Связывающие белки с двойной специфичностью, направленные против tnfα - RU2015143833A

1. Связывающий белок, содержащий первую и вторую полипептидные цепи, каждая из которых независимо содержит VD1-(X1)n-VD2-C-X2, где

VD1 представляет собой первый вариабельный домен;

VD2 представляет собой второй вариабельный домен;

C представляет собой константный домен;

X1 представляет собой линкер;

X2 представляет собой Fc-область, которая либо присутствует, либо отсутствует;

n равно 0 или 1,

где домены VD1 на первой и второй полипептидных цепях образуют первый функциональный связывающий мишень участок и домены VD2 на первой и второй полипептидных цепях образуют второй функциональный связывающий мишень участок, и где связывающий белок способен связывать

(a) TNFα и IL-13, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 38 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 39,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 40 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 41,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 42 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 43, или

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 48 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для IL-13, содержат

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 32 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 33;

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 34 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 35; или

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 36 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 37;

(b) TNFα и PGE2, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 38 и три CDR из SEQ ID NO: 39,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 40 и три CDR из SEQ ID NO: 41,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 42 и три CDR из SEQ ID NO: 43, или

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 48 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для PGE2, содержат

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 50 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 51;

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 52 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 53; или

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 54 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 55;

или

(c) TNFα и NGF, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 38 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 39,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 40 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 41,

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 42 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 43, или

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 48 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для NGF, содержат

CDR 1-3 из SEQ ID NO: 56 и CDR 1-3 из SEQ ID NO: 57.

2. Связывающий белок по п.1, где первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-X2, где

VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;

VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи;

C представляет собой константный домен тяжелой цепи;

X1 представляет собой линкер;

X2 представляет собой Fc-область, которая либо присутствует, либо отсутствует;

n равно 0 или 1, и

где вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C, где

VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;

VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи;

C представляет собой константный домен легкой цепи;

X1 представляет собой линкер;

n равно 0 или 1,

где домены VD1 на первой и второй полипептидных цепях образуют первый функциональный связывающий мишень участок и домены VD2 на первой и второй полипептидных цепях образуют второй функциональный связывающий мишень участок.

3. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок способен связывать:

(a) TNFα и IL-13, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

SEQ ID NO: 38 и SEQ ID NO: 39,

SEQ ID NO: 40 и SEQ ID NO: 41,

SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 43, или

SEQ ID NO: 48 и SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для IL-13, содержат

SEQ ID NO: 32 и SEQ ID NO: 33;

SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 35; или

SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 37;

(b) TNFα и PGE2, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

SEQ ID NO: 38 и SEQ ID NO: 39,

SEQ ID NO: 40 и SEQ ID NO: 41,

SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 43, или

SEQ ID NO: 48 и SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для PGE2, содержат

SEQ ID NO: 50 и SEQ ID NO: 51;

SEQ ID NO: 52 и SEQ ID NO: 53; или

SEQ ID NO: 54 и SEQ ID NO: 55;

или

(c) TNFα и NGF, где

(i) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для TNFα, содержат:

SEQ ID NO: 38 и SEQ ID NO: 39,

SEQ ID NO: 40 и SEQ ID NO: 41,

SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 43, или

SEQ ID NO: 48 и SEQ ID NO: 49;

и/или

(ii) вариабельные домены, которые образуют функциональный связывающий мишень участок для NGF, содержат

SEQ ID NO: 56 и SEQ ID NO: 57.

4. Связывающий белок по п.1, где

(a) связывающий белок способен связывать TNFα и IL-13, где связывающий белок способен связывать TNFα с K_D не более чем приблизительно 5,8×10^-11 M, при измерении с использованием поверхностного плазмонного резонанса, и/или связывающий белок способен связывать IL-13 с K_D не более чем приблизительно 1,2×10^-9 M, при измерении с использованием поверхностного плазмонного резонанса;

(b) связывающий белок способен связывать TNFα и PGE2, где связывающий белок способен нейтрализовывать TNFα с IC50 не более чем приблизительно 3,076 нМ, при измерении с использованием анализа нейтрализации TNFα, и/или связывающий белок способен нейтрализовывать PGE2 с IC50 не более чем приблизительно 124,8 нМ, при измерении с использованием анализа нейтрализации PGE2; или

(c) связывающий белок способен связывать TNFα и NGF, где связывающий белок способен нейтрализовывать TNFα с IC50 не более чем приблизительно 0,673 нМ, при измерении с использованием анализа нейтрализации TNFα, и/или связывающий белок способен ингибировать NGF с IC50 не более чем приблизительно 7,455 нМ, при измерении с использованием биоанализа пролиферации клеток TF-1.

