Имеющий оболочку микроорганизм - RU2004127459A

Реферат

1. Микроорганизм, в геном которого встроены и экспрессируются следующие компоненты:

I) нуклеотидная последовательность, кодирующая прямо или непрямо, антипролиферативно или цитотоксически действующий продукт экспрессии или несколько различных таких продуктов экспрессии;

II) нуклеотидная последовательность, которая кодирует протеин плазмы крови под контролем активируемой в микроорганизме активирующей последовательности или конститутивно активна;

III) необязательно, нуклеотидная последовательность, которая кодирует специфичный к клетке лиганд под контролем активируемой в микроорганизме активирующей последовательности или конститутивно активна;

IV) нуклеотидная последовательность транспортной системы, которая вызывает экспрессию продуктов экспрессии компонентов I) и II), а также, необязательно, III) на наружной поверхности микроорганизма или секрецию продуктов экспрессии компонента I) и экспрессию компонента II), а также, необязательно, компонента III), и предпочтительно конститутивно активна;

V) необязательно, нуклеотидная последовательность протеина для лизиса микроорганизма в цитозоле клеток млекопитающих и для внутриклеточного высвобождения плазмид с помощью по меньшей мере одного или нескольких компонентов I) и VI), содержащихся в подвергнутом лизису микроорганизме; и

VI) активируемая в микроорганизме и/или специфичная к тканевой клетке, специфичная к опухолевой клетке, функционально специфичная или неспецифичная к клетке активирующая последовательность для экспрессии компонента I),

причем каждый из компонентов от I) до VI) может быть представлен однократно или многократно, соответственно, будучи одним и тем же или разным.

2. Микроорганизм по п.1, где микроорганизмом является вирус, бактерия или одноклеточный паразит.

3. Микроорганизм по п.1, где вирулентность микроорганизма снижена.

4. Микроорганизм по п.1, где микроорганизмом является грамположительная или грамотрицательная бактерия.

5. Микроорганизм по п.4, выбираемый из группы, состоящей из Escherichia coli, Salmonella, Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, Listeria monocytogenes и Shigella.

6. Микроорганизм по п.1, где микроорганизмом является оболочка бактерии.

7. Микроорганизм по п.1, в котором компонент I) кодирует по меньшей мере один протеин, выбираемый из группы, состоящей из интерферонов; интерлейкинов; проапоптотических протеинов; антител или фрагментов антител, которые являются ингибирующими или цитотоксическими в отношении иммунокомпетентной клетки, опухолевой клетки или клеток ткани, от которой происходит опухоль; антипролиферативно действующих протеинов; цитотоксических протеинов; индукторов воспаления, в частности интерлейкинов, цитокинов или хемокинов; вирусных, бактериальных, происходящих от дрожжей, моллюска, млекопитающего или человека ферментов для активации или расщепления неактивного предшественника цитостатика с образованием цитостатика; слитых продуктов из специфичного к клетке лиганда и фермента; и ингибиторов ангиогенеза.

8. Микроорганизм по п.1, где компонент II) кодирует по меньшей мере один протеин плазмы крови, выбираемый из группы, состоящей из альбумина, трансферрина, гаптоглобина, гемоглобина, альфа-1-липопротеина, альфа-2-липопротеина, β-1-липопротеина и альфа-2-макроглобулина.

9. Микроорганизм по п.1, где компонент III) кодирует по меньшей мере один лиганд, специфичный к организму-мишени, выбираемому из группы, состоящей из опухолевых клеток; эндотелиальных опухолевых клеток; тканевых клеток, от которых происходит опухоль; активированных эндотелиальных клеток; макрофагов; дендритных клеток; и лимфоцитов.

10. Микроорганизм по п.1, где компонент III) кодирует по меньшей мере один лиганд, специфичный к типу тканевой клетки из тканей, выбираемых из группы, состоящей из щитовидной железы, тимуса, слюнной железы, лимфатического узла, слизистой оболочки желудка, почки, яичника, простаты, шейки (органа), слизистой оболочки мочевого пузыря и родимого пятна.

11. Микроорганизм по п.1, где компонент IV) кодирует гемолизиновый транспортный сигнал Escherichia coli, протеин S-ряда (Rsa A) Caulobacter crescentus и/или TolC-протеин Escherichia coli.

12. Микроорганизм по п.1, где компонент V) кодирует литический протеин грамположительных бактерий, литический протеин Listeria monocytogenes, протеин PLY551 бактерии Listeria monocytogenes и/или холин бактерии Listeria monocytogenes.

13. Микроорганизм по любому из пп.1-12, с которым связано вещество, обладающее длительным временем пребывания в крови, в частности по меньшей мере одно вещество, выбираемое из группы, состоящей из альбумина, трансферрина, преальбумина, гемоглобина, гаптоглобина, альфа-1-липопротеина, альфа-2-липопротеина, β-1-липопротеина, альфа-2-макроглобулина, полиэтиленгликоля (ПЭГ), конъюгатов ПЭГ с природными или синтетическими полимерами, например, с полиэтилениминами, декстранами, полигелинами, гидроксиэтилкрахмалом и смесями этих веществ, причем связывание веществ происходит путем физической сорбции, хемосорбции или ковалетно.

14. Плазмида или вектор экспрессии, содержащая(щий) компоненты I), II), IV) и VI), а также, необязательно, один или несколько компонентов III) и V).

15. Способ получения организма по любому из пп.1-13, причем конструируют плазмиду по п.14 и с помощью этой плазмиды трансформируют микроорганизм.

16. Применение микроорганизма по любому из пп.1-13 для получения фармацевтической композиции.

17. Применение микроорганизма для получения фармацевтической композиции в целях профилактики и/или лечения заболевания, которое возникает за счет неконтролируемого клеточного деления, в частности опухолевой болезни, например, карциномы простаты, рака яичника, рака молочной железы, рака желудка, опухоли почек, опухоли щитовидной железы, меланомы, опухоли шейки (органа), опухоли мочевого пузыря, опухоли слюнной железы и/или опухоли лимфатических узлов, лейкоза, воспаления, отторжения органа и/или аутоиммунного заболевания.

18. Применение по п.17 для удаления опухоли, а также здоровой ткани, от которой происходит опухоль.

19. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп.16-18, в котором получают имеющий оболочку микроорганизм по любому из пп.1-13 в физиологически эффективной дозе с одним или несколькими физиологически приемлемыми носителями для введения перорально, внутримышечно, внутривенно или интраперитонеально.