Код документа: RU2198656C2
Область
техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к сульфированным аминокислотным производным и к содержащим их ингибиторам металлопротеиназ.
Предпосылки создания
изобретения
Внеклеточный матрикс состоит из коллагена, протеогликана и т.д., обладает способностью поддерживать ткани и играет определенную роль в поддержании клеточных функций, например
размножения, дифференциации, адгезии или т. п. Матричные металлопротеиназы (ММП), такие как желатиназа, стромелизин, коллагеназа и т.п., играют важную роль в разложении внеклеточного матрикса, и эти
ферменты принимают участие в росте, реконструкции ткани и т.д. в условиях физиологической среды. Таким образом, полагают, что эти ферменты участвуют в развитии различных типов заболеваний, связанных с
разложением и фиброзом тканей, таких как остеоартрит, ревматоидный артрит, изъязвление роговицы, периодонтит, метастазы и инвазия опухоли и вирусные инфекции (например, ВИЧ-инфекция). В настоящее
время остается неясным, какой фермент в наиболее значительной степени участвует в вышеуказанных заболеваниях, однако предполагается, что эти ферменты по крайней мере принимают участие в разложении
ткани. В качестве ингибиторов металлопротеиназ описаны аминокислотные производные, например аминокислотные производные гидроксамовой кислоты (JP-A-62562939), аминокислотные производные карбоновой
кислоты и/или их производные гидроксамовой кислоты (WO 95/35276) и т.д.
Подробное описание изобретения
Поскольку ингибиторы ММП обладают способностью ингибировать активность
ММП, предполагается, что они участвуют в улучшении состояния и в предупреждении вышеуказанных заболеваний, что обусловлено или связано с их активностью. Таким образом, существует необходимость в
дальнейшей разработке ингибиторов ММП.
Учитывая вышеизложенное, согласно настоящему изобретению было установлено, что определенные сульфонамидные производные обладают выраженной активностью в качестве ингибиторов ММП.
Настоящее изобретение относится к композиции, предназначенной для ингибирования металлопротеиназы, которая содержит соединение формулы I:
Более подробно изобретение описано в последующих разделах а)-б), 1)-16) и А)-В).
а) Композиция, предназначенная для ингибирования металлопротеиназы, которая содержит соединение формулы I:
б) Указанная выше композиция, предназначенная для ингибирования металлопротеиназы, которая представляет собой композицию, предназначенную для ингибирования коллагеназы типа IV.
Предпочтительными в контексте настоящего изобретения являются следующие соединения.
1) Соединение формулы I:
2) Соединение формулы II:
3) Соединение формулы III:
4) Соединение
формулы IV:
5) Соединение формулы I':
6) Соединение формулы I":
7) Соединение формулы V:
8) Соединение формулы VI:
9) Соединение формулы VII:
10) Соединение
формулы VIII:
11) Соединение формулы IX:
12) Соединение формулы X:
13) Соединение
формулы XI:
14) Соединение формулы XII:
15) Соединение формулы XIII:
16) Соединение формулы XIV:
Соединение по изобретению более конкретно проиллюстрировано ниже.
(A) Соединение по любому из указанных выше пунктов с 1) по 16), где R1, R1', R1'' и R13 обозначают изопропил, бензил или (индол-3-ил)метил.
(Б) Соединение по любому из указанных выше пунктов с 1) по 4) и с 7) по 16), где R5, R7 и R14 обозначают фенил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей алкокси, алкилтио или алкил.
(B) Соединение по любому из указанных выше пунктов с 1) по 16), где конфигурация асимметричных атомов углерода, связанных с R1, R1', R1'' и R13, представляет собой R-конфигурацию.
Кроме того, изобретение относится к фармацевтической композиции, композиции, предназначенной для ингибирования металлопротеиназы, и к композиции, предназначенной для ингибирования коллагеназы типа IV, которая содержит соединение, указанное выше в пунктах с 1) по 16) и с А) по В).
Все соединения, указанные выше в пунктах с 1) по 16) и с А) по В), обладают выраженной ингибирующей активностью в отношении металлопротеиназ, а наиболее предпочтительными являются следующие соединения.
2) Соединение, в котором R1 обозначает изопропил, бензил или (индол-3-ил)метил, R2 обозначает атом водорода, R3 обозначает необязательно замещенный 2,5-тиофендиил, R обозначает
3) Соединение, в котором R1 обозначает изопропил, бензил или (индол-3-ил)метил, R2 обозначает атом водорода, R3 обозначает 1,4-фенилен, R4 обозначает тетразолдиил и R5 обозначает необязательно замещенный фенил.
Понятие "алкил" в контексте настоящего описания обозначает С1-С10алкил с прямой или разветвленной цепью, например метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил и т.п.
Понятие "(низш. ) алкил" в контексте настоящего описания обозначает С1-С6алкил с прямой или разветвленной цепью, например метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил и т.п.
Понятие "С3-С8циклоалкил" в контексте настоящего описания обозначает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и т.п.
Понятие "арил" в контексте настоящего описания обозначает моноциклические углеводороды или углеводороды со сконденсированным кольцом. Примерами арила являются фенил, нафтил и т.п.
Понятие "аралкил" в контексте настоящего описания обозначает алкил, как он определен выше, замещенный арилом, как он определен выше, в любом возможном положении. Примерами аралкила являются бензил, фенетил, фенилпропил (например, 3-фенилпропил), нафтилметил (α-нафтилметил), антрилметил (9-антрилметил) и т.п. Предпочтительным является бензил. Арильный фрагмент вышеуказанного гетероарила необязательно может быть замещен.
Понятие "гетероарил" в контексте настоящего описания обозначает 5-6-членную ароматическую гетероциклическую группу, которая содержит в кольце один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, включающей атомы азота, кислорода и серы, и которая может быть сконденсирована с карбоциклическим кольцом или с другим гетероциклическим кольцом в любом возможном положении. Примерами гетероарила являются пирролил (например, 1-пирролил), индолил (например, 2-индолил), карбазолил (например, 3-карбазолил), имидазолил (например, 4-имидазолил), пиразолил (например, 1-пиразолил), бензимидазолил (например, 2-бензимидазолил), индазолил (например, 3-индазолил), индолизинил (например, 6-индолизинил), пиридил (например, 4-пиридил), хинолил (например, 5-хинолил), изохинолил (например, 3-изохинолил), акридинил (например, 1-акридинил), фенантридинил (например, 2-фенантридинил), пиридазинил (например, 3-пиридазинил), пиримидинил (например, 4-пиримидинил), пиразинил (например, 2-пиразинил), циннолинил (например, 3-циннолинил), фталазинил (например, 2-фталазинил), хиназолинил (например, 2-хиназолинил), изоксазолил (например, 3-изоксазолил), бензизоксазолил (например, 3-бензизоксазолил), оксазолил (например, 2-оксазолил), бензоксазолил (например, 2-бензоксазолил), бензоксадиазолил (например, 4-бензоксадиазолил), изотиазолил (например, 3-изотиазолил), бензизотиазолил (например, 2-бензизотиазолил), тиазолил (например, 2-тиазолил), бензотиазолил (например, 2-бензотиазолил), фурил (например, 3-фурил), бензофурил (например, 3-бензофурил), тиенил (например, 2-тиенил), бензотиенил (например, 2-бензотиенил), тетразолил и т.п. Арильный фрагмент указанного выше гетероарила необязательно может быть замещен.
Понятие "гетероарилалкил" в контексте настоящего описания обозначает алкил, как он определен выше, замещенный гетероарилом, как он определен выше, в любом возможном положении. Примерами гетероарилалкила являются тиазолилметил (например, 4-тиазолилметил), тиазолилэтил (например, 5-тиазолил-2-этил), индолилметил (например, 2-индолилметил), имидазолилметил (например, 4-имидазолилметил), бензотиазолилметил (например, 2-бензотиазолилметил), бензопиразолилметил (например, 1-бензопиразолилметил), бензотриазолиметил (например, 4-бензотриазолиметил), бензохинолилметил (например, 2-бензохинолилметил), бензимидазолилметил (например, 2-бензимидазолилметил), пиридилметил (например, 2-пиридилметил) и т.п. Арильный фрагмент вышеуказанного гетероарила необязательно может быть замещен.
Понятие "арилен" в контексте настоящего описания обозначает, например, фенилен, нафтилен и т. п. В частности, обозначает, например, 1,2-фенилен, 1,3-фенилен, 1,4-фенилен и т.п.
Понятие "гетероарилен" в контексте настоящего описания обозначает, например, тиофендиил, фурандиил, пиридиндиил и т.п. и, в частности, 2,5-тиофендиил, 2,5-фурандиил и т.п.