5. Связывающий белок по п.1, содержащий две первых полипептидных цепи и две вторых полипептидных цепи и четыре функциональных связывающих мишень участка.

6. Связывающий белок по п.1, где X1 представляет собой любую из SEQ ID NO: 1-31.

7. Связывающий белок по п.1, где X1 не является CH1 или CL.

8. Связывающий белок по п.1, где Fc-область представляет собой Fc-область с вариантной последовательностью, и/или где Fc-область представляет собой Fc-область из IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE или IgD.

9. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок содержит

(a) константную область тяжелой цепи, содержащую:

(i) последовательность тяжелой цепи IgG1 человека дикого типа, или

(ii) последовательность тяжелой цепи IgG1 человека, модифицированную посредством одного или нескольких аминокислотных изменений, необязательно где изменения содержат замены в положениях аминокислот 234 и 235 последовательности константной области, необязательно где изменения содержат замену остатков лейцина в положениях 234 и 235 на остатки аланина;

и/или

(b) константную область легкой цепи, содержащую:

(i) последовательность константной области легкой цепи каппа человека дикого типа, или

(ii) последовательность константной области легкой цепи лямбда человека дикого типа.

10. Связывающий белок по любому из пп.1-9, где связывающий белок представляет собой кристаллизованный связывающий белок.

11. Связывающий белок по любому из пп.1-9, отличающийся тем, что белок способен связывать

(a) TNFα и IL-13, при этом он содержит любую пару последовательностей VH и VL DVD-Ig из таблицы 2;

(b) TNFα и PGE2, при этом он содержит любую пару последовательностей VH и VL DVD-Ig из таблицы 3;

или

(c) TNFα и NGF, при этом он содержит любую пару последовательностей VH и VL DVD-Ig из таблицы 4.

12. Конъюгат связывающего белка, содержащий связывающий белок по любому из пп.1-9, причем конъюгат связывающего белка дополнительно содержит молекулу иммуноадгезии, визуализирующее средство, лекарственное средство или цитотоксическое средство.

13. Конъюгат связывающего белка по п.12, где визуализирующее средство представляет собой радиоактивную метку, фермент, флуоресцентную метку, люминесцентную метку, биолюминесцентную метку, магнитную метку или биотин.

14. Конъюгат связывающего белка по п.13, где радиоактивная метка представляет собой³H_,¹⁴C_,³⁵S,⁹⁰Y,⁹⁹Tc,¹¹¹In,¹²⁵I,¹³¹I,¹⁷⁷Lu,¹⁶⁶Ho или¹⁵³Sm.

15. Конъюгат связывающего белка по п.12, где терапевтическое или цитотоксическое средство представляет собой антиметаболит, алкилирующее средство, антибиотик, фактор роста, цитокин, антиангиогенное средство, антимитотическое средство, антрациклин, токсин или апоптотическое средство.

16. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая аминокислотную последовательность связывающего белка по любому из пп.1-9.

17. Вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по п.16.

19. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.17.

20. Клетка-хозяин по п.19, где клетка-хозяин представляет собой прокариотическую клетку, Escherichia coli, эукариотическую клетку, клетку простейшего, клетку животного, клетку растения, клетку гриба, клетку дрожжей, клетку Sf9, клетку млекопитающих, клетку птиц, клетку насекомых, клетку CHO или клетку COS.

21. Способ получения связывающего белка, включающий культивирование клетки-хозяина по п.19 в культуральной среде в условиях, достаточных для продуцирования связывающего белка.

22. Фармацевтическая композиция, содержащая связывающий белок по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.

23. Фармацевтическая композиция по п.22, дополнительно содержащая по меньшей мере одно дополнительное лекарственное средство.

