Микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, для лечения опухолей - RU2004128929A

Реферат

1. Микроорганизм с нуклеотидной последовательностью, кодирующей клеточный антиген, в геном которого введены и экспрессируются следующие компоненты:

I) нуклеотидная последовательность, кодирующая по меньшей мере один эпитоп антигена или нескольких антигенов опухолевой клетки, и/или нуклеотидная последовательность по меньшей мере одного эпитопа антигена или нескольких антигенов, специфичного к тканевой клетке, от которой происходит опухоль;

II) необязательно, нуклеотидная последовательность, кодирующая протеин, который стимулирует клетки иммунной системы;

IIIA) нуклеотидная последовательность транспортной системы, которая обеспечивает экспрессию продукта экспрессии компонентов I) и, необязательно, II) на наружной поверхности бактерии и/или секрецию продукта экспрессии компонента I) и, необязательно, компонента II); и/или

IIIB) нуклеотидная последовательность протеина для лизиса микроорганизмов в цитозоле клеток млекопитающих и для внутриклеточного высвобождения плазмид, содержащихся в лизируемых микроорганизмах; и

IV) активирующая последовательность для экспрессии одного или нескольких компонентов от I) до IIIB), выбираемая из группы, состоящей из "активируемой в микроорганизме, специфичной к тканевой клетке и неспецифичной к клетке активирующей последовательности", причем каждый из компонентов от I) до IV) может быть представлен однократно или многократно, соответственно, будучи одинаковым или разным.

2. Микроорганизм по п.1, где микроорганизмом является вирус, бактерия, в частности, грамположительная или грамотрицательная бактерия, предпочтительно выбираемая из группы, состоящей из "Escherichia coli, Salmonella, Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, Listeria mobocytogenes и Shigella", или одноклеточный паразит, причем вирулентность микроорганизма предпочтительно снижена.

3. Микроорганизм по п.1, где микроорганизмом является оболочка бактерии.

4. Микроорганизм по п.1, где компонентом I) является нуклеотидная последовательность, кодирующая один эпитоп или несколько эпитопов антигена или нескольких антигенов протеина или нескольких протеинов, который необязательно мутирован, опухолевой клетки, причем этот протеин предпочтительно выбирают из группы, состоящей из "внеклеточной, трансмембранной или внутриклеточной части рецептора; внеклеточной, трансмембранной или внутриклеточной части адгезионной молекулы; протеина сигнальной трансдукции; контролирующего клеточное деление протеина; фактора транскрипции; дифференцировочного протеина; эмбрионального протеина; и вирусного протеина", причем протеином предпочтительно является продукт онкогена или продукт гена-упрессора, в особенности с-Raf, A-Raf, B-Raf или протеин, гомологичный с-Raf, A-Raf или B-Raf.

5. Микроорганизм по п.1, где компонентом I) является нуклеотидная последовательность, кодирующая антиген, который специфичен к тканевой клетке, в частности, выбираемой из группы, состоящей из "щитовидной железы, молочной железы, слюнной железы, лимфатического узла, тимуса слизистой оболочки желудка, почки, яичника, простаты, шейки (органа), слизистой оболочки мочевого пузыря и родимого пятна", от которой происходит опухоль.

6. Микроорганизм по любому из пп.1-5, с компонентом I) по п.4 и компонентом I) по п.5.

7. Микроорганизм по п.1, где компонент II) кодирует по меньшей мере один цитокин, интерлейкин, интерферон и/или хемокин.

8. Микроорганизм по п.1, где компонент IIIA) кодирует гемолизиновый транспортный сигнал Escherichia coli, протеин S-ряда (Rsa A) Caulobacter crescentus или TolC-протеин Escherichia coli.

9. Микроорганизм по п.1, где компонент IIIB) кодирует литический протеин грамположительных бактерий, литический протеин Listeria monocytogenes, PLY551 Listeria monocytogenes и/или холин Listeria monocytogenes.

10. Микроорганизм по п.1, где компонент IV) кодирует активаторную последовательность, активируемую в микроорганизме, в частности, кодирует специфичную к опухолевой клетке, специфичную к тканевой клетке, специфичную к макрофагам, специфичную к дендритным клеткам, специфичную к лимфоцитам, функционально специфичную или неспецифичную к клетке активируемую активаторную последовательность.

11. Микроорганизм по п.1, в котором компонент I) кодирует по меньшей мере два разных протеина.

12. Применение микроорганизма по любому из пп.1-11, для получения лекарственного средства, в частности, для профилактики и/или лечения заболевания, вызываемого неконтролируемым клеточным делением или инфекцией, предпочтительно опухолевой болезни, в частности, карциномы простаты, карциномы яичника, рака молочной железы, рака желудка, опухоли почки, опухоли щитовидной железы, меланомы, опухоли шейки (органа), опухоли мочевого пузыря, опухоли слюнной железы или опухоли лимфатического узла, лейкоза, вирусной или бактериальной инфекции, хронического воспаления, отторжения органа и/или аутоиммунного заболевания.

13. Применение по п.12 для удаления опухоли, а также здоровой ткани, от которой происходит опухоль.

14. Применение по п.12 или 13, где лекарственное средство предназначено для локального, парентерального, перорального или ректального введения.

15. Способ получения лекарственного средства по любому из пп.12-15, где микроорганизм по любому из пп.1-11 в физиологически эффективной дозе вместе с одним или несколькими физиологически приемлемыми носителями предназначается для перорального, внутримышечного, внутривенного, интраперитонеального, ректального или локального введения.

16. Плазмида или вектор экспрессии, содержащая(щий) компоненты I)-IV) по п.1.

17. Способ получения организма по любому из пп.1-11, в котором конструируют плазмиду или вектор экспрессии по п.16 и с помощью этой плазмиды или вектора экспрессии трансформируют микроорганизм.