Понятие "неароматическая гетероциклическая группа" в контексте настоящего описания обозначает 5-6-членную неароматическую гетероциклическую группу, которая содержит в кольце один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, включающей атомы азота, кислорода и серы, и она может быть присоединена в любом возможном положении. Примерами неароматической гетероциклической группы являются морфолино, пиперидино, пирролидино и т.п.
Понятие "алкокси" в контексте настоящего описания обозначает алкоксигруппу, в которой алкильный фрагмент обозначает алкил, как он определен выше. Примерами алкокси являются метокси, этокси, пропокси, бутокси, пентокси и т. п.
Понятие "(низш.)алкокси" в контексте настоящего описания обозначает алкоксигруппу, в которой алкильный фрагмент обозначает (низш.)алкил, как он определен выше. Примерами (низш.) алкокси являются метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси и т.п.
Понятие "галоген" в контексте настоящего описания обозначает фтор, хлор, бром или йод.
Понятие "алкилтио" в контексте настоящего описания обозначает алкилтиогруппу, в которой алкильный фрагмент обозначает (низш.)алкил, как он определен выше. Примерами алкилтио являются метилтио, этилтио и т.п.
Заместителями для "необязательно замещенного алкила", "необязательно замещенного С3-С8циклоалкила" и "необязательно замещенной неароматической гетероциклической группы" являются гидрокси, алкокси (например, метокси и этокси), меркапто, алкилтио (например, метилтио), циклоалкил (например, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил), галоген (например, фтор, хлор, бром и йод), карбокси, алкоксикарбонил (например, метоксикарбонил и этоксикарбонил), нитро, циано, галоидалкил (например, трифторметил), замещенная или незамещенная аминогруппа (например, метиламино, диметиламино, и карбамоиламино), гуанидино, фенил, бензилокси и т.п. Эти заместители способны связываться с ними в одном или в нескольких из возможных положений.
Заместителями для ароматического кольца "необязательно замещенного арила", "необязательно замещенного аралкила", "необязательно замещенного гетероарила", "необязательно замещенного гетероаралкила", "необязательно замещенного арилена" и "необязательно замещенного гетероарилена" являются, например, гидрокси, алкокси (например, метокси и этокси), меркапто, алкилтио (например, метилтио), циклоалкил (например, циклопропил, циклобутил, циклопентил), галоген (например, фтор, хлор, бром и йод), карбокси, алкоксикарбонил (например, метоксикарбонил и этоксикарбонил), нитро, циано, галоидалкил (например, трифторметил), арилокси (например, фенилокси), замещенная или незамещенная аминогруппа (например, метиламино, диметиламино, диэтиламино и бензилиденамино), гуанидино, алкил (например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил и трет-пентил), алкенил (например, винил и пропенил), алкинил (например, этинил и фенилэтинил), алканоил (например, формил, ацетил и пропионил), ацилокси (например, ацетилокси), ациламино, алкилсульфонил (например, метилсульфонил), фенил, бензил, азогруппа (например, фенилазо), необязательно замещенный гетероарил (например, 3-пиридил), необязательно замещенная уреидогруппа (например, уреидо и фенилуреидо) и т.п. Эти заместители способны связываться с ним в одном или в нескольких из возможных положений.
Предпочтительный вариант осуществления изобретения
Соединения формул (Iа) и (Ib) по изобретению могут быть синтезированы
из соответствующих α-аминокислот, представленных формулой (XV), с помощью 6 указанных ниже способов синтеза. В целом, соединения по изобретению можно получать по способу А. Каждый указанный в
классификации тип соединений можно получить с помощью способов Б-Е. Однако эти способы являются только примерами получения соединений, представленных формулой I. Соединение, представленное формулой I
и полученное любым другим способом, также подпадает под объем настоящего изобретения.
Способ А: Общий способ синтеза соединения, представленного формулой I.
Способ Б: Способ синтеза соединения, в котором R3 обозначает необязательно замещенный арилен или необязательно замещенный гетероарилен, R4 обозначает
Способ В: Способ синтеза соединения, в котором R3 обозначает необязательно замещенный арилен или необязательно замещенный гетероарилен, R4 обозначает связь и R5 обозначает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.
Способ Г: Способ синтеза соединения, в котором R3 обозначает необязательно замещенный арилен или необязательно замещенный гетероарилен, R4 обозначает -CO-NH- и R5 обозначает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.
Способ Д: Способ синтеза соединения, в котором R3 обозначает необязательно замещенный арилен или необязательно замещенный гетероарилен, R4 обозначает тетразолдиил и R5 обозначает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.
Способ Е: Способ синтеза соединения, в котором R3 обозначает необязательно замещенный арилен или необязательно замещенный гетероарилен, R4 обозначает -СН= СН- и R5 обозначает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.
Подробное описание этих способов приведено ниже.
Способ А (см. схему 1 в конце описания).
Превращение соединения (XV) в соединение (Iа-1) представляет собой сульфирование аминогруппы соединения (XV) (процесс 1). При необходимости после этой реакции проводят N-алкилирование, удаление карбоксизащитной группы и т. д. Превращение соединения (Iа-1) в соединение (Ib-1) проводят с целью получения производных гидроксамовых кислот из производных карбоновых кислот (процесс 2). Для получения соединения (Ib-1) из соединения (Iа-1) также может быть проведено взаимодействие с гидроксиламином, имеющим гидроксизащитную группу, или с его кислыми солями с получением соединения (XVI) (процесс 3) с последующим удалением защитной группы (процесс 4). Превращение в сульфонильные производные и производные гидроксамовых кислот может быть проведено в соответствии с общепринятыми методами. Например, аминокислоту, представленную формулой (XV), подвергают взаимодействию с сульфирующим агентом, таким как сульфонилгалогенид, представленным формулой R5-R4-R3-SO2Hal (где R3, R4 и R5 имеют значения, указанные выше, a Hal обозначает галоген), а затем с гидроксиламином. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Некоторые аминокислоты, представленные формулой
(XV), или их кислые соли (например, гидрохлорид, пара-толуолсульфонат и трифторацетат), которые используются в качестве исходных продуктов, имеются на рынке. Другие могут быть синтезированы в
соответствии с методом, описанным в Zikkenkagakukoza, том 22, IV (nihonkagakukai), J. Med. Chem. 38, 1689-1700, 1995, Gary M. Ksander и др. , некоторые из сульфирующих агентов имеются в продаже, а
другие могут быть синтезированы в соответствии с методом, описанным в Shin-zikkenkagakukoza, том 14, 1787, 1978, Synthesis 852-854, 1986 и т.д. Примерами карбоксизащитной группы являются сложные эфиры
(например, метиловый эфир, трет-бутиловый эфир и бензиловый эфир). Удаление защитной группы может быть проведено путем гидролиза с использованием кислоты (например, соляной и трифторуксусной кислоты)
или основания (например, гидроксида натрия) в зависимости от типа группы либо путем каталитического восстановления, например, в присутствии в качестве катализатора 10%-ного палладия на угле. Для
получения соединения (Ib-1) сложные эфиры могут быть непосредственно превращены в гидроксамовую кислоту с использованием процесса 2. Когда соединение формулы (XV) представляет собой аминокислоту, в
которой R15 обозначает атом водорода, предпочтительными растворителями для его сульфирования являются диметилформамид, тетрагидрофуран, диоксан, диметилсульфоксид, ацетонитрил, вода или
смесь этих растворителей. Когда соединение формулы (XV) представляет собой аминокислоту, в которой R15 обозначает защитную группу, такую как сложный эфир, примерами растворителей для его
сульфирования являются вышеуказанные растворители и смеси растворителей, включающие водонерастворимые растворители (например, бензол и дихлорметан) и вышеуказанные растворители. Примерами оснований,
которые могут использоваться для этого сульфирования, являются органические основания, такие как триэтиламин, N-метилморфолин и т. д., и неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид
калия, карбонат калия и т.п. Обычно эта реакция может быть проведена в диапазоне температур от температуры, полученной при охлаждении на льду, до комнатной. Когда радикалы R1, R3,
R4, R5 или R15 соединения (Iа-1) содержат функциональную(ые) группу(ы), которая(ые), возможно, может(гут) препятствовать указанному сульфированию (например,
гидрокси-, меркапто-, амино- и гуанидиногруппу), она (они) предварительно может(гут) быть защищена(ы) в соответствии с методом, описаннным в "Protective Groups in Organic Synthesis" (Theodora W. Green
(John Wiley & Sons)), с последующим удалением с помощью соответствующего процесса. Когда R2 не обозначает атом водорода, соединение (Ia-1), в котором R2 обозначает атом
водорода, дополнительно подвергают взаимодействию с галоидалкилом (например, с метилйодидом и этилйодидом) или галоидаралкилом (например, с бензилхлоридом и бензилбромидом) в диметилформамиде,
тетрагидрофуране, диоксане и т.п. в диапазоне температур от температуры, полученной при охлаждении на льду, до 80oС, предпочтительно от температуры, полученной при охлаждении на льду, до
комнатной, в течение 3-10 ч, предпочтительно в течение 10-20 ч, с получением требуемого N-R2-производного.
