Новое psma-связывающее антитело и его применения - RU2018128414A
Код документа: RU2018128414A
Формула
1. Молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент, способные к связыванию с простатическим специфическим мембранным антигеном (PSMA) человека, содержащее:
(i) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий область CDRH1 представленную SEQ ID NO: 03 (GFTFSDFYMY), область CDRH2 представленную SEQ ID NO: 04 (TISDGGGYTSYPDSVKG), и область CDRH3 представленную SEQ ID NO: 05 (GLWLRDALDY), или содержащий последовательности CDRH1, CDRH2 или CDRH3, характеризующиеся по меньшей мере 75% идентичностью последовательности или по меньшей мере 80% идентичностью последовательности SEQ ID NO: 03, SEQ ID NO: 04 или SEQ ID NO: 05; и
и (ii) вариабельный домен легкой цепи, содержащий область CDRL1 представленную SEQ ID NO: 06 (SASSSISSNYLH), область CDRL2 представленную SEQ ID NO: 07 (RTSNLAS), и область CDRL3 представленную SEQ ID NO: 8 (QQGSYIPFT), или содержащий последовательности CDRL1, CDRL2 или CDRL3, характеризующиеся по меньшей мере 75% идентичностью последовательности или по меньшей мере 80% идентичностью последовательности SEQ ID NO: 06, SEQ ID NO: 07 или SEQ ID NO: 08.
2. Молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, где вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 01 или 09, или где вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 02 или 10.
3. Молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент, способные к связыванию с PSMA человека, которые способны конкурировать за связывание с PSMA человека с молекулой антитела или ее антигенсвязывающим фрагментом по п. 1.
4. Молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент по любому из предыдущих пунктов, где молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент не конкурируют за связывание с PSMA человека с J591, или где молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент характеризуются сниженной степенью индукции антигенного сдвига при связывании с PSMA по сравнению с J591, или где молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент дополнительно связываются с клетками плоскоклеточной карциномы (SCC).
5. Молекула биспецифического антитела, содержащая:
(i) вариабельную область, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи по любому из предыдущих пунктов, где указанная вариабельная область содержит первый сайт связывания, способный к связыванию с простатическим специфическим мембранным антигеном (PSMA) человека; и
(ii) вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи молекулы антитела, содержащие второй сайт связывания.
6. Молекула антитела по п. 5, где первый или второй сайты связывания связываются с молекулой специфического рецептора T-клетки или естественной клетки-киллера (NK), где молекула специфического рецептора T-клетки или NK-клетки предпочтительно представляет собой CD3.
7. Молекула антитела по п. 6, где вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи молекулы антитела, содержащие второй сайт связывания, представляют собой вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи OKT3 или UCHT1.
8. Молекула антитела по любому из пп. 5-7, где
(i) первый сайт связывания содержится в пределах Fab-фрагмента, а второй сайт связывания содержится в пределах scFv-фрагмента; или
(ii) первый сайт связывания содержится в пределах одноцепочечного Fv-фрагмента, а второй сайт связывания содержится в пределах Fab-фрагмента,
где Fab-фрагмент и одноцепочечный Fv-фрагмент предпочтительно соединены посредством CH2-домена и/или CH3-домена.
9. Молекула антитела по п. 8, где по меньшей мере один аминокислотный остаток CH2-домена, который способен опосредовать связывание с Fc-рецепторами, отсутствует или мутирован.
10. Молекула антитела по п. 8 или п. 9, содержащая Fab-фрагмент, CH2-домен и scFv-фрагмент, где Fab-фрагмент содержит шарнирную область, где Fab-фрагмент предпочтительно представляет собой Fab-фрагмент гуманизированного антитела 10B3, и/или где scFv-фрагмент предпочтительно содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи из антитела OKT3, где тяжелая цепь молекулы антитела предпочтительно содержит последовательность SEQ ID NO: 12, и/или где легкая цепь молекулы антитела предпочтительно содержит последовательность SEQ ID NO: 13.
11. Молекула антитела по п. 8 или 9, содержащая Fab-фрагмент, CH2-домен, CH3-домен и scFv-фрагмент, где Fab-фрагмент содержит шарнирную область, где Fab-фрагмент предпочтительно представляет собой Fab-фрагмент гуманизированного антитела 10B3, и/или где scFv-фрагмент предпочтительно содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи из гуманизированного антитела UCHT1, где тяжелая цепь молекулы антитела предпочтительно содержит последовательность SEQ ID NO: 11, и/или где легкая цепь молекулы антитела предпочтительно содержит последовательность SEQ ID NO: 13.
12. Молекула антитела по п. 11, где молекула антитела представляет собой молекулу тетрамерного антитела или молекулу гомодимерного и тетравалентного антитела.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая молекулу антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент по любому из предыдущих пунктов.
14. Молекула антитела или ее антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-13 для применения в диагностике или лечении заболевания, где заболевание предпочтительно представляет собой рак, где рак предпочтительно представляет собой рак предстательной железы, рак толстой и прямой кишки, рак желудка, карциному легкого, остеосаркому, рак молочной железы, рак поджелудочной железы или плоскоклеточную карциному.
15. In vitro способ диагностирования заболевания, включающий приведение полученного от субъекта образца в контакт с молекулой антитела или ее антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп. 1-13, где заболевание предпочтительно представляет собой рак, где рак предпочтительно представляет собой рак предстательной железы, рак толстой и прямой кишки, рак желудка, карциному легкого, остеосаркому, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, глиобластому или плоскоклеточную карциному.
16. Молекула тетравалентного и гомодимерного биспецифического антитела, содержащая в каждом мономере:
(i) N-концевой Fab-фрагмент, содержащий вариабельную область, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, где указанная вариабельная область содержит первый сайт связывания, способный к связыванию с антигеном;
(ii) C-концевой scFv-фрагмент, содержащий вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи гуманизированного UCHT1, и
где (i) и (ii) соединены с помощью CH2- и CH3-домена.
17. Молекула тетравалентного биспецифического антитела по п. 16, где по меньшей мере один аминокислотный остаток CH2-домена, который способен опосредовать связывание с Fc-рецепторами, отсутствует или мутирован.
18. Молекула тетравалентного биспецифического антитела по п. 16 или 17, где Fab-фрагмент не является Fab-фрагментом негуманизированного, химерного или гуманизированного антитела 10B3 или J591, где предпочтительно первый сайт связывания не способен к связыванию с PSMA.
19. Молекула тетравалентного биспецифического антитела по любому из пп. 16-18, которая не является молекулой антитела по любому из пп. 1-15, и которая не является антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп. 1-15.
20. Молекула тетравалентного и гомодимерного биспецифического антитела по любому из пп. 16-19, где вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи гуманизированного UCHT1 содержат последовательность UCHT1, как показано в SEQ ID NO: 11, предпочтительно начинающуюся с аминокислотной последовательности DIQMT… и заканчивающуюся…VTVSS.
21. Молекула тетравалентного биспецифического антитела по любому из пп. 16-20, где Fab-фрагмент связывается с опухоль-ассоциированным антигеном.