24. Фармацевтическая композиция по п.23, где дополнительное лекарственное средство представляет собой визуализирующее средство, цитотоксическое средство, ингибитор ангиогенеза, ингибитор киназы, блокатор костимулирующей молекулы, блокатор молекулы адгезии, антитело против цитокина или его функциональный фрагмент, метотрексат, циклоспорин, рапамицин, FK506, поддающуюся обнаружению метку или репортер, антагонист TNF, противоревматическое средство, мышечный релаксант, снотворное средство, нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID), обезболивающее средство, анестетик, седативное средство, местный анестетик, нейромышечный блокатор, противомикробное средство, противопсориазное средство, кортикостероид, анаболический стероид, эритропоэтин, средство для иммунизации, иммуноглобулин, иммунодепрессивное средство, гормон роста, гормон-заместительное лекарственное средство, радиофармацевтическое средство, антидепрессант, антипсихотическое средство, стимулирующее средство, лекарственное средство против астмы, бета-агонист, ингалируемый стероид, адреналин или аналог, цитокин или антагонист цитокина.

25. Способ лечения индивидуума от заболевания или нарушения путем введения индивидууму связывающего белка по любому из пп.1-9.

26. Способ по п.25, где нарушение представляет собой артрит, остеоартрит, ювенильный хронический артрит, септический артрит, артрит Лайма, псориатический артрит, реактивный артрит, спондилоартропатию, системную красную волчанку, болезнь Крона, язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника, инсулинозависимый сахарный диабет, тиреоидит, астму, аллергические заболевания, псориаз, склеротический дерматит, реакцию "трансплантат против хозяина", отторжение трансплантата органа, острое или хроническое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органа, саркоидоз, атеросклероз, диссеминированное внутрисосудистое свертывание, болезнь Кавасаки, болезнь Грэйвса, нефротический синдром, синдром хронической усталости, гранулематоз Вегенера, болезнь Шенлейн-Геноха, микроскопический васкулит почек, хронический активный гепатит, увеит, септический шок, синдром токсического шока, септический синдром, кахексию, инфекционные заболевания, паразитарные заболевания, синдром приобретенного иммунодефицита, острый поперечный миелит, хорею Хантингтона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, инсульт, первичный билиарный цирроз, гемолитическую анемию, злокачественные опухоли, сердечную недостаточность, болезнь Аддисона, спорадическую полигландулярную недостаточность типа I и полигландулярную недостаточность типа II, синдром Шмидта, (острый) респираторный дистресс-синдром взрослых, алопецию, гнездную алопецию, артропатию, болезнь Рейтера, псориатическую артропатию, артропатию при язвенном колите, энтеропатический синовит, ассоциированную с хламидиями, иерсиниями и сальмонеллами артропатию, атероматозное заболевание/артериосклероз, атопическую аллергию, аутоиммунное буллезное заболевание, обычный пемфигус, листовидный пемфигус, пемфигоид, заболевание линейного IgA, аутоиммунную гемолитическую анемию, Кумбс-положительную гемолитическую анемию, приобретенную пернициозную анемию, ювенильную пернициозную анемию, миалгический энцефалит/синдром хронической усталости, хронический кожно-слизистый кандидоз, гигантоклеточный артрит, первичный склерозирующий гепатит, криптогенный аутоиммунный гепатит, обусловленные приобретенным иммунодефицитом заболевания, гепатит B, гепатит C, вариабельный неклассифицируемый иммунодефицит (вариабельную неклассифицируемую гипогаммаглобулинемию), кардиомиопатию с дилятацией, женское бесплодие, угасание функции яичников, преждевременное угасание функции яичников, фиброзную болезнь легких, криптогенный фиброзный альвеолит, поствоспалительное интерстициальное заболевание легких, интерстициальный пневмонит, обусловленное болезнью соединительной ткани интерстициальное заболевание легких, ассоциированное со смешанной болезнью соединительной ткани заболевание легких, ассоциированное с системной склеродермией заболевание легких, ассоциированное с ревматоидным артритом интерстициальное заболевание легких, ассоциированное с системной красной волчанкой заболевание легких, ассоциированное с дерматомиозитом/полимиозитом заболевание легких, ассоциированное с болезнью Шегрена заболевание легких, ассоциированное с