Оптимизированная экспрессия hpv 31 l1 в дрожжах - RU2005132603A

Реферат

1. Молекула нуклеиновой кислоты, включающая в себя последовательность нуклеотидов, которые кодируют белок HPV31 L1, описанный в SEQ ID NO:4, причем указанная последовательность нуклеиновой кислоты является кодон-оптимизированной для высокого уровня экспрессии в клетках дрожжей.

2. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

3. Клетка-хозяин, включающая в себя вектор по п.2.

4. Клетка-хозяин по п.3, причем клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из: Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyvermyces fragilis, Kluyveromyces lactis и Schizosaccharomyces pombe.

5. Клетка-хозяин по п.4, причем клеткой-хозяином является Saccharomyces cerevisiae.

6. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, в которой последовательность нуклеотидов включает в себя последовательность нуклеотидов, описанную в SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3.

7. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п.6.

8. Клетка-хозяин, включающая в себя вектор по п.7.

9. Вирусоподобные частицы (VLPs), включающие в себя рекомбинантный белок L1 или рекомбинантные белки L1+L2 HPV31.

10. VLPs по п.9, в которых рекомбинантный белок L1 или рекомбинантные белки L1+L2 продуцируются в дрожжах.

11. VLPs по п.10, в которых рекомбинантный белок L1 кодируется кодон-оптимизированной молекулой нуклеиновой кислоты HPV31 L1.

12. VLPs по п.11, в которой кодон-оптимизированная молекула нуклеиновой кислоты включает последовательность нуклеотидов, описанную в SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3.

13. Способ получения VLPs по п.11, включающий в себя:

(а) трансформацию дрожжей кодон-оптимизированной молекулой ДНК, кодирующей белок HPV31 L1 или белки HPV31 L1+L2;

(б) культивирование трансформированных дрожжей в условиях, позволяющих экспрессию кодон-оптимизированной молекулы ДНК с получением рекомбинантного белка папилломавируса; и

(в) выделение рекомбинантного белка папилломавируса с получением VLPs по п.14.

14. Вакцина, включающая в себя VLPs по п.11.

15. Фармацевтические композиции, включающие в себя VLPs по п.11.

16. Способ профилактики инфекции HPV, включающий в себя введение млекопитающему вакцины по п.14.

17. Способ индуцирования иммунного ответа у животного, включающий в себя введение животному VLPs по п.11.

18. Вирусоподобные частицы по п.11, в которых вид дрожжей выбирают из группы, состоящей из Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyvermyces fragilis, Kluyveromyces lactis и Schizosaccharomyces pombe.

19. Вирусоподобные частицы по п.18, в которых дрожжами является Saccharomyces cerevisiae.

20. Вакцина по п.14, которая также включает в себя VLPs по меньшей мере одного дополнительного типа HPV.

21. Вакцина по п.20, в которой по меньшей мере один дополнительный тип HPV выбран из группы, состоящей из: HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59 и HPV68.

22. Вакцина по п.21, дополнительно включающая HPV16 VLPs, HPV18 VLPs, HPV6 VLPs и HPV11 VLPs.

23. Вакцина по п.21, также включающая HPV 45 VLPs, HPV52 VLPs и HPV58 VLPs.

24. Молекула нуклеиновой кислоты, включающая в себя последовательность нуклеотидов, которая кодирует белок HPV31 L1, причем молекула нуклеиновой кислоты свободна от сигналов, терминирующих транскрипцию, распознаваемых дрожжами.

25. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п.24.

26. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.25.

27. Клетка-хозяин по п.26, причем клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из; Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Khryvermyces fragilis, Kluyveroinyces lactis и Schizosaccharomyces pombe.

28. Клетка-хозяин по п.27, причем клеткой-хозяином является Saccharomyces cerevisiae.

29. VLPs по п.10, в которых рекомбинантный белок L1 или рекомбинантные белки L1+L2 кодируются молекулой нуклеиновой кислоты HPV31 L1, свободной от сигналов, терминирующих транскрипцию, которые распознаются дрожжами.

30. Способ получения VLPs по п.29, включающий в себя:

(а) трансформацию дрожжей молекулой ДНК, кодирующей белок HPV31 L1 или белки HPV31 L1+L2, причем молекула ДНК свободна от последовательностей, терминирующих транскрипцию, которые распознаются дрожжами;

(б) культивирование трансформированных дрожжей в условиях, позволяющих экспрессию молекулы ДНК, продуцирующей рекомбинантный белок папилломавируса; и

(в) выделение рекомбинантного белка папилломавируса для получения VLPs по п.29.

31. Вакцина, включающая в себя VLPs по п.29.

32. Фармацевтические композиции, включающие в себя VLPs по п.29.

33. Способ профилактики инфекции HPV, включающий в себя введение млекопитающему вакцины по п.31.

34. Способ индуцирования в животных иммунного ответа, включающий в себя введение животному VLPs по п.29.

35. Вакцина по п.31, также включающая в себя VLPs по меньшей мере одного дополнительного типа HPV.

36. Вакцина по п.35, в которой по меньшей мере один дополнительный тип HPV выбран из группы, состоящей из: HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59 и HPV68.