Выявление аффинно-зрелых человеческих антител - RU2017134418A

1. Библиотека, содержащая по меньшей мере 1×10⁵ молекул нуклеиновых кислот, кодирующих тяжелые цепи иммуноглобулина, содержащие соматические гипермутации в первых 8 N-концевых аминокислотах вариабельной области.

2. Библиотека по п. 1, содержащая по меньшей мере 1×10⁶ молекул нуклеиновых кислот, кодирующих тяжелые цепи иммуноглобулина, содержащие соматические гипермутации в первых 8 N-концевых аминокислотах вариабельной области.

3. Библиотека по п. 1, содержащая по меньшей мере 1×10⁷ молекул нуклеиновых кислот, кодирующих тяжелые цепи иммуноглобулина, содержащие соматические гипермутации в первых 8 N-концевых аминокислотах вариабельной области.

4. Библиотека по п. 1, где тяжелые цепи иммуноглобулина представляют собой тяжелые цепи человеческого иммуноглобулина.

5. Библиотека по п. 1, представляющая собой фаговую библиотеку.

6. Библиотека по п. 1, где молекулы нуклеиновых кислот получены из образца человеческих B-лимфоцитов.

7. Очищенное антитело, содержащее последовательность вариабельной области, определенную путем скрининга библиотеки, которая содержит последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие вариабельную область, выделенные путем ПЦР-амплификации B-лимфоцитов, выделенных из человеческого субъекта с применением специфических по отношению к лидерной последовательности праймеров.

8. Композиция, содержащая кДНК и набор специфических по отношению к лидерной последовательности праймеров для амплификации по меньшей мере 90% нуклеиновых кислот, кодирующих V-область человеческого иммуноглобулина в образце человеческой ткани, где набор содержит (a) по меньшей мере 50 различных праймеров, где каждый из различных праймеров в наборе из по меньшей мере 50 различных праймеров включает отличающуюся последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-76; (b) по меньшей мере 32 различных праймера, где каждый из различных праймеров в наборе из по меньшей мере 32 различных праймеров включает отличающуюся последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-32; (c) по меньшей мере 15 различных праймеров, где каждый из различных праймеров в наборе из по меньшей мере 15 различных праймеров включает отличающуюся последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:33-48; или (d) по меньшей мере 27 различных праймеров, где каждый из различных праймеров в наборе из по меньшей мере 27 различных праймеров включает отличающуюся последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:49-76.

9. Композиция по п. 8, где набор амплифицирует 100% нуклеиновых кислот, кодирующих V-область человеческого иммуноглобулина в образце человеческой ткани.

10. Композиция по п. 8, где набор содержит набор из по меньшей мере 50 различных праймеров.

11. Композиция по п. 8, где набор содержит набор из по меньшей мере 32 различных праймеров.

12. Композиция по п. 8, где набор содержит набор из по меньшей мере 15 различных праймеров.

13. Композиция по п. 8, где набор содержит набор из по меньшей мере 27 различных праймеров.