Способ получения 2,4-дигидроксимасляной кислоты - RU2013123481A

Реферат

1. Способ получения 2,4-дигидроксимасляной кислоты (2,4-ДГМ), включающий:- первую стадию превращения малата в 4-фосфомалат с использованием малаткиназы,- вторую стадию превращения 4-фосфомалата в малат-4-полуальдегид с использованием малатполуальдегиддегидрогеназы,- третью стадию превращения малат-4-полуальдегида в 2,4-ДГМ с использованием ДГМ-дегидрогеназы.2. Способ по п.1, где малаткиназу получают при помощи по меньшей мере одной мутации фермента, где указанная(ые) мутация(и) улучшает(ют) активность и/или субстратную аффинность мутантного полипептида в отношении малата.3. Способ по п.2, где малаткиназа представляет собой аспартаткиназу.4. Способ по п.3, где мутантная аспартаткиназа содержит по меньшей мере одну мутацию по сравнению с ферментом дикого типа в одной из следующих позиций: S39, Т45, V115, Е119, F154 и/или S201, где встречающаяся в природе аминокислота в указанной(ых) позиции(ях) заменена на любую из других 19 существующих в природе протеиногенных аминокислот, то есть на аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновую кислоту, цистеин, глутаминовую кислоту, глутамин, глицин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, пролин, серин, треонин, триптофан, тирозин или валин.5. Способ по п.4, где мутантная аспартаткиназа содержит по меньшей мере одну мутацию по следующим аминокислотам: Е250, М318, S321, V339, S338, F324, L325, V339, S345, Е346, D340, Т344 и/или Т352, и где каждая из указанных аминокислот заменена на любую из других 19 существующих в природе протеиногенных аминокислот, то есть на аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновую кислоту, цистеин, глутаминовую кислоту, глутамин, глицин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, проли