Процесс 2
Гидроксиламин подвергают взаимодействию с
соединением (Iа-1) или с его функционально активным производным, получая производные гидроксамовых кислот (Ib-1). Гидроксиламин обычно используют в виде его кислых солей (например, гидрохлорида и
фосфата, сульфата, которые имеются в продаже) в присутствии основания. Примерами оснований, которые могут использоваться в этой реакции, являются органические основания, такие как триэтиламин, N,
N-диметиланилин, N-метилморфолин и т. д. , и неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат калия и т.д. Когда соединение (Iа-1) применяют в виде исходного продукта
для превращения в гидроксамовую кислоту, реакцию проводят в присутствии пептидконденсирующего агента (например, дициклогексилкарбодиимида, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида, N,
N'-карбонилдиимидазола или смеси одного из вышеуказанных агентов с 1-гидроксибензотриазолом, N-гидроксисукцинимидом и т.д.). Растворителем для этой реакции может служить диметилформамид,
тетрагидрофуран, диоксан, диметилсульфоксид, ацетонитрил, вода и смеси этих растворителей. Эту реакцию проводят температуре от -20oС до 40oС, предпочтительно от температуры,
полученной при охлаждении на льду, до комнатной, в течение 1-16 ч.
Ангидриды кислот (прежде всего смешанные ангидриды кислот), галогенангидриды, азиды кислот и сложные эфиры могут применяться в этой реакции в качестве функционально активного производного соединения (Iа-1). Эти функционально активные производные получают обычными методами. Например, производные ангидридов кислот могут быть получены взаимодействием соединения (Iа-1) с производными галогенангидридов (например, с этилхлоркарбонатом) в присутствии основания (например, триэтиламина), а производные галогенангидридов могут быть получены взаимодействием соединения (Iа-1) с галогенирующим агентом (например, с оксалилхлоридом и тионилхлоридом). Производные сложных эфиров могут быть неактивными или активными. Сульфонильные производные, полученные из соединения (XV), в котором R обозначает карбоксизащитные группы (например, метил, трет-бутил и бензил), в процессе 1 могут применяться в качестве неактивных сложных эфиров без удаления защитной группы. Активные сложные эфиры могут быть получены взаимодействием соединения (Iа-1), карбодиимидных реагентов (например, дициклогексилкарбодиимида, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимида) и гидроксипроизводных, соответствующих фрагменту активного сложного эфира, такому как 1-гидроксибензотриазол, N-гидроксисукцинимид или т.п. Условия реакции превращения функционально активных производных соединения (Iа-1) в гидроксамовую кислоту могут быть такими же, как и при превращении самого соединения (Iа-1) в гидроксамовую кислоту. Реакции процессов 1 и 2 могут проводиться непрерывно в виде реакции в одной колбе.
Процесс 3
Защищенный гидроксиламин, применяемый для этой реакции, включает О-бензилгидроксиламин,
О-(пара-метоксибензил) гидроксиламин, О-(трет-бутил)гидроксиламин или т.п. Условия этой реакции могут быть такими же, как и условия реакции в процессе 2.
Процесс 4
Этот
процесс, предназначенный для удаления защитной группы, проводят путем каталитического восстановления, обработки концентрированной соляной кислотой или обработки трифторуксусной кислотой, получая
требуемое соединение (Ib-1). Соединения по изобретению (Iа-1) и (Ib-1) могут быть выделены и очищены с помощью обычных методов разделения и методов очистки (например, хроматографией, кристаллизацией и
т.д.)
Способ Б (см. схему 2 в конце описания).
Превращение соединения (XV) в соединение (XVII) проводят путем сульфирования аминогруппы соединения (XV) (процесс 1) аналогично тому, как описано в процессе 1 способа А. Превращение соединения (XVII) в соединение (XVIII) проводят с помощью реакции Хека (Heck) (К. Sonogashira, Y. Tohda и N. Hagihara, Tetrahedron Lett., 4467 (1975) и т.д.), в которой галоген R17 используют для включения тройной связи (процесс 2). Превращение соединения (XVIII) в соединение (Iа-2) включает N-алкилирование, удаление карбоксизащитной группы и т.д. (процесс 3), которые могут быть проведены методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (Iа-2) в соединение (Ib-2) аналогично превращению производных карбоновых кислот в производные гидроксамовых кислот (процесс 4), что может быть проведено методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 2
Соединение (XVII)
подвергают взаимодействию с необязательно замещенным арилом или необязательно замещенным гетероарилом, имеющим этинильную группу, такую как этинилбензол, в растворителе, таком как диметилформамид,
толуол, ксилол, бензол, терагидрофуран и т.д., в присутствии палладиевого катализатора (например, Pd(Ph3P)2Cl2), реагента в виде двухвалентной меди (например, CuI) и
органического основания (например, триэтиламина и диизопропилэтиламина) с получением требуемого соединения (XVIII) (реакция Хека). Эту реакцию проводят при температуре от комнатной до 100oС,
предпочтительно при температуре от комнатной до 80oС. Эту реакцию завершают в течение 3-30 ч, предпочтительно в течение 10-20 ч. Когда необязательно замещенный арил или необязательно
замещенный гетероарил имеет заместителя(ей), который(ые) препятствуе(ют) этой реакции, заместитель(и) предварительно может(гут) быть защищен(ы) в соответствии с методом, описаннным в "Protective
Groups in Organic Synthesis" (Theodora W. Green (John Wiley & Sons)), с последующим удалением защитной группы на соответствующей стадии.
Процесс 3
Этот процесс может
быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 4
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А.
Способ В (см. схему 3 в конце описания).
Превращение соединения (XVII) в соединение (XIX) проводят с помощью реакции Сузуки (Suzuki) (M.J. Sharp и V. Shieckus, Tetrahedron Lett., 26, 5997 (1985) и т.д.), в которой галоген R используют для включения арила или гетероарила (процесс 1). Превращение соединения (XIX) в соединение (1а-3) включает N-алкилирование, удаление карбоксизащитной группы и т.д. (процесс 2), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (Iа-3) в соединение (Ib-3) аналогично превращению производных карбоновых кислот в производные гидроксамовых кислот (процесс 3), что может быть проведено методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Соединение (XVII) подвергают взаимодействию с необязательно замещенным арилом или необязательно замещенным гетероарилом, имеющим группу
В(ОН)2 (или В(Еt)2), такую как фенилбороновая кислота, в растворителе, таком как диметилформамид, толуол, ксилол, бензол, терагидрофуран и т.д., в присутствии палладиевого
катализатора (например, Pd(Ph3P)4) и основания (например, карбоната калия, карбоната кальция, триэтиламина, метоксида натрия и т.д.) с получением требуемого соединения (XIX)
(реакция Сузуки). Эту реакцию проводят при температуре от комнатной до 100oС, предпочтительно при температуре от комнатной до 80oС. Эту реакцию завершают в течение 5-50 ч,
предпочтительно в течение 15-30 ч. Когда необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил имеет заместителя(ей), который(ые) препятствует(ют) этой реакции, заместитель(и)
предварительно может(гут) быть защищен(ы) в соответствии с методом, описаннным в "Protective Groups in Organic Synthesis" (Theodora W. Green (John Wiley & Sons)), с последующим удалением
защитной группы на соответствующей стадии.
Процесс 2
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 3
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А.
Способ Г (см. схему 4 в конце описания).
Превращение соединения (XV) в соединение (XX) представляет собой сульфирование аминогруппы соединения (XV) (процесс 1), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (XX) в соединение (XXI) представляет собой восстановление нитрогруппы R17 до аминогруппы (процесс 2), и этот процесс может быть проведен с помощью каталитического восстановления или другого восстановления с использованием Fe-хлорида в соляной кислоте, Sn-хлорида в соляной кислоте т.д. Превращение соединения (XXI) в соединение (XXII) проводят с использованием обычной реакции образования амидной связи, для которой используется аминогруппа R17 (процесс 3). Превращение соединения (XXII) в соединение (Iа-4) включает N-алкилирование, удаление карбоксизащитной группы и т.д. (процесс 4) соединения (XXII), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (Iа-4) в соединение (Ib-4) аналогично превращению производных карбоновых кислот в производные гидроксамовых кислот (процесс 5), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 2
Соединение
(XX) обрабатывают водородом в таком растворителе, как метанол, этанол, этилацетат, уксусная кислота и т.д., в присутствии катализатора (например, Pd-C, PtO2, никель Ренея и т.д.) в условиях
либо нормального давления, либо избыточного давления, получая требуемое соединение (XXI). Эту реакцию проводят в диапазоне температур от температуры, полученной при охлаждении на льду, до 80oС, предпочтительно при температуре от комнатной до 50oС, и завершают в течение 1-10 ч, предпочтительно в течение 2-5 ч.
