Гетеродимеризованный полипептид - RU2017144098A

1. Полипептид, содержащий Fc-область IgG, где полипептид отличается тем, что Fc-область IgG состоит из гетеродимера, содержащего первый полипептид и второй полипептид, и где полипептид отличается тем, что функция Fc-области IgG является измененной по сравнению с функцией Fc-области IgG полипептида, отличающегося тем, что Fc-область IgG состоит из гомодимера, содержащего только первый полипептид, и/или по сравнению с функцией Fc-области IgG полипептида, отличающийся тем, что Fc-область IgG состоит из гомодимера, содержащего только второй полипептид, где изменение функции Fc-области представляет собой улучшение селективности связывания с рецептором(ами) Fcγ, где улучшение селективности связывания с рецептором Fcγ относится к селективности между активирующим рецептором(ами) Fcγ и ингибирующим рецептором Fcγ, где по меньшей мере одна или более мутаций аминокислот введены в введены в аминокислотный участок, выбранный из группы, состоящей из:

Ala в положении 231 (нумерация EU);

Pro в положении 232 (нумерация EU);

Glu в положении 233 (нумерация EU)/

Leu в положении 234 (нумерация EU);

Leu в положении 235 (нумерация EU);

Gly в положении 236 (нумерация EU);

Gly в положении 237 (нумерация EU);

Pro в положении 238 (нумерация EU);

Ser в положении 239 (нумерация EU);

Val в положении 240 (нумерация EU);

Asp в положении 265 (нумерация EU);

Val в положении 266 (нумерация EU);

Ser в положении 267 (нумерация EU);

His в положении 268 (нумерация EU);

Glu в положении 269 (нумерация EU);

Asp в положении 270 (нумерация EU);

Pro в положении 271 (нумерация EU);

Gln в положении 295 (нумерация EU);

Tyr в положении 296 (нумерация EU);

Ser в положении 298 (нумерация EU);

Tyr в положении 300 (нумерация EU);

Ser в положении 324 (нумерация EU);

Asn в положении 325 (нумерация EU);

Lys в положении 326 (нумерация EU);

Ala в положении 327 (нумерация EU);

Leu в положении 328 (нумерация EU);

Pro в положении 329 (нумерация EU);

Ala в положении 330 (нумерация EU);

Pro в положении 331 (нумерация EU);

Ile в положении 332 (нумерация EU);

Glu в положении 333 (нумерация EU);

Lys в положении 334 (нумерация EU);

Thr в положении 335 (нумерация EU);

Ile в положении 336 (нумерация EU), и

Ser в положении 337 (нумерация EU) в домен СН2 Fc-области IgG, где количество мутаций аминокислот, составляет не более чем 30.

2. Полипептид по п. 1, где по меньшей мере одна или более мутаций аминокислот, выбранных из группы, состоящей из

замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y или Q;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты S в положении 239 (нумерация EU) на М;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е;

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

замены аминокислоты K в положении 326 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты А в положении 327 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты L в положении 328 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты А в положении 330 (нумерация EU) на М или K и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на Е или L, введены в аминокислотные последовательности первого полипептида и/или второго полипептида, составляющих Fc-область IgG.

3. Полипептид по п. 1, где мутация введена по меньшей мере в одну аминокислоту, выбранную из Leu в положении 234, Leu в положении 235, Gly в положении 236, Ser в положении 239, His в положении 268, Asp в положении 270, Ser в положении 298, Lys в положении 326, Ala в положении 327, Leu в положении 328, Ala в положении 330 и Lys в положении 334 (нумерация EU), в аминокислотных последовательностях первого полипептида и/или второго полипептида, составляющих Fc-область IgG.

4. Полипептид по п. 1, где мутация введена по меньшей мере в одну аминокислоту, выбранную из Leu в положении 234, Leu в положении 235, Gly в положении 236, Ser в положении 239, His в положении 268, Asp в положении 270, Ser в положении 298, Ala в положении 327, Leu в положении 328 и Lys в положении 334 (нумерация EU), в аминокислотной последовательности любого полипептида из первого полипептида и второго полипептида, составляющих Fc-область IgG; и мутацию вводят по меньшей мере в одну аминокислоту, выбранную из Asp в положении 270, Lys в положении 326, Ala в положении 330 и Lys в положении 334 (нумерация EU), в аминокислотной последовательности другого полипептида.

5. Полипептид по п. 1, где по меньшей мере одна мутация аминокислоты, выбранная из группы, состоящей из

замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y или Q;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты S в положении 239 (нумерация EU) на М;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е;

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

замены аминокислоты А в положении 327 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты L в положении 328 (нумерация EU) на W и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на L,

введена в аминокислотную последовательность любого полипептида из первого полипептида или второго полипептида, составляющих Fc-область IgG; и по меньшей мере одна мутация аминокислоты, выбранная из группы, состоящей из:

замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е;

замены аминокислоты K в положении 326 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты А в положении 330 (нумерация EU) на М или K и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на Е,

введена в аминокислотную последовательность другого полипептида.

