Происходящие из перинатальной ткани мезенхимальные стволовые клетки: способ их получения и применения - RU2019118712A
Код документа: RU2019118712A
Формула
1. Способ получения СD106высокая CD151+ Нестин+ мезенхимальных стволовых клеток (MSC), включающий культивирование популяции недифференцированных MSC в культуральной среде, содержащей по меньшей мере два провоспалительных фактора роста.
2. Способ по п. 1, где указанные провоспалительные факторы роста выбраны среди TNFα (фактор некроза опухолей альфа), IL1 (интерлейкин-1), IL4, IL12, IL18 и IFNγ (интерферон-гамма), предпочтительно из IL1, IL4, IL12 и IL18.
3. Способ по п. 1 или 2, где указанный провоспалительный фактор роста представляет собой смесь IL1 и IL4, предпочтительно ILβ и IL4.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где указанные недифференцированные MSC происходят из биологической ткани, выбранной из плаценты, пуповины или плацентарных мембран (хорион, амнион), или их компонентов, или из биологической жидкости, такой как кровь пуповины, кровь плаценты или амниотическая жидкость.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где указанные недифференцированные MSC получают посредством выделения клеток из тканей эксплантов.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где указанные недифференцированные MSC получают из пуповины, предпочтительно посредством выделения клеток из экспланта фрагмента пуповины.
7. Способ по любому из пп. 1-6, где указанные недифференцированные MSC получают из плаценты, предпочтительно посредством выделения клеток из фрагмента ткани плаценты.
8. Способ по любому из пп. 1-7, где указанная культуральная среда содержит от 1 до 100 нг/мл интерлейкина 1, предпочтительно интерлейкина 1β.
9. Способ по любому из пп. 1-8, где указанная культуральная среда содержит от 1 до 100 нг/мл интерлейкина 4.
10. Способ увеличения уровня экспрессии CD106 недифференцированных MSC, включающий культивирование популяции недифференцированных MSC в культуральной среде, содержащей по меньшей мере два провоспалительных фактора роста.
11. Способ по п. 10, где указанные провоспалительные факторы роста выбраны среди TNFα, IL1, IL4, IL12, IL18 и IFNγ, предпочтительно выбраны из IL1, IL4, IL12 и IL18.
12. Способ по п. 10 или 11, где указанный провоспалительный фактор роста представляет собой смесь IL1 и IL4, предпочтительно IL1β и IL4.
13. Способ по любому из пп. 10-12, где указанные недифференцированные MSC происходят из биологической ткани, выбранной из плаценты, пуповины или плацентарных мембран (хорион, амнион), или их компонентов, или из биологической жидкости, такой как кровь пуповины, кровь плаценты или амниотическая жидкость.
14. Способ по любому из пп. 10-13, в котором указанные недифференцированные MSC получают выделением клеток из эксплантов ткани.
15. Способ по любому из пп. 10-14, в котором указанные недифференцированные MSC получают из пуповины, предпочтительно посредством выделения клеток из экспланта фрагмента пуповины.
16. Способ по любому из пп. 10-15, в котором указанные недифференцированные MSC получают из плаценты, предпочтительно посредством выделения клеток из фрагмента ткани плаценты.
17. Способ по любому из пп. 10-16, в котором указанная культуральная среда содержит от 1 до 100 нг/мл интерлейкина 1, предпочтительно интерлейкина 1β.
18. Способ по любому из пп. 10-17, в котором указанная культуральная среда содержит от 1 до 100 нг/мл интерлейкина 4.
19. Культура клеток, содержащая CD106высокая CD151+ Нестин+ мезенхимальные стволовые клетки (MSC), полученные способом по пп. 1-18.
20. Культура клеток по п. 19, содержащая:
свыше 60% клеток, экспрессирующих CD106 на выявляемом уровне,
свыше 98% клеток, экспрессирующих CD151 на выявляемом уровне,
свыше 98% клеток, экспрессирующих нестин на выявляемом уровне,
свыше 95% клеток, экспрессирующих маркеры CD73, CD90, CD105 и CD166 на выявляемом уровне, и
менее 2% клеток, которые экспрессируют маркеры CD45, CD34 и HLA-DR на выявляемом уровне.
