Молекулы анти-идиотипического анти-сеа антитела иих применение в качестве противораковых вакцин - RU2004133040A

Реферат

1. Молекула иммуноглобулина или ее фрагмент, имеющая происхождение от исходного анти-идиотипического анти-СЕА антитела и содержащая константные участки человеческого происхождения и синтетически сконструированные вариабельные участки, содержащие один или более фрагментов последовательности, состоящие из более чем 4 смежных аминокислотных остатков, имеющих происхождение от опухолевого антигена человека СЕА (канцероэмбрионального антигена).

2. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.1, в которой один из указанных фрагментов последовательности включают 5-20 смежных аминокислотных остатков.

3. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.1, в которой, по крайней мере, один из указанных фрагментов последовательности представляет собой компонент участка, определяющего комплементарность (CDR), тяжелой и/или легкой цепи указанного иммуноглобулина, или перекрывает соседние остатки каркасного участка, соседствующего с указанным CDR.

4. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.3, в которой указанный компонент составляет от 30 до 100% аминокислотных остатков указанного CDR.

5. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.3, в которой указанный CDR представляет собой CDR тяжелой цепи указанного иммуноглобулина.

6. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.3, в которой, по крайней мере, два CDR каждой тяжелой и/или легкой цепи полностью составляют фрагменты последовательности, имеющей происхождение от СЕА.

7. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.1, в которой указанное исходное анти-идиотипическое антитело представляет собой мышиное антитело 708.

8. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, содержащая в пределах вариабельных участков дополнительные фрагменты последовательности, включающие от 5 до 25 смежных аминокислотных остатков, имеющих происхождение от антигена CD55 человека или гипервариабельных участков анти-идиотипического анти-СD55 антитела.

9. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.8, в которой указанное анти-идиотипическое антитело анти-СD55 представляет собой мышиное антитело 105AD7.

10. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, в которой дополнительно содержащиеся потенциальные эпитопы класса II МНС, находящиеся в пределах вариабельных участков, и которые не вносят своего вклада в иммунный ответ на раковые клетки человека, позитивные по СЕА, удалены путем аминокислотных замен.

11. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, содержащая в пределах вариабельных участков дополнительные фрагменты последовательности, имеющей происхождение от СЕА, которые представляют собой эпитопы класса I МНС.

12. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.11, в которой указанные фрагменты последовательности, имеющей происхождение от СЕА, представляют собой TLLSVTRNDV и YLSGANLNL.

13. Молекула иммуноглобулина в соответствии с п.11, в которой указанные фрагменты последовательности, имеющей происхождение от СЕА, являются частью или полностью образуют один или более CDR легкой цепи указанного иммуноглобулина.

14. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, включающая в пределах вариабельных участков дополнительные фрагменты последовательности, имеющей происхождение от СЕА, которые представляют собой эпитопы класса II МНС, вносящие свой вклад в иммунный ответ, направленный на раковые клетки, позитивные по СЕА.

15. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, включающая вариабельную легкую цепь, выбранную из любой последовательности, как показано на фиг.4-7.

16. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, включающая вариабельную легкую цепь, выбранную из любой последовательности, как показано на фиг.8 и 9.

17. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, включающая тяжелую цепь, выбранную из любой последовательности, как показано на фиг.4-7, и легкую цепь, выбранную из любой последовательности, как показано на фиг.8 и 9.

18. Молекула иммуноглобулина в соответствии с любым из пп.1-7, в которой вариабельная тяжелая и/или легкая цепь включают один или более фрагментов последовательности, идентичных фрагментам последовательности, выбранным из группы:

(i) 345-354 СЕА человека;

(ii) 387-396 СЕА человека

(iii) 571-579 СЕА человека

(iv) 629-645 СЕА человека

(v) 148-167 CD55 человека.

19. Фармацевтическая композиция, содержащая молекулу иммуноглобулина, определенную в любом из пп.1-18 в биологически эффективном количестве, адъювант и необязательно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

20. Применение молекулы иммуноглобулина, определенной в любом из пп.1-18, или фармацевтической композиции по п.19 для производства лекарственного средства для вакцинации индивидуумов человека, страдающих от солидных или метастазирующих опухолей, позитивных по СЕА.

21. Применение в соответствии с п.20, в котором указанная вакцинация вызывает улучшенную стимуляцию Т-клеток, позитивных по CD8 и/или CD4, у указанного индивидуума.

22. Способ получения молекулы вакцины, основанной на синтетически сконструированной молекуле иммуноглобулина, приемлемой для лечения индивидуумов человека, страдающих от солидных или метастазирующих опухолей, позитивных по СЕА (канцероэмбриональному антигену), при этом указанный способ включает следующие этапы:

(i) отбор анти-идиотипического анти-СЕА антитела, имеющего происхождение не от человека,

(ii) замену нечеловеческих константных участков человеческими константными участками, и

(iii) замену частично или полностью одного или более гипервариабельных участков (CDR) фрагментами последовательности, имеющей происхождение от СЕА, при этом могут быть включены остатки каркасного участка, смежные с указанными CDR.

23. Способ в соответствии с п.22, включающий дополнительно один или более этапов, выбранных из группы:

(iv) замену фрагментов последовательности в пределах вариабельных участков фрагментами, имеющими происхождение от антигена CD55 или гипервариабельных участков анти-идиотипического антитела анти-CD55,

(v) замену фрагментов последовательности в пределах вариабельных участков фрагментами, которые представляют собой эпитопы класса I MHC и/или класса II MHC, которые отвечают на раковые клетки человека, позитивные по СЕА,

(vi) удаление в пределах вариабельных участков потенциальных эпитопов класса II МНС, которые не вносят своего вклада в иммунный ответ на раковые клетки, позитивные по СЕА.

24. Способ в соответствии с п.22 или 23, в котором указанное нечеловеческое анти-идиотипическое антитело анти-СЕА представляет собой мышиное антитело 708.