Способ выделения 6-аминопенициллановой кислоты или ее солей - SU546281A3

Описание

(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ 6-АМИНОПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ ЕЕ СОЛЕЙ растворителя зависит от растворимости в нем ФУК или ФЕУК и их солей, а также о растворимости 6-АПК или ее солей в данн растворе. При сушке распылением при рН 2 ФУК или ФЕУК экстрагируют ацетоном, н-бутанолом , этилацетатом, хлороформом, бутилацетатом и бензолом, предпочтительно этил ацетатом и н-бутанолом. Когда сушку распылением проводят при рН 8 ФУК или ФЕУК экстрагируют обычно метилизопропилкетоном. При последующей сушке распылением при рН 6 ФУК или ФЕУ экстрагируют 95%-ным водным ацетоном. При выделении 6-АПК предлагаемым си собом можно сначала подкислить гидролизный раствор соляной кислотой до рН 2, затем провести экстракцию ФУК или ФЕУК, например амилацетатом или н-бутанолом, этилацетатом или хлороформом, метиленхло- ридом, бензолом или толуолом, и подвергнут оставшийся лосле экстракции раствор сушке распылением при рН 2. В первом варианте предлагаемого способа , когда гидролизный раствор сушат распылением при рН 2-8 с последующим экстраги рованием ФУК или ФЕУК, более желательной является сушка раствора распылением при рН 6-8, рН 4 или рП 2 с использованием в качестве экстрагента 95%-ного ацетона, метили- зопропилкетона или этилацетата соответственно . Во втором варианте предлагаемого способа , когда из гидролизного раствора сначала экстрагируют ФУК или ФЕУК, а затем проводят сушку распылением при рН 2-8, более желательным является использование в качестве экстрагента н-бутанола с послед по- ш.ей сушкой распылением при рН 7. В слзчае сушки распылением при рН 2 в качестве экс трагента применяют амилацетат, а при сушк распылением при рН 4 - метилизопропилкето Полученцая в той или иной форме 6-АПК может быть дополнительно очищена или непосредственно использована для синтеза других пенициллинов. П р и fv э р 1 . В суспензию 26,7 г Pf oteuS f-ettgShi п.1тамм АТСС 925О в 1500 мл воды добавляют 80 г натриевой соли бензилпенициллина, перемешивают 10 час при рН 8,0 и 37 С, поддерживая рН 8,0 периодическим добавлением 2 н, едкого натра, отфильтровывают клеточный материал, сушат раствор распылением и получают 92,4 г тверёбдои массы, состоящей в основном из натриевой соли 6-АПК и фенилацетата натрия. Твердую массу экстрагирзтот 2 х 750 мл 95%ного водного ацетона, отфильтровывают твердое вещество, промывают, сушат и получают 60 58,2 г продукта, содержащего 80% натриевой соли 6-АПК. Аналогичные результаты получены при использовании 27 rE.CoPi штамм 9637 и 83,6 г натриевой соли бензилпенициллина или 27 г Aspe/giP&US fBovUS штамм 13608 и 84 г натриевой соли феноксиметилпенициллина . Пример 2 . Рас1-;епляют рроteuS rettget i штамм АТСС 9250 в ультразвуковой ванне, центрифуг ируют, светлый всплывший слой подвергают диализу и лиофи- ;шзации и получают неочишенную пенициллин-ацилазу , в раствор 2 г которой в 15О мл iАX воды вводят 8 г калиевой соли бензилпенициллина и перемешивают 10-20 час при 37°С и рК 8,0, добавляя при необходимости 2 н. едкое кали. Раствор переносят в ультрафильтрующую установку, пропускают через полупроницаемую мембрану под давлением азота, полученный раствор, почти не содержащий протеина, сушат распылением, экстрагируют твердое вещество 95%-нь)м водным ацетоном и выделяют неочищенную калиевую соль 6-АПК с высоким выходом. Подобные результаты получены при использовании пенициллин-ацилазы, полученной расщеплением Е.Сэй- штамм АТСС 9637 или Aspвhg fifiuS fBavuS штамм АТСС 13608, и калиевой соли бензилпенициллина (8,4 г) или феноксиметилпенициллина соответственно . П р к м е р 3. Пенициллин-ацилазу, полученную из Pi oteus i ettgehi штамм АТСС 9250, иммобилизуют на пористом стекле, добавляют к 4%-ному раствору калиевой соли бензилпенициллина в количестве, достаточном для завершения гидролиза за 12-18 час при 37°С и рН 8,0. РеакционHJTO смесь фильтруют, светлый раствор с рН 8,0 сушат распылением, твердое вещество экстраг;фуют 95%-ным водным ацетоном и получают калиевую соль 6-АПК. Результаты получены при использовании пенициллин-ацилазы, полученной из E.CD0J штамм 9837 или Asper gJSPus fPovus штамм АТСС 136О8 (.