Новые полипептиды - RU2017142008A
Код документа: RU2017142008A
Формула
1. Биспецифический полипептид, содержащий первый связывающий домен, обозначенный В1, который способен специфически связываться с первой Т-клеточной мишенью, и второй связывающий домен, обозначенный В2, который способен специфически связываться со второй Т-клеточной мишенью, при этом первая и вторая Т-клеточные мишени представляют собой разные мишени.
2. Полипептид по п. 1, отличающийся тем, что первый и/или второй связывающие домены выбирают из группы, состоящей из: антител или их антигенсвязывающих фрагментов
3. Полипептид по п. 2, отличающийся тем, что антигенсвязывающий фрагмент выбирают из группы, состоящей из: Fv-фрагмента (такого как одноцепочечный Fv-фрагмент или Fv-фрагмент с дисульфидной связью), Fab-подобного фрагмента (такого как Fab-фрагмент; Fab'-фрагмент или F(ab)2-фрагмент) и доменных антител.
4. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что полипептид представляет собой биспецифическое антитело.
5. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что:
(a) В1 содержит или состоит из антитела IgG1, а В2 содержит или состоит из неиммуноглобулинового полипептида или наоборот;
(b) В1 содержит или состоит из антитела IgG1, а В2 содержит или состоит из scFv или наоборот; или
(c) В1 содержит или состоит по меньшей мере из одного scFv, а В2 содержит или состоит по меньшей мере из одного scFv.
6. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий Fc-область человека или вариант указанной области, при этом область представляет собой область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, предпочтительно область IgG1 или IgG4.
7. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первая Т-клеточная мишень и/или вторая Т-клеточная мишень экспрессируются на поверхности Т-клеток.
8. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первая Т-клеточная мишень и/или вторая Т-клеточная мишень представляет собой молекулу контрольной точки.
9. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первая Т-клеточная мишень и/или вторая Т-клеточная мишень представляет собой стимулирующую молекулу контрольной точки.
10. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первая Т-клеточная мишень и/или вторая Т-клеточная мишень представляет собой ингибирующую молекулу контрольной точки.
11. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первая Т-клеточная мишень и/или вторая Т-клеточная мишень является представителем суперсемейства TNFR.
12. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что первую Т-клеточную мишень и/или вторую Т-клеточную мишень выбирают из группы, состоящей из: ОХ40, CTLA-4, CD137, CD27, GITR и CD28.
13. Полипептид по п. 12, отличающийся тем, что первую Т-клеточную мишень и/или вторую Т-клеточную мишень выбирают из группы, состоящей из: ОХ40, CTLA-4 и CD137.
14. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанный полипептид способен индуцировать антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC), антителозависимый клеточный фагоцитоз (ADCP), комплементзависимую цитотоксичность (CDC) и/или апоптоз.
15. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанный полипептид способен индуцировать опухолевый иммунитет.
16. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что В1 является специфическим для CD137, а В2 является специфическим для CTLA-4.
17. Полипептид по п. 16, отличающийся тем, что В1 представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, специфичный для CD137; а В2 представляет собой полипептидный связывающий домен, специфичный для CTLA-4, который включает или состоит из:
i) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3; или
ii) аминокислотной последовательности, в которой изменена по меньшей мере одна аминокислота по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3, при условии, что указанный связывающий домен связывается с CTLA-4 человека с более высокой аффинностью, чем человеческого CD86 дикого типа.
18. Полипептид по п. 1 или 2, отличающийся тем, что В1 содержит по меньшей мере одну тяжелую цепь (Н) и/или по меньшей мере одну легкую цепь (L), а часть В2 присоединена к указанной по меньшей мере одной тяжелой цепи (Н) или по меньшей мере одной легкой цепи (L).
19. Полипептид по п. 18, отличающийся тем, что В1 содержит:
по меньшей мере одну тяжелую цепь (Н) и по меньшей мере одну легкую цепь (L), и часть В2 присоединена либо к тяжелой цепи, либо к легкой цепи; или
две идентичные тяжелые цепи (Н) и две идентичные легкие цепи (L) и часть В2 присоединена как к обеим тяжелым цепям, так и к обеим легким цепям.
20. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, который содержит или состоит из полипептидной цепи, расположенной согласно любой из следующих формул, записанной в направлении N-C:
(A) L-(X)n-B2;
(B) B2-(X)n-L;
(C) В2-(Х)n-Н;
(D) Н-(Х)n-В2;
где X представляет собой линкер, а n равно 0 или 1.
