Связывающие агенты - RU2019125975A
Код документа: RU2019125975A
Формула
1. Молекула антитела человека, гуманизированного или химерного антитела, которая специфически связывается с индуцируемым глюкокортикоидами рецептором ФНО человека (GITR) и GITR яванского макака, или ее антигенсвязывающая часть, причем указанная молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, где
HCDR1 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: F-S-L-S-T-S/F-G-Y-G (SEQ ID NO: 7);
HCDR2 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: I-W-W-D-D-D-K-Y-Y-V-D-S-V-K-G (SEQ ID NO: 8); и
HCDR3 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: Т-R-Q/L/V-Y-F-P-F-A (SEQ ID NO: 9).
2. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по п. 1, отличающаяся тем, что
HCDR1 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: G-F-S-L-S-T-S/F-G-Y-G-V-G (SEQ ID NO: 25);
HCDR2 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: L-A-H-I-W-W-D-D-D-K-Y-Y-V-D-S-V-K-G (SEQ ID NO: 26); и
HCDR3 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: Т-R-Q/L/V-Y-F-P-F-A-Y (SEQ ID NO: 27).
3. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по п. 1 или 2, содержащая вариабельную область легкой цепи, где
LCDR1 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: А-S-Q-N/S-V-G-T/S-N (SEQ ID NO: 16);
LCDR2 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: S/Y-A-S-Y/N-R-Y-S/T (SEQ ID NO: 17); и
LCDR3 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: Y-S-T/N-D-P-L (SEQ ID NO: 18).
4. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по п. 3, в которой:
LCDR1 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: R-A-S-Q-N/S-V-G-T/S-N-L-A (SEQ ID NO: 28);
LCDR2 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: S/Y-A-S-Y/N-R-Y-S/T (SEQ ID NO: 17); и
LCDR3 содержит аминокислоты в последовательности в следующем порядке: Q-Q-Y-S-T/N-D-P-L-T (SEQ ID NO: 173).
5. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-4, содержащая:
(а) последовательности аминокислот GFSLSTSGYGVG (SEQ ID NO: 29) (HCDR1), LАHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRQYFPFAY (SEQ ID NO: 31) (HCDR3), RASQSVGSNLA (SEQ ID NO: 32) (LCDR1), SASYRYT (SEQ ID NO: 33) (LCDR2) и QQYSTDPLT (SEQ ID NO: 34) (LCDR3) [клон D_A6]; или
(b) последовательности аминокислот GFSLSTFGYGVG (SEQ ID NO: 35) (HCDR1), LAHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRQYFPFAY (SEQ ID NO: 31) (HCDR3), RASQSVGTNLA (SEQ ID NO: 36) (LCDR1), YASYRYT (SEQ ID NO: 37) (LCDR2) и QQYSNDPLT (SEQ ID NO: 38) (LCDR3) [клон G_G10]; или
(c) последовательности аминокислот GFSLSTSGYGVG (SEQ ID NO: 29) (HCDR1), LAHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRLYFPFAY (SEQ ID NO: 39) (HCDR3), RASQNVGSNLA (SEQ ID NO: 40) (LCDR1), SASNRYS (SEQ ID NO: 41) (LCDR2) и QQYSTDPLT (SEQ ID NO: 34) (LCDR3) [клон I_C2]; или
(d) последовательности аминокислот GFSLSTSGYGVG (SEQ ID NO: 29) (HCDR1), LAHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRVYFPFAY (SEQ ID NO: 42) (HCDR3), RASQNVGTNLA (SEQ ID NO: 43) (LCDR1), SASYRYT (SEQ ID NO: 33) (LCDR2) и QQYSTDPLT (SEQ ID NO: 34) (LCDR3) [клон H_B3]; или
(e) последовательности аминокислот GFSLSTSGYGVG (SEQ ID NO: 29) (HCDR1), LAHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRQYFPFAY (SEQ ID NO: 31) (HCDR3), RASQSVGSNLA (SEQ ID NO: 32) (LCDR1), SASNRYT (SEQ ID NO: 44) (LCDR2) и QQYSTDPLT (SEQ ID NO: 34) (LCDR3) [клон А6.1].
6. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-5, содержащая последовательности аминокислот GFSLSTSGYGVG (SEQ ID NO: 29) (HCDR1), LAHIWWDDDK YYVDSVKG (SEQ ID NO: 26) (HCDR2), TRQYFPFAY (SEQ ID NO: 31) (HCDR3), RASQSVGSNLA (SEQ ID NO: 32) (LCDR1), SASYRYT (SEQ ID NO: 33) (LCDR2) и QQYSTDPLT (SEQ ID NO: 34) (LCDR3) [клон D_A6].
7. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-6, обеспечивающая улучшенную активацию GITR по сравнению с гуманизированным IgG-антителом мыши против GITR, обозначенным «HuN6C8-Agly» в WO 2006/105021.
8. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-7, с улучшенной иммуногенностью in silico по сравнению с гуманизированным IgG-антителом мыши против GITR, обозначенным «HuN6C8-Agly» в WO 2006/105021.
9. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-8, с улучшенной аффинностью в отношении GITR яванского макака по сравнению с гуманизированным IgG-антителом мыши против GITR, обозначенным «HuN6C8-Agly» в WO 2006/105021.
10. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-9, содержащая одну или более замен, делеций или инсерций, которые удаляют сайт посттрансляционной модификации, например, сайт гликозилирования, сайт дезаминирования, сайт фосфорилирования или сайт изомеризации/фрагментации.
11. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-10, содержащая один или более каркасных скаффолдов вариабельного домена человека, в которые были инсертированы области CDR.
12. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-11, содержащая скаффолд IGHV3-7 зародышевой линии человека, в которую были инсертированы соответствующие последовательности HCDR.
13. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-8, содержащая скаффолд IGKV3-11 зародышевой линии человека, в которую были инсертированы соответствующие последовательности LCDR.
14. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-13, содержащая иммунологически инертную константную область.
15. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-14, которая представляет собой Fab-фрагмент, F(ab)2-фрагмент, Fv-фрагмент, тетрамерное антитело, тетравалентное антитело, мультиспецифическое антитело (например, бивалентное антитело), домен-специфическое антитело, однодоменное антитело, моноклональное антитело или слитый белок.
16. Иммуноконъюгат, содержащий молекулу антитела или ее антигенсвязывающую часть по любому из пп. 1-15, соединенную с терапевтическим агентом.
17. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая молекулу антитела или ее антигенсвязывающую часть по любому из пп. 1-15.
18. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 17.
19. Клетка-хозяин, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п. 17 или вектор по п. 18.
20. Способ получения антитела против GITR и/или его антигенсвязывающей части, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 19 в условиях, которые приводят к экспрессии и/или продуцированию указанного антитела и/или его антигенсвязывающей части, и выделение указанного антитела и/или его антигенсвязывающей части из клетки-хозяина или культуры.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая молекулу антитела или ее антигенсвязывающую часть по любому из пп. 1-15, или молекулу нуклеиновой кислоты по п. 17, или вектор по п. 18.
22. Способ усиления иммунного ответа у субъекта, включающий введение эффективного количества молекулы антитела или ее антигенсвязывающей части по любому из пп. 1-15, или иммуноконъюгата по п. 16, или молекулы нуклеиновой кислоты по п. 17, или вектора по п. 18, или фармацевтической композиции по п. 21.
23. Способ лечения или предотвращения рака у субъекта, включающий введение эффективного количества молекулы антитела или ее антигенсвязывающей части по любому из пп. 1-15, или иммуноконъюгата по п. 16, или молекулы нуклеиновой кислоты по п. 17, или вектора по п. 18, или фармацевтической композиции по п. 21.
24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из: рака поджелудочной железы, меланомы, рака молочной железы, рака легкого, рака бронхов, рака ободочной и прямой кишки, рака предстательной железы, рака желудка, рака яичников, рака мочевого пузыря, рака головного мозга или центральной нервной системы, рака периферической нервной системы, рака пищевода, рака шейки матки, рака матки или эндометрия, рака полости рта или глотки, рака печени, рака почки, рака яичка, рака желчных протоков, рака тонкой кишки или аппендикса, рака слюнной железы, рака щитовидной железы, рака надпочечной железы, остеосаркомы, хондросаркомы и рака гематологических тканей.
25. Молекула антитела или ее антигенсвязывающая часть по любому из пп. 1-15, или иммуноконъюгат по п. 16, или молекула нуклеиновой кислоты по п. 17, или вектор по п. 18, или фармацевтическая композиция по п. 21 для применения в лечении рака.
26. Молекула антитела, или ее антигенсвязывающая часть, или иммуноконъюгат, или молекула нуклеиновой кислоты, или вектор для применения по п. 25, или способ лечения по пп. 23 или 24, отличающиеся тем, что указанные антитело, его антигенсвязывающая часть, иммуноконъюгат, нуклеиновая кислота, вектор или фармацевтическая композиция предназначены для раздельного, последовательного или одновременного применения в комбинации, в сочетании с вторым терапевтическим агентом, например, противораковым агентом.
27. Применение молекулы антитела или ее антигенсвязывающей части по любому из пп. 1-15, или иммуноконъюгата по п. 16, или молекулы нуклеиновой кислоты по п. 17, или вектора по п. 18, или фармацевтической композиции по п. 21 при получении лекарственного средства для лечения рака.
28. Способ получения молекулы антитела, которая специфически связывается с GITR человека и GITR яванского макака, или ее антигенсвязывающей части, включающий следующие этапы:
(1) прививку областей CDR против GITR из источника, не относящегося к человеку на каркас v-домена человека, для получения молекулы гуманизированного антитела против GITR или ее антигенсвязывающей части;
(2) получение фаговой библиотеки клонов молекулы гуманизированного антитела против GITR или ее антигенсвязывающей части, содержащей одну или более мутаций в областях CDR;
(3) скрининг указанной фаговой библиотеки на связывание с GITR человека и GITR яванского макака;
(4) выбор клонов с этапа скрининга (3), обладающих специфичностью связывания с GITR человека и GITR яванского макака; и
(5) получение молекулы антитела, которое специфически связывается с GITR человека и GITR яванского макака, или ее антигенсвязывающей части из клонов, выбранных на этапе (4).
Комментарии