21. Культура клеток по п. 19 или 20, отличающаяся тем, что она содержит свыше 98% MSC, которые не экспрессируют маркеры CD11b, CD14, CD15, CD16, CD31, CD34, CD45, CD49f, CD102, CD104 и CD133 на выявляемом уровне.
22. Культура клеток в соответствии с любым из пп. 19-21 для применения в лечении субъектов, страдающих от ишемического заболевания, от расстройства системы кровообращения, от иммунопатологии, от повреждения или расстройства органа или от нарушения функции органа.
23. Культура клеток для применения по п. 22, где указанное заболевание или расстройство выбрано в группе, состоящей из следующего: сахарный диабет типа I, диабет типа II, GVHD (болезнь «трансплантат против хозяина»), апластическая анемия, рассеянный склероз, мышечная дистрофия Дюшенна, ревматоидный артрит, мозговой инсульт, идиопатический легочный фиброз, дилатационная кардиомиопатия, остеоартрит, цирроз, печеночная недостаточность, почечная недостаточность, окклюзионное заболевание периферических артерий, критическая ишемия конечностей, заболевание периферических сосудов, сердечная недостаточность, диабетическая язва, фиброзные расстройства, синехия и энедометриальные расстройства.
24. Культура клеток для применения по п. 22, где указанное заболевание или расстройство представляет собой заболевание или расстройство кожи или слизистой оболочки, предпочтительно диабетическую язву, язву, травму, ожог, ожог горячей жидкостью, рану или проблему с заживлением раны, пролежень, бородавку, синехию, эндометриальное расстройство или фиброзное расстройство желудочно-кишечного тракта, такое как анальный свищ.
25. Фармацевтическая или ветеринарная композиция, содержащая культуру клеток в соответствии с любым из пп. 19-21.
26. Фармацевтическая или ветеринарная композиция по п. 25, дополнительно содержащая гидрогель или другое биосовместимое вещество.
27. Местный препарат, содержащий культуру клеток в соответствии с любым из пп. 19-21.
28. Фармацевтическая композиция по п. 25 или 26, или местный препарат по п. 27 для применения в лечении субъектов, страдающих от ишемического заболевания, от расстройства системы кровообращения, от иммунопатологии, от фиброзного расстройства, от повреждения органа или от нарушения функции органа.
29. Фармацевтическая композиция по п. 25 или 26, или местный препарат по п. 27 для применения в лечении субъектов, страдающих от заболевания или расстройства, выбранных в группе, состоящей из следующего: сахарный диабет типа I, диабет типа II, GVHD, апластическая анемия, рассеянный склероз, мышечная дистрофия Дюшенна, ревматоидный артрит, мозговой инсульт, идиопатический легочный фиброз, дилатационная кардиомиопатия, остеоартрит, цирроз, печеночная недостаточность, почечная недостаточность, окклюзионное заболевание периферических артерий, критическая ишемия конечностей, заболевание периферических сосудов, сердечная недостаточность, диабетическая язва, фиброзные расстройства, синехия и расстройства эндометрия.
30. Дерматологическая или косметическая композиция, содержащая культуру клеток в соответствии с любым из пп. 19-21.
31. Применение дерматологической или косметической композиции по п. 30 для регенерации клеток кожи или слизистой, улучшения вида кожи или слизистой оболочки, или для исправления дефекта кожи или слизистой оболочки, такого как затемнение, прыщи, угри, морщины, сухость.
32. Применение дерматологической или косметической композиции по п. 30 для лечения повреждения или расстройства кожи, такого как ожог, рубец, ангиома, родинка или бородавка.
33. Медицинское устройство, содержащее культуру клеток в соответствии с любым из пп. 19-21.
34. Медицинское устройство по п. 33, где оно представляет собой повязку, пластырь, стент, эндоскоп или шприц.
35. Система доставки, содержащая культуру клеток в соответствии с любым из пп. 19-21.
36. Система доставки по п. 35, где она представляет собой микро- или нановезикулы биополимеров, липидов или наночастиц.
