Конъюгаты, содержащие антитело, специфическое для ed-в-домена фибронектина, и их применение для обнаружения и лечения опухолей - RU2004123785A

Реферат

1. Соединение, содержащее пептид, который включает

аа) последовательность антигенсвязывающего центра антитела к внеклеточному домену В (ED-B) фибронектина, которая содержит гипервариабельные участки HCDR3 и/или LCDR3, представленные в таблице 1, или ее вариацию, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 5 аминокислот для HCDR3-области и вплоть до 6 аминокислот для LCDR3-области, которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1;

аб) последовательность антигенсвязывающего центра антитела к внешнему домену В (ED-B) фибронектина, которая содержит гипервариабельные участки HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3, представленные в таблице 1, или ее вариацию, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 3 аминокислот для HCDR1-области, вплоть 8 аминокислот для HCDR2-области, вплоть до 5 аминокислот для HCDR3-области, вплоть до 6 аминокислот для LCDR1-области, вплоть до 4 аминокислот для LCDR2-области и вплоть до 6 аминокислот для LCDR3-области; которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1;

ав) последовательность, которая представлена в Seq. Id. No.1 (L 19), или вариацию Seq. Id. No.1, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 30 аминокислот, и которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1; и

ба) аминокислотную последовательность Хаа₁-Хаа₂-Хаа₃-Суs (Seq. Id. No.2), где символы Xaa₁, Хаа₂ и Хаа₃ каждый независимо друг от друга обозначает любую встречающуюся в естественных условиях аминокислоту, или

бб) аминокислотную последовательность Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Cys-Xaa₄ (Seq. Id. No.3), где символы Xaa₁, Xaa₂, Хаа₃ и Хаа₄ каждый независимо друг от друга обозначает любую встречающуюся в естественных условиях аминокислоту, или

бв) аминокислотную последовательность (His)_n (Seq. Id. No.4), где n обозначает целое число от 4 до 6, причем С-конец последовательности, описанной в аа), аб) или ав), связан с N-концом одной из последовательностей, представленных в Seq. Id. No.2, Seq. Id. No.3 или Seq. Id. No.4, через пептидную связь.

2. Соединение по п.1, где аминокислотная последовательность Xaa₁-Хаа₂-Хаа₃-Cys-Хаа₄ (Seq. Id. No.2) представляет собой последовательность Gly-Gly-Gly-Cys (Seq. Id. No.5) или Gly-Cys-Gly-Cys (Seq. Id. No.6).

3. Соединение по п.1, где аминокислотная последовательность Xaa₁ -Хаа₂-Хаа₃-Cys-Хаа₄ (Seq. Id. No.3) представляет собой последовательность Gly-Gly-Gly-Cys-Ala (Seq. Id. No.7) или Gly-Cys-Gly-Cys-Ala (Seq. Id. No.8).

4. Соединение по п.1, где значение n в аминокислотной последовательности (His)_n (Seq. Id. No.4) равно 6.

5. Соединение по п.1, конъюгированное с радиоактивным изотопом.

6. Соединение по п.5, конъюгированное с радиоактивным изотопом, выбранным из радиоактивного изотопа технеция, такого как^94mTc,^99mTc, рения, таким как¹⁸⁶Re,¹⁸⁸Re, или других изотопов, таких как²⁰³Pb,⁶⁷Ga,⁶⁸Ga,⁴³Sc,⁴⁴Sc,⁴⁷Sc,^110mIn,¹¹¹In,⁹⁷Ru,⁶²Cu,⁶⁴Cu,⁶⁷Cu,⁶⁸Cu,⁸⁶Y,⁸⁸Y,⁹⁰Y,¹²¹Sn,¹⁶¹Tb,¹⁵³Cm,¹⁶⁶Но,¹⁰⁵Rh,¹⁷⁷Lu,⁷²As и¹⁸F.

7. Соединение по п.6, где радиоактивный изотоп представляет собой^99mТс или¹⁸⁸Re.

8. Соединение по п.1, где пептид находится в восстановленной форме.

9. Фармацевтическая композиция, включающая в качестве действующего вещества соединение по одному из пп.1-8 в сочетании с физиологически приемлемыми вспомогательными веществами, носителями и/или разбавителями.