21. Полипептид по п. 20, отличающийся тем, что X представляет собой пептид с аминокислотной последовательностью SGGGGSGGGGS(SEQ ID NO: 47), SGGGGSGGGGSAP (SEQ ID NO: 48), NFSQP (SEQ ID NO: 49), KRTVA (SEQ ID NO: 50) или (SG)m, где m = от 1 до 7.
22. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, который связывается с CD137 человека с величиной Kd, составляющей менее чем 10×10-9М, 4×10-9М, или 1,2×10-9М и/или связывается с CTLA-4 человека с величиной Kd, составляющей менее чем 60×10-9М, 25×10-9М, или 10×10-9М.
23. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, который индуцирует повышение активности эффекторной Т-клетки, предпочтительно CD4+ эффекторной Т-клетки, в некоторых случаях при этом указанное повышение составляет по меньшей мере 1,5 раза, 4,5 раза или в 7 раз по сравнению с увеличением активности эффекторной Т-клетки, индуцированной комбинацией первого и второго связывающих доменов, вводимых в Т-клетку в виде отдельных молекул.
24. Полипептид по п. 23, отличающийся тем, что указанное повышение активности Т-клеток представляет собой повышение пролиферации и/или продукции IL-2 Т-клеткой.
25. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислот в указанной аминокислотной последовательности В2 (ii) заменены по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3; в некоторых случаях, без вставок или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3.
26. Полипептид по п. 25, отличающийся тем, что по меньшей мере одна из указанных аминокислотных замен в указанной аминокислотной последовательности указанного первого связывающего домена находится в положении 122 и в некоторых случаях указанная аминокислотная последовательность также замещена по меньшей мере в одном из положений 107, 121 и 125.
27. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанная аминокислотная последовательность В2 содержит или состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из SEQ ID NO 8, 6, 7 и 9-24.
28. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий аминокислотную последовательность легкой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 198, 200, 202, 204 и 206.
29. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий нуклеотидную последовательность легкой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 197, 199, 201, 203 и 205.
30. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из 179, 181, 185, 189 и 193.
31. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий нуклеотидную последовательность вариабельной области тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 180, 182, 186, 190 и 194.
32. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, содержащий аминокислотные последовательности:
a) SEQ ID NO: 179 и 198; или
b) SEQ ID NO: 181 и 200; или
c) SEQ ID NO: 185 и 202; или
d) SEQ ID NO: 189 и 204; или
e) SEQ ID NO: 193 и 206.
33. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что CD137-связывающий домен содержит Fc-область человека или вариант указанной области, при этом область представляет собой область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, предпочтительно область IgG1 или IgG4.
34. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что CD137-связывающий домен демонстрирует по меньшей мере одну из следующих функциональных характеристик, когда присутствует независимо от CTLA-4-связывающего домена:
I. связывание с CD137 человека с величиной KD, которая составляет менее чем 2×10-9М, более предпочтительно менее чем 1,2×10-9М; а также
II. способность вызывать повышение активности в CD8+ Т-клетки in vitro, в некоторых случаях при этом указанное повышение активности представляет собой повышение пролиферации и/или продукции IL-2, и/или продукции IFN-γ Т-клеткой.
35. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что CD137-связывающий домен содержит аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 177, 183, 187, 191 и 195, и аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 179, 181, 185, 189 и 193.
36. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что CD137-связывающий домен содержит нуклеотидную последовательность вариабельной области легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 178, 184, 188, 192, и 196 и нуклеотидную последовательность вариабельной области тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 180, 182, 186, 190 и 194.
37. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что CD137-связывающий домен содержит последовательности CDR, выбранные из последовательностей, указанных в Таблицах I (1) и I (2).
38. Полипептид по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что В1 является специфическим для ОХ40, а В2 является специфическим для CTLA-4.
39. Полипептид по п. 38, способный специфически связываться с CTLA-4 и ОХ40, отличающийся тем, что:
81 представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, специфический для ОХ40; а
82 представляет собой полипептидный связывающий домен, специфический для CTLA-4, который включает или состоит из:
i) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3; или
ii) аминокислотной последовательности, в которой изменена по меньшей мере одна аминокислота по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3, при условии, что указанный связывающий домен связывается с CTLA-4 человека с более высокой аффинностью, чем человеческий CD86 дикого типа.