анкилозирующим спондилитом заболевание легких, васкулитное диффузное заболевание легких, ассоциированное с гемосидерозом заболевание легких, индуцированное лекарственным средством интерстициальное заболевание легких, обусловленный радиацией фиброз, облитерирующий бронхиолит, хроническую эозинофильную пневмонию, заболевание легких с инфильтрацией лимфоцитов, постинфекционное интерстициальное заболевание легких, подагрический артрит, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный гепатит 1 типа (классический аутоиммунный или люпоидный гепатит), аутоиммунный гепатит 2 типа (гепатит, обусловленный антителом против LKM), опосредуемую аутоиммунным заболеванием гипогликемию, устойчивость к инсулину типа B с акантокератодермией, гипопаратиреоз, острое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органа, хроническое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органа, остеоартроз, первичный склерозирующий холангит, псориаз 1 типа, псориаз 2 типа, идиопатическую лейкопению, аутоиммунную нейтропению, NOS-болезнь почек, гломерулонефрит, микроскопический васкулит почек, болезнь Лайма, дискоидную красную волчанку, идиопатическое или NOS-мужское бесплодие, аутоиммунитет к семенной жидкости, рассеянный склероз (все подтипы), симпатическую офтальмию, легочную гипертензию, вторичную для болезни соединительной ткани, синдром Гудпасчера, легочное проявление узелкового полиартериита, острую ревматическую атаку, ревматоидный спондилит, болезнь Стилла, системную склеродермию, болезнь/артериит Такаясу, аутоиммунную тромбоцитопению, идиопатическую тромбоцитопению, аутоиммунное заболевание щитовидной железы, гипертиреоидизм, зобный аутоиммунный гипотиреоз (болезнь Хашимото), атрофический аутоиммунный гипотиреоз, первичную микседему, факогенный увеит, первичный васкулит, витилиго, острое заболевание печени, хронические заболевания печени, алкогольный цирроз, индуцированное алкоголем повреждение печени, холестаз, идиосинкразическое заболевание печени, индуцированный лекарственным средством гепатит, неалкогольный стеатогепатит, аллергию и астму, стрептококковую инфекцию группы B (GBS), психические расстройства (например, депрессию и шизофрению), опосредуемые типом Th2 и типом Th1 заболевания, острую и хроническую боль, различные формы боли, злокачественные опухоли, рак легкого, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря, рак толстого кишечника, рак поджелудочной железы, рак яичника, рак предстательной железы, рак прямой кишки, гемопоэтические злокачественные опухоли, лейкоз, лимфому, абеталипопротеинемию, акроцианоз, острые и хронические паразитарные и инфекционные процессы, острый лейкоз, острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), острую или хроническую бактериальную инфекцию, острый панкреатит, острую почечную недостаточность, аденокарциномы, эктопическую систолу предсердий, СПИД-дементный комплекс, индуцированный алкоголем гепатит, аллергический конъюнктивит, аллергический контактный дерматит, аллергический ринит, отторжение аллотрансплантата, дефицит альфа-1-антитрипсина, боковой амиотрофический склероз, анемию, стенокардию, дегенерацию клеток передних рогов спинного мозга, терапию против cd3, антифосфолипидный синдром, реакции гиперчувствительности против рецепторов, аортальные и периферические аневризмы, расслоение аорты, артериальную гипертензию, артериосклероз, артериовенозный свищ, атаксию, фибрилляцию предсердий (постоянную или пароксизмальную), трепетание предсердий, атриовентрикулярную блокаду, B-клеточную лимфому, отторжение трансплантата кости, отторжение трансплантата костного мозга (BMT), блокаду пучка Гиса, лимфому Беркитта, ожоги, аритмии сердца, синдром оглушения сердца, опухоли сердца, кардиомиопатию, воспалительные ответы на искусственное кровообращение, отторжение трансплантата хряща, дегенерацию коры головного мозга, нарушения мозжечка, хаотическую или многоочаговую тахикардию предсердий, ассоциированные с химиотерапией нарушения, хронический миелоцитарный лейкоз (CML), хронический алкоголизм, хронические воспалительные патологии, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), хроническую интоксикацию салицилатами, карциному ободочной и прямой кишки, застойную сердечную недостаточность, конъюнктивит, контактный дерматит, легочное сердце, болезнь коронарных артерий, болезнь Крейтцфельда-Якоба, культурально-негативный