Полипептиды апротинина для транспорта соединения через гематоэнцефалический барьер - RU2007134566A

Реферат

1. Биологически активный полипептид, способный преодолевать клеточный слой, имитирующий гематоэнцефалический барьер млекопитающих в анализе in vitro, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из

a) фрагмента апротинина, содержащего аминокислотную последовательность, определяемую SEQ ID NO:1,

b) фрагмента апротинина, состоящего из SEQ ID NO:1,

c) биологически активного аналога SEQ ID NO:1,

d) биологически активного фрагмента SEQ ID NO:1, и

e) биологически активного фрагмента аналога SEQ ID NO:1.

2. Биологически активный полипептид, способный преодолевать клеточный слой, имитирующий гематоэнцефалический барьер млекопитающих в анализе in vitro, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из

фрагмента апротинина длиной от 19 до 50 аминокислот, содержащего SEQ ID NO:1,

фрагмента апротинина, состоящего из SEQ ID NO:1,

биологически активного аналога SEQ ID NO:1 длиной приблизительно от 19 до 50 аминокислот, при условии, что указанный аналог не является последовательностью SEQ ID NO:102, 103, 104 или 105, и при условии, что если указанный аналог состоит из SEQ ID NO:67, то указанный аналог является амидированным,

биологически активного фрагмента SEQ ID NO:1 из 12-18 аминокислот, и

биологически активного фрагмента аналога SEQ ID NO:1 приблизительно из 10-18 аминокислот.

3. Полипептид по п.1, где указанный биологически активный аналог SEQ ID NO:1 выбран из группы, состоящей из

a) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 35% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

b) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 40% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

c) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 50% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

d) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 60% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

e) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 70% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

f) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 80% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

g) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 90% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1, и

h) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 95% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1.

4. Полипептид по п.2, где указанный биологически активный аналог SEQ ID NO:1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, определяемых в последовательностях с SEQ ID NO:2 по SEQ ID NO:62, с SEQ ID NO:68 по SEQ ID NO:93 и в SEQ ID NO:97.

5. Полипептид по п.2, где указанный биологически активный аналог SEQ ID NO:1 содержит аминокислотную последовательность, определяемую в SEQ ID NO:67.

6. Полипептид по п.5, где указанный полипептид является амидированным.

7. Полипептид по п.2, где указанный биологически активный аналог SEQ ID NO:1 содержит аминокислотную последовательность, определяемую в SEQ ID NO:99, 100 или 101.

8. Полипептид по любому из пп.1-4 или 7, где указанная аминокислотная последовательность является амидированной.

9. Полипептид по п.1, где длина указанного фрагмента апротинина составляет от 10 до 50 аминокислот.

10. Полипептид по п.9, где длина указанного фрагмента апротинина составляет от 19 до 50 аминокислот.

11. Полипептид по любому из пп.4-7, где указанная аминокислотная последовательность содержит от 1 до 12 аминокислотных замен в последовательности SEQ ID NO:1.

12. Полипептид по любому из пп.4-7, где указанная аминокислотная последовательность содержит от 1 до 10 аминокислотных замен в последовательности SEQ ID NO:1.

13. Полипептид по любому из пп.4-7, где указанная аминокислотная последовательность содержит от 1 до 5 аминокислотных замен в последовательности SEQ ID NO:1.

14. Полипептид по п.11, где указанная аминокислотная замена является неконсервативной.

15. Полипептид по п.11, где указанная аминокислотная замена представляет собой консервативную аминокислотную замену.

16. Полипептид по п.3, где по меньшей мере одна аминокислота указанного аналога, которая не является идентичной соответствующим образом расположенной аминокислоте SEQ ID NO:1, представляет собой консервативную аминокислотную замену.

17. Полипептид по п.1, где длина указанного биологически активного фрагмента SEQ ID NO:1 составляет от 10 до 18 аминокислот.

18. Полипептид по п.1, где длина указанного биологически активного фрагмента аналога SEQ ID NO:1 составляет от 10 до 18 аминокислот.

19. Полипептид по п.17, где указанный биологически активный фрагмент SEQ ID NO:1 содержит по меньшей мере 15 аминокислот последовательности SEQ ID NO:1.

20. Полипептид по п.17, где указанный биологически активный фрагмент аналога SEQ ID NO:1 содержит по меньшей мере 15 аминокислот указанного аналога SEQ ID NO:1.

21. Полипептид по п.2, где указанный биологически активный аналог SEQ ID NO:1 выбран из группы, состоящей из

a) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 35% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

b) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 40% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

c) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 50% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

d) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 60% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

e) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 70% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

f) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 80% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1,

g) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 90% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1, и

h) аналога SEQ ID NO:1, имеющего по меньшей мере 95% идентичность аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1.