40. Полипептид по п. 39, в котором CTLA-4, специфически связанный полипептидом, представляет собой CTLA-4 примата или мыши, предпочтительно человека, и/или в котором ОХ40, специфически связанный полипептидом, представляет собой ОХ40 примата, предпочтительно человека.
41. Полипептид по п. 39 или 40, в котором В1 содержит по меньшей мере одну тяжелую цепь (Н) и/или по меньшей мере одну легкую цепь (L), а часть В2 присоединена к указанной по меньшей мере одной тяжелой цепи (Н) или по меньшей мере одной легкой цепи (L).
42. Полипептид по п. 41, в котором В1 содержит:
по меньшей мере одну тяжелую цепь (Н) и по меньшей мере одну легкую цепь (L), и часть В2 присоединена либо к тяжелой цепи, либо к легкой цепи; или
две идентичные тяжелые цепи (Н) и две идентичные легкие цепи (L) и часть В2 присоединена как к обеим тяжелым цепям, так и к обеим легким цепям.
43. Полипептид по любому из пп. 38-42, который содержит или состоит из полипептидной цепи, расположенной согласно любой из следующих формул, записанной в направлении N-C:
(A) L-(X)n-B2;
(B) B2-(X)n-L;
(C) B2-(X)n-H;
(D) H-(X)n-B2;
где X представляет собой линкер, а n равно 0 или 1.
44. Полипептид по п. 43, отличающийся тем, что X представляет собой пептид с аминокислотной последовательностью SGGGGSGGGGS(SEQ ID NO: 47), SGGGGSGGGGSAP (SEQ ID NO: 48), NFSQP (SEQ ID NO: 49), KRTVA (SEQ ID NO: 50), GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 144) или (SG)m, где m = от 1 до 7.
45. Полипептид по любому из пп. 38-44, который связывается с ОХ40 человека с величиной Kd, составлющей менее чем 50×10-10М, 25×10-10М, или 20×10-10М и/или который связывается с CTLA-4 человека с величиной Kd, составлеющей менее чем 60×10-9М, 25×10-9М или 10×10-9М.
46. Полипептид по любому из пп. 38-45, который индуцирует повышение активности эффекторной Т-клетки, предпочтительно CD4+ эффекторной Т-клетки, в некоторых случаях при этом указанное повышение составляет по меньшей мере 1,5 раза, 4,5 раза или в 7 раз по сравнению с увеличением активности эффекторной Т-клетки, индуцированной комбинацией В1 и В2, вводимых в Т-клетку в виде отдельных молекул.
47. Полипептид по п. 46, отличающийся тем, что указанное повышение активности Т-клеток представляет собой повышение пролиферации и/или продукции IL-2 Т-клеткой.
48. Полипептид по любому из пп. 38-47, отличающийся тем, что 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислот в указанной аминокислотной последовательности В2 (ii) заменены по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3; в некоторых случаях, без вставок или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3.
49. Полипептид по п. 48, отличающийся тем, что по меньшей мере одна из указанных аминокислотных замен в указанной аминокислотной последовательности указанного первого связывающего домена находится в положении 122 и в некоторых случаях указанная аминокислотная последовательность также замещена по меньшей мере в одном из положений 107, 121 и 125.
50. Полипептид по любому из пп. 38-49, отличающийся тем, что указанная аминокислотная последовательность В2 содержит или состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из SEQ ID NO 8, 6, 7 и 9-24.
51. Полипептид по любому из пп. 38-50, отличающийся тем, что В1 проявляет по меньшей мере одну из следующих функциональных характеристик, когда присутствует независимо от В2:
I. связывается с ОХ40 человека с величиной KD, которая составляет менее чем 10×10-10М, более предпочтительно менее чем 5×10-10М;
II. не связывается с ОХ40 мыши; а также
III. не связывается с другими представителями суперсемейства TNFR человека, например, CD137 или CD40 человека.
52. Полипептид по любому из пп. 38-51, отличающийся тем, что В1 содержит любые один, два, три, четыре, пять или все шесть признаков, независимо выбранных из следующих:
(a) последовательность CDR1 тяжелой цепи, которая имеет длину 8 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "G, F, Т, F, G/Y/S, G/Y/S, Y/S, Y/S/A";
(b) последовательность CDR2 тяжелой цепи, которая имеет длину 8 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: " I, G/Y/S/T, G/S/Y, S/Y, G/S/Y, G/S/Y, G/S/Y, Т";
(c) последовательность CDR3 тяжелой цепи, которая имеет длину от 9 до 17 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "A, R, G/Y/S/H, G/Y/F/V/D, G/Y/P/F, -/H/S, -/N/D/H, -/Y/G, -/Y, -/Y, -/W/A/V, -/А/Y, -/D/A/Y/G/H/N, Y/S/W/A/T, L/M/I/F, D, Y".
