Способ получения производного паромомицина - SU1103796A3

Описание

И110

Изобретение относится к С чосс6у получения нового производного па-ромомицина , обладающего ценными фармакологическими свойствами фор-мулы

и . „JU.J.-®.

V---r на ннА.

кн;

%Hg

Целью изобретения является получение нового соединения расширяющег ассортимент средств воздействия на живой организм, превышающего по биологической- активности структурный аналог - паромомицин (см. таблицу ) .

Поставленная цель достигается путем синтеза указанного соединения основанного на известных реакциях ацилирования, получения Б-алкилдитиокарбоната и восстановления 1 .

Способ получения производного паромомицина формулы (1) заключаf ill 11 oJI /1(

ется в том, что 6, 3, 2, 5, 3, А -окси-4 ,&-О-бензилиден-пента-М-бензилоксикарбонилпаромомиция подвергают действию уксусного ангидрида в присутствии пиридина с последующим гидролизом Полученного гекса 0-ацетил-4 , 6 -0-бензилиден--пента-N-6ензилкйрбонилпаромомицина уксус} ой кислотой, при комнатной температуре , обработкой полученного б -окси производного 6, З, 21 3I 4 -гeкca-0-aпeтил-пeнтa-N-бeнзоилкарбонилпаромомицина хлористыг; бензоилом в сухом пиридине при 0° и полученное б-бензпильное производное обрабатывают хлористым сульфу-рилом в сухом пиридине, или сероуглеродом , гидроокисью натрия и иодистьм метилом, или (фенилтио)-тиокарбонилхлоридом в присутствии 4-диметил-аминопиридина , с. последующим восстановлением образующегося производного гидридом трибутилолова в атмосфере азота в толуоле при температуре кипения растворителя и в присутствии азобисизобутиронитрила, гидролизом мстилатом натрия с кипячением с обратиьм холодильником в

796S

80%-ном этаноле li присутствии цик- . логексана и 10% палладия на угле. Билогическая активность. 4 деоксипаромомицин проявляет ; антибактериальн то актр вность in vitro,

Испытания биологнческой активн .о-сти соединения in vitro выпо шялись методом серийных разведеJO нкй в жидкой среде (питательный бульoi .i Дифко) и минимальная подавляющая концентрация (МПК) определялась после 24-часовой инкубации при 37 С. Как видно из таблицы, 4-д,еоксипаро;;5 момицИн оказывает сходное с паромомицином действие на иггаммы, чувствительные к антибиотиков 5 и проявляет повьш1енную активность по отношению к некоторым резистентным 20 штаммам грамотрицательных бактерий. Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл) соединения () в сравнении с паромомицином представлена в таблице.

Примет 1. Получение гекса-О-ацетил-4 , б-О-бензилиденпента-fM-бензилоксикарбонютпаромомицина .

В 112, мл пиридина растворяют 11,1 г 456-0-бeнзилидeнпeнтa-N-бeIГ зилоксикарбонилпаромомицина (1) к 1голученному раствору прибавляют 56 мл уксусного анп-щрида. Реакционный раствор оставляют на три дня при комнатной температуре, а затем ме.дленно выливают в перемешиваемую смесь ВОДЬ со льдом. После перемешивания в течение одного часа полученное белое твердое вещество отфильтровывают , тщательно промыва ют водой и растворяют в метаноле. После упаривания растворителя получают 12,7 г гекса-О-ацетил-4, 6-0-бензилиденпента-Н-бензилоксикарбонилпаромомицина .

