Модифицированные дендритные клетки и их применение в лечении злокачественных опухолей - RU2017146770A
Код документа: RU2017146770A
Формула
1. Применение in vitro модифицированных лимфоцитов, содержащих вектор для регулируемой экспрессии белка, обладающего функцией интерлейкина-12 (IL-12), в получении медикамента для лечения опухоли у млекопитающего, причем указанный вектор содержит полинуклеотид, кодирующий переключатель гена, где указанный генный переключатель содержит:
(a) по меньшей мере одну последовательность транскрипционного фактора, причем указанная по меньшей мере одна последовательность транскрипционного фактора кодирует лиганд-зависимый транскрипционный фактор, функционально связанный с промтором; и
(b) полинуклеотид, кодирующий белок, обладающий функцией IL-12, связанный с промотором, который активируется указанным лиганд-зависимым транскрипционным фактором;
причем указанный полинуклеотид, кодирующий указанный белок, обладающий функцией IL-12, кодирует белок, который по меньшей мере на 85% идентичен человеческому IL-12 дикого типа, и при этом указанный лиганд вводят через или менее чем через 24 часа после введения фармацевтической композиции, содержащей указанные клетки, и ежедневно в течение периода от 5 до 28 дней.
2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что указанный лиганд вводят через или менее чем через 24 часов после введения указанного вектора или указанной фармацевтической композиции и ежедневно в течение по меньшей мере 14 дней.
3. Применение по любому из пп. 1 или 2, отличающееся тем, что указанный вектор представляет собой аденовирусный вектор.
4. Применение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что указанный переключатель гена представляет собой переключатель гена на основе рецептора экдизона (EcR).
5. Применение по любому из пп. 1-4, отличающееся тем, что указанный полинуклеотид, кодирующий переключатель гена, содержит первую последовательность транскрипционного фактора и вторую последовательность транскрипционного фактора под контролем промотора, причем белки, кодируемые указанной первой последовательностью транскрипционного фактора и указанной второй последовательностью транскрипционного фактора взаимодействуют с образованием белкового комплекса, функционирующего в качестве лиганд-зависимого транскрипционного фактора.
6. Применение по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что указанный первый транскрипционный фактор и указанный второй транскрипционный фактор связаны внутренним сайтом посадки рибосомы.
7. Применение по п. 5 или 6, отличающееся тем, что первая последовательность транскрипционнного фактора содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую трансактивационный домен VP-16 и белок ретиноидного Х-рецептора (RXR).
8. Применение по пп. 5-7, отличающееся тем, что вторая последовательность транскрипционного фактора содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую ДНК-связывающий домен GAL-4 и белок рецептора экдизона (EcR).
9. Применение по любому из пп. 1-8, отличающееся тем, что указанный вектор дополнительно содержит полинуклеотид, кодирующий белок, обладающий функцией интерферона-альфа, связанный с промотором, активируемым указанным лиганд-зависимым транскрипционным фактором.
10. Применение по любому из пп. 1-9, отличающееся тем, что указанный полинуклеотид, кодирующий белок, обладающий функцией IL-12, кодирует человеческий IL-12.
11. Применение по любому из пп. 1-10, отличающееся тем, что указанный вектор или указанная фармацевтическая композиция подходят для внутриопухолевого, внутрибрюшинного или подкожного введения.
12. Применение по любому из пп. 1-11, отличающееся тем, что указанная опухоль представляет собой меланому.
13. Применение по любому из пп. 1-12, отличающееся тем, что указанный лиганд выбран из группы, состоящей из (N-(1-этил-2,2-диметил-пропил)-N'-(2-метил-3-метокси-бензил)-гидразида 3,5-диметил-бензойной кислоты, (N-(1-трет-бутилбутил)-N'-(2-этил-3-метокси-бензил)-гидразида (R)-3,5-диметил-бензойной кислоты и N-(2-этил-3-метоксибензил)-гидразида 3,5-диметил-бензойной кислоты.
14. Применение по любому из пп. 1-13, отличающееся тем, что указанный белок, которые по меньшей мере на 85% идентичен человеческому IL-12 дикого типа, по меньшей мере на 90% идентичен человеческому IL-12 дикого типа, предпочтительно по меньшей мере на 95% идентичен человеческому IL-12 дикого типа или, более предпочтительно, по меньшей мере на 99% идентичен человеческому IL-12 дикого типа.
15. Применение по любому из пп. 1-14, отличающееся тем, что лиганд выбран из RG-115819, RG-115830 и RG-115932.
16. Применение по любому из пп. 1-15, отличающееся тем, что лимфоциты представляют собой В-клетки.
17. Применение по любому из пп. 1-15, отличающееся тем, что лимфоциты представляют собой Т-клетки.