сепсис, кистозный фиброз, ассоциированные с цитокиновой терапией нарушения, деменцию боксеров, демиелинизирующие заболевания, геморрагическую лихорадку денге, дерматит, дерматологические состояния, диабет, сахарный диабет, диабетическое атеросклеротическое заболевание, диффузное заболевание с тельцами Леви, застойную кардиомиопатию с дилятацией, нарушения базальных ганглиев, синдром Дауна в среднем возрасте, двигательные нарушения, индуцированные лекарственным средством, которое блокирует дофаминовые рецепторы ЦНС, чувствительность к лекарственным средствам, экзему, энцефаломиелит, эндокардит, эндокринопатию, эпиглоттит, инфекцию вирусом Эпштейна-Барр, эритромелалгию, экстрапирамидальные и мозжечковые нарушения, семейный гематофагоцитарный лимфогистиоцитоз, отторжение имплантата эмбрионального тимуса, наследственную атаксию Фридрейха, функциональные нарушения периферических артерий, грибковый сепсис, газовую гангрену, язву желудка, гломерулонефрит, отторжение трансплантата любого органа или ткани, грамотрицательный сепсис, грамположительный сепсис, гранулемы вследствие внутриклеточных организмов, волосатоклеточный лейкоз, болезнь Галлервордена-Шпатца, тиреоидит Хашимото, сенную лихорадку, отторжение трансплантата сердца, гемахроматоз, гемодиализ, гемолитический уремический синдром/тромболитическую тромбоцитопеническую пурпуру, кровопотерю, гепатит (A), аритмии пучка Гиса, ВИЧ-инфекцию/ВИЧ-невропатию, болезнь Ходжкина, гиперкинетические двигательные нарушения, реакции гиперчувствительности, связанный с гиперчувствительностью пневмонит, гипертензию, гипокинетические двигательные нарушения, обследование гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, идиопатическую болезнь Аддисона, идиопатический фиброз легких, опосредуемую антителами цитотоксичность, астению, младенческую спинальную мышечную атрофию, воспаление аорты, вирус гриппа a, облучение ионизирующей радиацией, иридоциклит/увеит/оптический неврит, повреждение при ишемии-реперфузии, ишемический инсульт, ювенильный ревматоидный артрит, ювенильную спинальную мышечную атрофию, саркому Капоши, отторжение трансплантата почки, легионеллез, лейшманиоз, лепру, повреждения кортикоспинальной системы, жировой отек, отторжение трансплантата печени, лимфатический отек, малярию, злокачественную лимфому, злокачественный гистиоцитоз, злокачественную меланому, менингит, менингококкемию, метаболические/идиопатические заболевания, мигрень, митохондриальное полисистемное нарушение, смешанную болезнь соединительной ткани, моноклональную гаммопатию, множественную миелому, полисистемную дегенерацию (Менцеля, Дежерина-Тома, Шая-Дрейджера и Мачадо-Джозефа), внутриклеточные mycobacterium avium, mycobacterium tuberculosis, миелодиспластический синдром, инфаркт миокарда, ишемические нарушения миокарда, карциному носоглотки, хроническое заболевание легких новорожденных, нефрит, нефроз, нейродегенеративные заболевания, нейрогенные мышечные атрофии, нейтропеническую лихорадку, неходжкинские лимфомы, окклюзию брюшного отдела аорты и ее ветвей, окклюзионные нарушения артерий, терапию okt3, орхит/эпидидимит, орхит/возвратные процедуры после вазэктомии, органомегалию, остеопороз, отторжение трансплантата поджелудочной железы, карциному поджелудочной железы, паранеопластический синдром/гиперкальцемию при злокачественной опухоли, отторжение трансплантата паращитовидной железы, воспалительное заболевание органов таза, круглогодичный ринит, заболевание перикарда, периферическое артериосклеротическое заболевание, периферические сосудистые нарушения, перитонит, пернициозную анемию, пневмонию Pneumocystis carinii, пневмонию, синдром POEMS (полиневропатия, органомегалия, эндокринопатия, моноклональная гаммопатия и синдром кожных изменений), постперфузионный синдром, синдром после искусственного кровообращения, посткардиотомный синдром после инфаркта миокарда, преэклампсию, прогрессирующие супрануклеарный паралич, первичную гипертензию легких, лучевую терапию, феномен и болезнь Рейно, болезнь Рейно, болезнь Рефсума, регулярную тахикардию с узким QRS, вазоренальную гипертензию, реперфузионное повреждение, рестриктивную кардиомиопатию, саркомы, склеродермию, сенильную хорею, сенильную деменцию с тельцами Леви, серонегативные артропатии, шок, серповидноклеточную анемию, отторжение аллотрансплантата кожи, синдром