22. Биологически активный полипептид по п.2, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из полипептида, содержащего SEQ ID NO:5, полипептида, содержащего SEQ ID NO:8, полипептида, содержащего SEQ ID NO:45, полипептида, содержащего SEQ ID NO:67, полипептида, содержащего SEQ ID NO:70, полипептида, содержащего SEQ ID NO:71, полипептида, содержащего SEQ ID NO:72, полипептида, содержащего SEQ ID NO:73, полипептида, содержащего SEQ ID NO:74, полипептида, содержащего SEQ ID NO:75, полипептида, содержащего SEQ ID NO:76, полипептида, содержащего SEQ ID NO:77, полипептида, содержащего SEQ ID NO:78, полипептида, содержащего SEQ ID NO:79, полипептида, содержащего SEQ ID NO:81, полипептида, содержащего SEQ ID NO:82, полипептида, содержащего SEQ ID NO:90 и полипептида, содержащего SEQ ID NO:91.

23. Полипептид по п.22, где указанный полипептид выбран из группы полипептидов, определяемых в SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:70, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:90 и SEQ ID NO:91.

24. Биологически активный полипептид по п.22, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из полипептида, содержащего SEQ ID NO:5, полипептида, содержащего SEQ ID NO:8, полипептида, содержащего SEQ ID NO:67, полипептида, содержащего SEQ ID NO:75, полипептида, содержащего SEQ ID NO:76, полипептида, содержащего SEQ ID NO:77, полипептида, содержащего SEQ ID NO:78, полипептида, содержащего SEQ ID NO:79, полипептида, содержащего SEQ ID NO:81, полипептида, содержащего SEQ ID NO:82, полипептида, содержащего SEQ ID NO:90, и полипептида, содержащего SEQ ID NO:91.

25. Полипептид по п.24, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из полипептидов, определяемых в SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:90 и SEQ ID NO:91.

26. Полипептид по п.25, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из полипептидов, определяемых в SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:79 и SEQ ID NO:91.

27. Полипептид по п.26, где указанный полипептид выбран из группы, состоящей из полипептидов, определяемых в SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:76 и SEQ ID NO:91.

28. Конъюгат, содержащий

a) носитель, выбранный из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27, и

b) вещество, выбранное из группы, состоящей из лекарственного средства, поддающейся детекции метки, белка, соединения на основе белка и полипептида.

29. Конъюгат по п.28, где указанный носитель состоит из полипептида по п.2 или по любому из пп.21-27.

30. Конъюгат, содержащий

a) носитель, выбранный из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27, при условии, что если указанный носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным, и

b) вещество, выбранное из группы, состоящей из лекарственного средства, поддающейся детекции метки, белка, соединения на основе белка и полипептида.

31. Конъюгат по п.30, где указанный носитель состоит из полипептида по п.2 или по любому из пп.21-27.

32. Конъюгат по пп.28-31, где указанная поддающаяся детекции метка представляет собой радиовизуализирующее средство.

33. Конъюгат по пп.28-31, где указанное соединение на основе белка представляет собой антитело или фрагмент этого антитела.

34. Конъюгат по пп.28-31, где указанное вещество представляет собой низкомолекулярное лекарственное средство.

35. Конъюгат по п.34, где указанное низкомолекулярное лекарственное средство представляет собой противоопухолевое лекарственное средство.

36. Конъюгат по п.35, где указанное противоопухолевое лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из паклитаксела, винбластина, винкристина, этопозида, доксорубицина, циклофосфамида, таксотера, мелфалана, хлорамбуцила и их сочетания.

37. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36, для транспорта вещества через гематоэнцефалический барьер нуждающегося в этом млекопитающего.

38. Применение по п.37, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

39. Применение по п.37, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

40. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36, для транспорта вещества через гематоэнцефалический барьер млекопитающего, нуждающегося в этом, при условии, что если указанный носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным.

41. Применение по п.40, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

42. Применение по п.40, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

43. Применение по пп.37-42, где указанное вещество представляет собой поддающуюся детекции метку.

44. Применение по пп.37-42, где указанная поддающаяся детекции метка представляет собой радиовизуализирующее средство.

45. Применение по пп.37-42, где указанное вещество представляет собой соединение на основе белка.

46. Применение по п.45, где указанное соединение на основе белка представляет собой антитело или фрагмент этого антитела.

47. Применение по пп.37-42, где указанное вещество представляет собой низкомолекулярное лекарственное средство.

