Мутантные рецепторы и их использование в системе экспрессии индуцибельного гена на основе ядерного рецептора - RU2011146202A

Реферат

1. Система модулирования экспрессии рекомбинантного гена, которая содержит:а) первую кассету экспрессии рекомбинантного гена, способного к экспрессии в клетке-хозяине, содержащую полинуклеотид, кодирующий первый полипептид, который содержит:i) ДНК-связывающий домен, распознающий элемент ответа, ассоциированный с геном, экспрессия которого должна быть модулирована, выбранный из группы, содержащей домен рецептора экдизона, ДНК-связывающий домен GAL4 и ДНК-связывающий домен LexA иii) первый лигансвязывающий домен ядерного рецептора иб) вторую кассету экспрессии рекомбинантного гена, способного к экспрессии в клетке-хозяине, содержащую полинуклеотид, кодирующий второй полипептид, который содержит:i) домен трансактивации, выбранный из группы, содержащей домен трансактивации рецептора экдизона, домен трансактивации VP16, домен трансактивации кислотного активатора В42 и домен трансактивации р 65; иii) второй лигандсвязывающий домен ядерного рецептора, причем один из первого и второго лигандсвязывающих доменов ядерного рецептора является лигандсвязывающим доменом рецептора экдизона, содержащим мутацию, находящуюся в состоянии, эквивалентном или аналогичном, по меньшей мере, аминокислотному остатку 110 SEQ ID NO: 1, обеспечивающему повышение чувствительности указанного лигандсвязывающего домена к диацилгидразиновому или тетрагидрохинолиновому лиганду, а другой из лигансвязывающих доменов ядерного рецептора способен димеризоваться с лигандсвязывающим доменом рецептора экдизона, содержащим указанную мутацию.2. Система модулирования экспрессии рекомбинантного гена по п.1, в которой мутация представляет собой А110Е, A110N,