10. Композиция по п.9, отличающаяся тем, что до 70% или более которой экскретируется у мышей через 24 ч через почки.

11. Композиция по п.9 или 10, отличающаяся тем, что через 5 ч после введения мышам соотношение ее распределения в опухоли/крови составляет 5:1 или более.

12. Композиция по п.9, предназначенная для применения в диагностике.

13. Композиция по п.9, предназначенная для применения в терапии.

14. Применение пептида, содержащего

аа) последовательность антигенсвязывающего центра антитела к внеклеточному домену В (ED-B) фибронектина, которая содержит гипервариабельные участки HCDR3 и/или LCDR3, представленные в таблице 1, или ее вариацию, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 5 аминокислот для HCDR3-области и вплоть до 6 аминокислот для LCDR3-области, которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1;

аб) последовательность антигенсвязывающего центра антитела к внешнему домену В (ED-B) фибронектина, которая содержит гипервариабельные участки HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3, представленные в таблице 1, или ее вариацию, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 3 аминокислот для HCDR1-области, вплоть 8 аминокислот для HCDR2-области, вплоть до 5 аминокислот для HCDR3-области, вплоть до 6 аминокислот для LCDR1-области, вплоть до 4 аминокислот для LCDR2-области и вплоть до 6 аминокислот для LCDR3-области; которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1;

ав) последовательность, которая представлена в Seq. Id. No.1 (L 19) или вариацию Seq. Id. No.1, такую как делеция, инсерция и/или замена, затрагивающая вплоть до 30 аминокислот, и которая обладает такой же функцией, что и пептид, имеющий последовательность Seq. Id. No.1; и

ба) аминокислотную последовательность Xaa₁-Хаа₂-Хаа₃-Cys (Seq. Id. No.2), где символы Xaa₁, Хаа₂, и Хаа₃ каждый независимо друг от друга обозначает любую встречающуюся в естественных условиях аминокислоту, или

бб) аминокислотную последовательность Xaa₁-Хаа₂-Хаа₃-Cys-Хаа₄ (Seq. Id. No.3), где символы Xaa₁, Хаа₂, Хаа₃, и Хаа₄ каждый независимо друг от друга обозначает любую встречающуюся в естественных условиях аминокислоту, или

бв) аминокислотную последовательность (His)_n (Seq. Id. No.4), где n обозначает целое число от 4 до 6,

причем С-конец последовательности, описанной в аа), аб) или ав), связан с N-концом одной из последовательностей, представленных в Seq. Id. No.2, Seq. Id. No.3 или Seq. Id. No.4, через пептидную связь, для связывания с радиоактивным изотопом.

15. Применение по п.14, где радиоактивный изотоп выбирают из радиоактивного изотопа технеция, такого как^94mTc,^99mTc рения, такого как¹⁸⁶Re,¹⁸⁸Re, или других изотопов, таких как²⁰³Pb,⁶⁷Ga,⁶⁸Ga,⁴³Sc,⁴⁴Sc,⁴⁷Sc,^110mIn,¹¹¹In,⁹⁷Ru,⁶²Cu,⁶⁴Cu,⁶⁷Cu,⁶⁸Cu,⁸⁶Y,⁸⁸Y,⁹⁰Y,¹²¹Sn,¹⁶¹Tb,¹⁵³Sm,¹⁶⁶Но,¹⁰⁵Rh,¹⁷⁷Lu,⁷²As и¹⁸F.

16. Применение по п.15, где радиоактивный изотоп представляет собой^99mTc,¹⁸⁸Re.

17. Способ получения пептида по одному из пп.1-4, отличающийся тем, что пептид экспрессируют в эукариотических клетках, в частности, в клетках дрожжей.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что эукариотические клетки представляют собой клетки Pichia pastoris.

19. Способ по п.17, отличающийся тем, что пептид экспрессируется конститутивно.

20. Способ по п.17, отличающийся тем, что N-конец пептида связывают непосредственно с сайтом расщепления Кех2 из

21. Набор для получения меченных с помощью радиоактивных изотопов фармацевтических агентов, включающий пептид по одному из пп.1-8, необязательно в сочетании с физиологически приемлемыми вспомогательными веществами.