Способ идентификации модулятора связывания между полипептидом αd и vcam-1 (варианты) - RU2215006C2

Код документа: RU2215006C2

Чертежи

Показать все 282 чертежа(ей)

Описание

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Реферат

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для поиска модулятора биологической активности β2-интегрина человека. Модулятор связывания между полипептидом αd(α-субъединица β2-интегрина) и VCAM-1 идентифицируют путем контактирования полипептида αd с последовательностью аминокислот SEQ ID N2, 53, 55 или 103 и VCAM-1 и детектированием связывания. Полипептид αd или VCAM-1 иммобилизуют на твердом носителе, неиммобилизованный партнер связывания метят детектируемым агентом, в частности флуоресцентным агентом. Детектирование связывания осуществляют по эмиссии света из флуоресцентного агента. Изобретение позволяет разрабатывать практические средства для терапевтического вмешательства в связанные с β2-интегрином иммунные и воспалительные реакции. 2 с и 2 з.п.ф-лы, 4 ил., 2 табл.

Формула

1. Способ идентификации модулятора связывания между полипептидом αd и VCAM-1, включающий в себя а) контактирование полипептида αd как изложено в SEQ ID Nos: 2, 53, 55 или 103, и VCAM-1 в присутствии и в отсутствие предполагаемого модуляторного соединения; b) детектирование связывания между αd и VCAM-1 и с) идентификацию предполагаемого модуляторного соединения в связи с уменьшенным или увеличенным связыванием между αd и VCAM-1 в присутствии предполагаемого модулятора в сравнении со связыванием в отсутствие предполагаемого модулятора.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что его осуществляют в клетке-хозяине, содержащей растворимый αd и растворимый VCAM-1, а уменьшенное или увеличенное связывание определяют количественно посредством измерения зависимого от связывания фенотипического изменения в клетке-хозяине, возникающего вследствие изменения в экспрессии продукта репортерного гена.
3. Способ идентификации модулятора связывания между полипептидом αd и VCAM-1, включающий в себя а) иммобилизацию полипептида αd как изложено в SEQ ID Nos: 2, 53, 55 или 103, или его фрагмента или VCAM-1 или его фрагмента на твердом носителе; b) мечение неиммобилизованного партнера связывания детектируемым агентом; с) контактирование указанного иммобилизованного партнера связывания с указанным меченым партнером связывания в присутствии и в отсутствие предполагаемого модуляторного соединения, способного специфически реагировать с αd или VCAM-1; d) детектирование связывания между указанным иммобилизованным партнером связывания и указанным меченым партнером связывания и е) идентификацию модулирующих соединений как соединений, влияющих на связывание между указанными иммобилизованным партнером связывания и меченым партнером связывания.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что αd или VCAM-1 иммобилизуют на твердом носителе, покрытом или пропитанном флуоресцентным агентом, указанный неиммобилизованный партнер связывания метят соединением, способным возбуждать указанный флуоресцентный агент, и взаимодействие αd с партнером связывания αd детектируют по эмиссии света из указанного флуоресцентного агента.

Патенты аналоги

Авторы

Патентообладатели

Заявители

СПК: A01K2217/05 A61K38/00 C07K16/2845 C07K2319/00 C07K14/70553 C12Q1/6818

МПК: A61K38/00

Публикация: 2003-10-27

Дата подачи заявки: 1998-10-02

0
0
0
0
Невозможно загрузить содержимое всплывающей подсказки.
Поиск по товарам