Молекулярные массивы антигенов - RU2005104235A

Реферат

1. Вирусоподобная частица, содержащая по меньшей мере один белок, выбранный из группы, состоящей из:

(а) белка, имеющего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1;

(b) белка, имеющего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3; и

(с) мутеина указанного белка (а) или (b);

и где указанный белок предпочтительно является рекомбинантным.

2. Вирусоподобная частица по п.1, где указанный мутеин имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1 или представленную в SEQ ID NO:3, где по меньшей мере один аминокислотный остаток, предпочтительно три аминокислотных остатка, более предпочтительно два аминокислотных остатка и еще более предпочтительно один аминокислотный остаток добавлен, делетирован или заменен, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой; и/или где предпочтительно указанный мутеин имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1 или представленную в SEQ ID NO:3, где по меньшей мере один остаток цистеина, предпочтительно два остатка цистеина делетированы или заменены, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой, и/или предпочтительно указанный мутеин имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1 или представленную в SEQ ID NO:3, где по меньшей мере один остаток лизина, предпочтительно три остатка лизина, более предпочтительно два остатка лизина и еще более предпочтительно один лизин добавлен, делетирован или заменен, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой.

3. Мутеин рекомбинантного белка SEQ ID NO:1, где предпочтительно по меньшей мере один аминокислотный остаток, предпочтительно три аминокислотных остатка, более предпочтительно два аминокислотных остатка и еще более предпочтительно один аминокислотный остаток добавлен, делетирован или заменен, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой, и/или где по меньшей мере один остаток цистеина, предпочтительно два остатка цистеина делетированы или заменены, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой, и/или где предпочтительно по меньшей мере один остаток лизина, предпочтительно три остатка лизина, более предпочтительно два остатка лизина и еще более предпочтительно один лизин добавлен, делетирован или заменен, где предпочтительно указанная по меньшей мере одна замена является консервативной заменой.

4. Мутеин по п. 3, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3.

5. Вектор, кодирующий по меньшей мере один белок выбран из группы, состоящей из:

(а) белка, имеющего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1;

(b) белка, имеющего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3; и

(с) мутеина указанного белка (а) или (b).

6. Композиция, содержащая:

(а) коровую (сердцевинную) частицу, выбранную из группы, состоящей из

(i) вирусной частицы АР205 и

(ii) вирусоподобной частицы АР205, и

(b) органическую молекулу,

где эта органическая молекула связана с коровой частицей; и где предпочтительно указанная органическая молекула и частица кора образуют упорядоченный и повторяющийся массив органической молекулы на поверхности частицы кора; и/или где предпочтительно указанная органическая молекула связана с частицей кора через третью молекулу, причем указанная третья молекула связывает частицу кора с этой органической молекулой.

7. Композиция по п.6, где указанная органическая молекула связана с частицей кора по меньшей мере одной ковалентной связью, где предпочтительно указанная ковалентная связь содержит пептидную связь; и/или где предпочтительно указанная органическая молекула связана с частицей кора по меньшей мере одной ковалентной связью, где предпочтительно указанная ковалентная связь содержит непептидную связь.

8. Композиция по п.6, где эта органическая молекула содержит или предпочтительно является гаптеном, антигеном или антигенной детерминантой, и где более предпочтительно указанная органическая молекула является антигеном или антигенной детерминантой.

9. Композиция по п.6, где вирусоподобная частица содержит по меньшей мере первый сайт присоединения, а органическая молекула содержит по меньшей мере второй сайт присоединения, так что указанный второй сайт присоединения способен связываться с указанным первым сайтом присоединения с образованием упорядоченного и повторяющегося массива антигенов, предпочтительно через по меньшей мере одну непептидную связь.

10. Композиция по п.9, где указанный первый сайт присоединения содержит, предпочтительно представляет собой аминогруппу, и где предпочтительно указанный первый сайт присоединения содержит, предпочтительно представляет собой остаток лизина и где указанный второй сайт присоединения содержит, предпочтительно представляет собой сульфгидрильную группу и где предпочтительно указанный второй сайт присоединения содержит, предпочтительно представляет собой остаток цистеина; и где предпочтительно указанный второй сайт присоединения не встречается природно в указанной органической молекуле.