в последнем берут калиевую соль феноксиметилпеницилли- на). Пример 4. К 45 г калиевой соли бензилпенициллина в 200 мл метиленхлорида добавляют 32 мл N , N -диметиланилина, размешивают 30 мин, добавляют по каплям 12 мл диметилдихлорсилана, поддерживая температуру ниже 30 С. охлаждают до-50°С. сразу же прибавляют 27 г пятихлористого фосфора, перемешивают 2 час при -40 С. охлаждают до -65с, вводят 6,4 мл N,N -диметиланилина и 20О мл н-бутанопа, поддерживая температуру ниже -40 С, интенсив но перемешивают 3 час при -40°С и дают нагреться до комнатной температуры, одновременно добавляя при непрерывном перемешивании 250 мл дистиллированной воды. ФУК экстрагируют н-бутанолом, водный слой подщелачивают до рН 8,0 добавлением 2 н. едкого кали, слой сушат распылением и получают 47,4 твердого вещества, содержащего 75% калиевой соли 6-АПК. Аналогичные результаты получены при ис пользовании калиевой соли феноксиметилпе- нициллина и пенициллин-ацилазы, полученной из Е СоО штамм АТСС 9637. Пример 5. Из 5%-ного раствора калиевой соли бензилпенициллина аналогично примеру 2 после фильтрации получают светлый раствор с рН 8,0, к которому добавляют соляную кислоту до рН 4,0, сушат распылением, образовавшееся твердое вещество светло-желтого цвета отмучивают нес- сколько раз в метилизопропилкетоне для уда ления ФУК, отфильтровывают, сущат распы- пением и выделяют 6-АПК с высоким выходом . Пример 6. Как в примере 3,75 г пористого стекла, на котором иммоби .изова- на пенициллин-ацилаза, полученная из Asper1 ПЛ ..лЛ.1 m J-4 f rf .-, .-ч ,-, gi86uS fBavue штамм АТСС 13608, вводят в 1 л 3%-ного водного раствора калиевой соли феноксиметилпенициллина, осторожно перемешивают 18 час при 37°С и рН 8,0 светлый фильтрат подкисляют 6 н. соляной кислотой до рН 2,0, сушат распылением, полученное желтоватое твердое вещество экстрагируют этилацетатом для отделения ФЕУК и отделяют неочищенный гидрохлорид 6-АПК Пример 7. 1500 мл 7%-ного водного раствора калиевой соли бензилпенициллина обрабатывают ЗОО г пористого стекла, на котором иммобилизована пенициллин-аци- лаза, полученная из PfoteuS (ettgei i штам АТСС 925О, осторожно перемешивают 2О час при 37°С и рН 8,0, фильтруют, добавляют к фильтрату 6 н. соляную кислоту до рН 2,0 и экстрагируют амилацетатом, сушат водную фазу распылением и получают твердый гидрохлорид 6-АПК. Пример 8. В 10ОО мл 5%-ного водного раствора калиевой соли феноксиметилпенициллина вводят 120 г пористого стек ла, на котором иммобилизована пенициллин- -ацилаза, полученная из A5pet-gJ6BuS ffiavUS штамм АТСС 13608, осторожно перемешивают 18 час при 37°С и рН 8,0, фильтруют , доводят рН фильтрата до 2,0 добавлением 6 н. соляной кислоты, экстрагируют ФЕУК н-бутанолом, добавляют к водному слою едкий натр до рН 4,0 и получают неочищенную 6-АПК. Пример 9. В раствор 2,0 г пенидиллин-ацилазы полученной аналогично примеру 1 из AspergttEus fiavus штамм 13608, в 150 мл воды добавляют 75 г калиевой соли бензилпенициллина, перемешивают 18 час при 37°С поддерживая рН 8 добавлением 2 н. едкого кали, пропускают через полупроницаемую мембрану под давлением азота, доводят рН фильтрата до 2,0 с помощью соляной кислоты, экстрагируют ФУК метилизопропилкетоном, доводят рН водного слоя до 7,0 добавлением 4 н. едкого кали, сушат распылением и получают твердое вещество, состоящее в основном из неочищенной калиевой соли 6-АПК. Пример 10. Как в примере 3, из 2%-ного раствора калиевой соли феноксиметилгпенициллина и пенициллин-ацилазы, полученной из AspQhgHPPuS fPaVus штамм 13608, после фильтрования и сушки фильтрата (рН 8) распылением получают беловатое вещество, которое экстрагируют холодным метанолом для отделения калиевой соли ФЕУК, и отделяют неочищенную калиевую соль 6 - АПК с высоким выходом. Пример 11. Проводят опыт, как примере 3, используя 4%-иый водный раствор натриевой соли бензилпенициллина и под- - - лг -rtfi ттТТ .