кожных изменений, отторжение трансплантата тонкого кишечника, солидные опухоли, специфические аритмии, спинальную атаксию, спиномозжечковые дегенерации, стрептококковый миозит, структурные повреждения мозжечка, подострый склерозирующий панэнцефалит, обмороки, сифилис сердечно-сосудистой системы, системную анафилаксию, синдром системного воспалительного ответа, ювенильный ревматоидный артрит с системным началом, T-клеточный или FAB ALL, телеангиэктазию, облитерирующий тромбоангит, тромбоцитопению, токсичность, трансплантацию, травму/кровопотерю, реакции гиперчувствительности типа III, гиперчувствительность типа IV, нестабильную стенокардию, уремию, уросепсис, крапивницу, заболевания клапанов сердца, варикоз вен, васкулит, заболевания вен, венозный тромбоз, фибрилляцию желудочков, вирусные и грибковые инфекции, энцефалит с высоким риском смертельного исхода/асептический менингит, гемофагоцитарный синдром с высоким риском смертельного исхода, синдром Вернике-Корсакова, болезнь Вилсона, отторжение ксенотрансплантата любого органа или ткани, острый коронарный синдром, острый идиопатический полиневрит, острую воспалительную демиелинизирующую полирадикулоневропатию, острую ишемию, болезнь Стилла взрослых, анафилаксиию, синдром антифосфолипидных антител, апластическую анемию, атопическую экзему, атопический дерматит, аутоиммунный дерматит, аутоиммунное нарушение, ассоциированное со стрептококковой инфекцией, аутоиммунную энтеропатию, аутоиммунную потерю слуха, аутоиммунный лимфопролиферативный синдром (ALPS), аутоиммунный миокардит, аутоиммунное преждевременное угасание функции яичников, блефарит, бронхоэктазы, буллезный пемфигоид, сердечно-сосудистое заболевание, катастрофический антифосфолипидный синдром, глютеиновую болезнь, шейный спондилез, хроническую ишемию, рубцовый пемфигоид, клинически изолированный синдром (cis) с риском рассеянного склероза, психиатрическое нарушение с началом в детском возрасте, дакриоцистит, дерматомиозит, диабетическую ретинопатию, грыжу межпозвоночного диска, пролапс межпозвоночного диска, индуцированную лекарственным средством иммунную гемолитическую анемию, эндометриоз, эндофтальмит, эписклерит, полиформную эритему, тяжелую полиформную эритему, гестационный пемфигоид, синдром Гийена-Барре (GBS), синдром Хьюза, идиопатическую болезнь Паркинсона, идиопатическую интерстициальную пневмонию, опосредуемую IgE аллергию, иммунную гемолитическую анемию, миозит с тельцами включения, инфекционное воспалительное заболевание глаз, воспалительное демиелинизирующее заболевание, воспалительное заболевание сердца, воспалительное заболевание почек, IPF/UIP, ирит, кератит, сухой кератоконъюнктивит, болезнь Куссмауля или болезнь Куссмауля-Мейера, паралич Ландри, гистиоцитоз клеток Лангерганса, гроздевидную кожу, дегенерацию желтого пятна, микроскопический полиангиит, болезнь Бехтерева, нарушения двигательных нейронов, пемфигоид слизистых оболочек, полиорганную недостаточность, миастению, миелодиспластический синдром, миокардит, нарушения корешков нервов, невропатию, не-A не-B гепатит, оптический неврит, остеолизис, олигоартикулярный JRA, окклюзионное заболевание периферических артерий (PAOD), заболевание периферических сосудов (PVD), заболевание периферических артерий (PAD), флебит, узелковый полиартериит (или нодозный полиартериит), полихондрит, полиоз, полиартикулярный JRA, синдром полиэндокринной недостаточности, полимиозит, ревматическую полимиалгию (PMR), первичный Паркинсонизм, простатит, истинную эритроцитарную аплазию, первичную недостаточность надпочечников, рецидивирующий оптический нейромиелит, рестеноз, ревматическую болезнь сердца, sapho (синовит, угри, пустулез, гиперостоз и остеит), вторичный амилоидоз, шоковое легкое, склерит, ишиас, вторичную недостаточность надпочечников, ассоциированное с кремнийорганическими соединениями заболевание соединительных тканей, дерматоз Снеддона-Уилкинсона, анкилозирующий спондилит, синдром Стивенса-Джонсона (SJS), височный артериит, токсоплазменный ретинит, токсический эпидермальный некролиз, поперечный миелит, TRAPS (рецептор фактора некроза опухоли), аллергическую реакцию 1 типа, диабет типа II, крапивницу, обычную интерстициальную пневмонию (UIP), васкулит, весенний конъюнктивит, вирусный ретинит, синдром Фогта-Коянаги-Харада (синдром VKH), влажную дегенерацию желтого пятна или заживление ран.

