34-36, отличающиеся тем, что указанный активирующий лиганд представляет собой
с) соединение формулы:
,
где Е представляет собой (С46)алкил, в состав которого входит третичный атом углерода, или циано(С35)алкил, в состав которого входит третичный атом углерода; R1 представляет собой Н, Me, Et, i-Pr, F, формил, CF3, CHF2, CHCl2, CH2F, CH2Cl, CH2OH, СН2ОМе, CH2CN, CN, C≡CH, 1-пропинил, 2-пропинил, винил, ОН, ОМе, OEt, циклопропил, CF2CF3, CH=CHCN, аллил, азидо, SCN или SCHF2;
R2 представляет собой Н, Me, Et, н-Pr, i-Pr, формил, CF3, CHF2, CHCl2, CH2F, CH2Cl, CH2OH, CH2OMe, CH2CN, CN, C≡CH, 1-пропинил, 2-пропинил, винил, Ac, F, Cl, OH, OMe, OEt, O-n-Pr, OAc, NMe2, NEt2, SMe, SEt, SOCF3, OCF2CF2H, COEt, циклопропил, CF2CF3, CH=CHCN, аллил, азидо, OCF3, OCHF2, O-i-Pr, SCN, SCHF2, SOMe, NH-CN, или соединен с R3 и фенильными атомами углерода, к которым присоединены R2 и R3, с образованием этилендиокси, дигидрофурильного кольца, содержащего атом кислорода, смежный с фенильным атомом углерода, или дигидропирильного кольца, содержащего атом кислорода, смежный с фенильным атомом углерода;
R3 представляет собой Н, Et, или соединен с R2 и фенильными атомами углерода, к которым присоединены R2 и R3, с образованием этилендиокси, дигидрофурильного кольца, содержащего атом кислорода, смежный с фенильным атомом углерода, или дигидропирильного кольца, содержащего атом кислорода, смежный с фенильным атомом углерода;
R4, R5 и R6 представляют собой независимым образом Н, Me, Et, F, Cl, Br, формил, CF3, CHF2, CHCl2, CH2F, CH2Cl, CH2OH, CN, C≡CH, 1-пропинил, 2-пропинил, винил, OMe, OEt, SMe, или Set; или
d) экдизон, 20-гидроксиэкдизон, понастерон А, муристерон А, оксистерол, 22(R) гидроксихолестерин, 24(S) гидроксихолестерин, 25-эпоксихолестерин, Т0901317, 5-альфа-6-альфа-эпоксихолестерин-3-сульфат, 7-кетохолестерин-3-сульфат, фарнезол, желчную кислоту, 1,1-бифосфонат сложного эфира, или ювенильный гормон III.
39. Первый и второй полипептиды, или система LIPC по любому из пп. 1-28, полинуклеотиды по п. 29 или 30, вектор по любому из пп. 31-33, или способ по любому из пп. 34-36, отличающиеся тем, что указанный активирующий лиганд представляет собой соединение формулы:
или
,
где R1, R2, R3 и R4 представляют собой: a) H, (С16)алкил; (С16)галогеналкил; (С16)цианоалкил; (С16)гидроксиалкил; (С14)алкокси(С16)алкил; (С26)алкенил, необязательно замещенный галогеном, циано, гидроксилом или (С14)алкилом; (С26)алкинил, необязательно замещенный галогеном, циано, гидроксилом или (С14)алкилом; (С35)циклоалкил, необязательно замещенный галогеном, циано, гидроксилом или (С14)алкилом; или b) незамещенный или замещенный бензил, где заместители представляют собой независимым образом 1-5 Н, галоген, нитро, циано, гидроксил, (С16)алкил или (Ci-С6)алкокси; и
R5 представляет собой Н; ОН; F; Cl; или (С16)алкокси;
при условии, что: в тех случаях, когда R1, R2, R3 и R4 представляют собой изопропил, R5 не является гидроксилом;
когда R5 представляет собой Н, гидроксил, метокси или фтор, по меньшей мере один из R1, R2, R3 и R4 не является Н;
когда только один из R1, R2, R3 и R4 представляет собой метил, и R5 представляет собой Н или гидроксил, остальные из R1, R2, R3 и R4 не являются Н;
когда оба R4 и один из R1, R2 и R3 представляют собой метил, R5 не является ни Н, ни гидроксилом;
когда все из R1, R2, R3 и R4 представляют собой метил, R5 не является гидроксилом;
когда все из R1, R2 и R3 представляют собой Н, и R5 представляет собой гидроксил, R4 не является этилом, н-пропилом, н-бутилом, аллилом или бензилом.
40. Первый и второй полипептиды, или система LIPC по любому из пп. 1-28, полинуклеотиды по п. 29 или 30, вектор по любому из пп. 31-33, или способ по любому из пп. 34-36, отличающиеся тем, что указанный активирующий лиганд представляет собой соединение формулы:
,
где X и X' представляют собой независимым образом О или S;
Y представляет собой:
(a) замещенный или незамещенный фенил, где заместители представляют собой независимым образом 1-5Н, (С14)алкил, (С14)алкокси, (С24)алкенил, галоген (F, Cl, Br, I), (С14)галогеналкил, гидрокси, амино, циано или нитро; или
(b) замещенный или незамещенный 2-пиридил, 3-пиридил или 4-пиридил, где заместители представляют собой независимым образом 1-4Н, (С14)алкил, (C14)алкокси, (С24)алкенил, галоген (F, Cl, Br, I), (С14)галогеналкил, гидрокси, амино, циано или нитро;
R1 и R2 независимым образом представляют собой: Н; циано; циано-замещенный или незамещенный (С17) разветвленный или прямоцепочечный алкил; циано-замещенный или незамещенный (С27) разветвленный или прямоцепочечный алкенил; циано-замещенный или незамещенный (С37) разветвленный или прямоцепочечный алкенилалкил; или валентности R1 и R2 совместно обеспечивают образование циано-замещенной или незамещенной (С17) алкилиденовой группы (RaRbC=), причем сумма не принадлежащих заместителям атомов углерода в Ra и Rb равна 0-6;
R3 представляет собой Н, метил, этил, н-пропил, изопропил или циано;
R4, R7 и R8 независимым образом представляют собой: Н, (С14)алкил, (С14)алкокси, (С24)алкенил, галоген (F, Cl, Br, I), (С14)галогеналкил, гидрокси, амино, циано или нитро; и R5 и R6 независимым образом представляют собой: Н, (С14)алкил, (С24)алкенил, (С34)алкенилалкил, галоген (F, Cl, Br, I), С14 галогеналкил, (С14)алкокси, гидрокси, амино, циано, нитро, или совместно посредством связи типа (-OCHR9CHR10O-) образуют кольцо с фенильными атомами углерода, к которым они присоединены; где R9 и R10 независимым образом представляют собой: Н, галоген, (С13)алкил, (С23)алкенил, (С13)алкокси(С13)алкил, бензоилокси(С13)алкил, гидрокси(С13)алкил, галоген(С13)алкил, формил, формил(С13)алкил, циано, циано(С13)алкил, карбокси, карбокси(С13)алкил, (С13)алкоксикарбонил(С13)алкил, (С13)алкилкарбонил(С13)алкил, (C13)алканоилокси(С13)алкил, амино(С13)алкил, (С13)алкиламино(С13)алкил (-(CH2)nRcRe), оксимо(-CH=NOH), оксимо(С13)алкил, (С13)алкоксимо(-C=NORd), алкоксимо(С13)алкил, (С13)карбоксамидо (-C(O)NReRf), (С13)карбоксамидо(С13)алкил, (С13)семикарбазидо(-C=NNHC(O)NReRf), семикарбазидо(С13)алкил, аминокарбонилокси(-OC(O)NHRg), аминокарбонилокси(С13)алкил, пентафторфенилоксикарбонил, пентафторфенилоксикарбонил(С13)алкил, п-толуолсульфонилокси(С13)алкил, арилсульфонилокси(С13)алкил, (С13)тио(С13)алкил, (С13)алкилсульфоксидо(С13)алкил, (С13)алкилсульфонил(С13)алкил или (С15)тризамещенный-силокси(С13)алкил (-(CH2)nSiORdReRg); где n=1-3, Rc и Rd представлены прямыми или разветвленными углеводородными цепями указанной длины, Re, Rf представлены Н, или прямыми или разветвленными углеводородными цепями указанной длины, Rg представлен (С13)алкилом или арилом, необязательно замещенным галогеном или (С13)алкилом, и Rc, Rd, Re, Rf и Rg являются независимыми друг от друга;
при условии, что
i) в тех случаях, когда и R9, и R10 представляют собой Н, или
ii) когда либо R9, либо R10 представляют собой галоген, (С13)алкил, (C13)алкокси(С13)алкил или бензоилокси(C13)алкил, или
iii) когда R5 и R6 совместно не образуют связь типа (-OCHR9CHR10O-),
число атомов углерода, за исключением входящих в циано-заместитель, для какой-либо одной или обеих групп R1 или R2 превышает 4, а число атомов углерода, за исключением входящих в циано-заместитель, для совокупности групп R1, R2 и R3 составляет 10, 11 или 12.
41. Способ измерения лиганд-индуцированной передачи клеточных сигналов, включающий:
a) введение первого и второго полипептидов, или системы LIPC по любому из пп. 1-28, полинуклеотидов по п. 29 или 30, или вектора по любому из пп. 31-33, в клетку-хозяина;
b) приведение указанной клетки-хозяина в контакт с активирующим лигандом; и
c) количественное определение абсолютной или относительной величины лиганд-индуцированной биологической активности или олигомеризации полипептидов.

Авторы

Заявители

СПК: C07K2319/03 C07K2319/715 C07K14/005 C07K14/035 C07K14/70567 C07K14/43563 C07K14/47

Публикация: 2019-05-06

Дата подачи заявки: 2016-03-29

0
0
0
0
Невозможно загрузить содержимое всплывающей подсказки.
Поиск по товарам