Антитело против ip-10 (варианты) и способ его получения, иммуноконъюгат и биспецифическая молекула на его основе, их композиции, способ лечения (варианты), кодирующая молекула нк, соответствующий экспрессионный вектор, клетка-хозяин, трансгенная мышь и ги - RU2006124611A

Реферат

1. Выделенное человеческое моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с человеческим IP-10 и проявляет по меньшей мере одно из следующих свойств:

ингибирует связывание IP-10 с CXCR3;

ингибирует индуцируемый IP-10 ток кальция;

ингибирует индуцируемую IP-10 миграцию клеток;

является перекрестно-реактивным с IP-10 макаки-резуса;

не является перекрестно-реактивным с мышиным IP-10;

не является перекрестно-реактивным с человеческим MIG;

не является перекрестно-реактивным с человеческим ITAC.

2. Антитело по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой антитело полной длины изотипа IgG1 или IgG4.

3. Антитело по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой фрагмент антитела или одноцепочечное антитело.

4. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена человеческой зародышевой линии V_H, выбранного из группы, состоящей из гена V_H 3-33 человека, гена V_H 3-30.3 человека, гена V_H 5-51 человека и гена V_H 4-61 человека.

5. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена человеческой зародышевой линии V_k, выбранной из группы, состоящей из гена V_k A27 человека, гена V_k L15 человека, гена V_k L6 человека и гена V_k L18 человека.

6. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена человеческой зародышевой линии V_H, выбранного из группы, состоящей из гена V_H 3-33 человека, гена V_H 3-30.3 человека, гена V_H 5-51 человека и гена V_H 4-61 человека, и вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена V_k человеческой зародышевой линии, выбранного из группы, состоящей из гена V_k A27 человека, гена V_k L15 человека, гена V_k L6 человека и гена V_k L18 человека.

7. Антитело по п.6, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена V_H 3-33 человека, и вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена зародышевой линии человека Vk, выбранного из группы, состоящей из гена Vk A27 человека, гена Vk L15 человека и гена Vk L6 человека.

8. Антитело по п.7, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk A27 человека.

9. Антитело по п.7, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk L15 человека.

10. Антитело по п.7, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk L6 человека.

11. Антитело по п.6, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена V_H 3-30.3 человека, и вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk L6 человека.

12. Антитело по п.6, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена V_H 5-51 человека, и вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk L18 человека.

13. Антитело по п.6, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена V_H 4-61 человека, и вариабельную область легкой цепи, которая представляет собой продукт или происходит из гена Vk A27 человека.

14. Антитело по любому из пп.4-13, отличающееся тем, что IP-10 представляет собой человеческий IP-10.

15. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, причем последовательность CDR3 вариабельной области тяжелой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 24-34 и их консервативных модификаций; последовательность CDR3 вариабельной области легкой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 73-83 и их консервативных модификаций, и при этом

антитело проявляет по меньшей мере одно из следующих функциональных свойств:

антитело ингибирует связывание IP-10 с CXCR3;

антитело ингибирует индуцируемый IP-10 ток кальция;

антитело ингибирует индуцируемую IP-10 миграцию клеток;

антитело является перекрестно-реактивным с IP-10 макаки-резуса;

антитело не является перекрестно-реактивным с мышиным IP-10;

антитело не является перекрестно-реактивным с человеческим MIG;

антитело не является перекрестно-реактивным с человеческим ITAC.

16. Антитело по п.15, отличающееся тем, что последовательность CDR2 вариабельной области тяжелой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 13-23 и их консервативных модификаций, и последовательность CDR2 вариабельной области легкой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 62-72 и их консервативных модификаций.

17. Антитело по п.16, отличающееся тем, что последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 1-12 и их консервативных модификаций, и последовательность CDR1 вариабельной области легкой цепи включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей аминокислот SEQ ID NONO: 51-61 и их консервативных модификаций.

18. Антитело по п.15, отличающееся тем, что оно представляет собой человеческое антитело.

19. Антитело по п.15, отличающееся тем, что оно представляет собой гуманизированное или химерное антитело.

20. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, в котором вариабельная область тяжелой цепи включает последовательность аминокислот, которая по меньшей мере на 80% гомологична последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 35-46; вариабельная область легкой цепи включает последовательность аминокислот, которая по меньшей мере на 80% гомологична последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NONO:84-94, и при этом

антитело проявляет по меньшей мере одно из следующих функциональных свойств:

антитело ингибирует связывание IP-10 с CXCR3;

антитело ингибирует индуцируемый IP-10 ток кальция;

антитело ингибирует индуцируемую IP-10 миграцию клеток;

антитело является перекрестно-реактивным с IP-10 макаки-резуса;

антитело не является перекрестно-реактивным с мышиным IP-10;

антитело не является перекрестно-реактивным с человеческим MIG;

антитело не является перекрестно-реактивным с человеческим ITAC.

21. Антитело по п.20, отличающееся тем, что оно представляет собой человеческое антитело.

22. Антитело по п.20, отличающееся тем, что оно представляет собой гуманизированное или химерное антитело.

23. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 1-12;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 13-23;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 24-34;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 51-61;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 62-72; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 73-83.

24. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 1;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 13;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 24;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 51;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 62; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 73.

25. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 2;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 14;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 25;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 52;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 63; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 74.

26. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 3;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 15;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 26;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 53;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 64; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 75.

27. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 4;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 16;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 27;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 54;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 65; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 76.

28. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 5;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 17;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 28;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 55;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 66; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 77.

29. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 6;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 18;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 29;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 56;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 67; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 78.

30. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 7;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 19;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 30;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 57;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 68; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 79.

31. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 8;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 20;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 31;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 58;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 69; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 80.

32. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 9;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 21;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 32;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 59;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 70; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 81.

33. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 10 или 11;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 22;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 33;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 60;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 71; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 82.

34. Антитело по п.23, отличающееся тем, что оно включает:

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 12;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 23;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 34;

CDR1 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 61;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 72; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 83.

35. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающая часть, которое специфически связывается с IP-10 и включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 35-46, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 84-94.

36. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 35, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 84.

37. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 36, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 85.

38. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 86.

39. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 38, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 87.

40. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 39, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 88.

41. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 40, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 89.

42. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 90.

43. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 42, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 91.

44. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 43, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 92.

45. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 44 или 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 93.

46. Антитело по п.35, отличающееся тем, что оно включает вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 46, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 94.

47. Выделенное человеческое антитело или его антигенсвязывающая часть, которые конкурируют за связывание с IP-10 с антителом по любому из пп.1-46.

48. Композиция, включающая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46 и фармацевтически приемлемый носитель.

49. Иммуноконъюгат, включающий антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46, связанные с терапевтическим агентом.

50. Иммуноконъюгат по п.49, отличающееся тем, что терапевтический агент представляет собой цитотоксин.

51. Иммуноконъюгат по п.49, отличающееся тем, что терапевтический агент представляет собой радиоактивный изотоп.

52. Композиция, включающая иммуноконъюгат по любому из пп.49-51 и фармацевтически приемлемый носитель.

53. Биспецифическая молекула, включающая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46, связанные со второй функциональной группой, имеющей другую специфичность связывания, чем указанное антитело или его антигенсвязывающая часть.

54. Композиция, включающая биспецифическую молекулу по п.53 и фармацевтически приемлемый носитель.

55. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46.

56. Экспрессионный вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.55.

57. Клетка-хозяин, содержащая экспрессионный вектор по п.56.

58. Трансгенная мышь, содержащая трансгены тяжелой и легкой цепи человеческого иммуноглобулина, экспрессирующая антитела по любому из пп.1-46.

59. Гибридома, продуцирующая антитела по любому из пп.1-46, полученная из мыши по п.58.

60. Способ подавления воспалительного или аутоиммунного ответа, опосредованного активированными Т-клетками или МК-клетками, заключающийся в контактировании Т-клеток или NK-клеток с антителом или его антигенсвязывающей частью, отличающийся тем, что в качестве последних используют антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46.

61. Способ лечения воспалительного или аутоиммунного заболевания у нуждающегося в лечении субъекта, заключающийся во введении субъекту антитела или его антигенсвязывающей части, отличающийся тем, что в качестве последних используют антитело или его антигенсвязывающую часть по любому из пп.1-46.

62. Способ по п.61, отличающийся тем, что заболевание представляет собой рассеянный склероз.

63. Способ по п.61, отличающийся тем, что заболевание выбрано из группы, состоящей из ревматоидного артрита, воспалительной болезни кишки (например, язвенного колита, болезни Крона), системной красной волчанки, диабета типа I, воспалительных кожных нарушений (например, псориаза, плоского лишая), аутоиммунного заболевания щитовидной железы (например, болезни Грейвса, тиреоидита Хашимото), синдрома Шегрена, легочного воспаления (например, астмы, хронической обструктивной болезни легких, саркоидоза легких, аутоиммунного альвеолита), отторжения трансплантата, повреждения спинного мозга, повреждения головного мозга (например, инсульта), нейродегенеративных заболеваний (например, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона), гингивита, воспаления, вызванного генотерапией, болезней ангиогенеза, воспалительной болезни почек (например, IgA нефропатии, мембранопролиферативного гломерулонефрита, быстро прогрессирующего гломерулонефрита) и атеросклероза.

64. Способ лечения вирусной или бактериальной инфекции, влекущей нежелательную активность IP-1, у нуждающегося в лечении субъекта, заключающийся во введении субъекту антитела или его антигенсвязывающей части по любому из пп.1-46.

65. Способ по п.64, отличающийся тем, что вирусная инфекция опосредована вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусом гепатита С (HCV), вирусом простого герпеса типа I (HSV-1) или вирусом тяжелого острого респираторного синдрома (SARS).

66. Способ получения антитела против IP-10, отличающийся тем, что получают последовательность вариабельной области тяжелой цепи антитела, включающей последовательность CDR1, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 1-12, последовательность CDR2, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 13-23, и последовательность CDR3, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 24-34, или последовательность вариабельной области легкой цепи антитела, включающей последовательность CDR1, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 51-61, последовательность CDR2, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 62-72, и последовательность CDR3, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NONO: 73-83; изменяют по меньшей мере один остаток аминокислоты в по меньшей мере одной последовательности вариабельной области антитела, причем указанная последовательность выбрана из вариабельной области тяжелой цепи антитела и вариабельной области легкой цепи антитела, с целью создания по меньшей мере одной измененной последовательности антитела, и экспрессируют измененную последовательность антитела в виде белка.