27. Способ по п.25, где нарушение представляет собой аутоиммунное нарушение, астму, ревматоидный артрит, остеоартрит, системную красную волчанку (SLE), рассеянный склероз, сепсис, нейродегенеративное заболевание или онкологическое нарушение.

28. Способ по п.25, где связывающий белок составлен для парентерального, подкожного, внутримышечного, внутривенного, внутрисуставного, внутрибронхиального, интраабдоминального, внутрикапсулярного, внутрихрящевого, внутриполостного, внутрибрюшнополостного, внутримозжечкового, интрацеребровентрикулярного, внутрикишечного, внутришеечного, внутрижелудочного, внутрипеченочного, внутримиокардиального, внутрикостного, внутритазового, внутриперикардиального, внутрибрюшинного, внутриплеврального, внутрипростатического, внутрилегочного, внутриректального, внутрипочечного, интраретинального, внутрипозвоночного, интрасиновиального, внутригрудного, внутриматочного, внутрипузырного, болюсного, вагинального, ректального, буккального, сублингвального, интраназального и трансдермального введения.

29. Способ определения присутствия, количества или концентрации по меньшей мере одной мишени или ее фрагмента в исследуемом образце с использованием иммуноанализа, где иммуноанализ включает контактирование исследуемого образца по меньшей мере с одним связывающим белком и по меньшей мере одной поддающейся обнаружению меткой, и

где по меньшей мере один связывающий белок включает связывающий белок по любому из пп.1-9.

30. Способ по п.29, дополнительно включающий:

(i) приведение в контакт исследуемого образца по меньшей мере с одним связывающим белком, где связывающий белок связывается с эпитопом на мишени или ее фрагменте с образованием первого комплекса;

(ii) приведение в контакт комплекса меньшей мере с одной поддающейся обнаружению меткой, где поддающаяся обнаружению метка связывается со связывающим белком или эпитопом на мишени или ее фрагменте, с которым не связывается связывающий белок, с образованием второго комплекса; и

(iii) обнаружение присутствия, количества или концентрации мишени или ее фрагмента в исследуемом образце на основе сигнала, сгенерированного поддающейся обнаружению меткой во втором комплексе, где присутствие, количество или концентрация мишени или ее фрагмента прямо коррелируют с сигналом, сгенерированным поддающейся обнаружению меткой.

31. Способ по п.29, дополнительно включающий:

(i) приведение в контакт исследуемого образца по меньшей мере с одним связывающим белком, где связывающий белок связывается с эпитопом на мишени или его фрагментом с образованием первого комплекса;

(ii) приведение в контакт комплекса по меньшей мере с одной поддающейся обнаружению меткой, где поддающаяся обнаружению метка конкурирует с мишенью или ее фрагментом за связывание со связывающим белком с образованием второго комплекса; и

(iii) обнаружение присутствия, количества или концентрации мишени или ее фрагмента в исследуемом образце на основе сигнала, сгенерированного поддающейся обнаружению меткой во втором комплексе, где присутствие, количество или концентрация мишени или ее фрагмента непрямо коррелируют с сигналом, сгенерированным поддающейся обнаружению меткой.

32. Набор для анализа исследуемого образца в отношении присутствия, количества или концентрации мишени или ее фрагмента в образце, причем указанный набор содержит (a) инструкции для анализа исследуемого образца в отношении мишени или ее фрагмента и (b) по меньшей мере один связывающий белок, включающий связывающий белок по любому из пп.1-9.