Обогащение антиген-специфичных плазмобластов - RU2015116927A

1. Способ получения популяции плазмобластов, обогащенной плазмобластами, обладающими специфичностью к антигену, включающий получение мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) от донора, контактирование РВМС с антигеном или его фрагментом или частью для получения премикса РВМС/антиген, перенос РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом и выделение плазмобластов из селезенки животного с ослабленным иммунитетом с получением, таким образом, популяции плазмобластов, обогащенной плазмобластами, имеющими специфичность к антигену.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включает промывание РВМС для удаления излишнего или несвязанного антигена из премикса РВМС/антиген до переноса РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что донор представляет собой донора, ранее подвергнутого воздействию антигена или его фрагмента или части.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включает сортинг отдельных плазмобластов.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включает сортинг отдельных антиген-специфичных плазмобластов.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включает клонирование иммуноглобулинов из плазмобластов.

7. Способ обогащения антиген-специфичных плазмобластов, включающий получение мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) от донора, контактирование РВМС с, по меньшей мере, одним антигеном для получения премикса РВМС/антиген, перенос РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом и выделение плазмобластов из селезенки животного с ослабленным иммунитетом с обогащением, таким образом, антиген-специфичных плазмобластов.

8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительно включает промывание РВМС для удаления излишнего или несвязанного антигена из премикса РВМС/антиген до переноса РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом.

9. Способ по п. 7, отличающийся тем, что донор представляет собой донора, ранее подвергнутого воздействию антигена или его фрагмента или части.

10. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительно включает сортинг отдельных плазмобластов.

11. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительно включает сортинг отдельных антиген-специфичных плазмобластов.

12. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительно включает клонирование иммуноглобулинов из плазмобластов.

13. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительно включает контактирование РВМС с двумя или более различными антигенами.

14. Способ идентификации плазмобласта, способного продуцировать антитело, обладающее специфичностью к антигену, включающий получение мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) от донора, контактирование РВМС, по меньшей мере, с одним антигеном для получения премикса РВМС/антиген, перенос РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом, выделение плазмобластов из селезенки животного с ослабленным иммунитетом и антиген-специфичный клеточный сортинг выделенных плазмобластов с идентификацией, таким образом, плазмобласта, способного продуцировать антитело, обладающее специфичностью к антигену.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что дополнительно включает промывание РВМС для удаления излишнего или несвязанного антигена из премикса РВМС/антиген до переноса РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом.

16. Способ по п. 14, отличающийся тем, что дополнительно включает клонирование иммуноглобулинов из выделенного плазмобласта.

17. Способ идентификации плазмобласта, способного продуцировать антитело, обладающее специфичностью к более чем одному антигену, включающий получение мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) от донора, контактирование РВМС с двумя или более различными антигенами для получения премикса РВМС/антиген, перенос РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом, выделение плазмобластов из селезенки животного с ослабленным иммунитетом и антиген-специфичный клеточный сортинг выделенных плазмобластов с идентификацией, таким образом, плазмобласта, способного продуцировать антитело, обладающее специфичностью к антигену.

18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что дополнительно включает промывание РВМС для удаления излишнего или несвязанного антигена из премикса РВМС/антиген до переноса РВМС в селезенку животного с ослабленным иммунитетом.

19. Способ по п. 17, отличающийся тем, что дополнительно включает клонирование иммуноглобулинов из выделенного плазмобласта.