Композиция и способ для иммунизации, способ продуцирования неприродного, упорядоченного и повторяющегося массива антигенов - RU2006141850A

Реферат

1. Композиция, предназначенная для иммунизации, содержащая:

(а) неприродный молекулярный каркас, содержащий:

(i) коровую частицу и

(ii) организатор, содержащий, по меньшей мере, один первый сайт связывания,

где указанный организатор связан с указанной коровой частицей, по меньшей мере, одной ковалентной связью; и где указанной коровой частицей является вирусоподобная частица РНК-фага;

(b) антиген или антигенную детерминанту, по меньшей мере, с одним вторым сайтом связывания, где указанный второй сайт связывания выбран из группы, состоящей из:

(i) сайта связывания, который в природе не ассоциируется с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой; и

(ii) сайта связывания, который в природе ассоциируется с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой,

где указанный второй сайт связывания способен связываться посредством, по меньшей мере, одной непептидной связи с указанным первым сайтом связывания; и где указанный антиген или антигенная детерминанта и указанный каркас взаимодействуют посредством упомянутого связывания с образованием упорядоченного и повторяющегося массива антигенов.

2. Композиция по п.1, где указанное связывание осуществляется посредством, по меньшей мере, одной ковалентной связи.

3. Композиция по п.1, где указанным первым сайтом связывания является лизиновый остаток, а указанным вторым сайтом связывания является цистеиновый остаток.

4. Композиция по п.1, где указанный РНК-фаг выбран из группы, состоящей из:

а) бактериофага Qβ;

b) бактериофага R17;

c) бактериофага fr;

d) бактериофага GA;

e) бактериофага SP;

f) бактериофага МS2;

g) бактериофага М11;

h) бактериофага МХ1;

i) бактериофага NL95;

k) бактериофага f2 и

l) бактериофага РР7.

5. Композиция по п.4, где указанные рекомбинантные белки содержат мутантные оболочечные белки, и где предпочтительно указанные мутантные оболочечные белки модифицированы посредством удаления, по меньшей мере, одного лизинового остатка путем замены, или посредством добавления, по меньшей мере, одного лизинового остатка путем замены или где предпочтительно указанные мутантные оболочечные белки модифицированы посредством делеции, по меньшей мере, одного лизинового остатка, или посредством добавления, по меньшей мере, одного лизинового остатка путем инсерции.

6. Композиция по п.1, где указанная коровая частица представляет собой вирусоподобную частицу бактериофага Qβ, состоящую, по существу, из оболочечных белков, имеющих аминокислотную последовательность SEQ ID NO:159, или, состоящую, по существу, из смеси оболочечных белков, имеющих аминокислотные последовательности SEQ ID NO:217, или их мутантов, и последовательности SEQ ID NO:159.

7. Композиция по п.1, где указанной коровой частицей является вирусоподобная частица бактериофага Qβ, состоящая, по существу, из мутантных оболочечных белков Qβ, имеющих аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

а) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:255;

b) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:256;

с) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:257;

d) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:258;

е) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:259 и

f) смеси последовательностей а)-е) и соответствующего белка А1.

8. Композиция по п.1, где указанный бактериофаг представляет собой бактериофаг Qβ или бактериофаг fr, где указанный организатор представляет собой интегральную часть указанного бактериофага Qβ или указанного бактериофага fr.

9. Композиция по п.1, где указанный первый и/или второй сайт связывания содержит:

(а) антиген;

(b) антитело или фрагмент антитела;

(c) биотин;

(d) авидин;

(e) стрептавидин;

(f) рецептор;

(g) лиганд рецептора;

(h) лиганд;

(i) лиганд-связывающий белок;

(j) полипептиды, взаимодействующие с лейциновой молнией;

(k) аминогруппу;

(l) химическую группу, реагирующую с аминогруппой;

(m) карбоксильную группу;

(n) химическую группу, реагирующую с карбоксильной группой;

(o) сульфгидрильную группу;

(p) химическую группу, реагирующую с сульфгидрильной группой; или

(q) их комбинации.