Процесс 3
Соединение (XXI) подвергают
взаимодействию с необязательно замещенным арилом или необязательно замещенным гетероарилом, имеющим группу галогенангидрида (или активного сложного эфира), такую как бензоилхлорид, в растворителе,
таком как диметилформамид, тетрагидрофуран, диоксан, диметилсульфоксид, ацетонитрил, ксилол, толуол, бензол, дихлорметан и т.д., в присутствии основания (например, триэтиламина, N-метилморфолина,
карбоната калия и т. д. ), получая требуемое соединение (XXII). Эту реакцию проводят в диапазоне температур от температуры, полученной при охлаждении на льду, до 100oС, предпочтительно при
температуре от комнатной до 60oС, и завершают в течение 3-30 ч, предпочтительно в течение 10-25 ч.
Процесс 4
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным
описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 5
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А.
Способ Д (см. схему 5 в конце описания).
Превращение соединения (XV) в соединение (XXIII) проводят путем сульфирования аминогруппы соединения (XV) (процесс 1), методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (XXIII) в соединение (XXIV) проводят путем восстановления, при котором этенильную группу R17 превращают в альдегидную группу (процесс 2). Превращение соединения (XXIV) в соединение (XXVI) проводят путем реакции образования тетразольного кольца (процессы 3 и 4). Превращение соединения (XXVI) в соединение (Iа-5) включает N-алкилирование, удаление карбоксизащитной группы и т.д. соединения (XXVI) (процесс 5), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (Iа-5) в соединение (Ib-5) аналогично превращению производных карбоновых кислот в производные гидроксамовых кислот (процесс 6), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 2
Соединение (XXIII) обрабатывают озоном в таком растворителе, как дихлорметан, этилацетат, метанол и т.д., получая озонид, а затем к этой реакционной смеси для восстановления добавляют такой
реагент, как цинк-уксусная кислота, триэтилфосфат, диметилсульфид и т.д., получая требуемые альдегидные производные (XXIV). Восстановление также может быть проведено путем каталитического
гидрирования. Эту реакцию проводят при температуре от -100oС до комнатной, предпочтительно от -78oС до температуры, полученной при охлаждении на льду, и завершают в течение 0,
5-10 ч, предпочтительно в течение 1-3 ч.
Процесс 3
Соединение (XXIV) подвергают взаимодействию с бензолсульфонилгидразидом в таком растворителе, как тетрагидрофуран, простой
эфир и т.д. и в смеси с таким растворителями, как метанол, этанол и т.д., получая требуемое соединение (XXV). Эту реакцию проводят в диапазоне температур от температуры, полученной при охлаждении на
льду, до 80oС, предпочтительно от комнатной температуры до 50oС и завершают в течение 3-30 ч, предпочтительно в течение 10-20 ч.
Процесс 4
Необязательно
замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил, имеющий аминогруппу, такую как анилин, растворяют в смесевом растворителе, таком как спирт (например, этанол) и вода. К этой смеси при
температуре от -20oС до 10oС, предпочтительно при 0oС-5oС, добавляют конц. соляную кислоту и диазотирующий агент, такой как водный раствор нитрита натрия,
получая соль диазония. Время реакции составляет 5 мин - 1 ч, предпочтительно 10-30 мин. Эту реакционную смесь добавляют к пиридиновому раствору соединения (XXV) и реакции дают протекать в течение 1-10
ч, предпочтительно 2-5 ч, при температуре от -30oС до 50oС, предпочтительно от -15oС до комнатной температуры, получая требуемое соединение (XXVI). Когда необязательно
замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил имеет заместителя(ей), который(ые) прпятствует(ют) этой реакции, заместитель(и) предварительно может(гут) быть защищен(ы) в соответствии с
методом, описаннным в "Protective Groups in Organic Synthesis" (Theodora W. Green (John Wiley & Sons)), с последующим удалением защитной группы на соответствующей стадии.
Процесс 5
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 6
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным
описанному в процессах 2-4 способа А.
Способ Е (см. схему 6 в конце описания).
Превращение соединения (XXIV) в соединение (XXVII) проводят в соответствии с реакцией Виттига (G. Wittig и др., Chem. Berr., 87, 1318 (1954)), при которой альдегидную группу R17 используют для введения арила или гетероарила через двойную связь (процесс 1). Превращение соединения (XXVII) в соединение (Iа-6) включает N-алкилирование соединения (XXVII), удаление защитной группы в нем и т.д. (процесс 2), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А. Превращение соединения (Iа-6) в соединение (Ib-6) аналогично превращению производных карбоновых кислот в производные гидроксамовых кислот (процесс 3), и этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А. Каждый процесс далее описан более подробно.
Процесс 1
Соединение (XXIV) подвергают
взаимодействию с производными илидов, необязательно замещенными арилом или необязательно замещенными гетероарилом, таким как Ph3P= CHPh и т.д., который получают обычным методом, в
растворителе, таком как толуол, ксилол, тетрагидрофуран, простой эфир, диметилформамид и т.д., при температуре от -100oС до комнатной, предпочтительно от -78oС до температуры,
полученной при охлаждении на льду, и завершают в течение 1-20 ч, предпочтительно в течение 1-5 ч, получая требуемое соединение (XXVII). Когда необязательно замещенный арил или необязательно замещенный
гетероарил имеет заместителя(ей), который(ые) прпятствует(ют) этой реакции, заместитель(и) предварительно может(гут) быть защищен(ы) в соответствии с методом, описанным в "Protective Groups in Organic
Synthesis" (Theodora W. Green (John Wiley & Sons)), с последующим удалением защитной группы на соответствующей стадии.
Процесс 2
Этот процесс может быть проведен
методом, аналогичным описанному в процессе 1 способа А.
Процесс 3
Этот процесс может быть проведен методом, аналогичным описанному в процессах 2-4 способа А.
Понятие "соединение по настоящему изобретению" в контексте данного описания включает фармацевтически приемлемую соль или гидрат этого соединения. Примером соли является соль щелочного металла (например, лития, натрия и калия), щелочно-земельного металла (например, магния и кальция), аммония, органического основания, аминокислот, минеральных кислот (соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, фосфорной кислоты и серной кислоты) или органических кислот (например, уксусной кислоты, лимонной кислоты, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, бензолсульфоновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты). Эти соли могут быть получены обычными методами.
Соединение по настоящему изобретению не ограничено каким-либо конкретным изомером, а включает все возможные изомеры и рацемические модификации.
Соединение по настоящему изобретению обладает очень высокой ингибирующей активностью в отношении металлопротеиназы, прежде всего ингибирующей активностью в отношении ММП, и оно ингибирует разложение матрикса, как описано в следующих примерах по тестированию. Таким образом, соединение по настоящему изобретению пригодно для лечения или предотвращения заболеваний, которые обусловлены ММП и родственными ферментами, такими, как TNF-α-превращающий фермент и т.д.
Очевидно, что соединения по настоящему изобретению пригодны для предотвращения или лечения таких заболеваний, как остеоартрит, ревматоидный артрит, изъязвление роговицы, болезнь периодонта, метастазы или инвазия опухоли, прогрессирующая вирусная инфекция (например, БИЧ-инфекция), атеросклеротические облитерации, атеросклеротическая аневризма, атеросклероз, рестеноз, сепсис, септический шок, коронарный тромбоз, аберрантный ангиогенез, склерит, рассеянный склероз, открытоугольная глаукома, ретинопатия, пролиферативная ретинопатия, реваскулярная глаукома, птеригий, кератит, врожденный буллезный эпидермолиз, псориаз, диабет, нефрит, нейродегенеративное заболевание, гингивит, рост опухоли, ангиогенез опухоли, глазная опухоль, ангиофиброма, гемангиома, лихорадка, кровоизлияние, коагуляция, кахексия, анорексия, острая инфекция, шок, аутоиммунное заболевание, малярия, болезнь Крона, менингит и язва желудка.
Когда соединение по настоящему изобретению вводят пациенту с целью лечения или предотвращения вышеуказанных заболеваний, оно может применяться путем орального введения в такой форме, как порошок, гранулы, таблетки, капсулы, пилюли и жидкое лекарственное средство, или путем парентерального введения, например, с помощью инъекции, суппозитория, чрескожных препаратов, инсуффляции или т.п. Эффективную дозу соединения по изобретению получают путем смешения при необходимости с применяемыми в медицине вспомогательными веществами, такими как эксципиенты, смачивающие вещества, разрыхлители, замасливатели и т.п. Когда изготовливают препарат для парентеральной инъекции, при его изготовлении соединение по изобретению и соответствующий носитель подвергают стерилизации.