Температура плавления ,124-127. Wl 21,0

П р м мер 2, Получение 6,3,

-.I с -1 Hf / ,

;, Ь 5 J, А -гскса-и-ацетилпента-N-бензилоксикарбонилпаромомицина

Раствор, содрежащий 12,8 г соединения , полученного в примере 1, в 500 мл уксусной кислоты и 125 мл воды оставляют на 90 ч при комнатной температуре. Растворитель после этого упаривают, остаток растворяют в метаноле и метанол удаляют (опеФацию повторяют несколько раз), В .результате получают 11,6 г соединения , название которого приводится в заглавии примера 2. Это соединение представляет собой твердое аморфное вещество. Температура плав ления 116-119°, 19,9 (с 0,537, CHC1.j). Спектр.ЯМР: (60 МГц, CDClj) пок зывает правильное соотношение аромати ческих и ацетильных протонов (1,38) Пример 3. Получение 6, З, Г.11 г / Г: 2, 5, 3, 4 -гекса-0-ацетил-6-0-бензоил-пента-М-бензилоксикарбонилпаромомицина . 10,1 г вещества, полученного в примере 2, растворяют а 100 мл сухого пиридина и охлаждают до 0°. Затем медленно при перемешивании прибавляют раствор 0,84 мл хлористо го бензоила в 2 мл пиридина. Реакционную смесь выдерживают при О, контролируя ход реакции методом тонкослойной хроматографии. Спустя 43 ч с момента начала реакции в реакционный раствор добавляют 0,42 хлористого бензоила в 1 мл пиридина Через 67 ч снова добавляют реагент (0,2 мл хлористого бензоила в 0,5 пиридина) и через 96 ч после начал реакции в реакционную смесь -добавляют воду и затем экстрагируют хло роформом. Хлороформенные экстракты промывают водой, 2 М раствором сол ной кислоты,, снова водой, затем в.о ньм раствором бикарбоната натрия и опять, водой. После высушивании орагнического раствора и удаления растворителя (хлороформа) получают 10,9 г вещества.. Сырой (неочищенный ) продукт очищают на колонке, заполненной силикагелем .(в качестве злюента используют 0-2%-ный рас вор метанола в хлороформе), в резу тате получают 5,8 г чистого целево продукта. Температуря плавления 110-115 . o/j 26,3 (с 1,096; CHCIj). Вычислено, %: С 59,9; П 5,58; N 4,26, . Найдено, %: С 59,8; ri 5,77; N 4,19. Ир и м е р 4, Получение 6, З, 5, З, 4 -гекса-0-ацетил-6-0-бензои 4-зпиxлop-4-дeoкcипeнтa-N-бeнзилoк . сикарбонилпаромомицина. 1 г соединения, полученного в .примере 3, растворяют в 15 мл сухого пиридина и к охлажденному до О раствору прибавляют по каплям 1,3 мл хлористого сульфурила. После этого реакционную смесь перемешивают 3 ч при 0° и 13 ч при комнатной температуре, затем большую 4acTiJ растворителя удаляют в вакууме и к остатку добавляют хлороформ и воду. После экстракции хлороформом хлороформенный слой промывают водой, высушивают и растворитель удаляют в вакууме. Сырой продукт очищают методом препаративной тонкослойной хроматографии и переосаждением из смеси хлороформ - эфир гексан. В результате получают 515 мг целевого продукта в чистом виде. Данное соединение имеет Rt 0,37 в системе растворителей толуол - этилацетат 1 (по объему) и содержит в молекуле атом. хлора (исходное вещество имеет Rf0,23) . Температура плавления 105-115 , 30,3 (с 1,012,СНС1з). Вычислено. %: С 59,29; Н 5,46; С1 2,13; N 4,12. CgjHgoCINsOjo Найдено, %: С 58,38; Н 5,41; С1 2,36; N 4,14, П р и м е р 5. Получение 6, 3, 2; 5i 4 -гекса-0-ацетил-6-0-бензоил-4-диоксипента -N-бензилоксикарбонилпаромомицина . Раствор 400 мг соединения, полученного в примере 4, в 16 мл толуола нагревают до кипения в атмосфере азота и прибавляют 0,8 мл гидриде- , трибутилолова в 0,8 мл толуола и 20 мг азобисизобутиронитрила. После кипячеггия реакционной смеси в течение 3 ч с обратным холодильником растворитель упаривают, и твердый остаток промывают н-гексаном, растворяют в хлороформе и полученный раствор прибавляют к смеси диэтилового эфира и н-гексана. В резуль7 тате осаждения получают 385 мг указанного соединения с достаточной для проведения последующих реакций частотой. В системе растворителей толуол -э.типацетат (1:1 по объему) соединение имеет Rr 0,31. Температура плавления 125-130, Lcf-l - 33,0 (с 1,116; СНС1;;). Вычислено, %: С 60,54; N 4,30. CezHg N Ojo Найдено, %: С 59,90; И 5,59; N 4,30, Пример 6. Получение 4-Д1;.. сипента-А-бензилоксикарбонилпарОг.ю цина (7). 385 мг соединения5 полученного в примере 5, без дальнейшей очистк растворяют в 14 мл 0,05 Н метаноль ного раствора метилата натрия и перемешивают при комнатной темпера туре в течение 3 ч. После этого пр бавляют твердую двуокись углерода и воду и образовавшийся раствор упаривают досуха. К остатку прибав ляют воду и смесь экстрагируют несколько раз этилацетатом. Объедине ные органические экстракты промьша водой и упаривают , при этом получают 205 мг сырого (неочищенного ) продукта, указанного выше. Очистку продукта осуществляют мето дом пропаративной тонкослойной хроматографии, используя в качестве элюента смесь растворителей хлороформ - этилацетат - метанол в соотношении 40:25:9 (по объему). Получают в результате 130 мг чисто целевого продукта, имеющего Rr.0j22 ( в той же системе растворителей, торая используется в качестве элюента ) , Температура плавления 125-130 Гс/: - 41,0 (с 0,900 CHCIo,) . , Вычислено, %: С 59,56; Н 5,95; N 5, 5 К С.,, Найдено, %: С 58,74, Н 5,78, N5,36. Пример 7. Получение 4-део сипаромомицина , К раствору 130 мг соединения, полученного в примере 6, в 16 мл 80%-ного метанола прибавляют 1 мл циклогексана и 20 мг 10%-ного палл дия на угле. Полученную смесь кипя тят с обратным холодильником в течение 1,5 ч, после этого фильтруют и упаривают растворитель в вакууме Получают 50 мг твердого остатка. С рой (неочищенный) продукт чистят на колонке, заполненной сорбентом CG 50 (в NH4 форме, 100-200 меш), получают 21 мг соединения, указанного выше, в чистом виде с темпера турой плавления 175-180 (с разложением ) . Продукт является гомоГенным на пластинке с нанесенным тонким слоем сорбента (двумерная хроматограмма в системе растворителей 28% амм1-{ак; бутанол: этанол: вода 5:8;10;7 по объему и имеет Кг , т.е. немного выше этой величины для ликпидомипина В (3-деоксипаромомидина ) , который имеет R,0 ,30. Продукт,, представляюш;ий собой свободное основание, переводят в сульфат добавлением 0,2 м раствора серной кислоты до рН 6,4. Температура плавления (с раз;1ожением) 230 (для сульфата), 58 (с 1,115; M-jO, для сульфата). Элементный анализ (сульфатная форма) для 5/2 HjSO. Вычислено, %:С 32,70; И 5,96; N 8,29. Найдено, %: С 33,51 ; Н 6,47; N 7,83. П р и м е р 8. Получение 6, З, (/ г л И /ИГf f. 2,5, 3, 4 -гекса-0-адетил-6-бензоил-4-0- (метилтио) тиокарбонил 1пенTa-N-бензилоксикарбонилпаромомицина . 0,28 мл 5 Н раствора гидроокиси натрия прибавляют по каплям к охлажденному льдом раствору 400 мг соединения, полученного в примере 3,и 0,4 мл сероуглерода в 3 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 20 мин при О . Затем при охлаждении к смеси прибавляют 0,6 мл йодистого метила и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 30 мин. Избыток летучих реагентов удаляют при пониженном давлении и после прибавления к остатку воды раствор экстрагиPiToT этилацетатом.. Экстракты промывают раствором хлористого натрия, затем водой, после этого органический слой высушивают и уларивают . Получают смесь трех соединений , каждое из которых имеет Rr 0,35; 0,42 и 0,53, соответственло, в системе растворителей толуол:этилацетат 1:1 (по объему). Соединение, представляющее собой ос;{овную часть остатка, и имеющее наиболее низкое значение R, вьщеляют методом препарат-ивной тонкослойной хроматограии . Получают 125 мг соединения, указанного , в очищенном ги1де. Пример 9, Получение 6, 3, 5, 3, 4 -гекса-0-ацетил-6-0-бензоил-4-деоксипен .а-Н-бензилоксикарбонилпаромомицина . Реакцию проводят в атмосфере азота . К кипящему растрору 125 мг соединения , Полученуого в примере &, в 8 мл сухого толуола прибавляют раствор 0,4 мл гидрида трибутилолова в 0,8 мл толуола и 10 мг азобисиэобутиронитрила . После кипячения полученной смеси в течение 2 ч с обратным холодильником реакционную смесь обрабатывают согласно примеру 5. Получают 70 мг продукта, ничем не отличающегося от продукта, описанного в примере 5 Получают 70мг продукта, ничем не отличающегося от продукта,описанного в примере 5.