6. Полипептид по п. 1, , где любая одна серия мутаций от (i) до (vi) введена в аминокислотную последовательность любого полипептида из первого полипептида или второго полипептида, составляющих Fc-область IgG, и любая одна серия мутаций от (vii) до (ix) введена в аминокислотную последовательность другого полипептида:

(i) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D и

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

(ii) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е и

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

(iii) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Q;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты S в положении 239 (нумерация EU) на М;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е и

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

(iv) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А и

замены аминокислоты А в положении 327 (нумерация EU) на D;

(v) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты S в положении 239 (нумерация EU) на М;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А и

замены аминокислоты А в положении 327 (нумерация EU) на D;

(vi) замены аминокислоты L в положении 234 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты L в положении 235 (нумерация EU) на Y;

замены аминокислоты G в положении 236 (нумерация EU) на W;

замены аминокислоты S в положении 239 (нумерация EU) на М;

замены аминокислоты Н в положении 268 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты S в положении 298 (нумерация EU) на А;

замены аминокислоты А в положении 327 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты L в положении 328 (нумерация EU) на W и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на L;

(vii) замены аминокислоты K в положении 326 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты А в положении 330 (нумерация EU) на М и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на Е;

(viii) замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е;

замены аминокислоты K в положении 326 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты А в положении 330 (нумерация EU) на М и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на Е;

(ix) замены аминокислоты D в положении 270 (нумерация EU) на Е;

замены аминокислоты K в положении 326 (нумерация EU) на D;

замены аминокислоты А в положении 330 (нумерация EU) на K и

замены аминокислоты K в положении 334 (нумерация EU) на Е.

7. Полипептид по п. 1, где изменение аминокислоты дополнительно введено для обеспечения разницы изоэлектрических точек первого полипептида и второго полипептида.

8. Полипептид по п. 7, где изменение аминокислоты для обеспечения разницы изоэлектрических точек отличается введением по меньшей мере одной мутации аминокислоты в аминокислотный участок, выбранный из группы, состоящей из Gly в положении 137, Gly в положении 138, Thr в положении 139, Lys в положении 14 7, Ser в положении 192, Leu в положении 193, Gln в положении 196, Tyr в положении 198, Ile в положении 199, Asn в положении 203, Lys в положении 214, Val в положении 263, Glu в положении 272, Lys в положении 274, Tyr в положении 278, Lys в положении 288, Lys в положении 290, Gly в положении 316, Lys в положении 317, Lys в положении 320, Lys в положении 324, Thr в положении 335, Ser в положении 337, Lys в положении 340, Leu в положении 358, Lys в положении 360, Gln в положении 362, Ser в положении 364, Ser в положении 383, Asn в положении 384, Gly в положении 385, Gln в положении 386, Pro в положении 387, Asn в положении 390, Val в положении 397 и Val в положении 422 (нумерация EU), в аминокислотной последовательности первого полипептида и/или второго полипептида.

9. Полипептид по п. 7, где изменение аминокислоты для обеспечения разницы изоэлектрических точек отличается введением мутации по меньшей мере в одну аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Gln в положении 196, Ile в положении 199, Val в положении 263, Glu в положении 272, Gly в положении 316, Leu в положении 358, Ser в положении 364, Ser в положении 383, Pro в положении 387 и Val в положении 397 (нумерация EU), в аминокислотной последовательность любого полипептида из первого полипептида или второго полипептида; и введением мутации по меньшей мере в одну аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Gly в положении 137, Gly в положении 138, Thr в положении 139, Lys в положении 147, Ser в положении 192, Leu в положении 193, Tyr в положении 198, Не в положении 199, Asn в положении 203, Lys в положении 214, Lys в положении 274, Tyr в положении 278, Lys в положении 288, Lys в положении 290, Gly в положении 316, Lys в положении 317, Lys в положении 320, Lys в положении 324, Thr в положении 335, Ser в положении 337, Lys в положении 340, Leu в положении 358, Lys в положении 360, Gln в положении 362, Ser в положении 383, Asn в положении 384, Gly в положении 385, Gln в положении 386, Asn в положении 390 и Val в положении 422 (нумерация EU), в аминокислотную последовательность другого полипептида.

10. Полипептид по п. 1, где полипептид представляет собой антигенсвязывающую молекулу.

11. Полипептид по п. 10, где антигенсвязывающая молекула представляет собой антитело, биспецифическое антитело или слитую с Fc молекулу, такую как слитый с пептидом Fc белок или слитый с каркасной областью белок.

12. Фармацевтическая композиция для лечения человеческого заболевания, связанного с антигенами, с которыми полипептид по п. 10 или 11 специфично взаимодействует, содержащая полипептид по п. 10 или 11 и приемлемый носитель с медицинской точки зрения.