Соответствующая доза варьируется в зависимости от состояний пациентов, пути введения, возраста пациентов, их веса
тела и т.п. и в конечном итоге должна определяться лечащим врачом. В случае орального введения суточная доза обычно может составлять 0,1-100 мг/кг/день, предпочтительно 1-20 мг/кг/день. В случае
парентерального введения суточная доза обычно может
составлять 0,01-10 мг/кг/день, предпочтительно 0,1-1 мг/кг/день. Суточная доза может вводиться в виде одной дозы, а также в виде нескольких
доз.
Следующие примеры служат для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения и не должны расматриваться как ограничивающие его объем.
В примерах используют приведенные ниже сокращения.
p-TsOH: пара-толуолсульфоновая кислота
ДМСО: диметилсульфоксид
Me: метил
tBu: трет-бутил
Пример 1 (способ А) (см.
схему 7 в конце описания).
Суспензию (R)-(+)-фенилаланина (соединение XV-1, 1,65 г (10 ммоль)) в 50 мл диметилформамида и 35 мл воды перемешивали и обрабатывали при охлаждении на льду 2,78 мл (20 ммоль) триэтиламина. Затем к смеси в течение 5 мин по каплям добавляли 2,52 г (10 ммоль) 4-бифенилсульфонилхлорида в 10 мл диметилформамида. После перемешивания реакционной смеси в течение 2 ч при этой же температуре к смеси добавляли 1,35 г (10 ммоль) гидрата 1-гидроксибензотриазола, 2,1 г (11 ммоль) гидрохлорида 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида, 3,47 (50 ммоль) гидрохлорида гидроксиламина и 7 мл (50 ммоль) триэтиламина. После перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь сливали на воду и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 2н. НС1, 5%-ным NaHCO3 и водой и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на колонках на силикагеле, собирая фракции, которые элюировались смесью СНCl3/МеОН (от 40/1 до 20/1), с получением 1,70 г соединения (Ib-1-l) в виде пены. Выход 43%. tпл 169-170oС.
Элементный анализ (%) C21H20N2
O4S:
рассчитано: С 63,62, Н 5,08, N 7,07, S 8,09;
обнаружено: С 63,61, Н 5,12, N 6,98, S 8,06.
ИК ν max (см-1) (нуйол): 3365, 3295, 3266, 1674, 1320, 1159.
ЯМР (δ част./млн) d6-AMCO: 2,61 (dd, J=8,6, 13,4 Гц, 1Н), 2,80 (dd, J= 6,0, 13,6 Гц, 1H), 3,80 (m, 1H).
[α]D:
+18,5±1,2 (c=0,503%, 25oC, ДМСО)
Пример 1'
Другой метод синтеза соединения (Ib-1-l) (см. схему 8 в конце описания).
Процесс 1
К раствору
бензилового эфира тозилата (R)-фенилаланина (соединение XV-1', 2,5 г (5,85 ммоль)) в 60 мл дихлорметана добавляли при охлаждении на льду триэтиламин (1,8 мл, 12,87 ммоль) и 4-бифенилсульфонилхлорид (1,
63 г, 6,44 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь промывали 2н. НС1, 5%-ным NaHCО3 и водой и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали
хроматографии на колонках на силикагеле, собирая фракции, которые элюировались смесью CHCl3/MeOH (от 40/1 до 20/1), и кристаллизовали из дихлорметана/гексана с получением 2,32 г соединения
(Ia-1-1'). Выход 84,1%. tпл 130-131oC.
Элементный анализ (%) C28H25NO4S:
рассчитано: С 71,32, Н 5,34, N 2,97, S 6,80;
обнаружено: С 71,05, Н 5,41, N 3,00, S 6,81.
ИК ν max (см-1) (нуйол): 3352, 1732, 1341, 1190, 1163.
ЯМР (δ част./млн) (СDС13): 3,06 (d, J=5,8 Гц, 2Н), 4,30 (dt, J=6,0, 9,0 Гц, 1Н), 4,89 (s, 2Н), 5,12 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 6,98-7,81 (m, 14H).
[α]D:-16,4±1,1 (с=0,506%, 25oC, MeOH)
Процесс 2
Раствор соединения (Ia-1-1') (2,28 г), которое было получено в процессе 1, в 50 мл смеси растворителей метанол/этилацетат (1/1) гидрировали в течение 25 мин
в присутствии 10%-ного Pd/C (200 мг). Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из дихлорметана/гексана, получая 1,83 г соединения (Ia-1-l").
Выход 99,1%. tпл 146-147oС.
Элементный анализ (%) C21H19N04S:
рассчитано: С 66,12, Н 5,02, N 3,67, S 8,41;
обнаружено: С 65,97, Н 5,06, N 3,61, S 8,48.
ИК ν mах (см-1) (нуйол): 3408, 3305, 1751, 1325, 1161, 1134.
ЯМР (δ част./млн) (CDCl3 ): 2,97 (dd, J=7,0, 13,8 Гц, 1Н), 3,14 (dd, J= 5,2, 14,0 Гц, 1H), 4,13 (m, 1H), 7,03-7,78 (m, 14H).
[α]D:-4,0±0,4 (с=1,000%, 25oС, MeOH)
Процесс 3
К раствору соединения (Ia-1-l", 1,0 г (2,62 ммоль)), которое было получено в процессе 2, в дихлорметане (20 мл) добавляли 0,33 мл (3,93 ммоль) оксалилхлорида и одну каплю
диметилформамида. После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в 10 мл тетрагидрофурана. Раствор, содержащий гидрохлорид
гидроксиламина (911 мг (13,1 ммоль)) и NаНСО3 (1,54 г (18,34 ммоль)) в 10 мл тетрагирофурана и 10 мл воды, перемешивали в течение 5 мин при охлаждении на льду. К смеси добавляли указанный
выше раствор хлорангидрида в тетрагидрофуране и образовавшуюся смесь перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь сливали на воду и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 5%
NаНСО3 и водой и концентрировали в вакууме, получая соединение (Ia-1) (969 мг). Выход 93,3%.
Процесс 4
К раствору соединения (Ia-1-l", 2,0 г 5,24 ммоль), которое
было получено в процессе 2, в дихлорметане (20 мл) добавляли гидрат 1-гидроксибензотриазола (0,7 г, 5,24 ммоль), N-метилморфолин (2,9 мл, 26,2 ммоль), гидрохлорид
1-этил-3-(3-диизопропиламино)карбодиимида (8 ммоль) и гидрохлорид О-бензилгидроксиламина (1,67 г, 10,48 ммоль) и образовавшуюся смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре. Реакционную
смесь сливали на воду и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 2н. НС1, 5% NaHCO3 и водой и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на колонках на
силикагеле, собирая фракции, которые элюировались смесью СН2Сl2/гексан (1/1), и перекристаллизовывали из дихлорметана/гексана с получением 2,04 г соединения (XVI-1). Выход 80%.
tпл 171-173oС.
Элементный анализ (%) С28Н25N2О4S:
рассчитано: С 69,12, Н 5,39, N 5,76, S 6,59;
обнаружено: С 68,85, Н 5,46, N 5,76, S 6,78.
ИК ν max (см-1) (нуйол): 3248, 1661, 1594, 1333, 1163.
ЯМР (δ част./млн) (CDCl3): 2, 85-3,60 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 4,77 (ABq-Apart, J= 11,4 Гц, 1H), 4,82 (ABq-Bpart, J=11,4 Гц, 1H), 5,00 (m, 1H), 6,95-7,70 (m, 19H).
[α]D:-40,2±1,6 (с=0,505%, 25oС, ДМСО).
Процесс 5
Раствор соединения (XVI-1) (1,97 г), которое было получено в процессе 4, в 60 мл смеси растворителей метанол/этилацетат (1/1) гидрировали в
течение 3,5 ч в присутствии 10%-ного Pd/C (200 мг). Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из дихлорметана/гексана, получая 1,35 г соединения
(Ib-1-l). Выход 84,4%.
Примеры 2-91
Соединения, которые приведены в таблицах 1-22, синтезировали аналогично тому, как это описано в примере 1'.
Пример 92 (способ Б) (см. схему 9 в конце описания).