(d) последовательность CDR1 легкой цепи, которая состоит из последовательности: "Q, S, I, S, S, Y";
(e) последовательность CDR2 легкой цепи, которая состоит из последовательности: "A, A, S";
(f) последовательность СОЮ легкой цепи, которая имеет длину от 8 до 10 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "Q,Q, S/Y/G, -/Y/H/G, -/S/Y/G/D, S/Y/G/D, S/Y/G/T, P/L, Y/S/H/L/F, Т";
при этом последовательность CDR3 тяжелой цепи (с) предпочтительно представляет собой последовательность длиной 10 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, Y/H, D, Y, A/Y/G, S/W/A, M/L, D, Y" или последовательность CDR3 длиной 11 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, G/Y, V/F/Y, Р, Н, G/Y/H, Y, F/I, D, Y"; а также
последовательность CDR3 легкой цепи (f) предпочтительно состоит из последовательности "Q, Q, S, Y, S, Т, Р, Y, Т".
53. Полипептид по любому из пп. 38-52, отличающийся тем, что В1 содержит все три последовательности CDR тяжелой цепи последовательности VH, как показано в Таблице А (1), и/или все три последовательности CDR легкой цепи последовательности VL, как показано в Таблице А (2) или отличающийся тем, что В1 содержит последовательность VH тяжелой цепи и/или последовательность VL легкой цепи, как показано в Таблице В.
54. Полипептид по любому из пп. 38-53, отличающийся тем, что В1 содержит последовательность CDR3 тяжелой цепи длиной 11 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, G/Y, V/F/Y, Р, Н, G/Y/H, Y, F/l, D, Y"; и последовательность VL легкой цепи SEQ ID NO: 97 (1135, как показано в Таблице В), в некоторых случаях отличающийся тем, что последовательность VL легкой цепи SEQ ID NO: 97 присутствует как часть более длинной последовательности SEQ ID NO: 129 (1141, как показано в Таблице D).
55. Полипептид по любому из пп. 38-54, отличающийся тем, что В1 содержит Fc-область человека или вариант указанной области, при этом область представляет собой область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, предпочтительно область IgG1 или IgG4.
56. Полипептид по любому из пп. 38-55, который содержит или состоит из аминокислотной последовательности любой из SEQ ID NO 125-134, в некоторых случаях отличающийся тем, что указанный полипептид представляет собой компонентную часть антитела.
57. Полипептид по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что В1 является специфическим для ОХ40, а В2 является специфическим для CD137.
58. Полипептид по п. 57, отличающийся тем, что указанный полипептид представляет собой Биспецифическое антитело, содержащее антитело, которое специфически связывается с ОХ40 (антитело анти-ОХ40), и антитело, которое специфически связывается с CD137 (антитело анти-CD137), соединенные друг с другом непосредственно или опосредованно.
59. Полипептид по п. 58, в котором специфически связанный CD137 представляет собой CD137 примата или мыши, предпочтительно человека, и/или отличающееся тем, что специфически связанный ОХ40 представляет собой ОХ40 примата, предпочтительно человека.
60. Полипептид по любому из пп. 58-59, который связывается с ОХ40 человека с величиной Kd, составляющей менее чем 50×10-10М, 25×10-10М, или 20×10-10М и/или который связывается с CD137 человека с величиной Kd, составляющей менее чем 10×10-9М, 4×10-9М, или 1,2×10-9М.
61. Полипептид по любому из пп. 58-60, который индуцирует повышение активности эффекторной Т-клетки, в некоторых случаях при этом указанное повышение составляет по меньшей мере 1,5 раза, 2 раза, 3 раза, 5 раз по сравнению с увеличением активности эффекторной Т-клетки, индуцированной комбинацией соответствующих моноспецифических антител, вводимых в Т-клетку в виде отдельных молекул.
