Слитые конструкции лекарственного средства и конъюгаты - RU2007119990A

Реферат

1. Слитая конструкция лекарственного средства, имеющая формулу

где Х представляет собой инсулинотропный агент или его аналог;

Y представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, или вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина;

Z представляет собой полипептидное лекарственное средство, которое имеет связывающую специфичность в отношении мишени;

а, b, с и d независимо представляют собой полипептид, содержащий от одного до примерно 100 аминокислотных остатков или отсутствуют;

n1 равно от одного до примерно 10;

n2 равно от одного до примерно 10; и

n3 равно от нуля до примерно 10.

2. Слитая конструкция по п.1, где один или каждый Х представляет собой GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)амид, [Ser⁸]GLP-1(7-36)амид, [Pro⁹]GLP(7-37) или их аналог.

3. Слитая конструкция по п.1, где оба n1 и n3 равны одному, а n2 равно от двух до примерно 10.

4. Слитая конструкция по п.1, где один или каждый Y содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26.

5. Слитая конструкция по п.1, где один или каждый Y содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22 и SEQ ID NO:23.

6. Слитая конструкция лекарственного средства, содержащая группировки X' и Y', где X' представляет собой GLP-1 или его аналог; и

Y' представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, или вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина.

7. Слитая конструкция лекарственного средства по п.6, где X' имеет амино-концевое расположение по отношению к Y'.

8. Слитая конструкция лекарственного средства по п.6, где Y' имеет амино-концевое расположение по отношению к X'.

9. Слитая конструкция лекарственного средства по п.6, где указанные V_H и V_L имеют связывающую специфичность в отношении человеческого сывороточного альбумина.

10. Слитая конструкция лекарственного средства по п.6, где Y' содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26.

11. Слитая конструкция лекарственного средства по п.6, где Y' содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22 и SEQ ID NO:23.

12. Конъюгат лекарственного средства, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, или вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, и GLP-1 или его аналог, который ковалентно связан с указанным V_H или V_L.

13. Конъюгат лекарственного средства по п.12, где конъюгат лекарственного средства содержит одиночный V_H.

14. Конъюгат лекарственного средства по п.12, где конъюгат лекарственного средства содержит одиночный V_L.

15. Конъюгат лекарственного средства по п.12, где указанный GLP-1 или аналог ковалентно связан с указанным V_H или V_L через линкерную группировку.

16. Конъюгат лекарственного средства по п.12, содержащий одно или более различных лекарственных средств, ковалентно связанных с указанным V_H или V_L.

17. Конъюгат лекарственного средства по п.12, где указанный вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, или указанный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L), который имеет связывающую специфичность в отношении сывороточного альбумина, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22 и SEQ ID NO:23.

18. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, кодирующая слитую конструкцию лекарственного средства по п.1 или 6.

19. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п.18.

20. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п.18.

21. Способ получения слитой конструкции лекарственного средства, включающий поддержание клетки-хозяина по п.20 в условиях, пригодных для экспрессии указанной рекомбинантной нуклеиновой кислоты, посредством чего получают слитую конструкцию лекарственного средства.

22. Фармацевтическая композиция, содержащая слитую конструкцию лекарственного средства по п.1 или 6 либо конъюгат лекарственного средства по п.12 и физиологически приемлемый носитель.

23. Конъюгат лекарственного средства или слитая конструкция, содержащие инсулинотропный агент и фрагмент антитела, который связывает антиген, где антиген действует, чтобы увеличить период полувыведения конъюгата лекарственного средства или слитой конструкции in vivo.

24. Конъюгат лекарственного средства или слитая конструкция по п.23, где лекарственное средство представляет собой лекарственный слитый белок, содержащий инсулинотропный агент пептид, связанный с фрагментом антитела.

25. Лекарственное средство по п.24, где инсулинотропный агент слит с фрагментом антитела через пептидную линкерную группировку.

26. Лекарственное средство по п.23, где антиген представляет собой сывороточный альбумин.

27. Лекарственное средство по п.23, где инсулинотропный агент представляет собой глюкагон-подобный пептид.

28. Лекарственное средство по п.23, где инсулинотропный агент выбран из группы, состоящей из GLP-1, аналога GLP-1, Эксендина-3, аналога Эксендина-3, Эксендина-4 и аналога Эксендина-4.

29. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 и 28, где GLP-1 или аналог содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% гомологична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 157 или 159.

30. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 и 28, где аналог GLP-1 содержит Gly¹⁰, Thr¹², Asp¹⁴, Phe²⁷и Ile²⁹.

31. Лекарственное средство по п.29, где аналог GLP-1 отличается от SEQ ID NO:157 или SEQ ID NO:159 не более чем на 6 аминокислот.

32. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 и 28, содержащее единичный вариабельный домен, специфический в отношении сывороточного альбумина (SA), который имеет константу диссоциации (К_d), равную 1 нМ - 500 мкМ для SA, как установлено поверхностным плазменным резонансом.

33. Лекарственное средство по п.32, где SA-специфический домен связывает SA в стандартном лиганд-связывающем анализе с IC50, равной 1 нМ - 500 мкМ.

34. Лекарственное средство по п.23, содержащее 2, 3 или 4 группировки инсулинотропного агента (IA).

35. Лекарственное средство по п.34, содержащее IA-IA'-AF или IA-(AF)_n-IA', где IA и IA' являются одинаковыми или различными инсулинотропными агентами и AF является фрагментом антитела, как указано в п.23, и n равно 1, 2, 3, 4 или 5.

36. Лекарственное средство по п.35, содержащее [GLP-1]-[AF]-[GLP-1] или [GLP-1]-[GLP-1]-[AF].

37. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 или 23, содержащее средство от переедания.

38. Лекарственное средство по п.37, где средство от переедания выбрано из группы, состоящей из PYY, аналога PYY, PYY (3-36).

39. Лекарственное средство по п.37, содержащее IA-(AF)_n-(IA')_x-[средство от переедания] или [средство от переедания]-(IA')_х-(AF)_n-IA, где n равно 1, 2, 3, 4 или 5 и x равно нулю, 1, 2, 3, 4 или 5.

40. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 или 23, имеющее t1/2 альфа между 1 и 6 часами.

41. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 или 23, имеющее t1/2 бета между 12 и 60 часами.

42. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12 и 23, дополнительно содержащее агент, выбранный из группы, состоящей из инсулина, Эксендина-4, Эксендина-3, PYY (3-36), Резистина, Лептина, антагониста MC3R/MC4R, антагониста AgRP, Аполипопротеина A-IV, Энтеростатина, гастрин-высвобождающего пептида (GRP), IGF1, BMP-9, IL-22, RegIV, интерферона альфа, INCAP пептида, соматостатина, амилина, нейрулина, интерферона бета, гибридов интерферона, адипонектина, эндоканнабиноидов, пептида С, WNT10b, орексина-А, адренокортикотропина, энтеростатина, холецистокинина, оксинтомодулина, меланоцит-стимулирующих гормонов, меланокортина, меланин-концентрирующего гормона, ВВ-2, агонистов NPY Y2, антагонистов NPY Y5/Y1, ОХМ, антагонистов Gal-1R, антагонистов MCH-1R, агонистов МС-3/4, агонистов BRS-3, панкреатического полипептида, фрагмента антитела против грелина, нейротрофического фактора, происходящего из головного мозга, человеческого гормона роста, паратиреоидного гормона, фолликулостимулирующего гормона, желудочного ингибиторного пептида или их аналога.

43. Лекарственное средство, содержащее GLP-1 или его аналог и белковую группировку, содержащую антигенсвязывающий сайт, где антигенсвязывающий сайт связывает антиген, который действует, чтобы увеличить период полувыведения конъюгата лекарственного средства in vivo, при условии, что белковая группировка не является пептидом, имеющим 10-30 аминокислот.

44. Слитая конструкция лекарственного средства, содержащая GLP-1 или его аналог и белковую группировку, содержащую антигенсвязывающий сайт, где антигенсвязывающий сайт связывает антиген, который действует, чтобы увеличить период полувыведения конъюгата лекарственного средства in vivo.

45. Лекарственное средство по п.43 или 44, где GLP или аналог представляет собой GLP-1 (7-37), GLP-1 (7-36)амид, [Ser⁸]GLP-1(7-36)амид, [Pro⁹]GLP-1(7-36), [Pro⁹]GLP-1(7-37) или их аналог.

46. Лекарственное средство по п.45, где аналог GLP имеет С-концевой пептид, выбранный из перечня, состоящего из PSS, PSSGAP или PSSGAPPPS.

47. Лекарственное средство по п.43 или 44, где указанный антиген представляет собой сывороточный альбумин.

48. Лекарственное средство по любому из п.43 или 44, содержащее единичную белковую группировку.

49. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, кодирующая лекарственное средство по любому из пп.43-48.

50. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п.49.

51. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п.49.

52. Способ получения слитой конструкции лекарственного средства, включающий поддержание клетки-хозяина по п.51 в условиях, пригодных для экспрессии указанной рекомбинантной нуклеиновой кислоты, посредством чего получают слитую конструкцию лекарственного средства.

53. Фармацевтическая композиция, содержащая лекарственное средство по любому из пп.43-48 и физиологически приемлемый носитель.

54. Способ лечения и/или предотвращения состояния у пациента, включающий введение этому пациенту лекарственного средства по любому из пп.1-17 и 23-48, где состояние выбрано из группы, состоящей из гипергликемии, диабета 2 типа, нарушенной толерантности к глюкозе, диабета 1 типа, ожирения, гипертензии, синдрома X, дислипидемии, когнитивных расстройств, атеросклероза, инфаркта миокарда, ишемической болезни сердца и других сердечно-сосудистых расстройств, удара, воспалительного синдрома кишечника, диспепсии и язв желудка.

55. Способ замедления или предотвращения развития заболевания диабета 2 типа у пациента, включающий введение этому пациенту лекарственного средства по любому из пп.1-17 и 23-48.

56. Способ уменьшения потребления пищи пациентом, уменьшения β-клеточного апоптоза, повышения β-клеточной функции и β-клеточной массы и/или восстановления чувствительности к глюкозе β-клеток у пациента, включающий введение этому пациенту лекарственного средства по любому из пп.1-17 и 23-48.

57. Способ уменьшения потребления пищи пациентом, уменьшения β-клеточного апоптоза, повышения β-клеточной функции и β-клеточной массы и/или восстановления чувствительности к глюкозе β-клеток, включающий введение этому пациенту лекарственного средства по любому из пп.1-17 и 23-48.

58. Способ лечения и/или предотвращения гипергликемии, диабета 1 типа, диабета 2 типа или дефицита β-клеток у пациента, включающий введение этому пациенту лекарственного средства по любому из пп.1-17 и 23-48.

59. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12, 23, 43 или 44 для лечения и/или предотвращения диабета.

60. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12, 23, 43 или 44 для лечения и/или предотвращения ожирения.

61. Лекарственное средство по любому из пп.1, 6, 12, 23, 43 или 44 для уменьшения потребления пищи пациентом.