Процесс 1
К раствору гидрохлорида метилового эфира D-валина (XV-2) (755 мг, 4,5 ммоль) в дихлорметане (12 мл) добавляли при
охлаждении на льду N-метилморфолин (1,49 мл, 3•4,5 ммоль) и 5-бром-2-тиофенсульфонилхлорид (1,24 г, 1,05•4,5 ммоль). После перемешивания в течение 15 ч при комнатной температуре
реакционную смесь промывали 2н. НС1, 5%-ным NaHCO3 и водой. Органический слой концентрировали в вакууме и сушили над Na2SO4. Остаток подвергали хроматографии на
колонках на силикагеле, собирая фракции, которые элюировались смесью этилацетат/гексан (1/3), и промывали н-гексаном с получением 1,32 г требуемого соединения (XVII-1). Выход 82%. tпл
109-110oС.
Элементный анализ (%) C10H14BrNО4S2:
рассчитано: С 33,71, Н 3,96, Вr 22,43, N 3,93, S 18,00;
обнаружено: С 33,75, Н 3,89, Br 22,43, N 3,96, S 17,86.
[α]D: -34,5±0,7 (с=1,012%, СНС13, 25oС).
ИК (СНС13, ν mах см-1): 1737, 1356, 1164, 1138.
ЯМР (СDС13, δ част. /млн): 0,89 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 1,00 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 2,00 (m, 1H), 3,60 (s, 3Н), 3,83 (dd, J=5,2, 10,0 Гц, 1Н), 5,20 (d, J= 10,0 Гц, 1H), 7,04 (d, J=4,1 Гц, 1H), 7,32 (d, J=4,1 Гц, 1H).
Процесс 2
К дегазированному раствору, содержащему 400 мг (1,12 ммоль)
соединения (XVII-1) в 5 мл диметилформамида, в атмосфере аргона добавляли 222 мг (1,5•1,12 ммоль) 4-метоксифенилацетилена и 21 мг (0,1•1,12 ммоль) йодида меди(I). Затем к реакционной
смеси добавляли 39 мг (0,05•1,12 ммоль) дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (II) и 0,47 мл (3•1,12 ммоль) триэтиламина. Образовавшуюся смесь дегазировали и перемешивали в течение ночи
в атмосфере аргона при 50oС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом. Органический слой промывали 1н. НС1, 5%-ным NaHCO3 и водой, сушили над Na2SO4 и
концентрировали в вакууме. Образовавшийся остаток подвергали хроматографии на колонках на силикагеле. Собирали фракции, которые элюировались смесью н-гексан/этилацетат (2/1), и перекристаллизовывали
из этилацетата/н-гексана, получая 392 мг требуемого соединения (XVIII-1). Выход 86%. tпл 131-132oС.
Элементный анализ (%) C19H21NO5S2•0,2H2O:
рассчитано: С 55,51, Н 5,25, N 3,41, S 15,60;
обнаружено: С 55,80, Н 5,19, N 3,38, S 15,36.
ИК (KBr, ν max см-1): 3268, 2203, 1736, 1604, 1524, 1348, 1164.
ЯМР (CDC13, δ част. /млн): 0,90 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 1,00 (d, J=7,0 Гц, 3Н), 2,00 (m, 1H), 3,60 (s, 3Н), 3, 84 (s, 3Н), 3,86 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1Н), 5,21 (d, J= 10,2 Гц, 1H), 6,90 (d, J=9,0 Гц, 2Н), 7,44 (d, J=9,0 Гц, 2Н), 7,12 (d, J=4,0 Гц, 1H), 7,44 (d, J=4,0 Гц, 1Н).
Процесс 3
К раствору, содержащему 407 мг (1 ммоль) соединения (XVII-1) в 8 мл тетрагидрофурана и 8 мл метанола, добавляли 5,1 мл 1н. NaOH. Образовавшуюся смесь перемешивали в течение 6 ч при 60oС.
Реакционную смесь концентрировали в вакууме для удаления органического растворителя и остаток разбавляли этилацетатом. Смесь подкисляли водным раствором лимонной кислоты и экстрагировали этилацетатом.
Органический слой промывали соляным раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме, получая 373 мг соединения (Ia-2-l). Выход 100%. tпл 147-148o
C.
ИК (KBr, ν max см-1): 1710, 1604, 1351, 1216.
Элементный анализ (%) С18Н19NO5S2•0,2Н2О:
рассчитано: С 54,45, Н 4,92, N 3,53, S 16,15;
обнаружено: С 54,39, Н 4,93, N 3,79, S 15,96.
Примеры 93-156
Соединения, которые приведены в
таблицах 23-30, синтезировали аналогично тому, как это описано в примере 92.
Примеры 157, 158 (см. схему 10 в конце описания).
Процесс 1 (R2 означает
СН3)
К раствору, содержащему 150 мг (0,33 ммоль) соединения (XVIII-2) в 2 мл диметилформамида, которое было синтезировано аналогично примеру 96, добавляли 227 мг (5•0,33
ммоль) карбоната калия и 0,1 мл (5•0,33 ммоль) метилйодида и образовавшуюся смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь сливали на воду и экстрагировали
этилацетатом. Органический слой промывали водой, сушили над Na2SО4 и концентрировали в вакууме, получая 373 мг N-метильного производного в виде масла. Выход 91%.
Элементный анализ (%) C24H23NO5S2:
рассчитано: С 61,39, Н 4,94, N 2,98, S 13,66;
обнаружено: С 61,22, Н 5,18, N 2,93, S 13,27.
Затем к раствору, содержащему 140 мг указанного выше маслянистого продукта, полученного в соответствии с описанным выше процессом, в 2 мл метанола, добавляли 0,6 мл 1н. NaOH и образовавшуюся смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подкисляли 2н. НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой, сушили над Nа2SО4 и концентрировали в вакууме, получая 105 мг соединения (Ia-2-66) (R=Me). Выход 77%. tпл 185-186oС.
Элементный анализ (%) C23
H21NO5S:
рассчитано: С 60,64, Н 4,65, N 3,07, S 14,08;
обнаружено: С 60,56, Н 4,84, N 3,01, S 13,94.
ИК (KBr, ν mах см-1): 3600-2300 шир., 3426, 2203, 1710, 1604, 1503, 1344, 1151.
ЯМР (d6-ДMCO, δ част. /млн): 2,88 (s, 3H), 2,93 (dd, J=12,0, 10,2 Гц, 1Н), 3,19 (dd, J=14,2, 5,6 Гц, 1Н), 3, 81 (s, 3H), 4,74 (dd, J=5,4, 10,2 Гц, 1Н), 6,99-7,04 (m, 2Н), 7,20-7,35 (m, 7H), 7,52-7,56 (m, 2H), 6,90 (d, J=9,0 Гц, 2H), 7,44 (d, J=9,0 Гц, 2H), 7,12 (d, J=4,0 Гц, 1H), 7,44 (d, J=4,0 Гц, 1Н).
Соединение (Ia-2-67) (R2=CH2Ph) синтезировали аналогично примеру 157.
ИК (KBr, ν max см-1): 2200, 1722, 1340, 1151.
ЯМР (d6-ДMCO, δ част./млн): 2,94 (dd, J=7,6, 13,8 Гц, 1H), 3,19 (dd, J= 7,2, 14,4 Гц, 1H), 3,83 (s, 3H), 4,29 (d, J=16,2 Гц, 1H), 4,62 (d, J=16,2 Гц, 1H) (приведены только характерные пики).
Пример 159 (способ В) (см. схему 11 в конце описания).
Процесс 1
К раствору, содержащему 500 мг (1,4 ммоль) соединения (XVII-2), которое
было получено в примере 96, в 12 мл безводного тетрагидрофурана, добавляли 387 мг (2•1,4 ммоль) порошкообразного карбоната калия, 319 мг (1,5•1,4 ммоль) 4-метоксифенилбороновой кислоты и
81 мг (0,05•1,4 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)палладия. Образовавшуюся смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 48 ч при 75oС. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом.
Органический слой промывали 1н. НС1, 5%-ным водным раствором NaHCО3 и водой, сушили над Na2SО4 и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии на
колонках на силикагеле. Собирали фракции, которые элюировались смесью н-гексан/этилацетат (3/1), и перекристаллизовывали из н-гексана, получая 447 мг требуемого соединения (XIX-1). Выход 83%. tпл 122-123oC.
Элементный анализ (%) C17H21NО5S2:
рассчитано: С 53,25, Н 5,52, N 3,65, S 16,72;
обнаружено: С 53,26, Н 5,50, N 3,69, S 16,63.
[α]D: -21,7±0,6 (с=1,000, ДМСО, 25oС)
ИК (KBr, ν max см-1): 1735, 1605,
1505, 1350, 1167, 1136.