10. Композиция по п.1, где указанным первым сайтом связывания является аминогруппа, а указанным вторым сайтом связывания является сульфгидрильная группа.

11. Композиция по п.1, где указанный второй сайт связывания в природе не ассоциируется с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой, и где указанным первым сайтом связывания является аминогруппа, а указанным вторым сайтом связывания является сульфгидрильная группа, или где указанным первым сайтом связывания является лизиновый остаток, а указанным вторым сайтом связывания является цистеиновый остаток, или где указанный второй сайт связывания включает или представляет собой сульфгидрильную группу или цистеиновый остаток.

12. Композиция по п.11, где указанная композиция содержит аминокислотный линкер, и где предпочтительно указанный аминокислотный линкер связан с указанным антигеном или с указанной антигенной детерминантой, по меньшей мере, одной ковалентной связью, и где, также предпочтительно, указанный аминокислотный линкер содержит указанный второй сайт связывания или альтернативно состоит из него, и где, также предпочтительно, указанный аминокислотный линкер содержит сульфгидрильную группу или цистеиновый остаток, и где, также предпочтительно, указанный аминокислотный линкер выбран из группы, состоящей из:

(а) CGG;

(b) N-концевого гамма 1-линкера;

(с) N-концевого гамма 3-линкера;

(d) шарнирных областей Ig;

(е) N-концевых глициновых линкеров;

(f) (G)_kC(G)_n, где n=0-12, а k=0-5;

(g) N-концевых глицин-сериновых линкеров;

(h) (G)_kC(G)_m(S)_l(GGGGS)_n, где n=0-3, k=0-5, m=0-10, l=0-2;

(i) GGC;

(k) GGC-NH₂;

(l) C-концевого гамма 1-линкера;

(m) С-концевого гамма 3-линкера;

(n) С-концевых глициновых линкеров;

(o) (G)_nC(G)_k, где n=0-12, а k=0-5;

(p) C-концевых глицин-сериновых линкеров;

(q) (G)_m (S)_l(GGGGS)_n(G)_oC(G)_k, где n=0-3, k=0-5, m=0-10, l=0-2 и о=0-8.

13. Композиция по п.1, где указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой является аутоантиген или его фрагмент.

14. Композиция по п.13, где указанным аутоантигеном является белок, пептид или его фрагменты, выбранные из группы, состоящей из:

а) лимфотоксина;

b) рецептора лимфотоксина;

с) RANKL;

d) VEGF;

е) интерлейкина-17;

f) фактора некроза опухоли α (TNFα); и

g) человеческого IgE.

15. Композиция по п.13, где указанным аутоантигеном является белок, пептид или его фрагменты, выбранные из группы, состоящей из:

a) интерлейкина-5;

b) интерлейкина-13;

c) CCL21;

d) CXCL12;

e) SDF-1;

f) MCP-1;

g) эндоглина;

h) резистина;

i) GHRH;

j) LHRH;

k) TRH;

l) эотаксина;

m) брадикинина; и

n) BLC.

16. Композиция по п.13, где указанным аутоантигеном является фактор некроза опухоли α (TNF-α), его фрагменты или пептиды TNF-α, и предпочтительно, указанный фактор некроза опухоли α (TNF-α), его фрагменты или пептиды TNF-α с указанным вторым сайтом связывания имеют аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

а) аминокислотной последовательности CSSRTPSDKPVAHVVANPQAEGQ; и

b) аминокислотной последовательности SSRTPSDKPVAHVVANPQAEGQGGC.

17. Композиция по п.13, где указанным аутоантигеном является лимфотоксин или его фрагмент, выбранные из группы, состоящей из:

а) лимфотоксина α (LTα);

b) лимфотоксина β (LTβ);

с) смеси или комбинации LTα и LTβ.

18. Композиция по п.13, где указанным аутоантигеном является лимфотоксин β или его фрагмент, и где указанный лимфотоксин β с указанным вторым сайтом связывания имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

а) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:346 и

b) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:347.