62. Полипептид по п. 61, отличающийся тем, что указанное повышение активности Т-клеток представляет собой повышение пролиферации и/или продукции IL-2 и/или продукции IFN-γ Т-клеткой, в некоторых случаях отличающийся тем, что Т-клетка представляет собой CD4+ или CD8+ Т-клетку.
63. Полипептид по любому из пп. 58-62, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 и антитело анти-CD137 соединены друг с другом опосредованно через линкер, который является пептидом аминокислотной последовательности GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 144), SGGGGSGGGGS(SEQ ID NO: 47), SGGGGSGGGGSAP (SEQ ID NO: 48), NFSQP (SEQ ID N0:49), KRTVA (SEQ ID NO: 50) или (SG)m, где m = от 1 до 7.
64. Полипептид по любому из пп. 58-63, который представляет собой биспецифическое антитело формата scFv-IgG.
65. Полипептид по любому из пп. 58-64, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 проявляет по меньшей мере одну из следующих функциональных характеристик, когда присутствует независимо от антитела анти-CD137:
I. связывается с ОХ40 человека с величиной KD, которая составляет менее чем 10×10-10М, более предпочтительно менее чем 5×10-10М;
II. не связывается с ОХ40 мыши; а также
III. не связывается с другими представителями суперсемейства TNFR человека, например, CD137 или CD40 человека.
66. Полипептид по любому из пп. 58-65, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 содержит любые один, два, три, четыре, пять или все шесть признаков, независимо выбранных из следующих:
(a) последовательность CDR1 тяжелой цепи, которая имеет длину 8 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "G, F, Т, F, G/Y/S, G/Y/S, Y/S, Y/S/A";
(b) последовательность CDR2 тяжелой цепи, которая имеет длину 8 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "I, G/Y/S/T, G/S/Y, S/Y, G/S/Y, G/S/Y, G/S/Y, Т";
(c) последовательность CDR3 тяжелой цепи, которая имеет длину от 9 до 17 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "A, R, G/Y/S/H, G/Y/F/V/D, G/Y/P/F, -/H/S, -/N/D/H, -/Y/G, -/Y, -/Y, -/W/A/V, -/А/Y, -/D/A/Y/G/H/N, Y/S/W/A/T, L/M/I/F, D, Y".
(d) последовательность CDR1 легкой цепи, которая состоит из последовательности: "Q, S, I, S, S, Y";
(e) последовательность CDR2 легкой цепи, которая состоит из последовательности: "A, A, S";
(f) последовательность CDR3 легкой цепи, которая имеет длину от 8 до 10 аминокислот и содержит консенсусную последовательность: "Q,Q, S/Y/G, -A7H/G, -/S/Y/G/D, S/Y/G/D, S/Y/G/T, P/L, Y/S/H/L/F, T";
при этом последовательность CDR3 тяжелой цепи (с) предпочтительно представляет собой последовательность длиной 10 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, Y/H, D, Y, A/Y/G, S/W/A, M/L, D, Y" или последовательность CDR3 длиной 11 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, G/Y, V/F/Y, Р, Н, G/Y/H, Y, F/I, D, Y"; а также
последовательность CDR3 легкой цепи (f) предпочтительно состоит из последовательности "Q, Q, S, Y, S, Т, Р, Y, Т".
67. Полипептид по любому из пп. 58-66, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 содержит все три последовательности CDR тяжелой цепи последовательности VH, как показано в Таблице А (1), и/или все три последовательности CDR легкой цепи последовательности VL, как показано в Таблице А (2) или отличающееся тем, что антитело анти-ОХ40 содержит последовательность VH тяжелой цепи и/или последовательность VL легкой цепи, как показано в Таблице В.
68. Полипептид по любому из пп. 58-67, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 содержит последовательность CDR3 тяжелой цепи длиной 11 аминокислот, которая содержит консенсусную последовательность "A, R, G/Y, V/F/Y, Р, Н, G/Y/H, Y, F/I, D, Y"; и последовательность VL легкой цепи SEQ ID NO: 97 (1135, как показано в Таблице В), в некоторых случаях отличающееся тем, что последовательность VL легкой цепи SEQ ID NO: 97 присутствует как часть более длинной последовательности SEQ ID NO: 129 (1141, как показано в Таблице D).