ЯМР (СDС13, δ част. /млн): 0,90 (d, J=7,0 Гц, 3Н), 1,00 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 2,10 (m, 1H), 3,54 (s, 3Н), 3,85 (s, 3Н), 3,87 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1Н), 5,20 (d, J= 10,2 Гц, 1H), 6,94 (d, J=9,0 Гц, 2Н), 7,52 (d, J=9,0 Гц, 2Н), 7,11 (d, J=4,0 Гц, 1H), 7,49 (d, J=4,0 Гц, 1Н).
Процесс 2
К раствору, содержащему 390 мг (1,01
ммоль) соединения (XIX-1) в 8 мл тетрагидрофурана и 8 мл метанола, добавляли 5,1 мл 1н. NaOH и образовавшуюся смесь перемешивали при 60oС в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали в
вакууме для удаления органического растворителя. Образовавшийся остаток разбавляли этилацетатом. Смесь подкисляли водным раствором лимонной кислоты и экстрагировали этилацетатом. Органический слой
промывали соляным раствором, сушили над Na2SО4 и концентрировали в вакууме, получая 373 мг соединения (Ia-3-l). Выход 100%. tпл 174-176oС.
ИК (КВr, ν max см-1): 1735, 1503, 1343, 1163.
Примеры 160-175
Соединения, которые приведены в таблицах 31-32, синтезировали аналогично тому, как это описано
в примере 159.
Пример 176 (способ Г) (см. схему 12 в конце описания).
Процесс 1
К раствору, содержащему 10 г (47,68 ммоль) гидрохлорида трет-бутилового эфира
D-валина (XV-3) в 100 мл дихлорметана, добавляли при охлаждении на льду 15,7 мл (3•47,68 ммоль) N-метилморфолина и 14,1 г (1,2•47,68 ммоль) 4-нитробензолсульфонилхлорида. После
перемешивания в течение 5 ч при комнатной температуре реакционную смесь промывали 2н. НС1, 5%-ным NаНСО3, водой. Органический слой сушили над Nа2SО4 и концентрировали
в вакууме и образовавщийся остаток перекристаллизовывали из дихлорметана/н-гексана, получая 13,3 г требуемого соединения (ХХ-1). Выход 77,8%. tпл 89-90oС.
Элементный анализ (%) C15H22N2О6S:
рассчитано: С 50,27, Н 6,19, N 7,82, S 8,95;
обнаружено: С 50,04, Н 6,10, N 7,89, S 8,84.
[α]D: -2,9±0,8 (с=0,512, ДМСО, 23oС).
ИК (KBr, ν max см-1): 3430 шир., 3301, 1722, 1698, 1525, 1362, 1348, 1181, 1174, 1159.
Процесс 2
Раствор, содержащий 13,29 г (37,08 ммоль) соединения (ХХ-1) в 200 мл метанола, гидрировали в течение 2 ч при комнатной температуре в присутствии 10%-ного Pd/C
(1 г). Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из ацетона/н-гексана, получая 11,5 г аминного производного (XXI-1). Выход 94,4%. tпл
164-166oС.
Элементный анализ (%) С15Н24N2О4S:
рассчитано: С 54,86, Н 7,37, N 8,53, S 9,76;
обнаружено: С 54,84,
Н 7,33, N 8,63, S 9,50.
[α]D: +10,3±1,0 (с=0,515, ДМСО, 23oС).
ИК (KBr, ν mах см-1): 3461, 3375, 1716, 1638, 1598, 1344, 1313.
ЯМР (d6-ДМСО, δ част./млн): 0,80 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 0,82 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 1,23 (s, 9Н), 1,83 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 5,86 (s, 2H), 6,56 (d, J=8,8 Гц, 2H), 7,36 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,47 (d, J=9,6 Гц, 1H).
Процесс 3
К раствору, содержащему 328 мг (1 ммоль) соединения (XXI-1) в 10 мл дихлорметана, добавляли при охлаждении
на льду 0,33 мл (3•1 ммоль) N-метилморфолина и 280 мг (1,5•1 ммоль) 4-(метилтио)бензоилхлорида. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной
смеси добавляли этиловый эфир и осадок собирали и промывали ледяной водой и этиловым эфиром. Твердый продукт перекристаллизовывали из ацетона/этилового эфира, получая 433 мг требуемого соединения
(XXII-1). Выход 90,5%. tпл 235-238oC.
Элементный анализ (%) С23Н30N2O5S2:
рассчитано: С 57,72, Н
6,32, N 5,85, S 13,40;
обнаружено: С 57,63, Н 6,28, N 5,86, S 13,20.
[α]D: +5,7±0,9 (с=0,512, ДМСО, 25oС).
ИК (KBr, ν mах см-1): 3366, 3284, 1713, 1667, 1592, 1514, 1498, 1341, 1317.
ЯМР (d6-ДМСО, δ част./млн): 0,82 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 0,84 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 1,22 (s, 9H), 1,91 (m, 1H), 2,55 (s, 3Н), 3,32 (s, 3Н), 3,44 (dd, J= 6,2, 8,6 Гц, 1H), 7,40 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,73 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,90-8,01 (m, 5H), 10,48 (s, 1H).
Процесс 4
К раствору, содержащему 405 мг (0,85 ммоль) соединения (XXII-1) в 3 мл дихлорметана, добавляли 3,3 мл (50•0,85 ммоль) трифторуксусной кислоты и образовавшуюся смесь перемешивали в течение 2 ч
при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировли в вакууме и образовавшийся остаток промывали этиловым эфиром, получая 340 мг требуемого соединения (Ia-4-l). Выход 94,7%. tпл
231-234oС.
ИК (KBr, ν max см-1): 1748, 1655, 1592, 1323, 1161.
Элементный анализ (%) С19Н22N2O5S2•0,1CF3COOH:
рассчитано: С 53,14, Н 5,13, N 6,46, S 14,78;
обнаружено: С 53,48, Н 5,31, N 6,57, S 15,06.
Примеры 177-208
Соединения, которые приведены в таблицах 33-36, синтезировали аналогично тому, как это описано в примере 176.
Пример 209 (способ Д) (см. схему 13 в конце описания).
Процесс 1
К раствору, содержащему 20,94 г (99,8 ммоль) гидрохлорида трет-бутилового эфира D-валина (XV-3) в 200 мл дихлорметана, добавляли при охлаждении на льду 22 мл (2•99,
8 ммоль) N-метилморфолина и 20,27 г (99,8 ммоль) пара-стиролсульфонилхлорида. После перемешивания в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь промывали 2н. НС1, 5%-ного NaHCO3
, водой. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме и образовавшийся остаток подвергали хроматографии на колонках на силикагеле. Собирали фракции, которые
элюировались смесью этилацетат/н-гексан/хлороформ (1/3/1), и промывали н-гексаном, получая 28,93 г требуемого соединения (ХХIII-1). Выход 85%. tпл 118-120oС.
ИК (KBr, ν max см-1): 3419, 3283, 1716, 1348, 1168.
ЯМР (СDС13, δ част. /млн): 0,85 (d, J=6,9 Гц, 3Н), 1,00 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 1,21 (s, 9Н), 2,04 (m, 1H), 3,62 (dd, J=9,8, 4,5 Гц, 1Н), 5,09 (d, J= 9,8 Гц, 1H), 5,41 (dd, J=0,5, 10,9 Гц, 1H), 5,84 (dd, J=0,5, 17,6 Гц, 1H), 6,72 (dd, J=10,9, 17,6 Гц, 1H), 7,49 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,79 (d, J=8,4 Гц, 2Н).
Процесс 2
Газообразным озоном в течение 15 ч при -78oС барботировали раствор, содержащий 5,09 г (15 ммоль) соединения (XXIII-1) в 300 мл дихлорметана. К этому
раствору добавляли 22 мл (20•15 ммоль) метилсульфида и реакционной смеси постепенно в течение 80 мин давали нагреться до комнатной температуры и концентрировали в вакууме, получая 6,03 г
альдегидного производного (XXIV-1).
ИК (СНС13, ν mах см-1): 3322, 1710, 1351, 1170.
ЯМР (СDС13, δ част. /млн): 0,85 (d, J=6,9 Гц, 3Н), 1,00 (d, J=6,9 Гц, 3Н), 1,22 (s, 9H), 2,07 (m, 1H), 3,69 (dd, J=4,5, 9,9 Гц, 1H), 8,01 (s, 4H), 10,08 (s, 1H).
Процесс 3
К раствору, содержащему 6,02 г (15
ммоль) соединения (XXIV-1) в 60 мл этанола и 15 мл тетрагидрофурана, добавляли при комнатной температуре 2,72 г (1,05•15 ммоль) бензолсульфонилгидразида. После перемешивания в течение 2 ч
образовавшуюся смесь концентрировали в вакууме. Остаток, который был получен после концентрирования в вакууме, хроматографировали на колонках на силикагеле и фракции, которые элюировались смесью
хлороформ/этилацетат (1/4), собирали и перекристаллизовывали из этилацетата, получая 4,44 г требуемого соединения (XXV-1). Выход процесса 2,60%. tпл 163-164oС.