-ЧГТ: ТХ TTrrj-iUTJTTU ТТ rlTJtTQ ТД ГТО П кисляя фильтрат до рН 4,0 с помощью 6 н. соляной кислоты. После сушки распылением белое твердое вещество экстрагируют метилзопропилкетоном и получают 6-АПК. Пример 12. Аналогично примеру 10 при использовании 4%-ного раствора натриевой соли феноксиметилпенициллина и подкисления фильтрата соляной кислотой до рН 4,0 после сушки распылением получают белое твердое вещество, которое обрабатывают несколько раз метилизопропилкетоном и отделяют 6-АПК с высоким выходом. Пример 13. 3%-ный раствор калиевой соли феноксиметилпенициллина обрабатывают , как в примере 1О, подкисляют светлый фильтрат 6 н. соляной кислотой до рН 2,0, полученное твердое вещество светложелтого цвета отмучивают несколько раз в бутилацетате для растворения ФЕУК, отфильтровывают , сушат распылением и выделяют гидрохлорид 6-АПК с высоким выходом. Пример 14. 4%-ный раствор калиевой соли бензилпенициллина обрабатывают подобно примеру 2, к полученному светлому раствору добавляют соляную кислоту до рН 2,0, дважды экстрагируют этилацетатом, сушат водный слой (рН 2,0) распылением и получают гидрохлорид 6-АПК с высоким выходом . Пример 15. раствор натриевой соли бензилпенициллина обрабатываю как в примере 3, поддерживая рН 8,0, добавлением 2 н, едкого натра, полученный светлый фильтрат подкисляют 6 н. соляной кислотой до рН 2,1, несколько раз экстраги руют метилизопропилкетоном, к водному сло добавляют 4 н. едкий натр до рН 7,3, суша распылением и отделяют натриевую соль 6-АПК с высоким выходом. Пример 16. Из 5%-ного раствора натриевой соли феноксиметилпенициллина, ка в примере 10, получают светлый фильтрат, который подкисляют 6 н. соляной кислотой до рН 2,0, экстрагируют бутанолом, отделя ют водный слой, доводят рН до 4,0 добавле нием едкого натра, сушат распылением и по лучают неочищенную 6-АПК. Формула изобретения 1.Способ выделения 6-аминопенициллан вой кислоты или ее солей из гидролизного раствора, содержащего 6-аминопенициллано- вую кислоту в концентрации 2-10 вес.% на единицу объема и фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту, отличаюшийс я тем, что, с целью упрощения процесса сначала гидролизный раствор сушат распыле нием при 125 - 275 С при рН 2-8, а затем фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту экстрагируют органичес ким растворителем или наоборот. 2,Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор сушат при рН 6-8. 3,Способ по п. 2, отличаю - щ и и с я тем, что, фенилуксусную или фе- ноксиуксусную кислоту экстрагируют 95%-ны водным ацетоном, 4.Способ по п. 1, отличающ и и с я тем, что раствор сушат распылением при рН 4,0. 5.Способ по п. 4, отличающийс я тем, что фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту экстрагируют метилизопропилкетоном . 6.Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор сушат распылением при рН 2. 7.Способ по п. 6, отличающий с я тем, что фенилуксусную или ф. ноксиуксусную кислоту экстрагируют этилацетатом . 8.Способ по п. 1, отличающийся тем, что фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту экстрагируют н, -бутанолом . 9.Способ по п. 8, отличающийся тем, что сущку распылением проводят при рН 7. 10.Способ по п. 1, отличающийся тем, что фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту экстрагируют амилацетатом . 11.Способ по п. 10, отличающийся тем, что раствор сущат распылением при рН 2. 12.Способ по п. 1, отличающийся тем, что фенилуксусную или феноксиуксусную кислоту экстрагируют метипизопропилкетоном . 13.Способ по п. 12, отличаюийся тем, что раствор сущат распыле ием при рН 4. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе; 1.Патент Великобритании № 896245, 2{3) А, 16 05.62. 2.Патент США № 3272715, 195-36, 13.09.66. 3.process BtocFLem.,(Eae-),{1966), 1 (7), 373-377.

Реферат

Формула