48. Применение по п.47, где указанное низкомолекулярное лекарственное средство представляет собой противоопухолевое лекарственное средство.

49. Применение по п.48, где указанное противоопухолевое лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из паклитаксела, винбластина, винкристина, этопозида, доксорубицина, циклофосфамида, таксотера, мелфалана, хлорамбуцила и их сочетания.

50. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27, или конъюгата по любому из пп.28-36 для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания головного мозга или неврологического заболевания, или для диагностики заболевания головного мозга или неврологического заболевания.

51. Применение по п.50, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

52. Применение по п.50, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

53. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36, для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания головного мозга или неврологического заболевания, или для диагностики заболевания головного мозга или неврологического заболевания, при условии, что если носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным.

54. Применение по п.53, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

55. Применение по п.53, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

56. Применение по пп.50-55, где указанное неврологическое заболевание выбрано из группы, состоящей из опухоли мозга, метастаза в головной мозг, шизофрении, эпилепсии, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, инсульта и связанных с гематоэнцефалическим барьером нарушений функции.

57. Применение по п.56, где указанное заболевание, представляющее собой связанное с гематоэнцефалическим барьером нарушение функции, представляет собой ожирение.

58. Способ лечения пациента с неврологическим заболеванием, включающий в себя введение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36.

59. Способ по п.58, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

60. Способ по п.58, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

61. Способ лечения пациента с неврологическим заболеванием, включающий в себя введение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36 при условии, что если носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным.

62. Способ по п.61, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

63. Способ по п.61, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

64. Способ диагностики неврологического заболевания у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36.

65. Способ по п.64, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

66. Способ по п.64, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

67. Способ диагностики неврологического заболевания у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36, при условии, что если носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным.

68. Способ по п.67, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

69. Способ по п.67, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

70. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36, для лечения млекопитающего с неврологическим заболеванием или для диагностики неврологического заболевания у нуждающегося в этом млекопитающего.

71. Применение по п.70, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

72. Применение по п.70, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

73. Применение носителя, выбранного из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27 или конъюгата по любому из пп.28-36 для лечения млекопитающего с неврологическим заболеванием или для диагностики неврологического заболевания у нуждающегося в этом млекопитающего, при условии, что если носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным.

74. Применение по п.73, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

75. Применение по п.73, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

76. Применение, как определено в любом из пп.70-75, где указанное неврологическое заболевание выбрано из группы, состоящей из опухоли мозга, метастаза в головной мозг, шизофрении, эпилепсии, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, инсульта и связанных с гематоэнцефалическим барьером нарушений функции.

77. Применение по п.76, где указанное заболевание, представляющее собой связанное с гематоэнцефалическим барьером нарушение функции, представляет собой ожирение.

78. Фармацевтическая композиция, содержащая

a) носитель, выбранный из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27, или конъюгат по любому из пп.28-36, и

b) фармацевтически приемлемый носитель.

79. Фармацевтическая композиция по п.78, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

80. Фармацевтическая композиция по п.78, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

81. Фармацевтическая композиция, содержащая

a) носитель, выбранный из группы, состоящей из полипептида по любому из пп.1-27, или конъюгат по любому из пп.28-36, при условии, что если носитель состоит из SEQ ID NO:67, то указанный носитель является амидированным, и

b) фармацевтически приемлемый носитель.

82. Фармацевтическая композиция по п.81, где указанный полипептид представляет собой полипептид, как определено в п.2 или в любом из пп.21-27.

83. Фармацевтическая композиция по п.81, где указанный конъюгат представляет собой конъюгат, как определено в п.31.

84. Фармацевтическая композиция по любому из пп.78-83, где указанную фармацевтическую композицию применяют для лечения неврологического заболевания.

85. Фармацевтическая композиция по любому из пп.78-83, где указанную фармацевтическую композицию используют для диагностики неврологического заболевания.

86. Нуклеотидная последовательность, кодирующая любой из полипептидов по пп.1-4 или 7.

87. Нуклеотидная последовательность по п.86, где указанная нуклеотидная последовательность кодирует полипептид по п.2 или по любому из пп.21-27.

88. Нуклеотидная последовательность по п.86, где указанная последовательность состоит из нуклеотидов, выбранных из группы, состоящей из рибонуклеотидов, дезоксирибонуклеотидов и их нуклеотидных аналогов.

89. Нуклеотидная последовательность по п.87, где указанная последовательность состоит из нуклеотидов, выбранных из группы, состоящей из рибонуклеотидов, дезоксирибонуклеотидов и их нуклеотидных аналогов.