Способ экспрессии белков, содержащих в качестве компонента гибридный изотип антитела - RU2003129528A

Реферат

1. Слитый белок, содержащий компонент иммуноглобулина, соединенный с компонентом, не являющимся иммуноглобулином, причем указанный компонент иммуноглобулина содержит первый домен от первого изотипа антитела и второй домен от второго изотипа антитела.

2. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что указанный компонент иммуноглобулина содержит шарнирную область от первого изотипа антитела и константную область от второго изотипа антитела.

3. Слитый белок по п.2, отличающийся тем, что указанная константная область представляет собой СН2 домен.

4. Слитый белок по п.3, отличающийся тем, что указанный СН2 домен получен из тяжелой цепи IgG2 человека, а указанная шарнирная область содержит три или менее остатков цистеина.

5. Слитый белок по п.3, отличающийся тем, что указанный СН2 домен получен из тяжелой цепи IgG4 человека.

6. Слитый белок по п.2, отличающийся тем, что указанная шарнирная область является шарнирной областью, не принадлежащей IgG2.

7. Слитый белок по п.2, отличающийся тем, что указанная шарнирная область получена из IgG1 человека.

8. Слитый белок по пп.3-6, отличающийся тем, что шарнирная область содержит два или менее остатков цистеина.

9. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что указанный домен иммуноглобулина не содержит сайта связывания антигена.

10. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что указанный домен иммуноглобулина содержит сайт связывания антигена.

11. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что компонент, не являющийся иммуноглобулином, соединен посредством генной инженерии с С-концом тяжелой цепи домена Ig.

12. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что компонент, не являющийся иммуноглобулином, присоединен посредством генно-инженерных методов к N-концу тяжелой цепи домена Ig.

13. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что компонент, не являющийся иммуноглобулином, соединен с полипептидом легкой цепи.

14. Слитый белок по п.2, отличающийся тем, что шарнирная область получена из IgA человека.

15. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что указанный первый домен иммуноглобулина является СН2 доменом, а указанный второй домен иммуноглобулина является СН3 доменом.

16. Слитый белок по п.15, отличающийся тем, что первый изотип антитела является IgG, а второй изотип антитела является IgM или IgA.

17. Антитело или Ig-содержащий слитый белок, содержащий компонент антитела IgG2, в котором шарнирная область IgG2 мутирована так, что она содержит два остатка цистеина.

18. Компонент иммуноглобулина, содержащий V домен, направленный против антигена, ассоциированного с опухолью, причем указанный компонент иммуноглобулина содержит первый домен от первого изотипа антитела и второй домен от второго изотипа антитела.

19. Белок по п.18, отличающийся тем, что он содержит неактивный сайт связывания Fc-I рецептора и шарнирную область, содержащую три или менее остатков цистеина.

20. Нуклеиновая кислота, кодирующая слитый белок по пп.1, 17 или 18.

21. Стабильно трансфицированная клетка, экспрессирующая белок по пп.1, 17 или 18.

22. Способ улучшения сборки антитела или Ig-содержащего слитого белка, включающий стадии:

а) замены шарнирной области указанного белка на другую шарнирную область; и

б) анализа сборки измененного белка.

23. Способ по п.22, отличающийся тем, что указанный белок и указанный измененный белок получены с помощью методик генетической инженерии.

24. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что компонент иммуноглобулина содержит Fc-фрагмент тяжелой цепи, а компонент, не являющийся иммуноглобулином, содержит молекулу эритропоэтина.

25. Нуклеиновая кислота, кодирующая слитый белок по п.24.

26. Слитый белок по п.1, отличающийся тем, что компонент, не являющийся иммуноглобулином, содержит молекулу эритропоэтина.

27. Способ повышения продуцирования антитела или Ig-содержащего слитого белка клеткой, включающий стадии:

а) замены шарнирной области указанного белка на другую шарнирную область; и

б) анализа продуцирования измененного белка.

28. Способ по п.27, отличающийся тем, что указанный белок и указанный измененный белок получены с помощью методик генетической инженерии.