19. Композиция по п.1, где указанным антигеном является белок или его фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

(i) белков, подходящих для индуцирования иммунного ответа против злокачественных клеток;

(ii) белков, подходящих для индуцирования иммунного ответа против инфекционных болезней;

(iii) белков, подходящих для индуцирования иммунного ответа против аллергенов, и

(iv) белков, подходящих для индуцирования иммунного ответа у сельскохозяйственных животных или у домашних питомцев;

и где, предпочтительно, указанным антигеном является:

(а) рекомбинантный белок ВИЧ,

(b) рекомбинантный белок вируса гриппа,

(с) рекомбинантный белок вируса гепатита С,

(d) рекомбинантный белок Toxoplasma,

(е) рекомбинантный белок Plasmodium falciparum,

(f) рекомбинантный белок Plasmodium vivax,

(g) рекомбинантный белок Plasmodium ovale,

(h) рекомбинантный белок Plasmodium malariae,

(i) рекомбинантный белок клеток рака молочной железы,

(j) рекомбинантный белок клеток рака почек,

(к) рекомбинантный белок клеток рака предстательной железы,

(1) рекомбинантный белок клеток рака кожи,

(m) рекомбинантный белок клеток рака головного мозга,

(n) рекомбинантный белок клеток лейкоза,

(о) рекомбинантный профилин,

(р) рекомбинантный белок яда пчел, вызывающий аллергию,

(q) рекомбинантный белок орехов, вызывающий аллергию,

(r) рекомбинантный белок пищевых аллергенов,

(s) рекомбинантных белков, вызывающий астму, или

(t) рекомбинантный белок Chlamydia.

20. Композиция по п.1, где указанным антигеном или антигенной детерминантой является белок фосфолипазы A₂ или его фрагмент, или его пептид, и где указанный белок фосфолипазы A₂ имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

а) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:168;

b) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:169;

b) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:170;

d) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:171;

е) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:172;

f) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:173;

g) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:174 и

h) аминокислотной последовательности SEQ ID NO:175.

21. Композиция по п.1, где указанным антигеном или антигенной детерминантой является белок М2 вируса гриппа или его фрагмент, или его пептид.

22. Фармацевтическая композиция, предназначенная для иммунизации, содержащая:

а) композицию по п.1; и

b) фармацевтически приемлемый носитель.

23. Способ иммунизации, предусматривающий введение индивидууму композиции по п.1.

24. Вакцинная композиция, предназначенная для иммунизации, содержащая композицию по п.1, где предпочтительно указанная вакцинная композиция дополнительно содержит адъювант.

25. Способ продуцирования неприродного, упорядоченного и повторяющегося массива антигенов, предусматривающий:

а) получение неприродного молекулярного каркаса, содержащего:

(i) коровую частицу, и

(ii) организатор, содержащий, по меньшей мере, один первый сайт связывания, где указанный организатор связан с указанной коровой частицей, по меньшей мере, одной ковалентной связью; и где указанной коровой частицей является вирусоподобная частица, содержащая рекомбинантные белки бактериофага или их фрагменты.

(b) получение антигена или антигенной детерминанты, по меньшей мере, с одним вторым сайтом связывания, где указанный второй сайт связывания выбран из группы, состоящей из:

(i) сайта связывания, который в природе не ассоциируется с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой; и

(ii) сайта связывания, который в природе ассоциируется с указанным антигеном или указанной антигенной детерминантой,

где указанный второй сайт связывания способен связываться с указанным первым сайтом связывания посредством, по меньшей мере, одной непептидной связи; и

с) объединение указанного молекулярного каркаса и указанного антигена или антигенной детерминанты,

где указанный антиген или антигенная детерминанта и указанный каркас взаимодействуют посредством упомянутого связывания с образованием упорядоченного и повторяющегося массива антигенов, и где, предпочтительно, указанное связывание осуществляется посредством, по меньшей мере, одной ковалентной связи, и где, также предпочтительно, указанной одной ковалентной связью является непептидная связь.