11. Композиция по п.8, где указанная композиция содержит аминокислотный линкер и где предпочтительно указанный аминокислотный линкер связан с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой посредством по меньшей мере одной ковалентной связи, предпочтительно посредством по меньшей мере одной пептидной связи, и где предпочтительно указанный аминокислотный линкер содержит указанный второй сайт присоединения, и/или где предпочтительно указанный аминокислотный линкер выбран из группы, состоящей из:

(а) CGG;

(b) N-концевого гамма 1-линкера;

(с) N-концевого гамма 3-линкера;

(d) шарнирных областей Ig;

(е) N-концевых глициновых линкеров;

(f) (G)_kC(G)_n, где n=0-12 и k=0-5 (SEQ ID NO:93);

(g) N-концевых глицин-сериновых линкеров;

(h) (G)_kC(G)_m(S)_l(GGGGS)_n, где n=0-3, k=0-5, m=0-10, l=0-2 (SEQ ID NO:94);

(i) GGC;

(k) GGC-NH₂;

(l) С-концевого гамма 1-линкера;

(m) С-концевого гамма-3-линкера;

(n) С-концевых глициновых линкеров;

(о) (G)_n(G)_k, где n=0-12 и k=0-5 (SEQ ID NO:95);

(p) C-концевые глицин-сериновых линкеров; и

(q) (G)_m(S)_l(GGGGS)_n(G)_oC(G)_k, где n=0-3, k=0-5, m=0-10, l=0-2 и o=0-8 (SEQ ID NO:96).

12. Композиция по п.6, где указанная органическая молекула выбрана из группы, состоящей из:

(а) органической молекулы, подходящей для индукции иммунной реакции против злокачественных клеток;

(b) органической молекулы, подходящей для индукции иммунной реакции против инфекционных заболеваний;

(с) органической молекулы, подходящей для индукции иммунной реакции против аллергенов;

(d) органической молекулы, подходящей для индукции улучшенной реакции против аутоантигенов;

(е) органической молекулы, подходящей для индукции иммунной реакции у сельскохозяйственных животных или домашних животных;

(f) органической молекулы, подходящей для индукции реакции против наркотика, гормона или токсичного соединения; и

(g) фрагментов, мутеинов или доменов молекул, представленных в (а)-(f).

13. Композиция по п.6, где эта органическая молекула является антигеном или антигенной детерминантой или их фрагментом или мутеином, выбранными из группы, состоящей из

(а) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции иммунной реакции против злокачественных клеток;

(b) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции иммунной реакции против инфекционных заболеваний;

(c) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции иммунной реакции против аллергенов;

(d) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции улучшенной реакции против аутоантигенов;

(е) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции иммунной реакции в сельскохозяйственных животных или домашних животных;

(f) антигена или антигенной детерминанты, подходящих для индукции реакции против наркотика, гормона или токсичного соединения; и

(g) фрагментов или доменов молекул, представленных в (а)-(f).

14. Композиция по п.6, где указанная органическая молекула является антигеном, выбранным из группы, состоящей из:

(а) полипептида ВИЧ,

(b) полипептида вируса гриппа,

(с) полипептида вируса гепатита С,

(d) полипептида Toxoplasma,

(е) полипептида Plasmodium falciparum,

(f) полипептида Plasmodium vivax,

(g) полипептида Plasmodium ovale,

(h) полипептида Plasmodium malariae,

(i) полипептида клеток рака молочной железы,

(j) полипептида клеток рака почки,

(k) полипептида клеток рака предстательной железы,

(l) полипептида клеток рака кожи,

(m) полипептида клеток злокачественной опухоли головного мозга,

(n) полипептида клеток лейкоза,

(о) рекомбинантного profiling,

(р) полипептида аллергии к укусу пчелы,

(q) полипептида аллергии к орехам,

(r) полипептида аллергий к пищевым продуктам,

(s) полипептида астмы или

(t) полипептида Chlamydia,

(u) Her2,

(v) GD2,

(w) EGF-R,

(х) CEA,

(y) CD52,

(z) gp100 меланомы человека,

(аа) melanA/MART-1 меланомы человека,

(bb) тирозиназы,

(сс) NA17-A nt,

(dd) MAGE3,

(ee) P53 и

(ff) HPV16E7 и

(gg) любого фрагмента или мутеина указанного антигена (а)-(z) и (аа)-(ff).

15. Композиция по п.8, где указанным антигеном или антигенной детерминантой является пептид, белок или фрагмент или мутеин белка или пептида, выбранный из группы, состоящей из:

а) белка фосфолипазы А₂;

b) IgE человека;

с) лимфотоксина;

d) белка М2 вируса гриппа и

е) пептида Der p I.