Элементный анализ (%) С22H29N3O6S2:
рассчитано: С 53,32, Н 5,90, N 8,48, S 12,94;
обнаружено: С 53,15, Н 5,87, N 8,32, S 12,
82.
[α]D: -11,6±1,0 (с=0,509, ДМСО, 23,5oС).
ИК (КВr, ν max см-1): 3430, 3274, 1711, 1364, 1343, 1172.
ЯМР (CDC13, δ част. /млн): 0,84 (d, J=6,9 Гц, 3Н), 0,99 (d, J=6,6 Гц, 3Н), 1,19 (s, 9H), 2,00 (m, 1H), 3,63 (dd, J=4,5, 9,9 Гц, 1H), 5,16 (d, J= 9,9 Гц, 1H), 7,50-7,68 (m, 5H), 7,73 (s, 1H), 7,78-7,84 (m, 2H), 7,96-8,02 (m, 2H), 8,16 (шир.s, 1H).
Процесс 4
К раствору, содержащему 0,14 мл (1,11•1 ммоль) 4-(метилмеркапто)анилина и 0,3 мл
конц. соляной кислоты в 3 мл 50%-ного водного раствора этанола, добавляли при внутренней температуре от 0 до 5oС раствор, содержащий 78,4 мг (1,14•1 ммоль) нитрита натрия в 1 мл воды,
и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при этой же температуре. К раствору, содержащему 496 мг (1 ммоль) соединения (XXV-1) в 5 мл безводного пиридина, добавляли в течение 8 мин при
-25oС вышеуказанную реакционную смесь. Эту реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 4 ч при температуре от -15oС до комнатной, сливали на воду и экстрагировали
этилацетатом. Органический слой промывали 2н. НС1, 5%-ным NаНСО3 и водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографировали на колонках на
силикагеле и фракции, которые элюировались смесью хлороформ/этилацетат (1/9), собирали, получая 374 мг требуемого соединения (XXVI-1). Выход 74%.
Элементный анализ (%) C23
H29N5O4S2•0,3H2O:
рассчитано: С 54,27, Н 5,86, N 13,76, S 12,60;
обнаружено: С 54,25, Н 5,77, N 13,87, S 12,52.
ИК (KBr, ν max см-1): 3422, 3310, 1705, 1345, 1171.
ЯМР (d6-ДМСО, δ част./млн): 0,83 (d, J=6,9 Гц, 3Н), 0,86 (d, J=7,2 Гц, 3Н), 1,19 (s, 9H), 2,00 (m, 1H), 2,59 (s, 3Н), 3,54 (dd, J=6,3, 9,6 Гц, 1H), 7,56 (d, J=8,7 Гц, 2H), 8,00 (d, J=8,6 Гц, 2H), 8,10 (d, J=8,7 Гц, 2H), 8,33 (d, J=9,6 Гц, 2H), 8,34 (d, J=8,7 Гц, 2Н).
Процесс 5
Раствор, содержащий 353 мг соединения (XXVI-1) в 2,5 мл дихлорметана и 2,5 мл трифторуксусной кислоты, перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь
концентрировали в вакууме и образовавшийся остаток промывали этиловым эфиром, получая 308 мг соединения (Ia-5-l). Выход 98%. tпл 194-195oС.
ИК (KBr, ν max см-1): 1720, 1343, 1166.
Элементный анализ (%) C19H21N5O4S2•1,1H2O:
рассчитано: С 48,83, Н
5,00, N 14,99, S 13,72;
обнаружено: С 49,13, Н 5,25, N 14,55, S 13,34.
Примеры 210-251
Соединения, которые приведены в таблицах 37-43, синтезировали аналогично тому,
как это описано в примере 209.
Примеры 252-266
Соединения, которые приведены в таблицах 44-45, синтезировали аналогично тому, как это описано в примере 157.
Пример 267
Соединения, которые приведены в таблице 46, синтезировали аналогично тому, как это описано в примере 92.
Ниже приведены примеры тестирования соединений по настоящему изобретению. Тестируемые соединения представляют собой соединения, приведенные в примерах и в таблицах.
Пример теста
(1) Выделение и очистка ММП-9 (92 кДа,
желатиназа В)
Коллагеназу типа IV (ММП-9) очищали в соответствии с методами, описанными в приведенной ниже литературе: Scott M. Wilhelm и др., J. Biol. Chem., 264, 17213-17221, (1989),
SV40-transformed Human Lung Fibroblasts Secrete a 92-kDa Type IV Collagenase Which Is Identical to That Secreted by Normal Human Macrophages; Yasunori Okada и др., J. Biol. Chem., 267, 21712-21791,
(1992), Matrix Metalloproteinase 9 (92-kDa Gelatinase/Type IV Collagenase) from HT 1080 Human Fibrosarcoma Cells; Robin V. Ward и др., Biochem. J., (1991) 278, 179-187, The purification of tissue
inhibitor of metalloproteinase-2 from its 72 kDa progelatinase complex.
ММП-9 секретируется линией клеток фибросаркомы человека АТСС HT 1080 в питательной среде, когда ее стимулируют 12-тетрадеканоилфорбол-13-ацетатом (ТФА). Производство ММП-9 в этой культуре подтверждали с помощью зимографии на желатине, как описано в приведенной ниже литературе: Hidekazu Tanaka и др. , (1993) Biochem. Biophys. Res. Commun., 190, 732-740, Molecular cloning and manifestation of mouse 105-kDa gelatinase cDNA. Кондиционную среду стимулированных клеток HT 1080 концентровали и очищали с помощью желатин-сефарозы 4В, конканавалин-А-сефарозы и сефакрила S-200. Полученная таким путем очищенная про-ММП-9 (92 кДА, желатиназа В) давала одну положительную полосу при зимографии на желатине. Далее активированную ММП-9 получали, обрабатывая про-ММП-9 трипсином.
(2) Способы оценки ингибиторов коллагеназы типа IV
Анализ коллагеназы проводили с использованием
активированной ММП-9, описанной выше, и субстрата, прилагаемого к набору по определению активности коллагеназы типа IV (фирма YAGAI, inc.), следуя протоколу производителя. Для каждого соединения
(ингибитора) проводили 4 следующих анализа:
(А) субстрат (коллагеназа типа IV), фермент (ММП-9), ингибитор,
(Б) субстрат (коллагеназа типа IV), ингибитор,
(В) субстрат
(коллагеназа типа IV), фермент (ММП-9),
(Г) субстрат (коллагеназа типа IV).
В соответствии с протоколом производителя измеряли интенсивность флуоресценции и процент
ингибирования определяли из следующего уравнения:
Ингибирование (%) = {1-(А-Б)/(В-Г)}•100
Значение IC50 представляет собой концентрацию, при которой процент
ингибирования составляет 50%. Полученные результаты приведены в таблицах 47-54.
Соединения по настоящему изобретению проявили выраженную активность в отношении ингибирования коллагеназы типа IV.
Промышленная применимость
Предполагается, что соединение по настоящему изобретению пригодно для предотвращения или лечения таких заболеваний, как
остеоартрит, ревматоидный артрит, изъязвление роговицы, болезнь периодонта, метастазы или инвазия опухоли, прогрессирующая вирусная инфекция (например, ВИЧ-инфекция), атеросклеротические облитерации,
атеросклеротическая аневризма, атеросклероз, рестеноз, сепсис, септический шок, коронарный тромбоз, аберрантный ангиогенез, склерит, рассеянный склероз, открытоугольная глаукома, ретинопатия,
пролиферативная ретинопатия, реваскулярная глаукома, птеригий, кератит, врожденный буллезный эпидермолиз, псориаз, диабет, нефрит, нейродегенеративное заболевание, гингивит, рост опухоли, ангиогенез
опухоли, глазная опухоль, ангиофиброма, гемангиома, лихорадка, кровоизлияние, коагуляция, кахексия, анорексия, острая инфекция, шок, аутоиммунное заболевание, малярия, болезнь Крона, менингит и язва
желудка, поскольку соединение по настоящему изобретению проявляют выраженную ингибирующую активность в отношении металлопротеиназ, прежде всего ММП.
Изобретение относится к области медицины и касается фармкомпозиции для ингибирования металлопротеиназы, содержащей сульфированные аминокислотные производные, и новых сульфированных аминокислотных производных. Композиции обладают повышенной активностью. 8 с. и 18 з.п. ф-лы, 54 табл.
Замещенные карбоксамиды и фармацевтическая композиция на их основе