Пример 10. Получение 6, З, 2 5 4 -гекса-0-ацетил-б-0-бензоил-4-0- (фенилтио)тиокарбонил -пента-М-бензилоксикарбонилпаромомицина .

К охлажд.енному до 0° раствору 1 г соединения, полученного в примере 3, в 20 мл сухого пиридина прибавляют 4 г (фенилтио)тиокарбонилхлорида и 100 мг 4-диметил-аминопиридина . Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 дней. После этого в смесь добавляют воду и лед и экстрагируют хлороформом. ХлороформеНные экстракты промывают водой, 2 Н соляной кислотой, водой, раствором бикарбоната натрия и снова водой. ПоTCW органический раствор высушивают

н упаривают. Остаток очищают на колонке, заполненной силикагелем, в качестве элюента используют смесь растворителей толуол:этилацетат в соотношении 1:1 (по объему). Дальнейоая очистка достигается путем применения метода препаративной тонкослойной хроматографии и переосаждением из смеси хлороформа эфиругексан . В результате очистки получают 600 мг соединения, указанного выше. I Продукт хроматографически однороден и имеет Rг 0,34 в системе растворителей толуолгэтилацетат (1:1 по объему).

ПримерП. Получение 6, 3, 2 5, 3 4 -тскса-0-ацетил-6-0-бензоил-4-деоксипента-Г -бензоилоксикарбонилпаромомицина . .

К кипящему раствору 320 мг, со-,. единения, полученного в примере tO, в 13 мл сухого толуола добавляют 2 мл гидрида трибутилолова, разбавленного 4 мл толуола, и 30. мг азобисизобутироннтрила . Реакцию проводят в атмосфере азота. После кипячения реакционной смеси с обратным холодильником в течение 2 ч ее обра,батьюают , как описано в примере 5. В результате получают 50 мг соединения , указанного вьшге.

Реферат