Т-клетки с костимулирующим химерным антигенным рецептором, нацеленные на il13rα2 - RU2017111298A
Код документа: RU2017111298A
Формула
1. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор, где химерный антигенный рецептор содержит: человеческий IL-13 (интерлейкин-13) или его вариант, имеющий 1-10 модификаций аминокислот; трансмембранный домен, выбранный из: трансмембранного домена CD4 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, трансмембранного домена CD8 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, трансмембранного домена CD28 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, и трансмембранного домена CD3ζ или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот; костимулирующий домен и домен сигнализации CD3ζ или его вариант, имеющий 1-10 модификаций аминокислот.
2. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой костимулирующий домен выбран из группы, состоящей из: костимулирующего домена CD28 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, костимулирующего домена 4IBB или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, и костимулирующего домена ОХ40 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот.
3. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, содержащая вариант человеческого IL-13, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, которые увеличивают специфичность связывания в отношении IL13Rα2 по сравнению с IL13Rα1.
4. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой человеческий IL-13 или его вариант представляет собой вариант IL-13, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 с 1-5 модификациями аминокислот, при условии, что аминокислота в положении 11 SEQ ID NO: 3 отличается от Е.
5. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 2, в которой химерный антигенный рецептор содержит два разных костимулирующих домена, выбранных из группы, состоящей из костимулирующего домена CD28 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, костимулирующего домена 4IBB или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, и костимулирующего домена ОХ40 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот.
6. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 5, в которой химерный антигенный рецептор содержит два разных костимулирующих домена, выбранных из группы, состоящей из костимулирующего домена CD28 или его варианта, имеющего 1-2
модификации аминокислот, костимулирующего домена 4IBB или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот, и костимулирующего домена ОХ40 или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот.
7. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой химерный антигенный рецептор содержит: человеческий IL-13 или его вариант, имеющий 1-2 модификации аминокислот; трансмембранный домен, выбранный из: трансмембранного домена CD4 или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот, трансмембранного домена CD8 или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот, трансмембранного домена CD28 или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот, и трансмембранного домена CD3ζ или его варианта, имеющего 1-2 модификации аминокислот; костимулирующий домен и домен сигнализации CD3ζ или его вариант, имеющий 1-2 модификации аминокислот.
8. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, содержащая спейсерную область, расположенную между IL-13 или его вариантом и трансмембранным доменом.
9. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 6, в которой спейсерная область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 14-20, 50 и 52.
10. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 6, в которой спейсер содержит шарнирную область IgG.
11. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 6, в которой спейсер содержит 10-150 аминокислот.
12. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 2, в которой домен сигнализации 4-1ВВ содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.
13. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой домен сигнализации CD3ζ содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7.
14. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой линкер из 3-15 аминокислот расположен между костимулирующим доменом и доменом сигнализации CD3ζ или его вариантом.
15. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где молекула нуклеиновой кислоты экспрессирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
16. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где химерный антигенный рецептор содержит область IL-13/IgG4/CD4t/41-BB, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 11, и домен сигнализации CD3ζ, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7.
17. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 14, где химерный антигенный рецептор содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
18. Популяция человеческих Т-клеток, трансдуцированных вектором, содержащим экспрессионную кассету, кодирующую химерный антигенный рецептор, где химерный антигенный рецептор содержит: человеческий IL-13 или его вариант, имеющий 1-10 модификаций аминокислот; трансмембранный домен, выбранный из: трансмембранного домена CD4 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, трансмембранного домена CD8 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, трансмембранного домена CD28 или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот, и трансмембранного домена CD3ζ или его варианта, имеющего 1-10 модификаций аминокислот; костимулирующий домен и домен сигнализации CD3ζ или его вариант, имеющий 1-10 модификаций аминокислот.
19. Популяция человеческих Т-клеток, содержащая вектор, экспрессирующий химерный антигенный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
20. Популяция человеческих Т-клеток по п. 16, в которой Т-клетки состоят из популяции центральных Т-клеток памяти.
21. Способ лечения рака у пациента, включающий введение популяции аутологических или аллогенных человеческих Т-клеток, трансдуцированных вектором, содержащим экспрессионную кассету, кодирующую химерный антигенный рецептор, где химерный антигенный рецептор содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
22. Способ по п. 19, в котором популяция человеческих Т-клеток содержит центральные Т-клетки памяти.
23. Способ по п. 19, где раковое заболевание представляет собой глиобластому.
24. Способ по п. 20, в котором трансдуцированные человеческие Т-клетки были получены способом, включающим получение Т-клеток от пациента, обработку Т-клеток для выделения центральных Т-клеток памяти и трансдуцирование по меньшей мере части центральных клеток памяти вирусным вектором, содержащим экспрессионную кассету, кодирующую химерный
антигенный рецептор, где химерный антигенный рецептор содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
25. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на 95% идентичной аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52.
26. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая является идентичной аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52, за исключением присутствия не более чем 5 замен, делеций или вставок аминокислот.
27. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая является идентичной аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52, за исключением присутствия не более чем 5 замен аминокислот.
28. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая является идентичной аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 10, 31-48 и 52, за исключением присутствия не более чем 2 замен аминокислот.