69. Полипептид по любому из пп. 58-68, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40, когда оно присутствует независимо от антитела анти-CD137, конкурирует за связывание с ОХ40 с антителом анти-ОХ40, как определено в любом из пунктов 65 -68.
70. Полипептид по любому из пп. 58-69, отличающийся тем, что антитело анти-CD137 проявляет по меньшей мере одну из следующих функциональных характеристик, когда присутствует независимо от антитела анти-ОХ40:
I. связывание с CD137 человека с величиной KD, которая составляет менее чем 2×10-9М, более предпочтительно менее чем 1,2×10-9М; а также
II. способность вызывать повышение активности в CD8+ Т-клетки in vitro, в некоторых случаях при этом указанное повышение активности представляет собой повышение пролиферации и/или продукции IL-2, и/или продукции IFN-γ Т-клеткой.
71. Полипептид по любому из пп. 58-70, отличающийся тем, что антитело анти-CD137 содержит все три последовательности CDR тяжелой цепи последовательности VH, как показано в Таблице 1(1), и/или все три последовательности CDR легкой цепи последовательности VL, как показано в Таблице 1(2) или отличающееся тем, что антитело анти-CD137 содержит последовательность VH тяжелой цепи и/или последовательность VL легкой цепи, как показано в Таблице Н.
72. Полипептид по любому из пп. 58-71, отличающийся тем, что антитело анти-CD137 содержит все три последовательности CDR тяжелой цепи последовательности VH, как показано в первом ряду Таблицы I (1), и/или все три последовательности CDR легкой цепи последовательности VL, как показано в первом ряду Таблицы I (2), или отличающееся тем, что антитело анти-CD137 содержит последовательность VH тяжелой цепи и/или последовательность VL легкой цепи, как показано в Таблице Н, SEQ ID NO 177-180.
73. Полипептид по любому из пп. 58-72, отличающийся тем, что антитело анти-CD137, когда оно присутствует независимо от антитела анти-ОХ40, конкурирует за связывание с CD137 с антителом анти-CD137, как определено в п. 67.
74. Полипептид по любому из пп. 58-73, отличающийся тем, что антитело анти-ОХ40 и/или антитело анти-CD137 содержит Fc-область человека или вариант указанной области, при этом область представляет собой область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, предпочтительно область IgG1 или IgG4.
75. Полипептид по любому из пп. 58-74, который содержит аминокислотную последовательность любой из SEQ IDNO 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161 или 163.
76. Полипептид по любому из пп. 58-75, который содержит аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO 165, 167, 169, 171 или 173.
77. Полипептид по любому из пп. 58-76, который содержит аминокислотные последовательности:
- SEQ ID NO: 165 и любую из SEQ ID NO: 149, 153, 159 и 163; или
- SEQ IDNO: 167 и SEQ ID NO: 151; или
- SEQ ID NO: 169 и SEQ ID NO: 155; или
- SEQ ID NO: 171 и SEQ ID NO: 157; или
- SEQ ID NO: 173 и SEQ ID NO: 161.
78. Полипептид по любому из предшествующих пунктов для применения в способе лечения или профилактики заболевания или патологического состояния у индивидуума.
79. Способ лечения или профилактики заболевания или патологического состояния у индивидуума, при этом способ включает введение индивидууму биспецифического полипептида по любому из предшествующих пунктов.
80. Полипептид по п. 78 или способ по 79, отличающиеся тем, что заболевание или патологическое состояние представляет собой рак и в некоторых случаях отличающиеся тем, что индивидуум представляет собой человека.
81. Полипептид или способ по п. 80, отличающиеся тем, что способ включает системное или местное введение биспецифического антитела, например, в участок опухоли или в лимфоузлы, дренирующие опухоль.
82. Полипептид или способ по п. 80 или 81, отличающиеся тем, что рак может представлять собой рак предстательной железы, рак молочной железы, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак яичников, рак легкого, рак шейки матки, рабдомиосаркому, нейробластому, множественную миелому, лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, меланому, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак области головы и шеи, рак печени, рак кожи, лимфому или глиобластому.
83. Полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере одну полипептидную цепь биспецифического полипептида по любому из пп. 1-78.
84. Композиция, содержащая биспецифический полипептид по любому из пп. 1-78 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
85. Полипептид по любому из пп. 1-78, конъюгированный с дополнительным терапевтическим фрагментом.
86. Антитело, специфическое для CD137, определение которого приведено в любом из пп. 70-73.
Комментарии