16. Композиция по п.6, где указанной органической молекулой является антиген или антигенная детерминанта, кроме того, указанный антиген или указанная антигенная детерминанта является аутоантигеном или антиидиотипическим антителом, или их фрагментами, и где предпочтительно указанный аутоантиген является белком, пептидом или их любыми фрагментами или мутеинами, выбранными из группы, состоящей из:

а) лимфотоксина;

b) рецептора лимфотоксина;

с) RANKL;

d) VEGF;

е) VEGFR;

f) интерлейкина-5;

g) интерлейкина-8;

h) интерлейкина-17;

h) интерлейкина-13;

i) ангиотензина;

k) CCL21;

l) CXCL12;

m) SDF-1;

n) MCP-1;

o) эндоглина;

р) резистина;

g) GHRH;

r) LHRH;

s) TRH;

t) MIF;

u) эотаксина;

v) брадикинина;

w) BLC;

x) M-CSF;

x) фактора α некроза опухолей (TNFα);

y) амилоидного бета-пептида (Aβ_1-42) и

z) IgG человека;

и/или предпочтительно указанный аутоантиген является лимфотоксином или его фрагментом, выбранным из группы, состоящей из: а) лимфотоксина α (LTα); b) лимфотоксина β (LTβ); и с) смеси или комбинации LTα и LTβ.

17. Композиция по п.6, где указанная органическая молекула является органической молекулой, подходящей для индукции иммунной реакции против наркотика, гормона или токсина.

18. Композиция по п.6, где указанная органическая молекула является органической молекулой, подходящей для индукции иммунной реакции против наркотика; и где предпочтительно указанный наркотик выбран из группы, состоящей из:

(а) кодеина;

(b) фентанила;

(с) героина;

(d) морфина;

(е) амфетамина;

(f) кокаина;

(g) метилендиоксиметамфетамина;

(h) метамфетамина;

(i) метилфенидата;

(j) никотина;

(k) LSD;

(l) мескалина;

(m) псилоцибина; и

(n) тетрагидроканнабинола;

и/или где предпочтительно указанный наркотик является никотином.

19. Композиция по п.6, где эта органическая молекула является подходящей для индукции иммунной реакции против гормона; и где предпочтительно указанная органическая молекула является гормоном, выбранным из группы, предпочтительно состоящей из:

(а) прогестерона;

(b) эстрогена;

(с) тестостерона;

(d) фолликулостимулирующего гормона;

(е) меланинстимулирующего гормона;

(f) адреналина; и

(g) норадреналина.

20. Композиция по п.6, где эта органическая молекула является подходящей для индукции иммунной реакции против токсина, и где предпочтительно указанная органическая молекула является токсином, выбранным из группы, состоящей из:

(а) афлатоксина;

(b) токсина ciguetera;

(с) тетродотоксина;

(d) антибиотиков; и

(е) противораковых агентов.

21. Фармацевтическая композиция, содержащая:

а) композицию по любому из пп.6-20 и

b) приемлемый фармацевтический носитель.

22. Вакцинная композиция, содержащая иммунологически эффективное количество композиции по любому из пп.6-20, и где предпочтительно указанная вакцинная композиция дополнительно содержит адъювант.

23. Способ иммунизации, предусматривающий введение вакцинной композиции по п.22.

24. Способ получения не встречающегося природно, упорядоченного и повторяющегося массива антигенов, предусматривающий:

(а) обеспечение молекулярного каркаса, содержащего частицу кора, выбранную из группы

(i)вируса АР205 и

(ii) вирусоподобной частицы АР205; и

(b) обеспечение органической молекулы, подходящей для индукции иммунной реакции;

(с) обеспечение средства ассоциации (а) и (b), причем указанное средство необязательно содержится в (а) и/или (b); или в виде отдельной молекулы; и

(d) объединение элементов (а)-(с) таким образом, что указанная органическая молекула связывается с указанным каркасом с образованием упорядоченного и повторяющегося массива антигенов.

25. Способ лечения или профилактики заболевания, нарушения или физиологических состояний у индивидуума, предусматривающий введение индивидууму композиции по любому из пп.6-20 или вакцинной композиции по п.22.

26. Способ получения вирусоподобной частицы АР205, предусматривающий стадии

(а) обеспечения нуклеиновой кислоты или вектора, кодирующего по меньшей мере один белок, выбранный из группы, состоящей из:(i) белка, имеющего аминокислотную последовательность,

приведенную в SEQ ID NO:1;

(ii) белка, имеющего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:3; и

(iii) мутеина указанного белка (i) или (ii);

(b) введения указанной нуклеиновой кислоты или указанного вектора в клетку-хозяина, причем предпочтительно указанная клетка-хозяин представляет собой E. coli;

(с) экспрессии указанной нуклеиновой кислоты или последовательности указанного вектора в указанной клетке-хозяине для получения указанного белка или указанного мутеина, способных образовывать вирусоподобную частицу АР205.